安神定志灵对大鼠脑内突触体多巴胺释放相关因子表达的影响

目的：研究安神定志灵对SNAP25（synaptosomal associated protein of molecular mass 25kD,SNAP25）、Synataxin1a的调控作用,从多巴胺释放途径探讨安神定志灵治疗ADHD的作用机制。方法：依据随机数字将SHR大鼠分为模型组,西药组,安神定志灵低、中、高剂量组,每组8只,另设WKY大鼠8只设为正常组,分别灌胃4周。Percoll密度梯度离心法制备脑突触体,运用Western blot法检测SNAP25、Synataxin1a的表达;运用PCR技术检测SNAP25、Synataxin1a mRNA表达水平,运用免疫组织化学技术检测SNAP25、Synataxin1a阳性细胞表达量。结果：与正常组相比,模型组大鼠突触体内SNAP25、Synataxin1a蛋白及mRNA表达量显著降低（P＜0.01）;经灌胃给药后,与模型组比较,西药组及安神定志灵中剂量组突触体内SNAP25、Synataxin1a蛋白表达量,SNAP25、Synataxin1a mRNA表达量数均显著上调（P＜0.01）;免疫组化阳性细胞计数显示,与正常组比较,模型组SNAP25及Synataxin1a阳性细胞表达量显著降低显著降低（P＜0.01）,安神定志灵高剂量组Synataxin1a阳性细胞表达量亦显著降低（P＜0.01）;与模型组比较,西药组及安神定志灵低、中剂量组Synataxin1a阳性细胞表达量显著上升（P＜0.01）,SNAP25阳性细胞数在西药组及安神定志灵中剂量组上升明显（P＜0.01）。安神定志灵低、高剂量组疗效不稳定。结论：安神定志灵能够显著改善SHR大鼠脑内SNAP25、Synataxin1a的表达,影响脑内多巴胺的合成和转运相关因子,安神定志灵治疗ADHD的药效机制可能与调控多巴胺释放因子相关。     

安神定志灵对大鼠脑内突触体多巴胺合成相关因子表达的影响

目的:研究安神定志灵对酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH),多巴脱羧酶(DOPA decarboxylase,DDC),蛋白激酶A(protein kinase A,PKA)的调控作用,揭示安神定志灵治疗注意缺陷多动障碍(ADHD)的药效机制。方法:依据随机数字将自发性高血压(SHR)大鼠分为模型组,利他林组,安神定志灵低、中、高剂量(6.75,13.35,26.70 g·kg~(-1))组,每组8只,另设WKY大鼠8只为正常组,分别灌胃4周。Percoll密度梯度离心法制备脑突触体,运用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测TH,PKA蛋白表达;运用实时荧光定量聚合酶链式反应(Read-time PCR)技术检测TH,DDC,PKA mRNA表达水平,运用免疫荧光技术检测TH,DDC阳性细胞表达量。结果:与正常组比较,模型组大鼠突触体内TH,DDC,PKA表达量显著降低(P0.01);与模型组比较,利他林组及安神定志灵中剂量组突触体内TH,PKA蛋白及TH,PKA,DDC mRNA表达量及阳性细胞数均有所升高(P0.05);免疫组化阳性细胞计数显示,与正常组比较,模型组及安神定志灵高剂量组TH阳性细胞表达显著降低(P0.01),安神定志灵低剂量组TH阳性细胞表达明显降低(P0.05);模型组及安神定志灵低剂量组中DDC阳性细胞表达显著降低(P0.01);治疗后与模型组比较,利他林组及安神定志灵低、中剂量组TH阳性细胞表达显著上升(P0.01),利他林组及安神定志灵中、高剂量组DDC阳性细胞数上升显著(P0.01)。结论:安神定志灵通过调控TH,DDC,PKA的表达,影响多巴胺的合成速度,安神定志灵控制ADHD核心症状的作用可能与调控多巴胺合成速度有关。     

安神定志灵方对自发性高血压大鼠前额叶皮质DβH、NET的影响

目的探讨安神定志灵方对注意力缺陷多动障碍(ADHD)的作用机制。方法将自发性高血压大鼠(SHR)40只随机分为模型组、择思达组和安神定志灵低、中、高剂量组,每组8只,另设Wistar京都大鼠(WKY)8只为正常1组,SD大鼠8只为正常2组。择思达组给予盐酸托莫西汀胶囊0.045mg/(kg·d)灌胃,安神定志灵低、中、高剂量组分别给予安神定志灵方6.7、13.4、26.7g/(kg·d)灌胃,正常1组、正常2组、模型组均灌胃生理盐水1.5ml/100g,均每日早晚2次灌胃,持续4周。运用蛋白免疫印迹法检测大鼠前额叶皮质多巴胺-β-羟化酶(DβH)、去甲肾上腺素转运体(NET)蛋白表达,运用PCR技术检测DβH、NET mRNA表达,运用免疫荧光技术检测DβH、NET阳性细胞表达。结果与正常1组、正常2组比较,模型组大鼠前额叶皮质DβH蛋白、mRNA表达及阳性细胞表达量降低,NET蛋白、mRNA表达及阳性细胞表达量升高(P0.05);与模型组比较,择思达组及安神定志灵低剂量组DβH蛋白、mRNA表达及阳性细胞表达量升高,择思达组和安神定志灵低、中剂量组NET蛋白、mRNA表达及阳性细胞表达量降低(P0.05);与择思达组比较,安神定志灵低剂量组DβH蛋白、mRNA表达及阳性细胞表达量升高,安神定志灵高剂量组NET蛋白、mRNA表达及阳性细胞表达量降低(P0.05)。结论安神定志灵方可能通过调控SHR大鼠前额叶皮质DβH、NET的表达,达到控制注意力缺陷多动障碍临床症状的目的。     

安神定志灵对ADHD模型动物前额叶TH、DAT的影响

目的探求复方安神定志灵对注意缺陷多动障碍(ADHD)模型动物前额叶TH、DAT的影响。方法随机将SHR大鼠分为模型组、择思达组(0.045 mg/kg)及复方安神定志灵低、中、高剂量组(6.7、13.4、26.7 g/kg),WKY大鼠为正常组1,SD大鼠为正常组2,每组8只,灌胃28 d。Western blot法检测TH、DAT的蛋白表达,Real-time PCR检测TH、DAT mRNA表达,免疫荧光技术检测TH、DAT阳性细胞表达。结果与正常组1、2比较,模型组TH蛋白及mRNA表达降低,DAT蛋白及mRNA表达升高(P<0.05);与模型组比较,择思达组及安神定志灵低剂量组TH蛋白及mRNA表达升高(P<0.05),择思达组及安神定志灵中剂量组DAT蛋白及mRNA表达降低(P<0.05)。结论安神定志灵能够调控SHR大鼠前额叶TH、DAT的表达。     

不同中医体质类型女大学生体质健康评价分析

目的研究安神定志灵对突触相关蛋白25(SNAP25)、突触融合蛋白1a(Synataxin 1a)的调控作用,从多巴胺释放途径探讨安神定志灵治疗注意力缺陷多动障碍(ADHD)的作用机制。方法自发性高血压大鼠(Spontaneously hypertensive rats,SHR)随机分为模型组,盐酸哌甲酯组(10.5μg·kg~(-1)),安神定志灵低、中、高剂量(6.75,13.35,26.70 g·kg~(-1))组,每组10只,另取10只正常血压大鼠(Wistar-Kyoto rats,WKY)作为正常组,连续灌胃给药4周。采用Percoll密度梯度离心法制备脑突触体;采用Western Blot法检测突触体SNAP25、Synataxin 1a蛋白表达;Real-time PCR法检测SNAP25、Synataxin 1a m RNA表达;免疫组化法检测纹状体SNAP25、Synataxin 1a阳性细胞表达。结果与正常组比较,模型组大鼠脑突触体SNAP25及Synataxin 1a的蛋白、m RNA、阳性细胞表达量均显著降低,差异有统计学意义(P0.05,P0.01)。与模型组比较,各给药组的SNAP25、Synataxin 1a蛋白相对表达量均显著升高(P0.05,P0.01);安神定志灵低、中剂量组的Synataxin1a m RNA相对表达量显著升高(P0.05,P0.01),安神定志灵中、高剂量组的SNAP25 m RNA相对表达量亦显著上调(P0.01);安神定志灵低、中剂量组的Synataxin 1a阳性细胞表达量显著升高(P0.01),安神定志灵中、高剂量组的SNAP25阳性细胞表达量亦显著升高(P0.01)。结论安神定志灵能够显著改善SHR大鼠脑内SNAP25、Synataxin 1a的表达,其治疗ADHD的药效机制可能与调控多巴胺释放因子相关。     

安神定志灵对ADHD模型大鼠纹状体多巴胺转运体表达的影响

目的:研究安神定志灵对注意缺陷多动障碍(attention deficit hyperactivity disorder,ADHD)动物模型-自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rat,SHR)纹状体多巴胺转运体(DAT)表达的影响,探讨该药治疗ADHD的作用机制。方法:30只SHR鼠随机分为5组(模型组、利他林组、安神定志灵高、中、低剂量组),每组6只,Wistar-Kyoto(WKY)大鼠6只作为正常对照组。安神定志灵高、中、低剂量组分别按生药剂量34.1,17.1,8.5 g.kg-1 ig;利他林组以2.1 mg.kg-1利他林ig;模型组和正常对照组以10 mL.kg-1生理盐水ig。连续给药2周后处死大鼠,取脑分别用RT-PCR和激光共聚焦显微镜检测各组大鼠纹状体多巴胺转运体(DAT)mRNA和蛋白表达水平。结果:大鼠纹状体中DAT的蛋白表达水平,组间存在差异(P<0.05),SHR模型组大鼠纹状体中DAT的蛋白表达与正常对照组比较显著增高(P<0.01);安神定志灵中、高剂量组DAT的蛋白表达显著低于模型组(P<0.01),利他林组DAT的蛋白表达显著低于模型组(P<0.05),安神定志灵低剂量组和模型组DAT蛋白表达相比无统计学意义。蛋白表达量从高到低依次为安神定志灵低剂量组、利他林组、安神定志灵中、高剂量组。结论:安神定志灵可以降低SHR大鼠纹状体中DAT mRNA及蛋白的表达水平,减少突触前神经元对DA的重摄取,增加突触间隙的DA浓度,改善了中枢DA的神经信号传导功能,起到对ADHD的治疗作用。     

安神定志灵对SHR大鼠突触体ATP、LDH及AC/cAMP/PKA信号通路的影响

目的研究安神定志灵对ADHD模型大鼠突触体ATP、LDH酶活性的影响及对AC/cAMP/PKA信号通路的调控作用。方法设WKY大鼠10只为正常对照组,SHR大鼠依据随机数字分为模型组,西药组,安神定志灵低、中、高剂量组,每组10只,分别灌胃给药4周。Percoll密度梯度离心法制备脑突触体,运用比色法检测突触体ATP酶、乳酸脱氢酶(LDH)活性,运用ELISA法检测突触体内腺苷酸环化酶(AC)、环磷酸腺苷(cAMP)、蛋白激酶A(PKA)含有量。结果电镜观察结果显示,此次实验所提取突触体能够满足实验要求。相比正常组,模型组大鼠脑突触体内ATP酶活性降低,LDH酶活性有所升高(P0.05);经治疗4周后,与模型组相比,西药组及安神定志灵中剂量组ATP酶活性显著升高,LDH酶活性显著降低(P0.01),安神定志灵低剂量组ATP酶活性有所增高、LDH酶活性降低(P0.05)。相比正常组,模型组大鼠脑突触体内AC、cAMP、PKA含有量均低于正常组(P0.05);经治疗4周后,与模型组相比,西药组及安神定志灵中剂量大鼠脑突触体内AC、cAMP、PKA含有量均有所升高(P0.05),安神定志灵高剂量组大鼠脑突触体内AC、cAMP含有量升高(P0.05)。结论安神定志灵可调节模型大鼠突触体ATP酶、LDH酶活性,提高突触体内AC、cAMP、PKA含有量,提示安神定志灵可能通过降低D2RS(多巴胺D2受体短型)受体对AC/cAMP/PKA信号通路的抑制功能而发挥治疗作用。     

"安神定志灵"对自发性高血压大鼠行为学及前额叶去甲肾上腺素α2A受体的影响研究

目的:研究安神定志灵对自发性高血压大鼠(SHR)多动冲动行为及前额叶去甲肾上腺素α2A受体(ADRα2A)的影响。方法:选择SPF级雄性SHR作为注意缺陷多动障碍(ADHD)模型动物,随机分为模型组、择思达组(0.045mg/kg)和安神定志灵低、中、高剂量组(6.7、13.4、26.7g/kg),每组8只,另设WKY大鼠8只为正常对照1组,SD大鼠8只为正常对照2组。各组分别灌胃药物或生理盐水4周。于灌胃给药第0、7、14、21天进行旷场试验,观察并比较各组大鼠中央区域活动时间、活动距离及穿格数。末次给药24h后取各组大鼠前额叶,运用Western blot法检测ADRα2A蛋白表达,运用PCR技术检测ADRα2A mRNA表达,运用免疫荧光技术检测ADRα2A阳性细胞表达量。结果:给药前,模型组、择思达组及安神定志灵各剂量组大鼠中央区域活动时间、活动距离及穿格数均较正常对照1、2组显著升高(P0.05)。给药第14、21日,各给药组大鼠上述指标均较模型组有不同程度的降低,以择思达组和安神定志灵中剂量组最为明显(P0.05);给药第28天,各给药组大鼠上述指标均较模型组明显降低(P0.05)。模型组大鼠前额叶ADRα2A蛋白表达、m RNA表达及阳性细胞表达量均显著低于正常对照1、2组(P0.05);与模型组比较,择思达组及安神定志灵低剂量组ADRα2A蛋白表达、m RNA表达及阳性细胞表达量显著升高(P0.05),此2组间比较差异无统计学意义(P0.05)。结论:安神定志灵能调控SHR自发活动性及多动、冲动行为,其中中剂量可较早发挥作用,低剂量可显著改善SHR前额叶ADRα2A的表达,达到控制ADHD临床症状的目的。     

安神定志灵对ADHD模型鼠前额叶、纹状体各G蛋白亚基表达的影响

目的:探讨中药复方安神定志灵对注意缺陷多动障碍动物模型SHR大鼠前额叶、纹状体中Gαs、Gαi及Golf mRNA和蛋白表达的影响。方法:将SHR大鼠运用随机区组分为模型组、利他林组、安神定志灵低剂量、中剂量、高剂量组,每组10只,另将10只WKY大鼠设为正常组。安神定志灵低、中、高剂量组分别按生药量6.7、13.4、26.7 g·kg~(-1)灌胃,每日2次;利他林组以2 mg·kg~(-1)给予利他林灌胃,每日2次;模型组和正常对照组每日按体质量给予等量双蒸水灌胃,灌胃4周后处死。分别用RT-PCR和Western Blot检测各组大鼠前额叶、纹状体中Gαs、Golf及Gαi mRNA和蛋白的表达水平。结果:模型组大鼠除前额叶皮质Gαi蛋白外,余G蛋白亚基mRNA和蛋白表达水平均明显低于正常组(P<0.05或P<0.01)。经治疗后,利他林组和安神定志灵各剂量组有提高前额叶皮质、纹状体中三种G蛋白亚基Gαi mRNA和蛋白的表达水平趋势或能显著提高其表达水平(P<0.05或P<0.01)。结论:安神定志灵可以升高SHR大鼠前额叶皮质、纹状体Gαs、Golf及Gαi三者mRNA和蛋白的表达水平,提示安神定志灵可以激活突触后膜多巴胺受体下游不同的G蛋白亚基,进而影响下游的信号通路从而发挥治疗作用。     

安神定志灵对ADHD模型鼠前额叶皮质和纹状体多巴胺D1,D2受体表达的影响

目的:研究安神定志灵对注意缺陷多动障碍(attention deficit hyperactivity disorder,ADHD)动物模型-自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rat,SHR)前额叶皮质、纹状体多巴胺受体D1,D2(DRD1,DRD2)表达的影响,探讨该药治疗ADHD的作用机制。方法:30只SHR鼠随机分为5组(模型组、利他林组、安神定志灵高、中、低剂量组),每组6只,Wistar大鼠6只作为正常对照组。安神定志灵高、中、低剂量组分别按生药剂量34.1,17.1,8.5 g.kg-1 ig;利他林组以2.1 mg.kg-1利他林ig;模型组和正常对照组以10 mL.g-1生理盐水ig。实验2周后处死大鼠,取脑分别用RT-PCR和Western blot检测各组大鼠前额叶皮质、纹状体内DRD1,DRD2 mRNA和蛋白表达水平。结果:模型组与正常对照组比较,DRD1,DRD2 mRNA和蛋白表达水平显著降低(P<0.01);利他林组与模型组比较,DRD1,DRD2 mRNA和蛋白表达水平显著升高(P<0.01);安神定志灵中剂量组与模型组比较,DRD1,DRD2 mRNA和蛋白表达水平显著升高(P<0.01);安神定志灵低剂量组和高剂量组RD1,DRD2mRNA和蛋白表达水平高于空白模型组,但没有统计学差异。结论:安神定志灵可以上调SHR大鼠额叶皮质和纹状体中DRD1,DRD2 mRNA及蛋白的表达水平,说明安神定志灵在调控前额叶-纹状体通路的功能中发挥着重要的作用,而DRD1,DRD2参与了这一调节的过程,最终起到对ADHD的治疗作用。     

浅议影响小儿头皮静脉穿刺的因素

头皮静脉穿刺是儿科护士必备的技术，其成功率的高低直接危机患儿的痛苦乃至生命，掌握这门过硬的技术，尽量做到一针见血，是儿科护士的天职，也是衡量合格护士的标准之一。本人从事儿科护理工作已多年，现将这方面的体会做一报告。     

对《伤寒论》与《温疫论》的再思考

通过分析伤寒与温疫的证治特点、《伤寒论》与《温疫论》的篇章结构、张仲景与吴又可所处的时代背景,以及现代医学对出血热与鼠疫的认识,梳理热病证治的发展历史与脉络。     

基于《伤寒论》引发古代伤寒学派思考

《伤寒论》这一中医经典著作,指导临床,疗效显著,活人无数,尤其是对外感热病的发展影响颇深.伤寒学派是以研究或阐述张仲景《伤寒论》辨证论治及理法方药为中心的医学学术群体,该学派学术璀璨,连绵千年.现就以古代此派的形成、发展、争鸣3个阶段进行初步探析,认为其形成于晋唐,发展于宋元,争鸣于明清.     

基于效应的针刺穴位组学研究思考

根据“穴位组学概念”的提出,针对针刺机理进行深入研究。目的在于揭示针刺的生物学基础,阐明针刺的科学性,并对相关针刺处方进行优化,围绕临床针刺治疗手段中的关键技术进行标准化与规范化研究,实现针刺科学机理转化为实际应用,从而更好的服务于临床。     

中药蛇床子的研究进展

概述近年来有关蛇床子的化学成分、药理作用和临床应用和研究进展。     

百年以来《伤寒论》理论研究述评(之二)

从中华人民共和国建立到文化大革命爆发的近20年间,是新时期仲景学说研究队伍的形成———发展期。在这一时期,对《伤寒论》原著的注释和校正工作,揭开了新中国教材编写的序幕;对《伤寒论》中一些有代表性问题或关键性字词的考订,是一个特点;对《伤寒杂病论》方法论的研究,也是这一时期出现的新特点。此外,这一时期,对六经的研究逐渐深入;对方证的研究仍是热门话题;对伤寒方中用药规律的研究出现热潮;对张仲景治疗方法原理的研究开始活跃;比较性研究热度不减;专题性研究渐成趋势。     

百年以来《伤寒论》理论研究述评(之一)

近百年来,公开发表的研究《伤寒论》的学术论文约3万篇,内容涉及张仲景生平事迹、《伤寒论》版本传承、《伤寒论》学术思想和临床应用研究等多个方面。民国时期是近代仲景学术研究的萌芽——发动期,这一时期的文章具有以下时代特点:①期刊和作者群有明显的地域和社团性;②体现了中西医结合的研究方向;③研究空间不断扩大;④学术争鸣空前活跃。     

艾灸足三里对胃黏膜病变的作用机制研究

艾灸足三里在脾胃病的临床疗效肯定,其机制研究也随着现代医学的发展不断完善。大量研究证明,艾灸足三里促进胃黏膜修复的信号传导是通过神经实现的,其作用机制是系统而复杂的,既可以直接调节胃肠内分泌激素的水平,也可以作用于胃黏膜损伤的信号传导途径上。因此,艾灸足三里对于各种原因引起的胃黏膜病变及病变的各个阶段都有一定作用,且作用机制不尽相同。据现有研究,对未来艾灸足三里的机制研究进行展望。     

辨证施护喘证

喘证的一般护理注意调整病室环境、体位与休息、严密观察生命体征、饮食护理、情志护理;根据中医辨病与辨证相结合的方法,同病异护、异病同护,实施具有针对性、个性化的护理措施,保障治疗措施的实施,促进疾病康复。     

变应性鼻炎研究概要

对变应性鼻炎的发病机理、流行情况、实验及试验研究、中医药治疗、针灸治疗、治疗前景的实验研究等方面进行了综述 ,并提出从辨证指标入手的观点。