Pin1对oxLDL诱导内皮细胞炎症反应的作用及机制研究

目的探讨肽基脯氨酰顺反异构酶1(Pin1)对氧化低密度脂蛋白(oxLDL)诱导内皮细胞炎症反应的影响。方法人脐静脉内皮细胞系予以不同浓度oxLDL干预12、24、48h;并预先转染Pin1 siRNA或给予STAT3抑制剂后,采用50μg/ml oxLDL干预内皮细胞15min或24h,检测内皮细胞中血管细胞黏附分子1(VCAM-1)、Pin1蛋白表达水平,STAT3活化水平和单核-内皮细胞黏附情况。结果与对照组相比,oxLDL 50μg/ml组和100μg/ml组细胞内VCAM-1、Pin1蛋白表达明显增加(P0.05); oxLDL50μg/ml干预12、24、48h后,细胞内VCAM-1、Pin1蛋白表达亦明显增加(P0.05)。与对照组相比,oxLDL50μg/ml干预15min后,胞内p-STAT3明显增加(P0.05);oxLDL50μg/ml干预24h后,内皮细胞上黏附的单核细胞数量明显增多(P0.05)。与oxLDL组相比,Pin1 siRNA干扰后显著降低了oxLDL诱导的内皮细胞p-STAT3水平、VCAM-1蛋白表达水平(P0.05),也明显减少了oxLDL诱导的单核细胞黏附水平(P0.05)。此外,STAT3抑制剂显著降低了oxLDL诱导的内皮细胞VCAM-1蛋白表达与单核细胞黏附水平(P0.05)。结论 Pin1通过上调STAT3信号通路活化水平促进oxLDL诱导的内皮细胞炎症反应。     

核因子-κB介导非对称性二甲基精氨酸上调大鼠腹腔巨噬细胞诱导型一氧化氮合酶的表达

目的:探讨非对称性二甲基精氨酸(ADMA)上调大鼠腹腔巨噬细胞诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的表达是否受核因子-κB(NF-κB)调控。方法:分离培养原代Wistar大鼠腹腔巨噬细胞。分组:①正常对照组:以含10%胎牛血清(FBS)DMEM培养液与巨噬细胞共孵育;②氧化型LDL(oxLDL)组:在培养液中加oxLDL50mg/L;③A+O组:在培养液中加ADMA(15μmol/L)和oxLDL(50mg/L);④P+A+O组:在培养液中加NF-κB特异性抑制剂吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(PDTC,25μmol/L)、ADMA(15μmol/L)和oxLDL(50mg/L)。以实时荧光定量PCR和Westen blotting分别检测iNOSmRNA和蛋白表达,以电泳迁移率变动分析(EMSA)和增强化学发光法(ECL)检测NF-κB活性。结果:①与正常对照组相比,oxLDL组与A+O组iNOSmRNA和蛋白表达增强,以A+O组尤为明显,2组比较差异有统计学意义(P0.05);P+A+O组iNOSmRNA和蛋白表达降低,与A+O组比较差异有统计学意义(P0.05)。②与正常对照组相比,oxLDL组与A+O组NF-κB活性增强,以A+O组尤为明显,2组相比差异有统计学意义(P0.05);P+A+O组NF-κB活性降低,与A+O组相比差异有统计学意义(P0.05)。③相关分析:NF-κB活性与iNOSmRNA和蛋白表达量均呈正相关。结论:ADMA可能通过NF-κB途径增强iNOS表达而促进巨噬细胞转化为泡沫细胞、促进动脉粥样硬化的发生发展。     

低密度脂蛋白胆固醇对人单核细胞膜联蛋白A1表达水平的影响

目的探讨LDL-C对人外周血单核细胞中膜联蛋白(annexin)A1表达水平的影响,为LDL-C致动脉粥样硬化机制提供新的视点。方法在体外分离培养人外周血单核细胞,随机分为对照组、不同浓度组(0.7、1.3、2.6、3.9 mmol/L LDL-C处理)和不同时间组(2、8、1 6、24 h用3.9 mmol/L LDL C处理),应用流式细胞仪检测annexinA1表达水平。结果与对照组比较,各浓度组annexin A1表达水平下降,且随浓度增加其抑制作用增强(P<0.01)。8 h后各时间组annexin A1表达水平明显下降,且随时间延长其抑制作用增强(P<0.05)。结论LDL-C可以通过降低人单核细胞annexin A1表达而影响单核细胞与内皮细胞黏附,进而启动动脉粥样硬化的发生发展,但具体机制有待进一步阐明。     

冠心病患者外周血单核细胞中miR-125a-3p的表达研究

目的 探讨冠状动脉粥样硬化性心脏病(coronary heart disease,CHD)患者外周血单核细胞中miR-125a-3p的表达水平.方法 收集昆明医科大学附属延安医院心血管内科2014年8月1日至2014年10月30日收治并被确诊为冠心病的患者共63例,其中稳定型心绞痛组23例(B组);急性冠状动脉综合征组40例(C组),选择健康对照组20例(A组).抽取静脉血,分离单核细胞,提取单核细胞总核糖核酸(ribonucleic acids,RNA),使用实时荧光定量PCR(real-time fluoresecnt quantitative PCR,RT-PCR)检测miR-125a-3p的表达水平.结果 A组、B组、C组miR-125a-3p表达水平分别为1、3.12(2.86~3.38)、24.79(8.85~40.73).与A组比较,B组、C组miR-125a-3p表达水平显著上调(P<0.01);与B组比较,C组miR-125a-3p表达水平显著上调(P<0.01).结论 miR-125a-3p可能参与动脉粥样硬化的发生和进展,可能为动脉粥样硬化治疗的新靶点.     

不同类型高脂血症小而密低密度脂蛋白的水平及调血脂治疗对其影响

目的 :研究不同类型高脂血症患者血清小而密低密度脂蛋白胆固醇 (LDL C)水平的变化 ,观察血脂康调血脂治疗对高脂血症患者小而密LDL C的影响。方法 :采用非变型梯度凝胶电泳法分别测定 37例冠状动脉 (冠脉 )正常的高脂血症患者 (A组 ) ,131例冠脉造影证实有冠心病的高脂血症患者 (B组 )及 40例冠脉及血脂均正常的受检者 (对照组 )和 80例血脂正常的冠心病患者 (C组 )血清小而密LDL C的水平 ,比较A、B和C组间小而密LDL C水平的差异 ;将B组分为 3个亚组即 40例高胆固醇血症患者 (B1组 )、49例混合型高脂血症患者 (B2组 )、42例高甘油三酯血症患者 (B3组 ) ,给予调血脂治疗 8周 ,分别测定治疗前后该 3个亚组血清小而密LDL C的水平 ,并与对照组对比。结果 :与对照组相比 ,A组患者血清小而密LDL C占总LDL C含量的百分比仅有轻度升高 [(45 5± 5 5 ) %比(40 6± 6 3) % ,P >0 0 5 ] ,B组和C组患者血清小而密LDL C的含量明显升高 [(65 8± 8 2 ) %和 (68 3± 13 8) % ,P <0 0 1]。B组中以B 2组 [(65 7± 7 8) % ,P <0 0 1]和B3组 [(69 3± 7 8) % ,P <0 0 1]患者升高最为明显。调血脂治疗后血清小而密LDL C实际含量均较治疗前显著下降。结论 :合并有冠心病的高脂血症患者小而密LDL C的升高更为明显 ,     

孕期炎症刺激对子代大鼠血脂水平的影响

目的研究孕期炎症刺激对子代大鼠血脂水平的影响。方法 8只SD孕鼠随机分为对照组和脂多糖刺激组,分别在孕第8、10、12天腹腔注射生理盐水或脂多糖(0.79 mg/kg)。子代出生1天及每周测体重;检测8周龄雄性仔鼠血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL)、高密度脂蛋白(HDL)、谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)水平;组织切片观察子代肝脏病理形态学变化;透射电镜观察肝、胸主动脉超微结构;免疫荧光检测仔鼠肝脏8-OHd G表达情况;TMRE染色检测线粒体膜电位。结果与对照组子代相比,脂多糖刺激组子代1天、1周龄体重下降(P0.01),而后体重显著增加(P0.01)。脂多糖刺激组子代8周龄外周血TG、TC、LDL及AST水平与对照组子代相比显著升高(P0.05或P0.01);肝脏病理改变明显,线粒体结构显著损伤,8-OHd G表达增多,肝脏线粒体膜电位较对照组子代明显降低(P0.01);胸主动脉表现出内皮脱落、平滑肌细胞迁移为特征的损伤。结论孕期炎症刺激导致子代线粒体损伤,可能与脂质代谢障碍并最终导致动脉粥样硬化发生相关。     

致动脉粥样硬化不同因素对大鼠腹腔巨噬细胞和主动脉平滑肌细胞分泌表达Tenascin-C的影响

目的　观察一些致动脉粥样硬化因素对培养的大鼠腹腔巨噬细胞和主动脉平滑肌细胞分泌表达Tenascin C的影响。方法　体外分离培养大鼠腹腔巨噬细胞和主动脉平滑肌细胞 ,同步后分别加入不同刺激因子采用Westernbolt及逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)的方法检测Tenascin C蛋白和mRNA水平表达。结果　Tenascin C在两种细胞的对照组中均不表达 ,低密度脂蛋白刺激组只有少量表达 ,其余各刺激组均呈高水平表达。加入氧化修饰低密度脂蛋白 (oxLDL) 2h后即有Tenascin C的表达 ,6h时达高峰 ,可持续到 2 4h。oxLDL与Tenascin C蛋白的表达呈明显的浓度依赖性。结论　oxLDL等致动脉粥样硬化刺激因子可在转录水平上调Tenascin C基因的表达 ,从而促进血管平滑肌细胞和巨噬细胞分泌表达高水平的Tenascin C ,这可能是动脉粥样硬化中Tenascin C沉积的主要原因     

冠心病不同类型间C反应蛋白与氧化型低密度脂蛋白自身抗体的比较研究

目的 研究C反应蛋白(CRP)、氧化型低密度脂蛋白自身抗体(anti-oxLDL)与冠心病斑块稳定性的关系。方法 2003-07～12第一军医大学南方医院分别测定21例急性心肌梗死(AMI)、22例不稳定型心绞痛(UAP)、20例稳定型心绞痛(SAP)和21例对照者的CRP、oxLDL自身抗体和LDL自身抗体水平,比较各组中上述指标有无显著差异,并评估CRP分别与两种抗体水平的相关性。结果 急性冠状动脉综合征(ACS)组(包括AMI组和UAP组)的CRP明显高于SAP组和对照组(P<0.05);ACS组的oxLDL自身抗体水平明显高于SAP组和对照组(P<0.05);各组LDL自身抗体水平比较无显著差异(P>0.05);各组中CRP与oxLDL自身抗体水平是显著正相关(P<0.01),CRP与LDL自身抗体水平无显著相关性(P>0.05)。结论 对特异性抗原oxLDL的免疫反应,在导致斑块的不稳定及急性冠状动脉综合征的发生中可能起着重要的作用,oxLDL自身抗体水平可能是评价CHD斑块不稳定的重要特异性标志物。     

转化生长因子β1对巨噬细胞清道夫受体-A表达的影响

目的　探讨转化生长因子β1(TGF β1)对巨噬细胞清道夫受体 A(ScR A)的影响。 方法　利用鼠单克隆抗人TGF β1抗体 (AntiTGF β1Ab) ,细胞培养 ,受体摄取配体及Northernblot印迹方法 ,观察AntiTGF β1Ab对人类单核细胞株 (THP 1细胞 )由来巨噬细胞受体摄取乙酰化LDL(Ac LDL)以及对ScR AmRNA表达的影响。结果　巨噬细胞对Ac LDL的摄取随AntiTGF β1Ab浓度的增加而增加。Ac LDL结合量 (ng mgprotein)与对照组 (36 89± 1 31)比较 ,投用 1 0、3 0 μg mlAntiTGF β1Ab ,其Ac LDL结合量分别为 45 5 6± 0 81(P <0 0 5 ) ,6 0 94± 1 17(P <0 0 1)。摄入量 (ng mgprotein)与对照组 (35 0 5 9± 6 0 3)比较 ,分别为 40 3 48± 4 37(P <0 0 5 ) ,5 0 3 6 1± 11 77(P <0 0 1)。降解量 (ng mgprotein)与对照组 (1382 0 6± 3 0 9)比较 ,分别为 16 17 71± 39 0 8,1934 84± 42 6 7(P<0 0 1)。巨噬细胞ScR AmRNA表达随AntiTGF β1Ab浓度的增加而增强。与空白对照组比较 ,投用 1 0、3 0 μg mlAntiTGF β1Ab ,其ScR AmRNA表达分别增强 15 7%和 38 2 %。结论　TGF β1抑制THP 1细胞由来巨噬细胞ScR A的表达。TGF β1的这种作用可能参与了动脉硬化形成和发展的病理过程     

应激对兔动脉粥样硬化及外周血黏附分子CD11a的影响和普萘洛尔干预作用

目的研究应激对实验性家兔动脉粥样硬化(AS)斑块的病理形态学和外周血黏附分子CD11a的影响及普萘洛尔的干预作用,以探讨普萘洛尔稳定AS斑块的免疫学机制。方法27只健康雄性中国家兔,随机分为正常空白对照(8只)、模型对照组(8只)和普萘洛尔组(8只),余3只为单纯模型组,用于动脉粥样硬化模型组织形态学观察。正常空白对照,给予普通饮食,其他3组给予高脂饮食,建立动脉粥样硬化模型,给予刺激,建立应激动物模型(除外单纯模型组),取外周血流式细胞术检测应激前后表达CD11a白细胞的阳性百分率。病理切片观察主动脉AS斑块形成情况,检测斑块内巨噬细胞含量。结果应激可导致模型对照组和空白对照组外周血黏附分子CD11a水平升高;但普萘洛尔组外周血CD11a白细胞的阳性百分率和AS斑块内巨噬细胞含量低于模型组(P<0.05)。结论应激可导致黏附分子CD11a水平升高。普萘洛尔可在一定程度上防止应激所导致的外周血黏附分子CD11a水平的升高。     

State of knowledge of helminth fauna of freshwater fishes of Poland

A total 89 fish and lamprey species has been recorded from Polish freshwater habitats. Twenty-seven of them (30.3%) have not been surveyed for parasitic helminthes. Some of the latter fishes are either rare or not easily accessible. Other live only in specific habitats in scattered localities. An important obstacle for studying parasite faunas of some fishes may be their status on an endangered species. Among the non-surveyed fishes, are those which have been relatively recently introduced to Poland or migrated there on their own. The present paper attempts to review all hitherto not studied helminthologically fish species, their habitats, localities and current protection status.     

高血压降压治疗目标的再认识

根据传统的高血压水平的定义,1993年WHO高血压治疗指南提出血压控制目标为<140/90mm Hg(1mm Hg=0.133kPa),但是并非所有患者都必须将血压降至同一水平,而应根据患者情况进行个体化治疗。Framingham进行的一项长达10～12年的心血管事件研究发现,第5年后,正常上限血压[收缩压(SBP     

Lack of correlation of degree of villous atrophy with severity of clinical presentation of coeliac disease

BACKGROUND AND AIM: Both the clinical presentation and the degree of mucosal damage in coeliac disease vary greatly. In view of conflicting information as to whether the mode of presentation correlates with the degree of villous atrophy, we reviewed a large cohort of patients with coeliac disease. PATIENTS AND METHODS: We correlated mode of presentation (classical, diarrhoea predominant or atypical/silent) with histology of duodenal biopsies and examined their trends over time. RESULTS: The cohort consisted of 499 adults, mean age 44.1 years, 68% females. The majority had silent coeliac disease (56%) and total villous atrophy (65%). There was no correlation of mode of presentation with the degree of villous atrophy (p=0.25). Sixty-eight percent of females and 58% of males had a severe villous atrophy (p=0.052). There was a significant trend over time for a greater proportion of patients presenting as atypical/silent coeliac disease and having partial villous atrophy, though the majority still had total villous atrophy. CONCLUSIONS: Among our patients the degree of villous atrophy in duodenal biopsies did not correlate with the mode of presentation, indicating that factors other than the degree of villous atrophy must account for diarrhoea in coeliac disease.