外感湿热类病证用药比较

为了探寻治疗外感湿热类病证的用药规律,从温病学代表医家相关著作中选取叶天士《临证指南医案》中33例、薛生白《湿热论》和《扫叶庄医案》中50例医案,借助中医传承辅助平台软件对数据进行归纳与分析,总结二位代表医家治疗外感湿热类病证的用药。     

慢性胃炎病证结合大鼠模型建立方法研究简况

有效建立动物模型可为疾病发生发展、治疗及后期科研提供研究基础。慢性胃炎大鼠模型造模方法主要有脱氧胆酸钠、感染幽门螺杆菌、乙醇、碘乙酰胺、水杨酸钠等,不同方法造模侧重点和病理方向不同,可根据不同需要,采取不同方法;现临床多采取联合化学刺激法,大大缩短了实验时间,造模效果稳定,且模拟了多因素造成的胃炎,在实验中越来越受青睐。中医动物模型是根据中医理论,对人类疾病和证型的某些特征进行模拟;慢性胃炎临床中脾虚证及脾胃湿热证较为常见,尽量选择符合中医病因造模因子,使造模病因病机设计与临床相符,在现有的基础上,完善和创新方法,使复制出的动物模型更加接近于脾胃湿热和脾胃虚弱证型。分析不同致病因素对大鼠模型的影响,将西医诊疗和中医辨证有机结合起来,对进一步分析中西医的内在联系及中药、方剂的作用机理有着重要意义,建立病证结合模型意义重要可体现在两个方面:1病证结合模型在中医临床与基础理论研究之间起着桥梁作用,且随着病证结合模型的发展和深化,其对于深层次探讨中西医理论的内在联系亦有重要意义;2成功的病证结合模型有助于中药、方剂作用机制的研究并满足新药开发的需要,同时也使临床病理、药理得到了直接明确的阐述。     

病证结合模型的研究思路

病证结合模型的研究思路@郭书文$北京中医药大学东直门医院重点学科研究中心!北京100700 @孟庆刚$北京中医药大学东直门医院重点学科研究中心!北京100700中医;;病证;;动物模型;;研究思路~~     

痛风性关节炎湿热证病证结合模型的建立

目的：探讨建立痛风性关节炎湿热证病证结合大鼠模型的方法.方法：将40只成年健康雄性SD大鼠随机分为4组,每组10只,体质量（200±20）g.A、B组正常喂养,B组于造模开始后第13天在右侧踝关节腔注射微晶尿酸钠溶液.C、D组正常喂养,同时自由饮用200g· L-1蜂蜜水,并分别以油脂（1 g· 100g-1）或52％红星二锅头酒（1 mL· 100g-1）灌胃,二者交替进行,持续10 d.自第11天开始,置入温度（32±2）℃、相对湿度（92±3）％的人工气候箱中喂养.D组大鼠同时于第13天在右侧踝关节腔注射微晶尿酸钠溶液.造模期间观察大鼠的饮食、精神状态、大小便、舌象等情况;造模开始后第15天,测定尿液水通道蛋白2含量;造模开始后第16天,测定血浆内皮素和血浆降钙素基因相关肽含量;造模结束后处死大鼠,观察舌组织和右侧踝关节滑膜组织的病理变化.结果：①一般情况观察结果.A组大鼠喂养期间,饮食、饮水、活动及大便均正常.B组大鼠造模前期饮食、饮水、活动及大便均正常,自第13天开始饮食、饮水减少,烦躁不安,右踝关节明显增粗,且红、肿、热,伴活动受限.C组大鼠开始造模后逐渐出现饮食、饮水量减少,嗜卧懒动、行动呆滞,毛发蓬松,颜色枯槁,小便黄;造模第5天,开始出现大便溏泻或粘腻;第11天出现明显呼吸粗重,烦躁不安,毛发疏松、粗糙,阴囊松弛下垂,大便溏泻或粘腻症状加重,渐见肛周污秽.D组大鼠造模后症状与C组相同,第13天开始合并出现B组造模后的相同表现.②尿液水通道蛋白2含量测定结果.4组大鼠尿液水通道蛋白2含量比较,差异有统计学意义[（0.251±0.018）mg·mL-1,（0.249±0.020） mg·mL-,（0.233±0.014）mg·mL-1,（0.233±0.011）mg·mL-,F=0.511,P=0.003].A组与B组比较,差异无统计学意义（P=0.760）;A组高于C组和D组（P =0.003;P=0.003）;B组高于C组和D组（P =0.003;P=0.003）;C组和D组比较,差异无统计学意义（P =0.751）.③血浆内皮素含量测定结果.4组大鼠血浆内皮素含量比较,差异有统计学意义[（4.14±0.08）pg·mL-1,（17.75±0.51）pg·mL-1,（19.01±0.13）pg·mL-1,（19.96±0.50）pg· mL-1,F=4.151,P=0.001].A组低于B、C、D组（P=0.000;P =0.000;P =0.000）;B组低于C组和D组（P =0.000;P =0.000）;C组低于D组（P=0.000）.④血浆降钙素基因相关肽含量测定结果.4组大鼠血浆降钙素基因相关肽含量比较,差异有统计学意义[（91.29-±0.42）pg·mL-1,（47.99±0.65）pg·mL-1,（56.32 ±2.17）pg·mL-1,（60.20±0.40）pg· mL-1,F=2.616,P=0.003].A组高于B、C、D组（P =0.000;P =0.000;P =0.000）;B组低于C组和D组（P =0.000;P=0.000）;C组低于D组（P=0.000）.⑤血浆内皮素含量和降钙素基因相关肽含量的相关性分析结果.相关性分析结果显示,A、B组血浆内皮素含量和降钙素基因相关肽含量呈正相关（r =0.886,P=0.002;r =0.989,P=0.001）;C、D组血浆内皮素含量和降钙素基因相关肽含量呈负相关（r=-0.706,P=0.005;r=-0.725,P=0.007）.⑥舌象及舌组织观察结果.A组大鼠舌淡红、苔薄白,B组舌红、苔微黄,C组舌红、苔腻微黄,D组舌红、苔黄腻.A组丝状乳头排列正常,无破坏,乳头呈圆锥形,尖端略向咽部倾斜.B组丝状乳头复层扁平上皮多有角化、脱落,且乳头高度参差不齐,尖端变钝或消失,上皮的厚度较C组变厚.菌状乳头固有层毛细血管增多,乳头数目及其分支减少.C组丝状乳头复层扁平上皮角化较B组严重,上皮形状矮短,尖端变钝或消失.菌状乳头固有层毛细血管增多,乳头数目及其分支增多.D组丝状乳头复层扁平上皮见角化、脱落,根部间或有空洞表现,上皮形状矮短并多有破坏,尖端变钝间或有消失;菌状乳头固有层毛细血管增多.⑦踝关节滑膜组织观察结果.A组踝关节及其周围组织结构正常清晰,滑膜完整正常,无任何组织病理学改变;B组踝关节及其周围组织可见滑膜壁增厚,血管充血明显,滑膜及附近软骨被炎症细胞严重浸润破坏,出现组织坏死现象;C组表现同A组,D组表现同B组;在局部解剖关节取材时,B、D组踝关节腔内可见尿酸盐结晶沉着.结论：在高脂高糖饮食、湿热环境、关节腔注射微晶尿酸钠溶液复合因素干预下,可复制出痛风性关节炎湿热证病证结合大鼠模型.     

骨质疏松肾阴虚型小鼠病证结合模型建立的实验研究

目的采用病、证模型复合方法建立骨质疏松肾阴虚型病证结合模型。方法雌性昆明小鼠45只,随机分为对照组(A组)、骨质疏松症模型组(B组)、骨质疏松肾阴虚型模型组(C组),每组15只。骨质疏松模型采用去势法复制,骨质疏松肾阴虚模型采用去势结合甲状腺素灌服法诱导。通过观察小鼠的症状体征、下丘脑-垂体-靶腺轴(肾上腺,甲状腺)相关指标及环磷酸腺苷(cAMP)与环磷酸鸟苷(cGMP)等验证肾阴虚证;通过测定骨密度、骨组织形态学及护骨素(OPG)和细胞核因子κB受体激活物配基(RANKL)基因表达等评估骨质疏松症。结果与A组小鼠相比,C组动物出现明显的毛发干枯,大便干结,体质量下降,肛温升高等类似肾阴虚表现,促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)、促肾上腺皮质激素(ACTH)、促甲状腺激素(TSH)、游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)含量升高,cAMP/cGMP升高,股骨及腰椎骨密度降低,骨组织HE染色及骨形态计量学示明显骨质疏松症征象,骨组织OPG表达下调,RANKL表达上调。与B组相比,C组在骨密度、骨组织形态学、OPG及RANKL基因表达,差异均无统计学意义。结论去势结合甲状腺素复制骨质疏松肾阴虚病证结合模型是可行的,该模型同时具有肾阴虚和骨质疏松症的特征改变,更接近临床实际情况,适合作为绝经后骨质疏松肾阴虚型病证结合模型进一步在中医药研究领域推广运用。     

病证结合模型的研究进展

中医动物模型重复性差，割裂了病与证的联系；单纯借鉴西医病理模型制备中医病和证的模型，不符合中医理论的要求；病证结合模型体现病与证的紧密联系，符合临床实践，已成为中医实验动物模型发展的新方向。本文对病证结合动物模型的建立、优势及评价体系的构建等进行综述。     

建立病证结合动物模型的新思路

动物实验是医学发展的基础和条件,研究疾病的每一项重大成果的取得都要应用实验动物。实验动物模型由于条件可控性强,能突出强调实验因素,排除非实验因素的干扰,最大限度地减少各种误差,使实验结论更具有真实性,因而,在现代医学中实验动物模型运用得更为广泛和深入。 1 中医“证”的动物模型发展概况 动物模型的复制是现代医学研究的基本方法。目前,中医“证”的动物模型复制也有了飞速发展:一是根据中医基础理论及临床某些证候表现,采用相应的手段在动物身上复制,导致动物某组织、器官或全身产生一定程度的损伤或功能改变,从而出现某…     

病证结合诊断标准的建立

辨证论治是中医的特色和精华,对证的准确辨识是临床论治的依据。因此,建立客观的证的诊断标准,对于提高中医的临床诊疗水平具有重要的意义。同时,在中医学中也很重视辨病,认为病是对疾病全过程的特点与规律所作的概括,证是对疾病当前阶段的病位、病性等所作的结论,两者对疾病本质所反映的侧重面有所不同,因此,将辨病与辨证相结合是中医诊断学的基本原则之一。传统意义上的病证结合是指中医的病与中医的证相结合,病证之间存在“异病同证”和“同病异证”的关系,因此,临床上有“异病同治”和“同病异治”。     

不同品系、不同性别对大鼠CIA发病情况的比较研究

目的:对胶原诱导性关节炎(collagen-induced arthritis,CIA)在不同性别、不同品系(SD大鼠、Wistar大鼠、Lewis大鼠)大鼠的发病情况进行比较研究,以期寻找出一种适合制作CIA模型的大鼠品系。方法:选用6周龄SPF级SD大鼠、Wistar大鼠各80只,Lewis大鼠40只,雌雄各半。采用尾根部皮下注射Ⅱ型胶原与不完全弗氏佐剂混合物的方法诱导出关节炎模型。结果:(1)不同种属发病率不同;随着免疫时间的延长,发病率越高。两两比较显示,SD和Wistar大鼠与Lewis大鼠发病率有显著性差异,但SD与Wistar无显著性差异;(2)不同品系大鼠AI不同,有显著性差异;组间两两比较结果显示:Lewis比SD、Wistar大鼠AI低,有显著性差异,且SD比Wistar大鼠AI高,差异亦具有显著性。但性别对AI没有影响;(3)性别对病理积分影响无显著性,种属对病理积分影响有显著性差异。两两比较结果显示,Lewis比SD、Wistar大鼠关节病理积分低,有显著性差异,而SD与Wistar大鼠之间无显著性差异。结论:在制作痹证(RA)大鼠模型时建议首选SD大鼠,其次可以选择Wistar大鼠,雌雄均可。     

病证结合模型与中医实验研究

实验动物学是生命科学研究的基础。对于生物医学来说,探讨危害人类健康的各种疾病的发生、治疗与预防,及其生理、生化、病理、免疫等方面的机制,均需通过动物实验予以阐明或证实,因此,建立动物模型是医学研究的重要手段。就医学动物的疾病模型而言按产生原因可分为自发性、诱发性、移植性疾病动物模型;按系统范围分为疾病的基本过程、各系统疾病的动物模型。如诱发性疾病等动物模型是根据研究者自己的研究     

病证结合证候模型研究基本思路

辨证论治是中医理论体系的特色和中医临床医学的精华，证候则是中医认识和治疗疾病的基础与依据。因此，证候的研究是中医理论和临床研究的核心与关键问题。但是，证候研究经历大约50年后仍然没有取得令人满意的突破，究其根本原因是证候的本质规律没有被揭示，其中一个关键的环节是证候研究缺乏基础到临床的桥梁，而从基础到临床研究的一个重要桥梁就是动物模型。     

脾胃虚寒型胃溃疡病证结合大鼠实验模型的建立及评价研究

目的:建立脾胃虚寒型胃溃疡(GU)病证结合大鼠实验模型并对其进行客观评价。方法:36只SD大鼠按随机数字方法分为正常组、模型组和黄芪建中汤组(HQJZT)3组,采用“苦寒泻下+劳倦过度”法联合“乙醇+阿司匹林”造模,观察大鼠的一般症状与体征,测定体质量、进食量、饮水量、肛温,计算溃疡指数,HE染色观察黏形态学改变,ELISA法测定NO、MDA、PGE含量,免疫组化检测TLR-2、MyD88蛋白表达。结果:与正常组比较,模型大鼠体质量、进食量、肛温均显著降低,总体或局部症状与体征、胃黏膜形态均发生病性改变。给予HQJZT后上述指标均明显提高或明显改善,与正常组比较,模型大鼠胃黏膜PGE、NO含量显著降低,MDA含量明显增加,TLR-2、MyD88蛋白表达明显上调;给予HQJZT后PGE、NO含量显著增加,MDA含量明显降低,TLR-2、MyD88蛋白表达显著下调,与模型组比较差异有统计学意义。结论:本研究构建了可靠、稳定的脾胃虚寒型GU病证结合大鼠实验模型,该模型可为中医药防治GU的临床研究奠定基础。     

肝纤维化病证结合模型的研究思路

目的:建立适合中医药研究的肝纤维化病证结合动物模型。方法:通过分析近年来肝纤维化中医证候动物摸型研制过程中存在的问题,结合本实验结果对肝纤维化病证结合动物模型的选择、建立方法及评价体系进行探讨分析。结论:以40%CCl4油剂为基础,及(或)其它以中医理论为基础的病因干预因素的综合法复制病证结合肝纤维化模型,肝组织病理上符合肝纤维化疾病模型,大鼠外在一般表现符合中医证的模型,并经中医药反证,表明该病证结合肝纤维化模型复制成功。     

肝纤维化大鼠肝郁病证结合模型的建立与评价

目的 通过构建肝纤维化大鼠肝郁病证结合的模型,为相关研究提供模型参考依据和临床治疗提供诊疗思路.方法 将30只SD大鼠随机分成2组,即空白组和模型组,每组15只.模型组大鼠每天定期皮下注射四氯化碳(carbon tetrachloride,CCL4)+橄榄油,自第5周起每日加用夹尾进行刺激,每次30min,3次/天;空...     

血管性痴呆肾虚血瘀证病证结合大鼠模型的建立

目的:建立肾虚血瘀证VD病证结合动物模型并对其模型进行评价。方法:52周龄SD雄性大鼠随机分为高龄模型组、高龄假手术组各8只,8周龄SD雄性大鼠随机分为低龄模型组、低龄假手术组各8只。模型组大鼠采用双侧颈总动脉永久性结扎法造模,假手术组仅分离双侧颈总动脉但不结扎。造模结束后,各组大鼠进行Morris水迷宫测试,观察大鼠表征、生殖功能、海马病理形态变化,检测血液流变学、血清一氧化氮(NO)、内皮素-1(ET-1)、睾酮(T)、雌二醇(E_2)、钙(Ca)、磷(P)、骨钙素(BGP)等指标变化。结果:高龄模型组大鼠表征具有体毛枯疏晦暗或发黄无光泽,体质量增长缓慢、自主活动减少、喜卧、行动迟缓、反应迟钝、腰背蜷缩、舌质紫暗、尾巴有不同程度紫或黄褐色斑等肾虚血瘀证特点,脑海马病理形态学发生显著缺血性损伤改变。与低龄假手术组比较,低龄模型组大鼠与高龄模型组大鼠逃避潜伏期延长,穿越原平台次数及在原平台停留时间均显著缩短;全血还原黏度(低切、中切)、血浆还原黏度(低切、中切)、聚集指数、ET-1水平均显著升高,产仔数、NO、T水平显著降低,高龄模型组P水平显著升高,E_2、Ca和BGP水平显著降低;与低龄模型组比较,高龄模型组逃避潜伏期显著延长,穿越原平台次数及在原平台停留时间显著缩短,睾丸指数、产仔数、NO和T水平显著降低,ET-1水平显著升高。结论:高龄双侧颈总动脉结扎法制备的模型大鼠符合VD肾虚血瘀病证结合特点。     

论病证结合血瘀证血管内皮细胞损伤模型的建立

建立病证结合血瘀证血管内皮细胞损伤模型是血瘀证模型研制的一个方向。文章论述了建立病证结合血瘀证血管内皮细胞损伤模型的必要性和可行性,认为该模型具有重要的学术价值、深远的科研价值和积极的临床价值。     

骨质疏松肾阳虚病证结合模型构建的实验研究

目的研究建立骨质疏松肾阳虚病证结合模型的方法。方法雌性昆明小鼠随机分为对照组(A组)、证型模型组(B组)、疾病模型组(C组)、疾病证型模型组(D组)。分别应用去双侧卵巢法构建骨质疏松模型,氢化可的松皮下注射诱导肾阳虚证模型。通过观察小鼠症状体征、促肾上腺皮质激素、促甲状腺激素、环磷酸腺苷、环磷酸鸟苷、骨密度、骨组织形态学等评价模型。结果与A组比较,D组小鼠出现毛发干枯,畏寒倦卧,肛温降低等肾阳虚症状,促肾上腺皮质激素及促甲状腺激素含量降低(P<0.01),环磷酸腺苷/环磷酸鸟苷降低(P<0.01),股骨近端、腰椎骨密度下降(P<0.01),HE染色及骨组织形态计量学分析显示骨小梁排列稀疏、变细,破骨细胞数增多等。结论采取双侧卵巢切除结合氢化可的松皮下注射的方法,能成功构建骨质疏松肾阳虚病证结合模型。     

肝纤维化病证结合模型的研制

目的:制备客观、公认的肝纤维化病证结合模型.方法:分别设立正常对照组、单纯肝纤维化组、肝纤维化肝郁脾虚证组和气虚血瘀证组,各模型组先用CCl4注射法复制肝硬化疾病模型,然后肝郁脾虚证组附加夹尾和大黄灌胃法、气虚血瘀证组附加游泳疲劳法,并以相应药物干预以反证模型制备的成功.对各组大鼠进行一般情况和肝组织病理观察.结果:各模型组均出现一般情况较差;病理检查示不同程度肝纤维化表现;肝郁脾虚证组和气虚血瘀证组均出现相应的中医证候表现.结论:按本实验方法复制的肝纤维化病证结合模型既符合肝纤维化病理特征,又能体现中医不同证候特点.     

病证结合研究探讨

病证结合是中医目前发展的基本方向,结合中医对疾病证的推理性判断和西医对疾病的实证性认识,以病统证,病证结合,宏观与微观相结合,辨病与辨证相结合,是中医发展的必经之路.     

建立实验性自身免疫性前列腺炎湿热证病证结合小鼠模型探讨

目的:探讨建立自身免疫性前列腺炎湿热证病证结合小鼠模型的方法。方法:将40只雄性KM小鼠随机抽取10只为正常组,其余30只应用Wistar大鼠前列腺蛋白提纯液辅以免疫佐剂及高脂高糖饮食、白酒、湿热环境制备实验性自身免疫性前列腺炎(湿热证)小鼠模型。造模期间观察小鼠的饮食、精神状态、大小便、舌象等情况;造模结束后处死小鼠,观察小鼠前列腺组织的病理学改变,用免疫组化法检测小鼠前列腺组织中TGF-β1、IL-6、IL-17A、TNF-α、NF-κBp65的表达。结果:正常组小鼠精神状况、饮食、饮水、活动及大小便情况均正常;模型组小鼠精神萎靡、饮食及饮水量减少、倦卧懒动、毛发无光泽、大便时溏、小便黄臭。正常组小鼠前列腺组织结构清晰,未见明显病理改变;模型组小鼠前列腺组织显示周围带炎症细胞浸润、伴纤维增生和脓肿形成,腺间质及腺体内炎症细胞浸润,腺体囊性扩张、乳头状增生,基底细胞增生。免疫组化法显示,与正常组比较,模型组小鼠前列腺组织中TGF-β1的表达显著降低,差异有统计学意义(P0.01);IL-6、IL-17A、TNF-α和NF-κBp65的表达显著上升,差异有统计学意义(P0.05,P0.01)。结论:采用高脂高糖饮食、白酒、湿热环境及前列腺蛋白提纯液免疫诱导可复制了湿热证EAP小鼠模型。