nm23—H1与p21、p53蛋白在人卵巢癌中表达的相关性研究

目的：研究人卵巢癌组织中肿瘤转移抑制基因nm23-H1、抑癌基因p21^WAFI及p53蛋白的表达,探讨它们在卵巢癌发生、发展中的作用。方法：采用免疫印迹技术,对74例卵巢癌组织及21例卵巢非癌组织中nm23-H1p21^WAFI及p53蛋白进行检测。结果：在卵巢癌中nm23-H1、p53蛋白的表达高于卵巢非癌组织,p21^WAFI蛋白的表达呈下调;肿瘤发生转移时卵巢癌组织中nm23-H1和p21WAF蛋白表达显著低于未发生肿瘤转移的癌组织。p53蛋白表达与肿瘤转移无关。nm23-H1 \p21^WAFI 蛋白与卵巢癌组织类型无关,但与卵巢癌的临床分期相关。p53蛋白的表达与卵巢癌组织类型及卵巢癌的临床分期无关。nm23-H1与p53、p21^WAFI蛋白间表达在卵巢癌中呈相关性。结论：nm23-H1、p53、p21^WAFI 基因在卵巢癌发生、发展中起一定的作用,nm23-H1与p53、p21^WAFI基因在卵巢癌发生、发展中可能起协同作用。     

nm23-H1与p21、p53蛋白在人卵巢癌中表达的相关性研究

目的研究人卵巢癌组织中肿瘤转移抑制基因nm23-H1、抑癌基因p21WAFI及p53蛋白的表达,探讨它们在卵巢癌发 生、发展中的作用。方法采用免疫印迹技术,对74例卵巢癌组织及21例卵巢非癌组织中nm23-H1、p21WAFI及p53蛋白进行检 测。结果在卵巢癌中nm23-H1、p53蛋白的表达高于卵巢非癌组织,p21WAFI蛋白的表达呈下调;肿瘤发生转移时卵巢癌组织中 nm23-H1和p21WAF蛋白表达显著低于未发生肿瘤转移的癌组织。p53蛋白表达与肿瘤转移无关。nm23-HI、p21WAFI蛋白与卵巢癌 组织类型无关,但与卵巢癌的临床分期相关。p53蛋白的表达与卵巢癌组织类型及卵巢癌的临床分期无关。nm23-H1与p53、 p21WAFI蛋白间表达在卵巢癌中呈相关性。结论nm23-HI、p53、p21WAFI基因在卵巢癌发生、发展中起一定的作用,nm23-H1与p53、 p21WAFI基因在卵巢癌发生、发展中可能起协同作用。     

头颈部鳞癌中TP53基因的调控网络分析

目的挖掘隐藏在头颈部鳞癌中抑癌基因TP53表达异常的机制。方法从TCGA数据库中选取279例头颈部鳞癌样本的测序数据,利用cbioportal获得TP53基因在头颈部鳞癌中的表达情况及其对患者生存的影响,并筛选样本中与TP53存在共表达关系的基因。利用String和DAVID数据库,建立TP53的共表达网络并分析网络功能,通过lncRNA2target和Star Base数据库,筛选出能够调控TP53的短链非编码RNA(microRNA),长链非编码RNA(lncRNA)和竞争性内源性RNA(ceRNA),利用Cytoscape软件建立TP53相关基因调控网络。结果 279例头颈部鳞癌样本中共有77%的样本出现TP53表达异常,且TP53表达异常患者的生存率显著低于TP53正常表达的患者。此外,筛选出TP53基因的共表达基因288个,(Spearman分数和Pearson分数0.3)功能分析结果显示共表达基因的功能主要为转录调控、细胞凋亡、增殖过程和免疫应答等功能。TP53基因调控网络揭示has-miR-186-5p和has-miR-202-3p等43个microRNA能够靶向调控TP53基因;此外,MEG1、TUG1和MALAT1等6个lncRNA,PHC2、FZD4和TUB等56个mRNA能够通过ceRNA作用调控TP53。结论通过生物信息学方法和基因数据库建立的TP53相关基因调控网络揭示可能调控抑癌基因TP53的若干microRNA、lncRNA和ceRNA,可以为头颈部鳞癌中TP53的作用机制和以TP53为靶点的分子治疗提供新的切入点。     

肿瘤抑制基因p53和p21WAF1／Cip1／Sdi1的相关性

抑癌基因p53在细胞周期调控、基因组稳定性维持、细胞分化和凋亡中起重要作用。DNA损伤后的细胞反应包括凋亡或细胞周期阻滞 ,它们都需要野生型p53基因转录活化。对此 ,目前研究集中在p53下游靶基因p2 1WAF1 /Cip1 /Sdi1 ,该基因编码一种细胞周期蛋白激酶抑制剂 ,后者在介导p53依赖性的细胞周期阻滞中起重要作用。然而DNA损伤诱发的凋亡需要有转录活性的p53而不是p2 1WAF1 /Cip1 /Sdi1参与。     

p53研究的新进展

肿瘤抑制基因p53是目前研究最为广泛和系统的抑癌基因之一。野生型p53(wt-p53)参与了DNA损伤修复、细胞周期调控、细胞凋亡及抑制血管生成等过程。p53基因的突变使上述功能丧失,从而导致肿瘤的形成。在大约50％人类肿瘤中可发现p53基因的突变,且几乎可见于各种类型的肿瘤细胞中。本文就目前p53研究及相关基冈治疗的进展作一综述。     

p53基因网络王国

抑癌基因p53作为多种细胞应激与细胞应答的中间环节,与其上下游的各种调控因子及相 关基因共同构成了一个错综复杂的信号传导通路。上游:DNA损伤、缺氧、原癌基因激活、核苷酸衰竭、 端粒缩短等因素均可激活p53的功能网络;中游:p53的功能活性受mdm2(mouse double minus 2)、 p14ARF(alternative reading frame)、共价修饰、蛋白质与蛋白质的相互作用等多种相互联系又相互制约 的因素的调控;下游:p53肩负着介导细胞周期阻滞、促进细胞凋亡、维持基因组稳定、抑制肿瘤血管发 生等多种功能使命,在整个机体组织细胞的生长、发育、分化过程中起着举足轻重的作用。因其功能的 多样性及与肿瘤发生发展的高度相关性,p53已成为肿瘤发生机制研究及基因治疗的-个重要靶点。因 此,作为细胞内信号传递网络的核心之一,深入理解p53基因网络的各个层面将对细胞生长代谢调控 研究及肿瘤遗传学研究大有裨益。     

外源性野生型p53基因在两个肺腺癌细胞系中表达及对p16和p21基因的调控

目的 探讨p53基因在肺癌细胞周期中的作用机制，以及裸鼠体内基因治疗的作用。方法 用以腺病毒为载体的野生型p53基因pAdCMV-p53(Ad-p53)感染高转移肺腺癌95D细胞系和高浸润肺腺癌L-18系，对感染前后各细胞系的细胞生长曲线、p53、p16和p21基因的表达以及调亡进行分析。此外，用Ad-p53对两细胞系进行了裸鼠体内感染实验。结果 体外实验中，导入p53基因细胞系的生长均得到抑制，并且最终都出现凋亡，感染后的细胞中p53和p21基因的mRNA表达量明显增高，p16基因的mRNA表达量则无明显变化。p53基因治疗后的裸鼠，其中95D细胞系的肿瘤全部消失；L-18细胞系的腹腔注射组肿瘤全部消失，而皮下注射组无明显变化。结论 p53基因是一个有效的肿瘤抑制基因，其诱导细胞凋亡的途径与p16基因不同。腺病毒介导的野生型p53基因可以有效地控制肺癌细胞的发展和转移。     

p53基因网络王国

抑癌基因p53作为多种细胞应激与细胞应答的中间环节，与其上下游的各种调控因子及相关基因共同构成了一个错综复杂的信号传导通路。上游：DNA损伤、缺氧、原癌基因激活、核苷酸衰竭、端粒缩短等因素均可激活p53的功能网络；中游：p53的功能活性受mdm2(mouse double minus2)、p14^ARF(alternative reading frame)、共价修饰、蛋白质与蛋白质的相互作用等多种相互联系又相互制约的因素的调控；下游：p53肩负着介导细胞周期阻滞、促进细胞凋亡、维持基因组稳定、抑制肿瘤血管发生等多种功能使命，在整个机体组织细胞的生长、发育、分化过程中起着举足轻重的作用。因其功能的多样性及与肿瘤发生发展的高度相关性，p53已成为肿瘤发生机制研究及基因治疗的一个重要靶点。因此，作为细胞内信号传递网络的核心之一，深入理解p53基因网络的各个层面将对细胞生长代谢调控研究及肿瘤遗传学研究大有裨益。     

p53与肿瘤的形成,治疗和预后

p53基因作为抑制基因在约50％的人类肿瘤中被检测出来,其蛋白产物p53蛋白与特异性DNA序列结合并激活转录。转录激活导致p53增加,进而诱导蛋白p21、WAF1／CIP1产生,通过p21与。cyclin－cdk复合物结合来抑制cdk活性,从而达到控制细胞从GI期进入S期的目的．也可通过p21与PCNA结合抑制DNA复制。p53在肿瘤形成中的作用50－55％的人类肿瘤中发现有p53突变。这些突变完全淘汰不能与特异DNA序列结合的P53蛋白。P53的细胞周期抑制功能需要p53转录活性,至少有些p53的凋亡活动不需要有赖于p53的基因产物。这可能意味着,被选p53靶基因的…     

c-Myc介导的细胞凋亡途径

细胞凋亡是细胞生物学行为中一复杂的主动过程,受细胞内外多种因子调控。本文阐述了c-Myc在细胞凋亡中与其它癌基因、抑癌基因bcl-2、p53等产物的相互作用,与蛋白酶类的关系以及与Fas/FasL凋亡途径的偶联。表明c-Myc不仅是促进细胞增殖的重要因子,也是介导细胞凋亡的重要成员。     

p53介导的凋亡相关基因的研究进展

p53是重要的细胞周期调控基因之一。在参与维持细胞周期的正常运行中起着重要作用，p53基因通过诱导细胞发生G1期阻滞修复损伤DNA和诱导细胞凋亡来抑制肿瘤细胞的增殖。在p53基因介导细胞凋亡的通路中，有许多已知和未知的相关基因发生作用。本就p53基因调控细胞凋亡途径的上，下游已知基因作一综述。     

miRNA与lncRNA的相互调控作用在肿瘤中的研究进展

miRNA是一类具有介导基因转录后表达调控功能的非编码小分子RNA,lncRNA是碱基数大于200个核苷酸的非翻译转录本,通过基因印迹、染色质重塑、细胞周期调控等多种机制发挥其生物学功能。miRNA与lncRNA之间存在着相互调控关系,对肿瘤的发生发展以及治疗具有重要作用。     

p73基因研究进展

p73是最近发现的p53家族的一员,它与p53不仅在蛋白结构上具有较高的同源性,功能也具有一定的相似性,被认为是一种潜在的抑癌基因。但随着研究的深入,发现P73在功能和调控机制上与P53都具有不同点。P73具有诱导细胞凋亡的能力,其机制与P53不同。P73在很多肿瘤中的表达高于相应的正常组织,这与经典的抑癌基因也不同。因此对于P73基因仍需进一步的研究。     

mPer2在小鼠黑色素瘤细胞B16细胞凋亡中的作用研究

目的:研究mPer2在小鼠黑色素瘤细胞B16细胞凋亡中的作用机制。方法:将构pcDNA3.1-mper2和pcDNA3.1空质粒分别转染入小鼠黑色素瘤细胞B16中。提取两组细胞的总RNA和总蛋白,利用特异引物和抗体,分别检测两组细胞中p53和c-Myc基因在RNA和蛋白水平表达的变化。结果:RT-PCR和蛋白印迹检测均显示与转染pcDNA3.1( )空质粒相比,转染pcDNA3.1-mPer2入B16细胞后,p53的表达增高,而c-Myc表达降低。结论:mPer2可能通过抑制细胞癌基因c-Myc的表达,促进抑癌基因p53的表达,从而抑制B16细胞生长,诱导细胞凋亡。     

膀胱移行细胞癌中p16、p53及c-erbB-2蛋白的异常表达及临床意义

目的研究膀胱癌组织中p16、p53及c-erbB-2蛋白表达,探讨其与膀胱癌病理分级、临床分期和转移的关系.方法应用免疫组化SP法对75例膀胱癌组织中p16、p53及c-erbB-2蛋白表达进行检测.结果75例膀胱癌中p16、p53及cerbB-2的阳性率分别为41.3%(31/75)、44%(33/75)和40%(30/75),p16、和c-erbB-2基因在膀胱癌中的阳性率与肿瘤病理分级和临床分期有显著性统计学意义(P＜0.05),p53及c-erbB-2阳性率与肿瘤临床分期及转移有密切的关系(P＜0.01).773%(58/75)肿瘤有上述癌基因和(或)抑癌基因的异常表达,其中53.3%(40/75)的肿瘤同时有多个基因的表达异常.结论肿瘤的多基因分析比单基因分析更有价值,癌基因c-erbB-2和抑癌基因p16、p53基因的表达异常及协同作用在膀胱癌的发生发展中起重要作用.     

结肠癌细胞HCT116中p53的R213突变对靶基因p21表达的影响

目的确定在结肠癌细胞系中,p53的213位精氨酸突变后对其下游靶基因p21表达的影响。方法在p53缺失的结肠癌细胞系HCT116~(-/-)中转染p53的R213位突变的质粒;荧光素酶双报告基因系统检测p53靶基因启动子活性;EMSA检测p53与其靶基因p21的结合能力;real-time PCR和Western blot检测p53下游靶基因p21的表达。结果 p53蛋白213位精氨酸突变为赖氨酸后,明显降低了p53靶基因的启动子活性(P0.05);与靶基因p21启动子的结合能力明显降低(P0.05);并抑制了p21基因的表达(P0.05)。而213位突变为谷氨酰胺后,迁移率比突变前明显变快。结论在人的结肠癌细胞中,p53蛋白R213位的不同突变对下游靶基因p21有不同的影响,提示存在着不同的调控机制。     

p53基因多态性与癌症的发生风险

在人类肿瘤发生中基因的易感性起着非常重要的作用。在一些特定的癌症类型中尤其明显 ,例如子宫颈癌 ,大约一半病例有家族史。p53基因在细胞周期中发挥其重要的调控作用 ,它的突变经常在肿瘤发生早期出现 ,新获得的 p53基因突变在复发性肿瘤的侵袭过程中发挥着重要的作用。野生型p53通常能提高化疗诱导的凋亡 ,尽管这可能依赖于肿瘤的类型 ,但对抗癌药物治疗肿瘤有益处。对化疗作用产生耐受现象或肿瘤的复发通常伴随有新的 p53基因的突变。因此 p53基因的多态变异自然成为研究热点。最近研究表明 p53基因的第 72位密码子其等位基因的多态可…     

个体性反义RNA对乳腺癌细胞突变p53基因表达的特异性封闭作用

目的研究针对p53基因突变的个体性反义RNA对乳腺癌突变p53基因的特异性封闭作用。方法通过免疫细胞化学LSAB法染色、聚合酶链反应-单链构象多态性分析及测序确定人乳腺癌细胞系MDA-MB-231中p53突变位点,构建针对该突变点的反义表达载体并制备其反义RNA。原位杂交技术检测反义RNA与细胞内突变p53基因的特异性结合;在阳离子脂质体介导下将反义RNA转染细胞;以免疫细胞化学LSAB法染色及细胞生长抑制率观测反义RNA作用时效;Western blot检测p53蛋白的表达;四甲基偶氮唑盐法检测转染细胞的生长活性;流式细胞术检测转染细胞的细胞周期分布;原位缺口末端标记法检测转染细胞的凋亡情况。结果人乳腺癌细胞系MDA—MB-231的p53第8外显子（exon8）有突变,据此位点构建反义表达载体[pGEM3zf（＋／-）p53exon8]。原位杂交结果显示反义RNA（ASp53exon8＇RNA）在细胞质内有阳性杂交信号;于转染后48h反义RNA封闭效果最显著,突变p53蛋白（mt-p53）的表达受抑制,细胞增殖能力下降,G2／M期阻滞。结论针对p53基因突变位点制备的个体性反义RNA可特异性封闭乳腺癌细胞突变p53基因的表达。     

转录因子PAX5对多发性骨髓瘤细胞IM9的抗凋亡及促增生作用

目的：应用DNA介导的RNA干扰技术使核转录因子PAX5基因沉默,观察PAX5对下游基因调节以及细胞增殖和抗凋亡的影响。方法：筛选高表达PAX5的肿瘤细胞株。构建针对PAX5的siRNA表达载体并转染入多发性骨髓瘤细胞IM9,筛选稳转细胞系。RT-PCR分析PAX5敲低细胞中p53、XBP-1和c-Myc等重要基因表达水平的影响,同时用MTT和流式分析分别检测细胞增殖和细胞凋亡率。结果：PAX5在多发性骨髓瘤细胞株IM9中特异性表达,而KAS6和前列腺癌细胞DU145和PC3中没有表达。利用RNA干扰技术敲低IM9细胞中PAX5,不仅可使p53、XBP-1的表达增加,同时观察到c-Myc的表达下降。MTT实验证实PAX5基因沉默的IM9细胞增殖速率明显低于对照组细胞,同时对5-FU的药物敏感性增加。结论：PAX5在多发性骨髓瘤细胞株IM9中特异性的表达,并可促进肿瘤的生长和抗药性。本研究中进一步发现,PAX5除可调节p53和XBP-1基因的表达,c-Myc的表达也随PAX5敲低而下降,提示PAX5有可能直接参与c-Myc的转录调节并在肿瘤发生中起到作用。     

p53基因甲基化模式的变化及其生物学效应

被誉为基因组保护者的p53是防范哺乳动物基因组损伤的关键抑癌基因之一,其产物在细胞增殖分化过程中发挥着调控细胞周期的作用,参与受损细胞周期抑制、DNA修复、细胞凋亡等维持基因组稳定性相关的各个途径.p53不同位点的甲基化情况与该基因的激活状态、肿瘤的发生等密切相关.该文就p53启动子区域、编码区的CpG位点和编码区非CpG位点的胞嘧啶甲基化改变及其生物学效应作一简要概述.