针刺对缺血缺氧性脑损伤幼鼠实验的研究进展

近年来,国内外学者通过针刺对缺血缺氧性脑损伤幼鼠神经干细胞和神经营养因子影响的实验研究,取得较大进展。本文对幼鼠缺血缺氧性脑损伤后,针刺在抑制细胞凋亡,减少神经元损伤,促进内源性神经干细胞的增殖、分化与迁移和神经营养因子分泌机制方面的文献进行综述。     

中药对神经干细胞生物学影响的研究进展

神经干细胞（neural stem cell，NSC）是一类能生成神经组织或源自神经系统，并具有自我更新能力和多向分化潜能的细胞，是近年来的一个研究热点。传统观点认为神经系统的神经元处于分化状态，受损后无法再生，研究发现NSC可分布在胚胎早期脑室和脑室下区、成年脑室区、纹状体、海马齿状回以及脊髓等部位。目前应用无血清培养、单克隆技术及免疫细胞化学技术对NSC进行分离、培养和鉴定，但诱导NSC分化的因素尚未完全明了，有关NSC体内外定向诱导分化为神经细胞一直是人们感兴趣的课题。众所周知，在神经干细胞的增殖分化过程中，外源性因素如生长因子、细胞因子等对其具有重要影响。我国学者在观察临床运用活血化瘀、益智生髓中药治疗中风等脑血管病获得良好疗效的基础上，尝试应用中医药学理论，开展中药及其有效成分对神经干细胞增殖分化影响的研究。目的是利用由其分化的神经元或少突胶质细胞替换因损伤而发生死亡的神经元或少突胶质细胞，修复重塑中枢神经结构和功能，可望为中医药在NSC领域的研究和应用开辟新的途径。本文就此方面的研究概况进行综述。     

从BMP4表达探讨地黄多糖诱导MSCs向神经细胞分化的机理

骨髓间充质干细胞（MSCs）是一种来源于中胚层的成体干细胞,具有较强的可塑性和多向分化潜能。研究已证明体内移值的MSCs能够横向分化为神经元或胶质细胞,能促进损伤区神经组织再生修复,改善损伤区的神经功能,在特定的培养条件下还可分化为神经元样细胞。我们前期研究已证明地黄多糖能更有效地促进MSCs分化为神经细胞。有研究[5]显示BMP4是龟版调控MSCs增殖、     

中药联合干细胞疗法治疗缺血性脑卒中的研究进展

脑卒中是全球致死和致残的主要疾病之一,其中缺血性脑卒中是最常见的卒中类型。近年来,随着再生医学领域的发展,国内外对干细胞疗法的研究不断深入。研究证实,干细胞疗法,包括激活内源性神经干细胞和外源性干细胞移植,可以促进内源性神经和血管再生,修复神经损伤,从而改善神经功能,在缺血性脑卒中治疗领域具有广阔的应用前景。然而,该疗法存在细胞存活、迁移及分化率较低的问题,目前尚无有效解决方案。中医药治疗中风已有数千年历史,积累了丰富的临床经验,传统中药用于治疗缺血性脑损伤的疗效已得到肯定。近年来又有研究发现,中药对体内外多种干细胞的增殖、分化等生理活动有促进作用,中药联合干细胞疗法已用于多种疾病的治疗。进一步的研究发现,中药可激活缺血损伤脑组织内源性神经干细胞,促进神经自我修复,并对移植干细胞在体内的一系列生物活动有协同作用。笔者对近几年缺血性脑卒中治疗的研究进行整理、归纳、总结,从干细胞疗法角度对中药复方、单味药以及有效成分在缺血性脑卒中方面的研究进展进行综述,以期为中医药的研究提供新思路,并为中药的进一步深入开发应用提供参考。     

中医药保护脑缺血再灌注损伤后神经血管单元的作用

脑缺血再灌注损伤(CIRI)是多环节、多因素、多途径的酶促级联反应,其发生发展与炎症、氧化应激、血管功能紊乱、细胞凋亡等机制密切相关。目前针对CIRI后特定神经元或血脑屏障等单一结构功能改变的研究较多,而对脑组织整体变化的研究较少。神经血管单元是由血管、神经元、血脑屏障及神经胶质细胞相互作用构成的整体。当CIRI损伤后,出现神经元变性、坏死,血脑屏障通透性改变,小胶质细胞增生等一系列复杂的病理变化,最终引起继发性脑损伤。因此在治疗策略中,通过加强神经细胞-细胞间和非神经细胞之间的信号联系,双向调节神经-胶质细胞-血管内皮细胞,促进神经元存活,提高突触重塑及神经再生等修复过程,是保证神经血管单元间正常功能和血流的物质基础,可作为新的治疗靶点,故神经血管单元概念的提出为缺血性脑损伤的基础研究及临床治疗提供了新的研究方向。中医药具有多组分、多靶点及整体调节的优势特点,能够对CIRI后神经血管单元起到整体保护作用。笔者拟对CIRI后神经血管单元结构的改变及中医药对其调节作用机制进行综述。     

补阳还五汤通过Notch信号通路修复缺血性脑损伤的研究进展

补阳还五汤在改善缺血性脑损伤后脑梗死、减少致残率方面发挥着重要作用,并且取得了显著的临床疗效。此外,补阳还五汤还能促进脑缺血后脑内神经干细胞(NSCs)的增殖、迁移和分化。在缺血性脑损伤后,Notch信号通路被激活,活化的信号通路在调控NSCs的增殖与分化、炎症反应、缺血区血管生成等方面起着重要作用。研究发现补阳还五汤可以通过Notch信号通路调节NSCs的增殖和分化,从而达到神经保护的作用。现将NSCs的增殖与分化作为补阳还五汤和Notch信号通路的结合点,探讨补阳还五汤通过Notch信号通路来发挥对缺血性脑损伤的修复作用。     

基于神经血管单元探讨中医药治疗缺血性脑损伤的研究思路

缺血性脑损伤是由多种细胞相互作用引起的级联反应,以往主要针对特定神经元或血脑屏障等结构进行研究,而忽略了大脑各个功能区的整体联系性和不同结构之间的相互作用。近年来脑保护的目标已逐步由单一结构转变为对神经和血管整体的保护,并提出神经血管单元(NVU)这一概念。研究发现NVU内存在着多种双向细胞-细胞间和细胞-细胞外基质的相互作用,这种相互作用主要由神经元、胶质细胞、血管内皮细胞和细胞外基质共同构成。当脑组织缺血缺氧时,NVU整体结构功能破坏,引起胶质细胞活化/血管内皮细胞结构改变/血脑屏障通透性破坏等一系列动态的病理变化。故在治疗过程中,以NVU整体结构为靶点,协调其内部神经元-胶质细胞-血脑屏障-细胞外基质的动态变化,对减轻神经损伤与促进其修复具有重要意义。中医药具有整体调节和综合治疗优势,在保护NVU整体与各个组分的结构功能作用显著,已成为改善缺血性脑损伤及其机制研究领域的热点。因此,基于NVU的变化深入研究中医药保护缺血性脑损伤的作用机制,在诸多靶点中选择有效的药物干预,能够为中医药治疗缺血性脑损伤提供新的治疗思路。     

针刺治疗缺血性中风对神经干细胞增殖分化作用的最新实验研究进展

随着对神经干细胞的深入研究,其对神经系统损伤后修复已经成为实验研究的一个热点。就最近几年来针刺对缺血性脑损伤神经干细胞影响的最新实验研究进展做一综述。目前实验研究主要关注针刺对内源性神经干细胞增殖,分化,迁移的直接促进作用以及对内源性NSC增殖分化调控机制和影响因素的有效影响。但是目前对内源性神经干细胞的增殖分化调控机制和影响因素还没有完全研究清楚,并且针刺对脑缺血损伤后的作用的机制也同样没有完全清楚,还有很多研究对神经干细胞的增殖分化有新的发现,其影响因素还有很多,针刺依然对这些因素的有一定作用,但是否与脑缺血损伤后修复有联系,还需进一步研究证明。     

中医药对神经干细胞影响的研究概况

1 神经干细胞的概念及生物学特性 　　神经干细胞（neural stem cell,NSC）是指中枢神经系统中的一类具有多向分化潜能,自我复制,高度增殖能力,在特定条件诱因下,能够向特定类型神经元或神经胶质细胞分化的特殊的未分化或低分化的细胞的总称.特征是：未分化,缺乏分化标记,可增殖即能够自我更新;具有分化为神经元、少突胶质细胞和星形胶质细胞的多种分化潜能.     

传代神经干细胞体外分化研究

目的：分离、培养和鉴定Wistar大鼠脑部的神经干细胞,传代培养后进行诱导分化。方法：分离培养神经干细胞,传代后进行诱导分化研究。结果：所分离培养的细胞具有增殖能力和分化潜能,表达nestin蛋白,诱导分化后经细胞免疫学证实为表达NSE的神经元和表达GFAP的星形胶质细胞。结论：神经干细胞具有体外诱导分化为神经元和星形胶质细胞的能力。     

电针对血管性痴呆模型大鼠海马神经胶质细胞及微血管的影响

目的 :观察电针对实验性血管性痴呆 (VD)大鼠海马神经胶质细胞和毛细血管的影响。方法 :实验用 4 血管阻断模型 ,用Morris水迷宫测定大鼠学习记忆能力 ,并用电镜观察鼠脑海马神经胶质细胞和毛细血管的超微结构变化。结果 :模型组海马神经组织超微结构的形态损害明显 ,胶质细胞变性、水肿 ,毛细血管内皮细胞受损。电针能明显减轻或抑制缺血的大鼠海马神经胶质细胞及毛细血管的损害。结论 :电针明显改善痴呆大鼠的学习记忆能力 ,与其对脑组织神经元、神经胶质细胞及微血管的全脑保护作用密切相关     

中医药诱导神经干细胞增殖分化治疗缺血性脑卒中的策略和设想

1神经干细胞与缺血性脑损伤 1.1神经干细胞的概念和生物学特点 Mcbay[1]1997年提出,神经干细胞(neural stem cell,NSC)是指具有分化为神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞的能力,能自我更新并能提供大量脑组织细胞的细胞群,此概念目前得到普遍认可.NSC通常具有以下特征:①我维持、自我更新;②不断增殖分裂;③多向分化潜能;④对疾病和损伤一定的反应能力.而自我更新和多向分化潜能是NSC的两个基本属性[2].目前NSC在脑内的分布尚有较多争论,脑室下区(subventricular zone,SVZ)和海马齿状回的颗粒下层(subgranular layer,SGL)已被证实是NSC产生最为活跃的区域[3、4].     

鼠尾草酸对β-淀粉样蛋白损伤的神经干细胞增殖的影响

目的观察鼠尾草酸对β-淀粉样蛋白(β-amyloid protein,Aβ)损伤的神经干细胞的影响,为通过促进神经新生治疗Aβ损伤所致疾病提供理论依据。方法使用Aβ建立神经干细胞损伤模型,使用鼠尾草酸治疗神经干细胞,通过细胞计数法计算神经干细胞的增殖速度,噻唑蓝(MTT)测定神经干细胞活性,逆转录-聚合酶链反应(RTPCR)测定神经干细胞中Nestin m RNA及凋亡相关基因Caspase3 m RNA表达,免疫组化测定神经干细胞向神经元和星形胶质细胞的分化潜能。结果鼠尾草酸能增加神经干细胞的增殖速度,增加神经干细胞活力,减少神经干细胞Caspase3 m RNA表达,增加神经干细胞向神经元分化比例,逆转Aβ损伤造成的神经干细胞凋亡。结论鼠尾草酸促进神经干细胞增殖,促进神经干细胞向神经元分化,逆转Aβ对神经干细胞的损伤可能是由于抑制了凋亡基因表达。     

调节Notch信号通路在醒神开窍针刺法治疗缺血性中风中的作用探讨

缺血性中风是当今危害人们健康的重要疾病之一。促进中枢神经系统内源性神经干细胞(NSCs)的增殖、分化,从而修复受损的神经元是提高缺血性中风临床疗效的关键点。NSCs的增殖、分化可受多种因素影响,其中Notch信号通路在机体发生缺血性中风时激发内源性NSCs的增殖、分化是必不可少的。从中医学角度看,醒神开窍针刺法可使缺血性中风患者髓海充而复神明,改善中风后"形神失调"的症状,认为其机制与调节Notch信号通路,促进内源性NSCs的增殖、分化有关。     

去大脑皮层血管成年大鼠前脑bFGF和PCNA的表达及三七总皂甙作用研究

目的:研究去皮层血管后前脑内bFGF和PCNA的表达,以及三七总皂甙对其表达的影响。方法:通过免疫组织化学的方法检测去除大脑左侧皮层血管成年大鼠前脑内bFGF和PCNA的表达,以及给予三七总皂甙后其表达的变化。结果:去大脑皮层血管后bFGF和PCNA在病灶及病灶周围、大脑皮质、海马、纹状体、侧脑室室管膜下层和室管膜层等均有表达,给予三七总皂甙后阳性细胞数量显著增加,反应增强、细胞着色加深,经图象分析阳性细胞的面密度和光密度及细胞记数,并统计处理,作用明显,P<0.001,具有统计学意义。结论:三七总皂甙促进去大脑皮层血管后成年大鼠前脑内bFGF和PCNA的表达,bFGF可能通过多种分泌方式及转运途径促进神经元存活、损伤神经组织的修复、血管增生以及脑内细胞的增殖,其中包括促进脑内胶质细胞和神经干细胞的增殖。     

黄芪甲苷促内、外源性神经干细胞治疗脑缺血损伤的研究进展

以缺血性中风为首的脑中风(脑缺血)严重威胁人类健康,会造成神经元急性坏死并触发神经元迟发性凋亡.神经干细胞(NSCs)是具有分化为神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞能力又能够自我更新的细胞.脑缺血时肌体诱导内源性NSCs的增殖和分化,或者移植外源性NSCs,对脑缺血的治疗和神经功能的恢复都有积极作用.补气药黄芪中主要活...     

兔骨髓基质细胞源性神经干细胞诱导分化及移植修复脊髓损伤实验研究

目的:探究骨髓基质源性神经干细胞对于修复脊髓损伤的可行性和可靠性。方法:采用新西兰白兔作为研究对象,提取骨髓基质细胞加以培养分化,手术方式将骨髓基质细胞源性神经干细胞悬浊液移植到脊髓损伤部位,观察损伤区域再生情况。结果:早期培养细胞在无诱导分化时能表达巢蛋白,表明其有干细胞活性;干细胞移植后脊髓损伤部位增殖细胞排列无层次,且Brd U染色呈阳性。结论:兔骨髓基质细胞在合适的体外培养条件下能分化成干细胞,具有增殖分化能力,可以应用于修复脊髓损伤等神经学科领域。     

白脉散有效成分组调控神经干细胞增殖的实验研究

神经干细胞(NSCs)具有替代及修复受损神经组织的作用,研究发现能够通过调控NSCs内环境诱导其增殖分化,重塑神经功能,从而修复脑卒中神经病变等神经系统损伤。本实验研究了蒙药白脉散有效成分组(BMECG)激活NSCs增殖的药理学作用。通过建立体内外2种损伤模型,模拟脑卒中神经病变,分别利用流式细胞术、行为学检测、Nestin免疫组化等方法研究BMECG的脑保护作用机制。结果表明,BMECG能够显著提高体外培养NSCs增殖能力,有助于小鼠的行为学功能恢复,明显改善模型小鼠大脑皮层NSCs增殖能力。因此BMECG直接针对NSCs增殖存活能力发挥作用,可能是治疗脑卒中神经病变的机制之一,该药物具有重要的研究意义和广阔的应用前景。     

中药调节神经干细胞增殖分化的研究进展

神经干细胞(neural stem cells,NSCs)指能自我更新,并具有分化为神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞潜能的细胞群。目前,神经再生和NSCs移植已成为治疗神经系统疾病的新策略,但NSCs移植仍存在存活率不高、定向分化困难、易成瘤和难以穿透疤痕组织等问题。如何通过调控内源性NSCs的增殖和定向分化是成体神经再生研究的新热点问题。药物诱导内源性NSCs增殖和定向分化的技术有望应用于再生医学,修复受损的神经,治疗中枢神经系统疾病。中药作为我国的传统医药,具有多靶点、多环节、多途径的治疗特点,在促进神经再生方面具有独特优势和广阔前景。近年来药理学研究表明中药可通过调控胞外信号通路[如Notch,Wnt/β-catenin,the Sonic Hedgehog(Shh)通路等],影响胞内转录因子以及改变神经发生微环境(如神经营养因子BNDF等)等多种途径间接或直接调控NSCs的增殖和分化。对近年来中药复方、中成药、单味中药及天然产物调节NSCs增殖分化的分子机制相关研究加以归纳总结,为中药防治中枢神经系统疾病提供新的思路。     

补益脾胃元气方药对海马神经干细胞增殖分化的影响

目的:探讨人参、大补元煎、洗心汤三组补益脾胃元气方药对海马神经干细胞(neural stem cells,NSCs)增殖分化的影响。方法:从新生24小时内的Wistar胎鼠脑中分离培养海马NSCs,制备不同药物含药脑脊液并与Aβ_(1-42)共同处理海马NSCs。通过CCK8实验检测各组海马NSCs增殖率,免疫荧光法与蛋白印迹法检测海马NSCs分化为神经元与星形胶质细胞的情况。结果:含中药各实验组的海马NSCs增殖率显著高于Aβ_(1-42)处理组(P0.05);含中药各实验组海马NSCs分化为神经元与星形胶质细胞数量明显多于Aβ_(1-42)处理组(P0.05),各中药组之间对比,差异不具有统计学意义(P0.05)。结论:人参、大补元煎、洗心汤能显著促进海马NSCs增殖、诱导海马NSCs分化为神经元与星形胶质细胞。