热敏灸对肠易激综合征模型大鼠HPA轴调节机制的研究

目的:观察热敏灸对肠易激综合征(IBS)大鼠促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)、促肾上腺皮质激素(ACTH)、皮质酮(CORT)的影响,探讨热敏灸治疗IBS的可能作用机制。方法:56只SD雄性大鼠按随机数字表随机分为空白组(8只)、模型组(8只)、艾灸组(32只)和米非司酮组(RU-486组,8只)。空白组正常饲养,模型组、RU-486组与艾灸组采用慢性不可预见性刺激法建立IBS模型,造模21 d。造模结束后,艾灸组灸"命门"穴,每日1次,每次40 min,共14 d,每隔5 min检测大鼠尾温并记录,根据大鼠尾温变化分热敏灸组和非热敏灸组,两组各随机抽取8只;RU-486组予RU-486灌胃处理,空白组、模型组与艾灸组灌服同等换算体积0.9%Na Cl溶液14 d。观察各组大鼠一般状况、体质量、行为学、小肠推进率、内脏敏感性变化,ELISA法检测大鼠血清CRH、ACTH、CORT含量,光学显微镜观察结肠形态学变化。结果:(1)造模后,大鼠表现为静卧少动、神态怠倦、毛发枯槁、耳郭色泽变暗淡、粪便时干时稀等;体质量增长缓慢;大鼠穿格数、站立数明显减少;内脏敏感性增高、小肠推进率下降;结肠组织显微镜下未见明显炎性细胞浸润。(2)干预后,与空白组相比,RU-486组体质量、内脏敏感性差异无统计学意义(均P0.05),但小肠推进率明显下降(P0.01);干预后,热敏灸组与非热敏灸组体质量低于空白组(均P0.01),但内脏敏感性、小肠推进率与空白组比较差异无统计学意义(均P0.05)。与模型组相比,RU-486组干预后体质量升高、内脏敏感性改善(P0.05,P0.01),但小肠进率方面差异无统计学意义(P0.05);热敏灸组与非热敏灸组干预后体质量、内脏敏感性、小肠推动率均明显优于模型组(P0.05,P0.01),且热敏灸组在体质量、小肠推动率方面优于非热敏灸组(均P0.05)。(3)与空白组相比,模型组血清CRH、ACTH、CORT均升高(P0.05,P0.01);与模型组相比,热敏灸组干预后血清CRH、ACTH、CORT含量均降低(P0.05,P0.01),非热敏灸组血清CRH、ACTH含量均降低(P0.05,P0.01),RU-486组血清CRH含量降低,而ACTH、CORT含量明显升高(P0.05,P0.01)。与非热敏灸组相比,热敏灸组干预后CRH含量降低(P0.05),ACTH、CORT含量比较差异无统计学意义(均P0.05)。结论:热敏灸可能通过调节下丘脑-垂体-肾上腺轴(HPA轴),降低血清CRH、ACTH、CORT含量,改善胃肠运动功能,从而达到治疗IBS的目的。     

热敏灸对肠易激综合征模型大鼠CRH、ACTH及CORT的影响

目的:观察热敏灸对肠易激综合征(IBS)模型大鼠CRH、ACTH与CORT的影响。方法:64只SD雄性大鼠随机分为空白组(8只)、模型组(8只)、艾灸组(32只)、假手术组(8只)、NMDA组(8只),空白组不予干预,其余各组通过慢性不可预见性刺激法复制IBS模型。造模完成,艾灸组以悬灸命门穴出现尾温变化为依据,分为热敏灸组和非热敏灸组。实验第21、28、35天,NMDA组套管植入海马微量注射5μg/μL NMDA 1μL,假手术组、艾灸组注射生理盐水。观察各组大鼠行为学变化。应用Real-time PCR检测下丘脑CRH mRNA表达,放射免疫法检测血清ACTH、CORT水平。结果:(1)与空白组相比,各组大鼠下丘脑CRH mRNA表达均升高(P0.01,P0.05)。与模型组相比,假手术组CRH mRNA表达无明显差异,NMDA组CRH mRNA表达升高(P0.01),热敏灸组、非热敏灸组CRH mRNA表达均明显降低(均P0.01)。与非热敏灸组相比,热敏灸组CRH mRNA表达降低,差异有统计学意义(P0.05);(2)与空白组相比,各组大鼠血清ACTH含量均升高(均P0.01)。与模型组相比,假手术组ACTH含量无明显差异,NMDA组ACTH含量升高(P0.01),热敏灸组、非热敏灸组ACTH含量均明显降低(P0.01,P0.05)。与非热敏灸组相比,热敏灸组ACTH含量降低(P0.05);(3)与空白组相比,各组大鼠血清CORT含量均升高(P0.01,P0.05)。与模型组相比,假手术组、NMDA组CORT含量无明显差异;热敏灸组、非热敏灸组CORT含量均明显降低(均P0.01)。与非热敏灸组相比,热敏灸组CORT含量降低(P0.05)。结论:热敏灸可有效改善IBS模型大鼠相关症状,可能是通过调节NR的表达,降低下丘脑CRHmRNA表达及血清ACTH、CORT含量,恢复HPAA负反馈调节功能实现的。     

热敏灸对肠易激综合征模型大鼠iGR、CORT的影响

目的:观察热敏灸对肠易激综合征(IBS)模型大鼠海马iGR及CORT的影响,探讨热敏灸治疗IBS的可能作用机制。方法:64只SD雄性大鼠按随机数字表随机分为空白组(8只)、模型组(8只)、艾灸组(32只)、假手术组(8只)、NMDA组(8只),空白组正常饲养,模型组、艾灸组、假手术组、NMDA组采用慢性不可预见性刺激法建立IBS模型。假手术组、艾灸组和NMDA组大鼠于造模第15天进行脑立体定位,海马处植入套管。造模结束后,艾灸组灸"命门"穴,根据大鼠尾温变化分为热敏灸组和非热敏灸组。造模完成当天、第8、15天,NMDA组海马微量注射NMDA,假手术组、艾灸组注射等量生理盐水。观察各组大鼠行为学变化。治疗结束后采用PCR方法检测海马iGR mRNA表达,放免法检测血清CORT含量。结果:(1)与空白组比较,模型组、热敏灸组、非热敏灸组、假手术组、NMDA组iGR mRNA表达降低(P0.01),与模型组比较,热敏灸组、非热敏灸组iGR mRNA表达增加(均P0.01)。与非热敏灸组相比,热敏灸组在改善iGR mRNA表达方面优于非热敏灸组(均P0.05)。(2)与空白组相比,模型组、热敏灸组、非热敏灸组、假手术组、NMDA组CORT含量均升高(均P0.01)。与假手术组比较,热敏灸组、非热敏灸组CORT含量均明显降低(均P0.01)。与非热敏灸组相比,热敏灸组CORT含量降低(均P0.05)。结论:热敏灸能改善iGR mRNA表达,降低CORT含量,改善HPAA负反馈调节,这可能是热敏灸通过HPAA途径治疗IBS的可能机制。     

热敏灸对肠易激综合征大鼠内脏敏感性、小肠推进率及血清CGRP、ET的影响

目的:观察热敏灸对肠易激综合征(IBS)大鼠内脏敏感性、小肠推进率及血清降钙素基因相关肽(CGRP)、内皮素(ET)的影响,探讨热敏灸治疗IBS的可能作用机制。方法:48只SD雄性大鼠按随机数字表随机分为空白组(8只、A组)、模型组(8只,B组)、艾灸组(32只),A正常饲养,B组与艾灸组采用慢性不可预见性刺激法建立IBS模型,造模21d。造模结束后,艾灸组灸命门穴,每日1次,每次40min,每隔10min检测大鼠尾温并记录,根据大鼠尾温变化分热敏灸组(C组)和非热敏灸组(D组),两组各随机抽取8只。共14d,A、B组正常饲养。治疗前后检测大鼠内脏敏感性。治疗结束后,行小肠推进率实验并腹主动脉取血。结果:与A组相比,B组内脏敏感性、小肠推进率差异均有统计学意义(P0.05,P0.01);与B组相比,C、D组小肠推进率、内脏敏感性均有统计学意义(P0.05,P0.01)。与A组相比,B组血清CGRP、ET水平均下降明显(P0.01);与B组相比,C、D组血清CGRP水平偏高,C组血清ET升高明显,差异明显(P0.01);与D组相比,C组血清ET水平较高,差异有统计学意义(P0.05)。结论:与传统艾灸相比,热敏灸治疗IBS疗效更佳。热敏灸可调节IBS大鼠血清CGRP、ET表达,改善大鼠胃肠动力、内脏敏感性。     

基于NF-κB信号通路探讨热敏灸治疗膝骨性关节炎兔模型的效应机制

目的:观察热敏灸对KOA兔模型核因子κB亚基p65/p50(Nuclear factor κB-p65/p50,NF-κB p65/p50)、白介素-1β(lniierleukin-1β,IL-1β)、Ⅱ型胶原的影响,探讨热敏灸治疗KOA的作用机制。方法:42只雄性日本长耳兔按随机数字表随机分为空白组(6只)、模型组(6只)、艾灸组(24只)、假手术组(6只)。空白组正常饲养,模型组与艾灸组采用木瓜蛋白酶注射膝关节建立KOA模型,假手术组采用腔内注射生理盐水造模,每日强迫活动30min,造模15天。造模结束后,艾灸组艾灸犊鼻穴,每日1次,每次40min,共14天,根据家兔艾灸过程中温度变化分为热敏灸组和非热敏灸组,两组各随机抽取6只;空白组、模型组、假手术组正常饲养,不予任何干刺激。治疗结束后,采用放射免疫法检测IL-1β含量,Real-time PCR检测法检测软骨NF-κB p65/p50、Ⅱ型胶原。结果:(1)与空白组相比,模型组、热敏灸组、非热敏灸组、假手术组血清、关节炎IL-1β表达均升高,差异有统计学意义(P0.05,P0.01);与模型组相比,热敏灸组、非热敏灸组、假手术组表达均明显偏低(P0.05,P0.01);与非热敏灸组相比,热敏灸组表达明显偏低(均P0.05)。(2)与空白组相比,模型组、热敏灸组、非热敏灸组、假手术组NF-κB p65/p50表达均升高,差异有统计学意义(P0.05,P0.01);与模型组相比,热敏灸组、非热敏灸组、假手术组表达均明显降低(P0.01);与非热敏灸组相比,热敏灸组表达明显降低(均P0.05)。(3)与空白组相比,模型组、热敏灸组、非热敏灸组、假手术组Ⅱ型胶原表达均下降,差异有统计学意义(均P0.01);与模型组相比,热敏灸组、非热敏灸组、假手术组表达均明显升高(均P0.01);与非热敏灸组相比,热敏灸组表达明显升高(P0.05)。结论:热敏灸可能通过抑制NF-κB信号通路,减少炎症反应、保护关节软骨从而达到治疗KOA的目的。     

热敏灸干预膝骨性关节炎兔模型效应机制的研究

目的:观察热敏灸对膝骨性关节炎(KOA)兔模型一氧化氮(NO)、含Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶-4(ADAMTS-4)、Ⅱ型胶原、蛋白多糖(PG)的影响,探讨热敏灸治疗KOA的作用机制。方法:42只雄性日本长耳兔按随机数字表随机分为空白组(6只)、模型组(6只)、艾灸组(24只)、假手术组(6只)。空白组正常饲养,模型组与艾灸组采用木瓜蛋白酶注射膝关节腔建立KOA模型,每日强迫活动30 min,造模15 d。假手术组腔内注射0.9%Na Cl溶液。造模结束后,艾灸组艾灸"犊鼻"穴,每日1次,每次40 min,共14 d,根据兔艾灸过程中温度变化分为热敏灸组和非热敏灸组,两组各随机抽取6只;空白组、模型组、假手术组正常饲养,不予任何刺激。观察各组兔体质量、行为学变化;干预结束后,采用硝酸还原法检测血清NO含量,Real-time PCR法检测软骨ADAMTS-4、Ⅱ型胶原、PG含量。结果:(1)造模后,与空白组相比,模型组、热敏灸组、非热敏灸组、假手术组兔体质量均下降,Lequesne MG评分升高(P0.05,P0.01)。干预后,与空白组相比,模型组、假手术组兔体质量仍下降,Lequesne MG评分升高(P0.05,P0.01);与模型组相比,热敏灸组、非热敏灸组、假手术组干预后兔体质量升高,Lequesne MG评分降低(P0.05,P0.01);与非热敏灸组相比,热敏灸组兔体质量明显升高(P0.05),但Lequesne MG评分比较差异无统计学意义(P0.05)。(2)干预后,与空白组相比,模型组、热敏灸组、非热敏灸组、假手术组NO、ADAMTS-4表达均升高,Ⅱ型胶原、PG表达均下降(P0.05,P0.01);与模型组相比,热敏灸组、非热敏灸组、假手术组干预后NO、ADAMTS-4表达均明显降低,Ⅱ型胶原、PG均明显升高(P0.05,P0.01);与非热敏灸组相比,热敏灸组干预后NO、ADAMTS-4表达明显降低,Ⅱ型胶原、PG表达均明显升高(均P0.05)。结论:热敏灸可能通过抑制NO和ADAMTS-4表达,减少炎性反应、保护关节软骨从而达到治疗KOA的目的。     

热敏灸对慢性萎缩性胃炎模型大鼠c-myc、survivin、Cyclin D1的影响

目的观察热敏灸"中脘"穴对慢性萎缩性胃炎(CAG)模型大鼠胃黏膜原癌基因(c-myc)、存活素(survivin)及细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)表达的影响。方法 66只SD大鼠按随机数字表法随机分为空白组、造模组。空白组正常饲养,造模组采用复合病因造模法连续造模12周后,随机分为模型组、维酶素组、艾灸组。艾灸组艾灸"中脘"穴40min,艾灸后按2ml/(kg·d)灌服0.9%NaCl,根据艾灸过程中大鼠尾温变化分为热敏灸组和非热敏灸组,维酶素组灌服等量维酶素,1次/d,共28d。实验结束后光镜观察胃黏膜组织学变化,Real time-PCR法检测胃黏膜c-myc、survivin mRNA表达;免疫组化法检测Cyclin D1蛋白的表达,IPP6.0软件对免疫组化照片进行平均光密度分析。结果①与空白组相比,模型组胃黏膜c-myc、survivin mRNA表达均明显升高(均P0.01);与模型组相比,非热敏灸组、热敏灸组、维酶素组均能降低c-myc、survivin mRNA表达(均P0.01),且热敏灸组及维酶素组均优于非热敏灸组(P0.05,P0.01);在降低c-myc mRNA方面维酶素组优于热敏灸组(P0.05),在降低survivin mRNA方面热敏灸组与维酶素组疗效相当。②空白组cyclin D1呈阴性表达,模型组呈强阳性表达,维酶素组、热敏灸组和非热敏灸组较模型组表达均下降,维酶素与热敏灸组阳性表达近似,但均明显低于非热敏灸组。与空白组相比,模型组、非热敏灸组Cyclin D1平均光密度表达升高(均P﹤0.01);与模型组相比,非热敏灸组、热敏灸组及维酶素组Cyclin D1表达均下降(P﹤0.05,P﹤0.01);与非热敏灸组相比,热敏灸组、维酶素组Cyclin D1表达降低(均P﹤0.05),但热敏灸组与维酶素组间无差异。结论①热敏灸能明显改善CAG大鼠体质量及胃黏膜组织病理形态。②热敏灸可能通过调控胃黏膜c-myc、survivin mRNA、Cyclin D1表达,恢复胃黏膜细胞增殖与凋亡平衡而达到治疗CAG的目的。     

热敏灸对脑缺血再灌注损伤模型大鼠大脑皮质细胞凋亡的影响

目的观察热敏灸对脑缺血再灌注损伤模型大鼠大脑皮质细胞凋亡和Caspase-3表达的影响,阐明热敏灸治疗脑缺血再灌注损伤作用机理。方法将75只雄性SD大鼠随机分为4组:假手术组、模型组、艾灸组和热敏灸组,采用血管内线栓法阻塞大脑中动脉2h后进行再灌注,制备局灶性脑缺血再灌注损伤模型。采用TTC(2,3,5-氯化三苯基四氮唑)染色检查脑组织梗死情况,TUNEL法检测大脑皮质中的凋亡细胞,免疫组化法检测大脑皮质中Caspase-3蛋白的表达。结果与假手术组大鼠相比,模型组大鼠脑梗死面积增加,大脑皮质中凋亡细胞和Caspase-3蛋白的表达明显增多(P0.05);与模型组相比,艾灸组、热敏灸组大鼠脑梗死面积减少,大脑皮质中凋亡细胞和Caspase-3蛋白的表达减少(P0.05),且热敏灸组优于艾灸组。结论热敏灸减轻大鼠脑组织缺血再灌注损伤的效果,可能与降低Caspase-3的表达、减少脑细胞凋亡有关。     

基于PGE2/PKC/TRPV1信号通路研究热敏灸对膝骨性关节炎兔镇痛效应机制

目的 观察热敏灸对膝骨性关节炎(KOA)兔血清PGE2、背根神经节PKC、穴区皮肤TRPV1的影响，探讨其治疗KOA的作用机制。方法 36只雄性普通级新西兰兔随机分为空白组(6只)、假手术组(6只)、造模组(24只)。采用木瓜蛋白酶溶液注射膝关节腔法造模15d,假手术组关节腔内注射等量的0.9%NaCl溶液。造模成功后，造模组随机分成模型组(6只),艾灸组(18只),艾灸组艾灸“犊鼻”穴，每日1次，每次40 min,共7 d,根据兔艾灸过程中温度变化分为热敏灸组(10只)和非热敏灸组(7只),空白组、假手术组、模型组不予干预措施。干预结束后，肉眼、光镜下观察膝关节滑膜形态学变化；ELISA法检测血清PGE2表达；Real-time PCR法检测各组兔背根神经节PKC mRNA、穴区皮肤TRPV1 mRNA的含量。结果 (1)干预后模型组兔膝关节腔内有大量积液，滑膜增生肥厚，伴有血管增生及大量炎症细胞成团聚集；热敏灸及非热敏灸组关节腔内积液减少，滑膜异常增生改善。(2)与空白组比较，模型组血清PGE2含量明显上升(P<0.01);与模型组比较，热敏灸组、非热敏灸组血清PGE2含量下...     

不同刺灸法对功能性便秘大鼠血浆一氧化氮、一氧化氮合酶及结肠血管活性肠肽的影响

目的:比较毫针、电针、艾灸3种刺灸方法对功能性便秘大鼠的治疗作用差异,并探讨其疗效的可能机制。方法:雄性SD大鼠随机分为空白对照组(8只)、模型组(11只)、西沙必利组(8只)、毫针组(11只)、电针组(11只)和艾灸组(11只)。除空白对照组外,余各组每日予盐酸洛哌丁胺混悬液(3mg/kg)灌胃,制备功能性便秘大鼠模型。造模同时每日灌胃后间隔1h,西沙必利组予西沙必利混悬液灌胃,毫针组、电针组和艾灸组在"天枢"穴和"上巨虚"穴分别予以毫针、电针、艾灸干预治疗,每日1次,治疗15min,共治疗6d。观察各组大鼠首粒黑便排出时间,酶联免疫法检测血浆一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)、血管活性肠肽(VIP)的含量,免疫组化法、蛋白印迹法检测各组大鼠结肠组织中VIP的表达。结果:与空白对照组比较,模型组大鼠的首粒黑便排出时间延长(P0.05),血浆NO、NOS、VIP含量均升高(P0.01,P0.05),VIP蛋白在大鼠结肠肠壁的平滑肌层表达评分升高(P0.05),结肠组织VIP蛋白表达升高(P0.01)。与模型组比较,西沙必利组、毫针组、电针组和艾灸组首粒黑便排出时间均缩短(P0.05),血浆NO、NOS、VIP含量均降低(P0.01,P0.05),结肠组织VIP蛋白表达评分均降低(P0.05),VIP蛋白表达均降低(P0.01)。与西沙必利组比较,毫针组、电针组、艾灸组首粒黑便排出时间延长(P0.05),电针组血浆VIP含量降低(P0.01),艾灸组结肠组织VIP蛋白表达降低(P0.01)。3个刺灸干预组之间比较,电针组血浆NO、NOS含量及结肠组织VIP蛋白表达评分均低于毫针组和艾灸组(P0.01,P0.05);血浆VIP含量由低到高依次为电针组、艾灸组、毫针组,且差异均有统计学意义(P0.01,P0.05);结肠组织VIP蛋白表达,艾灸组低于毫针组(P0.05)和电针组(P0.01)。结论:3种刺灸方法均对功能性便秘有良性调整作用,其中电针对血浆NO、NOS及VIP含量的调节作用较为显著,而在对结肠组织VIP蛋白表达的调节方面,艾灸可能更为适宜。     

艾灸对实验性类风湿关节炎大鼠外周血炎症因子及滑膜组织膜型程序性细胞死亡配体1表达的影响

目的观察艾灸对实验性类风湿关节炎(RA)大鼠外周血中白细胞介素10(IL-10)、γ干扰素(IFN-γ)含量及滑膜组织膜型程序性细胞死亡配体1(mPD-L1)表达的影响,探讨艾灸治疗RA抗炎效应的作用机制。方法将45只SD大鼠按照随机数字表法分为空白组、模型组和艾灸组,每组各15只。采用弗氏完全佐剂法对模型组和艾灸组造模,空白组同法注射0.9%氯化钠注射液0.1 mL作为对照。在造模后第7 d,艾灸组采用麦粒灸"肾俞""足三里"穴各5壮,日1次,6 d为1个疗程,共治疗3个疗程:空白组及模型组不施灸。用酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组外周血中IL-10、IFN-γ的含量,免疫组化法测定滑膜组织mPD-L1的表达。结果模型组血清中IFN-γ含量高于空白组(P0.05),艾灸组低于模型组(P0.05),艾灸组与空白组比较差异无统计学意义(P0.05)。模型组血清中IL-10含量低于空白组(P0.05),艾灸组高于模型组(P0.05),艾灸组与空白组比较差异无统计学意义(P0.05)。模型组滑膜组织mPD-L1表达高于空白组(P0.05),艾灸组滑膜组织mPD-L1表达低于模型组(P0.05),艾灸组与空白组比较差异无统计学意义(P0.05)。结论艾灸治疗实验性RA有显著的抗炎作用,其作用机制可能与艾灸调节滑膜组织mPD-L1的表达,进而调控炎症因子IL-10、IFN-γ的表达关系密切。     

热敏灸“中脘”穴对慢性萎缩性胃炎模型大鼠血清GH、PG的影响

目的:观察热敏灸"中脘"穴对慢性萎缩性胃炎(CAG)模型大鼠血清生长激素(GH)、胃蛋白酶原(PG)的影响,探讨热敏灸治疗CAG的可能作用机制。方法:将66只雄性SD大鼠随机分为空白组(12只)和造模组(54只)。空白组不予干预;造模组采用复合病因造模法造模12周后随机分为模型组(11只)、维酶素组(11只)、艾灸组(22只)。艾灸组悬灸"中脘"穴40 min,艾灸后按2 mL·kg^-1·d^-1灌服0.9%氯化钠溶液,根据悬灸过程中大鼠尾温变化分为热敏灸组(11只)和非热敏灸组(8只);维酶素组等量灌服维酶素溶液。每日1次,共28 d。观察各组大鼠体质量的变化;ELISA法检测血清GH、PGⅠ、PGⅡ表达,并计算PGⅠ/PGⅡ值(PGR);肉眼、光镜下观察胃黏膜形态学变化。结果:①造模后,造模组大鼠体质量低于空白组(P<0.01)。干预后,与模型组比较,维酶素组、非热敏灸组和热敏灸组大鼠体质量均明显增长(P<0.05);各干预组组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。②造模组大鼠肉眼及光镜下胃黏膜色暗红或灰白,皱襞变平,充...     

不同刺灸法对功能性便秘大鼠血浆SP含量、结肠SP mRNA表达的影响研究（英文）

目的:探讨不同刺灸方法对功能性便秘大鼠血浆P物质(substance P,SP)含量、结肠SP m RNA表达的影响。方法:将60只健康雄性SD大鼠按随机数字表法分为空白对照组(8只)、模型组(11只)、药物对照组(8只)、毫针组(11只)、电针组(11只)和艾灸组(11只)。造模同时空白组和模型组不予干预,药物对照组予西沙必利混悬液灌胃,电针组、毫针组、艾灸组则分别给予电针、毫针和艾灸治疗6天。治疗结束后观察各组大鼠24 h粪便量和粪便含水量,结肠组织结构及粘膜层酸性粘液,血浆SP含量,结肠SP m RNA表达。结果:与空白对照组比较,模型组24 h粪便量及粪便含水量显著下降(P0.01);与模型组比较,各组大鼠24 h粪便量均增加(P0.05或0.01),除艾灸组外,其余各组大鼠24 h粪便量含水量也明显增加(P0.01);与药物组比较,艾灸组24 h粪便量含水量减少(P0.01);不同刺灸法干预组之间比较,24小时粪便量各组无差异(P0.05),24小时粪便含水量毫针组、电针组均高于艾灸组(P0.01),毫针组和电针组无差异(P0.05)。大鼠结肠组织HE染色显示结构正常、完整,各组间无明显差异。采用PAS染色显示酸性粘液层,与空白组比较,模型组酸性粘液明显减少;与模型组比较,药物组、毫针组、电针组、艾灸组均有不同程度增加。与空白对照组比较,模型组血浆SP含量下降(P0.05);与模型组比较,毫针组、艾灸组含量均升高(P0.01);与药物组比较,三个刺灸法干预组含量均高于药物组(P0.05或0.01);不同刺灸法干预组之间比较,毫针组高于艾灸组及电针组(P0.05),艾灸组与电针组无差异。与空白对照组比较,模型组结肠组织SP m RNA的表达升高(P0.05);与模型组比较,四个干预组的结肠组织SP m RNA表达均下降(P0.05);与药物组比较,毫针组、电针组、艾灸组无差异(P0.1);不同刺灸法干预组之间比较,艾灸组低于毫针组(P0.05)。结论:不同刺灸方法治疗功能性便秘的疗效不同可能与调节血浆SP含量、结肠组织SP mRNA表达的机制有关。     

麦粒灸调控IL-17对实验性RA大鼠血清TNF-a、IL-1b含量影响的研究

目的:探索麦粒灸治疗类风湿性关节炎(RA)抗炎效应的IL-17信号转导机制。方法:雄性SD大鼠66只,随机分为空白组、模型组、空白艾灸组、艾灸组、IL-17过表达模型艾灸组(IL-17过艾组)、IL-17沉默模型艾灸组(IL-17沉艾组)、IL-17过表达模型组和IL-17沉默模型组,前6组每组各9只,后2组每组各6只。大鼠右后足足垫部皮内注入弗氏完全佐剂0.15 ml制作RA模型。造模后第2天进行慢病毒注射建立IL-17基因过表达、IL-17基因沉默模型。造模后第7天开始麦粒灸大鼠"肾俞""足三里"两穴各5壮,每日1次,治疗18天。观测计算大鼠足跖肿胀度;采用ELISA双抗夹心法检测大鼠血清IL-17、TNF-a、IL-1b含量。结果:造模后模型组大鼠右后足容积显著高于空白组(P0.01),麦粒灸后艾灸组大鼠右后足容积显著低于模型组(P0.01)。造模后模型组大鼠血清IL-17、TNF-a、IL-1b显著高于空白组;麦粒灸后艾灸组大鼠血清IL-17、TNF-a、IL-1b显著低于模型组。麦粒灸后IL-17过艾组大鼠血清TNF-a含量显著高于艾灸组(P0.01);IL-17沉艾组大鼠血清TNF-a含量显著低于艾灸组、空白组。麦粒灸后IL-17过艾组、IL-17沉艾组IL-1b含量与艾灸组相比,没有显著性差异。结论:麦粒灸可能通过调控IL-17从而调节RA大鼠血清TNF-a含量,起到抑制RA滑膜炎症的作用。     

不同灸法对环磷酰胺所致免疫抑制兔脾组织程序性死亡因子-1及其配体表达的影响

目的观察不同灸法对环磷酰胺所致免疫抑制兔脾组织程序性死亡因子-1(PD-1)及其配体PD-L1表达的影响。方法大耳白兔32只随机分为空白组、模型组、隔药饼灸组、艾灸组。除空白组外,其余3组腹腔注射环磷酰胺制备免疫抑制兔模型,连续7 d。成模后,隔药饼灸组和艾灸组分别给予隔药饼灸、艾灸干预,隔日灸,共灸10次。治疗结束后次日动物麻醉,摘取脾脏。采用RT-qPCR检测PD-1、PD-L1m RNA表达,免疫组化检测PD-1蛋白表达。结果与空白组比较,模型组兔脾组织PD-1、PD-L1m RNA表达明显升高(P0.01);与模型组比较,隔药饼灸组兔脾组织PD-1、PD-L1m RNA表达明显降低(P0.01),艾灸组兔脾组织PD-L1 mRNA表达明显降低(P0.05),PD-1 mRNA表达虽有降低趋势但差异无统计学意义(P0.05)。免疫组化结果显示,兔脾组织棕褐色PD-1阳性表达主要在细胞浆、细胞膜或间质,与空白组比较,模型组兔脾组织PD-1蛋白表达显著升高(P0.01);与模型组比较,隔药饼灸组和艾灸组兔脾组织PD-1蛋白表达显著降低(P0.01,P0.05)。结论不同灸法对免疫抑制兔免疫功能均有明显改善作用,隔药饼灸较艾灸更具优势。     

不同刺灸法对功能性便秘大鼠结肠组织肠神经相关蛋白表达的影响

目的:比较手针、电针和艾灸对功能性便秘大鼠结肠组织肠神经活动相关蛋白降钙素基因相关肽(CGRP)、瞬时感受器电位香草素受体1(TRPV 1)、蛋白酶激活受体-4(PAR-4)表达的影响。方法:60只SD大鼠随机分为空白对照组(8只)、模型组(11只)、西沙必利组(8只)、手针组(11只)、电针组(11只)和艾灸组(11只)。以盐酸洛哌丁胺混悬液连续灌胃6d制备功能性便秘模型。西沙必利组和3个刺灸干预组分别于每日灌胃后1h给予相应干预:西沙必利组予西沙必利混悬液3mg/kg灌胃;其余3组分别采用手针、电针和艾条温和灸的方法对大鼠"天枢""上巨虚"穴干预15min,连续6d。计量第6天24h粪便量,采用炭餐指示剂进行小肠推进率实验,分别采用实时荧光定量PCR法和Western blot技术检测结肠组织CGRP、TRPV 1、PAR-4mRNA及其蛋白的表达。结果:与空白对照组比较,模型组24h粪便量、小肠推进率显著降低(P0.01);与模型组比较,西沙必利组、手针组、电针组的粪便量和小肠推进率均升高(P0.05,P0.01),艾灸组小肠推进率也升高(P0.01);与西沙必利组及电针组比较,手针、艾灸两组的小肠推进率均降低(P0.01)。与空白对照组比较,模型组CGRP、TRPV 1、PAR-4蛋白及mRNA表达水平均升高(P0.01);与模型组比较,各治疗组蛋白及mRNA表达水平除艾灸组CGRP外其余均降低(P0.05,P0.01);与西沙必利组比较,艾灸组3种蛋白表达水平均升高(P0.05,P0.01),3个刺灸干预组PAR-4mRNA表达水平均升高(P0.01),手针组CGRP mRNA表达水平降低(P0.05)、TRPV 1mRNA表达水平升高(P0.05);3个刺灸干预组之间比较,手针、电针两组CGRP、TRPV 1蛋白及CGRP、PAR-4 mRNA表达均低于艾灸组(P0.05,P0.01),电针组TRPV 1mRNA表达低于手针组(P0.05)。结论:3种刺灸方法对功能性便秘大鼠结肠组织CGRP、TRPV 1、PAR-4蛋白及mRNA表达均有不同程度的降低作用。     

艾灸对实验性类风湿性关节炎大鼠海马GR、MEL1B表达影响的研究

目的:探索艾灸治疗实验性类风湿性关节炎(RA)大鼠海马中枢的功能机制。方法:将SD大鼠随机分为空白对照组、RA模型组、艾灸组,用弗氏完全佐剂制造实验性RA病理模型,艾灸"肾俞"、"足三里"穴治疗,用免疫组化法测定大鼠海马糖皮质激素受体(GR)表达,用原位杂交法检测海马褪黑激素受体1B(MEL1B)表达。结果:模型组与空白组比较,GR表达有增高趋势(P>0.05),艾灸组显著低于模型组(P<0.01)。模型组与空白组比较,MEL1B光密度值显著增高(P<0.01),艾灸组明显低于模型组(P<0.05)。结论:艾灸对实验性RA海马中枢有良性调整作用,海马GR、MEL1B在艾灸治疗实验性RA大鼠抗炎效应中具有重要作用。     

化瘀通络灸对血管性痴呆大鼠学习记忆能力及海马BDNF/TrkB表达的影响

目的:探讨在"神经血管小生境"(neurovascular niche)微环境中,化瘀通络灸对血管性痴呆(vascular dementia,VD)大鼠学习记忆能力及脑源性神经营养因子(brain derived neurotrophic factor,BDNF)、酪氨酸激酶B(tyrosine kinase B,TrkB)表达水平的影响。方法:通过双侧颈总动脉永久性结扎法(2-VO)复制VD大鼠模型,将慢病毒介导的逆转录病毒携带增强绿色荧光蛋白(EGFP)标记的神经干细胞(NSCs)与内皮祖细胞(EPCs)共培养构建"NSCs+EPCs"共植体,移植入VD大鼠侧脑室,建立具有"neurovascular niche"的VD大鼠模型。实验一将造模成功的大鼠分为3组:NSCs+EPCs艾灸组、NSCs+EPCs空白组、模型组,每组12只,模型组和NSCs+EPCs空白组不进行其他任何治疗,NSCs+EPCs艾灸组进行化瘀通络灸法治疗,悬灸"百会""大椎""神庭",每穴20 min,每天治疗1次,14 d为一疗程,共治疗3个疗程。治疗结束后,采用Morris水迷宫实验检测各组大鼠学习记忆成绩;实验二将造模成功的大鼠分为3组:NSCs+EPCs艾灸组、NSCs+EPCs空白组、模型组,每组18只,每一组再根据治疗的不同疗程分为3个亚组,每亚组6只,治疗方法同实验一。每一亚组大鼠再分别于治疗相应疗程后灌注取脑,并行冰冻切片,进行免疫荧光实验观察BDNF/TrkB表达水平。结果:经治疗后,NSCs+EPCs艾灸组在降低逃避潜伏期、减短第一次穿越平台时间、增加穿越平台次数均优于模型组、NSCs+EPCs空白组(P0.01,P0.05);NSCs+EPCs艾灸组3个疗程之间蛋白表达存在逐步增加的趋势,疗程之间比较差异有统计学意义(均P0.05),且NSCs+EPCs艾灸组蛋白表达增加均优于NSCs+EPCs空白组(P0.05,P0.01)。结论:化瘀通络灸是临床治疗VD的一种有效方法;化瘀通络灸可上调"neurovascular niche"内BDNF/TrkB蛋白的表达,共同调控"NSCs-EPCs"偶联机制,促进神经新生,修复神经损伤。     

艾灸对脾虚胃溃疡模型大鼠胃组织表皮生长因子受体、磷酸化细胞外信号调节激酶的影响

目的:观察艾灸对脾虚胃溃疡模型大鼠胃组织表皮生长因子受体(EGFR)和磷酸化细胞外信号调节激酶(p-ERK1/2)蛋白表达的影响,初步探讨其作用机制。方法:SD大鼠随机分为空白组、模型组、四君子汤组、艾灸非穴位组和艾灸组,每组10只。采用大黄浓缩液灌胃法建立大鼠脾虚模型,在此基础上运用无水乙醇灌胃法制备脾虚胃溃疡大鼠模型。四君子汤组予以四君子汤灌胃,艾灸组大鼠隔日交替灸"足三里""中脘"或"脾俞""胃俞",艾灸非穴位组灸艾灸组穴位的对照点,每日1次,共治疗8d。按脾虚动物模型标准观察大鼠脾虚症状,按Guth法计算胃黏膜损伤指数,光镜下观察胃黏膜组织形态学变化,免疫组织化学法检测胃组织EGFR的表达和蛋白质印迹法检测p-ERK1/2蛋白的水平。结果:与空白组比较,其余各组造模大鼠脾虚症状明显,模型组大鼠胃黏膜损伤指数显著增加(P0.01),光镜下胃黏膜损伤严重,胃组织EGFR、p-ERK1/2蛋白表达升高(P0.01,P0.05);与模型组比较,四君子汤组、艾灸非穴位组和艾灸组胃黏膜损伤指数显著降低(P0.01,P0.05),光镜下胃黏膜损伤改善,且胃组织EGFR和p-ERK1/2蛋白表达显著升高(P0.01);与艾灸非穴位组相比,四君子汤组和艾灸组胃黏膜损伤指数呈降低趋势,但差异无统计学意义(P0.05),而光镜下胃黏膜损伤恢复较艾灸非穴位组好,胃组织EGFR和p-ERK1/2蛋白表达显著升高(P0.01,P0.05)。结论:激活EGFR/ERK信号转导通路是艾灸启动机体的内源性保护机制之一,艾灸治疗脾虚胃溃疡可能是通过提高胃组织表皮生长因子、转化生长因子的表达,两者均结合并激活EGFR,激活后的EGFR介导ERK磷酸化从而激活EGFR/ERK信号转导通路,因而起到保护胃黏膜、促进胃黏膜增殖修复的作用。     

不同艾灸因素对阿尔茨海默小鼠PI3K/AKT通路与皮质β淀粉样蛋白沉淀的影响

目的:观察艾灸、艾烟、无烟灸干预对APP/PS1小鼠大脑皮质PI3K/AKT通路相关指标和β淀粉样蛋白沉淀的影响,从能量代谢的角度探索艾灸不同作用因素在防治阿尔茨海默病中的机制。方法:将32只5个月龄雄性APP/PS1阿茨海默病模型小鼠随机分为模型组、艾灸组、艾烟组、无烟灸组,每组各8只,并将8只同月龄雄性C57BL/6小鼠作为空白对照组。空白组、模型组小鼠每日常规抓取、固定于正常环境;艾灸组与无烟灸组小鼠每日抓取、固定后取关元穴灸治;艾烟组小鼠每日抓取、固定后暴露于10~15 mg/m~3艾烟环境。所有干预20 min/d,6 d/周,共8周。于第10周取材。ELISA法检测各组小鼠大脑皮质中IRS-1、PI3K、AKT、GSK-3α、IDE的含量,刚果红染色检测大脑皮质区β淀粉样蛋白沉淀情况。结果:皮质中IRS-1含量比较显示,模型组低于空白组(P0.01),艾灸组、艾烟组高于模型组(P0.01,P0.05);脑中PI3K含量比较显示,模型组低于空白组(P0.01),艾灸组、艾烟组高于模型组(P0.05);脑中AKT含量比较显示,模型组低于空白组(P0.05),艾灸组、艾烟组、无烟灸组高于模型组(P0.05),艾灸组高于无烟灸组(P0.05);脑中GSK-3α含量比较显示,模型组高于空白组(P0.01),艾灸组、艾烟组、无烟灸组低于模型组(P0.01,P0.05,P0.05)。模型组小鼠在皮质内可观察到明显的橘红色Aβ沉积,空白对照组明显少于模型组(P0.01)。艾烟组、艾烟组、无烟灸组在相同皮质区域中,淀粉样蛋白沉淀均有不同程度的减少。结论:艾灸与艾烟可以调整APP/PS1阿尔茨海默病小鼠的脑部能量代谢,此外艾烟还可以增加对β淀粉蛋白的清除,减缓小鼠皮质内β淀粉蛋白沉淀的产生速度,以延缓AD病理进程。