前列腺癌组织中miRNAs的表达及意义

目的研究前列腺癌组织中6种miRNAs的表达及其意义,并探讨它们在前列腺癌诊断中的应用价值。方法采用核酸分子原位杂交(in situ hybridizationI,SH)技术,结合组织微阵列平台分别检测38例良性前列腺增生(benign prostate hyperpla-sia,BPH)和52例前列腺癌(prostatic cancer,PCa)中6种miRNAs的表达情况。结果 6种miRNAs在PCa中的表达率与BPH比较差异均有统计学意义(P<0.05)。6种miRNAs的表达均与PCa的Gleason评分相关(P<0.05);与患者的年龄及血清PSA水平均无明显相关性(P>0.05)。miR-15b、miR-182和miR-96的表达与PCa的临床分期相关(P<0.05);miR-96的表达与肿瘤累及前列腺叶数相关(P<0.05)。结论 miRNAs与PCa的发生、发展以及生物学行为有关,并可能作为PCa诊断及判断预后的生物标记物。     

前列腺癌与前列腺增生HER-2及C-myc基因mRNA表达的研究

目的 检测良性前列腺增生(BPH)与前列腺癌(PCa)组织标本HER-2及C-mvc mRNA相对值,探讨此值对PCa诊断的特异性意义.方法 通过实时荧光定量PCR检测63例PCa、37例BPH及3例正常前列腺组织HER-2及C-myc mRNA的表达,比较其在PCa与BPH中组织定量的差异.结果 相对于BPH,PCa HER-2及C-myc mRNA表达相对值分别为4.25±0.03,7.24±0.06,PCa HER-2及C-myc表达相对值较BPH高,差异有统计学意义(均为P<0.05).结论 实时荧光PCR定量检测HER-2及C-myc mRNA为PCa的诊断提供了重要的辅助指标.     

联合检测IL-6、T-PSA、F-PSA及F-PSA/T-PSA在前列腺疾病鉴别诊断中的应用价值

目的 探讨血清中白细胞介素6(IL-6)、总前列腺特异性抗原(T-PSA)及游离前列腺特异性抗原(F-PSA)在前列腺癌(PCa)患者和前列腺增生(BPH)患者中的表达情况,用于鉴别诊断临床上的前列腺癌和前列腺增生患者.方法 经直肠行前列腺穿刺活检病理诊断确诊为PCa和BPH的患者,回顾性分析其治疗前血清中的IL-6、T-PSA及F-PSA的检测结果.结果 PCa患者血清中的IL-6、T-PSA及F-PSA明显高于BPH患者(P<0.05);按照年龄分层(45~,55~,65~,75~)分析的结果显示在各个年龄段PCa患者血清中的IL-6、T-PSA及F-PSA均明显高于BPH患者(P<0.05).在75~年龄段,PCa患者F-PSA/T-PSA明显低于BPH患者(P<0.05).结论 IL-6、T-PSA及F-PSA的联合检测对PCa和BPH患者具有鉴别意义.     

miR-96与转移抑制因子1是前列腺癌骨转移潜在的生物学标志物

目的探讨miR-96和转移抑制因子1(MTSS1)在前列腺癌(PCa)组织中的表达及其临床意义。方法收集PCa患者标本89例,癌旁组织作为正常对照,分别用原位杂交及免疫组化检测PCa组织及癌旁组织中miR-96和MTSS1的表达水平,并对二者进行相关性分析。结果 89例PCa组织中miR-96阳性表达率为87.64%,显著高于癌旁组织(P0.01);而MTSS1蛋白阳性表达率为16.85%,显著低于癌旁组织(P0.01);miR-96的表达随着Gleason评分和临床分期演进而增加(P0.05),有骨转移的miR-96的表达高于无骨转移组(P0.05);MTSS1的表达随着Gleason评分和临床分期演进而下调,且有骨转移的MTSS1的表达显著低于无骨转移组(P0.01);miR-96表达与MTSS1的表达呈显著负相关(P0.01)。结论 miR-96与MTSS1可能是PCa骨转移的重要生物学标志。     

前列腺癌组织中Apaf-1和Caspase-9表达及临床意义

目的检测凋亡蛋白酶活化因子-1(Apaf-1)和细胞凋亡蛋白酶-9(Caspase-9)在前列腺癌(prostatic carcinoma,PCa)和良性前列腺增生(benign prostatic hyperplasia,BPH)中的表达,探讨Apaf-1、Caspase-9表达与PCa临床病理特征的关系。方法采用免疫组化SP法检测45例PCa和60例BPH组织中Apaf-1和Caspase-9蛋白的表达。结果 PCa组中Apaf-1和Caspase-9的阳性率明显低于BPH组,差异有统计学意义(P<0.05);Apaf-1和Caspase-9的表达与患者年龄及远处转移无关,与病理分级及临床分期相关(P<0.05)。结论 Apaf-1和Caspase-9在PCa组织中低表达,二者呈正相关(rs=0.645,P<0.01),Apaf-1和Caspase-9可能与PCa的发生、发展密切相关。     

前列腺组织中ERα、ERβ的表达及其意义

目的探讨雌激素及其受体ERα、ERβ与良性前列腺增生(benign prostatic hyperplasia,BPH)、前列腺癌(prostate cancer,PCa)的关系。方法采用免疫组化SP法检测ERα和ERβ在20例正常前列腺(normal prostate,NP)、80例BPH及46例PCa标本中的表达。结果 ERα主要在前列腺组织间质细胞表达,上皮细胞中无表达,在NP中呈低表达,在BPH中高表达,而在PCa表达下降(P0.01);但ERα在PCa不同病理分级和临床分期中的表达强度差异无显著性(P0.05)。ERβ主要在前列腺组织上皮细胞表达,很少位于间质,在NP、BPH中高表达,而在PCa中表达下降甚至呈阴性(P0.01),ERβ表达与分化程度呈正相关(P0.01),且主要表达于A、B期组织中(P0.01)。结论 ERα主要在间质细胞表达,而ERβ主要在上皮细胞表达,提示雌激素对BPH及PCa的作用可能主要是通过ERβ途径发挥作用的。ERβ在PCa中的表达明显下降,提示其可能与PCa的发生、发展有关,推测PCa中大部分ERβ可能是更具有侵袭性的ERβ变异体,致使PCa恶性程度增加。     

胰腺导管腺癌患者血清中microRNA-155的表达及其临床意义

目的 检测microRNA-155(miR-155)在胰腺导管腺癌(pancreatic ductal adenocarcinoma,PDAC)组织中、患者血清中的含量,探讨其作为PDAC血清学诊断标志物的可能性.方法 应用荧光实时定量PCR法检测miR-155在20对PDAC组织和癌旁组织、70例PDAC患者和40例健康人血清、10对荷人PDAC小鼠和对照组小鼠血清及6株PDAC细胞株和其培养上清中的含量.结果 实验结果 显示,PDAC组织中miR-155表达高于癌旁胰腺组织(P=0.005);并且miR-155在PDAC患者血清中表达量高于健康对照组(P=0.004);在荷人PDAC小鼠血清中miR-155含量高于对照组小鼠(P=0.012);同时,6株PDAC细胞株miR-155的表达存在差异(P=0.000),miR-155在细胞内和在其培养上清中的表达具有高度一致性(r=0.628,P=0.005).结论 miR-155在PDAC组织和患者血清中表达上调,提示其可能是PDAC血清学的潜在标志物.     

循环miRNA-141对前列腺癌的诊断和预后价值研究

 目的:研究血清miR-141在前列腺癌中的表达及临床意义。方法:采用实时荧光定量PCR检测75例前列腺癌和52例良性前列腺增生（BPH）患者,以及40例健康对照血清miR-141的相对表达水平。结果:前列腺癌血清miR-141的表达量较BPH和健康对照增高,差异有统计学意义（P＜0.01）。但miR-141在BPH组和对照组中的表达差异无统计学意义（P>0.05）。ROC曲线显示miR-141能够较好地区分前列腺癌与BPH（或健康对照）,曲线下面积分别为0.785（95%CI∶0.689～0.823）和0.801（95%CI∶0.723～0.868）。血清miR-141表达与Gleason积分、临床分期和骨转移相关（均P<0.05）,随着临床分期的增加,miR-141的表达水平增加;但miR-141表达量与患者年龄、肿瘤复发和血清前列腺特异性抗原水平无关(均P>0.05)。结论: 循环miR-141可作为非侵入性诊断前列腺癌并且判断其预后的分子标志物。     

良、恶性前列腺组织中S100P与Ki-67的表达

目的观察人良、恶性前列腺组织中S100P与Ki-67的表达及二者的相关性。方法应用免疫组化SP法检测15例正常前列腺组织、30例前列腺增生(prostatic hyperplasia,BPH)及30例前列腺癌(prostate cancer,PCa)组织中S100P与Ki-67的表达,并分析二者在PCa组织中的表达有无相关性。结果 (1)S100P蛋白在正常前列腺组织及BPH组织中的阳性率(93.33%、90.00%)明显高于前列腺癌组(20.00%)(χ2=38.953,P<0.01);S100P蛋白在高、中、低分化PCa组织中阳性率差异无统计学意义(P>0.05)。(2)Ki-67在PCa组织中阳性率(63.33%)明显高于BPH(13.33%)及正常对照组(6.67%)(χ2=22.763,P<0.01);低分化PCa组Ki-67阳性率比高、中分化组明显增高(P<0.05)。(3)PCa组织中S100P和Ki-67二者表达呈负相关关系,但无统计学意义(r=-0.077,P=0.689)。结论前列腺发生癌变后S100P与Ki-67表达分别会发生下调与升高,可能预示肿瘤更具增殖能力和侵袭性,联合检测二者有助于判断PCa的发展趋势及预后评估。     

miR-132抑制舌癌细胞增殖、侵袭及迁移

为研究miR-132在舌癌中的表达情况,收集病理诊断确诊为舌癌的20例患者舌癌组织及癌旁组织,通过RT-PCR检测miR-132在舌癌及癌旁组织中的表达水平。应用mimics转染CAL-27细胞株,采用平板克隆、MTT实验检测miR-132过表达组、对照组舌癌细胞的增殖活性。Transwell实验研究miR-132与舌癌细胞迁移作用的关系。结果显示,miR-132在舌癌组织中的表达水平(0.56±0.05)显著低于癌旁组织(1.43±0.12,P0.001)。舌癌组织中miR-132的表达水平随着病理分级恶性程度的升高而降低(P0.05)。细胞克隆形成实验及MTT实验结果显示,miR-132 mimics组的细胞活性及增殖明显受抑制(P=0.003 2,P0.001)。Transwell实验显示,miR-132 mimics组的细胞过膜数量[(89±15)/视野]明显低于对照组[(380±25)/视野](P=0.002)。提示miR-132在舌癌组织中表达下降,miR-132在舌癌的增殖和转移过程中发挥重要作用,其可作为舌癌的潜在临床预后标志物,为舌癌的预后判断及治疗提供参考。     

胃癌组织中microRNA的差异表达

目的 检测胃癌组织和癌旁组织中microRNA (miRNA)的差异表达.方法 收集经病理确诊为胃癌进行外科手术切除的25例患者的胃癌组织及距离胃癌病灶5 cm以上的癌旁组织,选取其中7例标本提取总RNA,应用Illumina miRNA芯片检测胃癌和癌旁组织中差异表达的miRNA.应用定量实时PCR技术验证25例胃癌和癌旁组织标本中差异表达的miRNA,并分析25例患者的临床病理与胃癌组织中miRNA差异表达的关联.结果 Illumina miRNA芯片检测显示,HS-138,HS-153,HS-157在胃癌组织中表达下调,miR-181a,miR-21,miR-21*,miR-27a,miR-584,miR-93在胃癌组织中表达上调.定量实时PCR显示,与癌旁组织比较,胃癌组织中miR-181a表达上调(56.848±135.551比3.950±12.101,P＜0.05),而miR-584在胃癌和癌旁组织中的表达差异无统计学意义(P＞0.05).胃癌组织miR-181a表达与患者胃癌淋巴结转移及年龄有关联(rp=0.462、0.414,P=0.009、0.023),与性别和病理分型无关联(P=0.220、0.106).结论 应用miRNA芯片技术和荧光定量PCR技术发现了胃癌组织中差异表达的miRNA.     

诱导型一氧化氮合酶在正常前列腺、良性前列腺增生及前列腺癌组织中的表达研究

目的：探讨诱导型一氧化氮合酶（iNOS）与良性前列腺增生（BPH）、前列腺癌（PCa）病理生理变化的关系。方法：采用免疫组化方法检测6例正常前列腺组织、15例BPH患者的前列腺组织以及9例前列腺癌组织中iNOS的表达。结果：BPH组与PCa组中iNOS呈阳性表达，主要分布于前列腺上皮细胞及前列腺癌细胞胞浆内，间质平滑肌细胞内及正常前列腺组织内均未见表达，iNOS在PCa组织中的表达低于BPH组（P〈0．05）。结论：iNOS产生的NO在BPH及前列腺癌的发生发展过程中起重要作用，但iNOS在前列腺肿瘤发病机制的确切作用还需进行进一步研究。     

前列腺腺癌中双染鸡尾酒抗体Ki-67/caspase-3的表达及意义

目的探讨Ki-67/caspase-3鸡尾酒抗体在前列腺腺癌(PAC)、高级别前列腺上皮内瘤(HGPIN)及良性前列腺增生(BPH)组织中的表达及意义。方法收集40例PAC、30例HGPIN和BPH标本,按常规方法石蜡包埋,制作蜡块连续切片,进行HE染色及Ki-67/caspase-3鸡尾酒抗体双重免疫组化染色。结果 Ki-67表达阳性率及增殖指数在PAC组织中明显高于HGPIN和BPH组织,且随着Gleason分级增高其增殖指数存在递增趋势(P0.05,P0.01)。caspase-3在BPH组织中表达阳性率明显高于PAC及HGPIN组织(P0.05),但在PAC与HGPIN、不同Gleason分级PAC中的表达阳性率差异无统计学意义(P0.05)。Ki-67和caspase-3在PAC和HGPIN组织中的表达呈负相关,而在BPH中的表达呈正相关。结论 Ki-67/caspase-3在不同病变中表达不同,鸡尾酒抗体联合检测可用于前列腺良恶性疾病的诊断、鉴别诊断及预后的判断。     

甲状腺乳头状癌患者外周血miR-146a、miR-146b表达水平与预后的关系研究

目的 探讨甲状腺乳头状癌(papillary thyroid cancer,PTC)患者血清miR-146a、miR-146b的表达水平及其与临床病理特征、预后的关系.方法 采用前瞻性研究方法,选取2018年6月至2020年2月本院收治的PTC患者80例为研究对象,50例同期健康人群作为对照组.荧光定量PCR检测外周血中miR-146a、miR-146b的表达水平,分析PTC患者血清miR-146a、miR-146b水平与临床病理、预后的关系.结果 PTC患者血清miR-146a、miR-146b表达水平(5.18±0.04、2.59±0.13)高于正常人群(1.01±0.01、1.12±0.03)(t=23.091、8.431,P<0.001、<0.001).miR-146a、miR-146b表达与TNM分期、分化程度、淋巴结转移和组织学亚型有显著相关性(P<0.05).miR-146a低表达组患者累积生存率高于miR-146a高表达组(P=0.001);miR-146b低表达组患者累积生存率高于miR-146b高表达组(P<0.001).结论 miR-146a、miR-146b在PTC患者血清中高水平表达,与肿瘤的进展、预后不良有关.     

前列腺癌患者的血清IL-6、性激素和PSA水平的临床评价

目的:探讨前列腺癌(prostate cancer,PCa)患者血清白介素-6(IL-6)、性激素和前列腺特异性抗原(prostate specific antigen,PSA)的水平及其临床评价.方法:采用化学发光免疫分析法测定了178例前列腺疾病[其中68例PCa,43例前列腺增生(BPH),31例BPH+急性尿潴留(AUR)和36例急性前列腺炎(AP)]患者和60例正常对照组血清IL-6、T、FSH和 LH以及PSA的水平,并同时进行比较性分析.结果:在178例前列腺疾病中,68例PCa患者血清IL-6水平较43例BPH、31例BPH+AUR、36例AP患者和60例正常对照组均明显增高(P<0.01、<0.05、<0.05和<0.01).在性激素分析中,68例PCa患者血清T水平较60例正常对照组明显降低(P<0.01),其他各组均正常(P均 >0.05);68例PCa患者血清FSH水平较60例正常对照组明显增高(P<0.01),43例BPH和36例AP患者均正常(P均>0.05),而31例BPH+AUR患者稍增高(P<0.05);68例PCa患者血清LH较60例正常对照组明显增高(P<0.05),而31例AP患者明显降低,有待进一步探讨.在PSA测定中,68例PCa患者血清PSA较其他前列腺疾病组和60例正常对照组非常明显增高(P均<0.01),在68例PCa患者中,37例骨转移患者的血清IL-6和PSA水平较31例未转移患者明显增高(P分别为<0.01和<0.05),性激素之间无明显差异(P均>0.05).结论:PCa患者血清IL-6、FSH、LH和PSA水平明显增高和血清T明显降低是诊断和鉴别前列腺良恶性疾病的有价值的临床指标,而PCa患者骨转移的典型特点是血清IL-6和PSA水平的增高,但与血清性激素水平无关.     

凋亡相关基因p53、bcl-2、bax在前列腺组织中的相关性

目的　探讨细胞凋亡相关基因p53、bcl-2、bax在前列腺组织中的相关性。 方法　收集36例前列腺癌(prostate caner, PCa)、20例前列腺增生(benign prostatic hyperplasia,BPH)和11例正常前列腺(normal prostatic, NP),应用免疫组织化学S-P法检测凋亡相关基因p53、bcl-2、bax蛋白的表达。 结果　①PCa和BPH组bcl-2蛋白阳性表达率明显高于NP组（P<0.05）,而PCa组与BPH组阳性率差异无显著性。PCa组p53蛋白阳性表达率明显高于BPH组和NP组（P<0.01）,而BPH组与NP组阳性率无显著性差异（P>0.05）。②p53与PCa分级有关,随着肿瘤分级增高而呈正相关（P<0.05）;bcl-2与PCa分级有关,随着肿瘤分级增高而呈正相关（P<0.01）,显示bcl-2、p53蛋白表达随着病理分级的增高而增高。PCa、BPH和NP中bax阳性表达率差异无显著性。③p53蛋白表达阳性率≤5年生存组明显高于>5年生存组,呈负相关（P<0.05）;bcl-2、bax蛋白表达与生存期无关（P>0.05）。 结论 细胞凋亡相关基因 p53、bcl-2、bax蛋白的异常表达与PCa的发生和发展、病理分级和预后有相关性。     

肾癌患者血清中miR-126的异常表达及其临床意义

目的：检测miR-126在肾癌病人血清中的表达状况,同时研究miR-126与肾癌患者临床病理特征之间的关联,为进一步的深入研究奠定基础。方法：收集35例新诊断肾癌患者术前血清样本,另外收集35例健康体检者血清样本作为对照,利用实时荧光定量PCR技术检测miR-126在肾癌患者血清中的表达情况,利用SPSS19.0软件分析肾癌病人临床病理特征和miR-126表达量两者之间的关系。结果：与对照组比较,肾癌组患者血清中miR-126表达量明显低于健康体检组,差异具有统计学意义(P<0.05),在35例肾癌血清样本中,出现31例miR-126下调(88.57%),而4例则表现为上调(11.43%)。肾癌病人的性别、年龄、肾癌组织类型、肾肿瘤大小、TNM分期和肾癌患者血清中miR-126表达量无相关性(P>0.05)。结论：miR-126在肾癌患者血清中低表达,提示其可能与肾癌的发生和发展相关。     

CCL5在胃癌患者肿瘤组织和血清中的表达及临床意义

目的:检测胃癌患者组织及血清中的CCL5的表达并探讨血清中CCL5表达的临床意义。方法:选择临床病理资料齐全的胃癌蜡块标本48例,取癌组织和癌旁组织(对照组),采用SP免疫组化法检测CCL5在胃癌组织及癌旁组织中的表达。抽取新诊断胃癌患者50例(均未行手术及放化疗)及健康志愿者16例(对照组)的血清标本,采用ELISA检测CCL5在胃癌患者及健康志愿者血清中的表达,研究血清中CCL5的表达水平与胃癌的病理因素及生物学行为之间的关系。结果:CCL5在胃癌患者组织及血清中呈高表达,与对照组相比,明显升高,具有统计学差异(P0.001),胃癌患者血清中CCL5的表达水平与胃癌组织浸润深度、淋巴结转移情况、TNM分期情况及肿瘤分化程度均具有相关性(P0.001),与患者的性别及年龄无相关性。结论:CCL5可能成为胃癌患者肿瘤分期及疾病进展的重要分子标志。     

microRNA-204在鼻咽癌中的表达及生物学意义研究

目的:研究微小RNA 204(microRNA-204,miR-204)在鼻咽癌(Nasopharyngeal carcinoma,NPC)中的表达情况及生物学意义。方法:收集2012年3月至2014年3月间于我院耳鼻喉头颈外科行组织病理活检的NPC组织及对应癌旁鼻黏膜组织共43例,运用q RT-PCR技术检测miR-204在NPC组织及癌旁组织中的表达水平,统计分析miR-204表达水平与患者临床病理资料间的相关性;免疫组化检测鼻咽癌组织中miR-204下游潜在靶点Bcl-2及SIRT1蛋白的表达水平,统计分析Bcl-2及SIRT1蛋白与miR-204表达间的相关性;采用人工合成的miR-204模拟物(miR-204 mimics)转染人鼻咽癌CNE-2细胞,分别采用q RT-PCR及Western blot检测转染后Bcl-2及SIRT1 mRNA和蛋白的表达变化。结果:miR-204在NPC组织中表达水平显著低于对应癌旁鼻黏膜组织(P0.05);miR-204低表达与肿瘤淋巴结转移(P0.05)及高TNM分期(Ⅲ+Ⅳ期,P0.05)显著相关;在鼻咽癌组织中miR-204与其下游潜在靶点Bcl-2及SIRT1的表达呈显著负相关关系(P0.05),miR-204转染人鼻咽癌CNE-2细胞后可显著降低细胞内Bcl-2及SIRT1 mRNA和蛋白的表达水平(P0.05)。结论:miR-204在鼻咽癌组织中表达下调并与肿瘤恶性临床病理特征有关,miR-204可能通过下调Bcl-2及SIRT1的表达来抑制鼻咽癌的发生、发展过程。     

microRNA-92a在弥漫大B细胞淋巴瘤患者中的表达及可能机制

目的分析miR-92a在弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)患者中的表达与临床病理特征的关系,观察miR-92a对弥漫大B淋巴瘤细胞系OCI-LY10增殖、侵袭能力的影响。方法采用实时荧光定量PCR方法检测86例DLBCL患者肿瘤组织和22例正常淋巴结组织中miR-92a的表达,分析miR-92a表达水平与患者临床病理特征的关系。对弥漫大B淋巴瘤细胞系OCI-LYl0进行miR-92a反义核苷酸(ASO)转染并培养,MTT法检测细胞增殖能力,Transwell小室检测细胞侵袭能力,real-time PCR方法与Western blot方法检测细转染miR-92a ASO后各组细胞KLF4的m RNA和蛋白的表达。结果DLBCL患者淋巴结组织中miR-92a表达水平显著高于对照组(P0.05)。miR-92a在DLBCL患者中的表达与疾病分期显著相关(P0.05),但与患者年龄、性别无关(P0.05)。与对照组相比,miR-92a ASO组OCI-LYl0细胞的增殖侵袭能力明显降低,KLF4蛋白与m RNA表达水平显著升高(P0.05)。结论miR-92a在DLBCL中表达上调,其促进OCI-LY10细胞增殖侵袭的作用机制可能与下调KLF4蛋白表达有关。