PLA-α-细辛脑纳米粒的制备、表征及其对鼻黏膜的毒性

目的:表征聚乳酸-α-细辛脑(PLA-α-细辛脑)纳米粒,评价其鼻腔给药后鼻黏膜毒性,为其通过鼻腔给药方式用于体内的研究提供基础。方法:采用有机溶剂挥发法将α-细辛脑制备成PLA-α-细辛脑纳米粒,通过粒径分布、载药量和包封率评价纳米粒的工艺条件;红外光谱,差示扫描量热分析,X射线衍射分析及体外溶出试验分析药物在纳米粒中的分布状态;鼻纤毛毒性及鼻黏膜病理切片研究PLA-α-细辛脑纳米粒混悬液鼻腔给药后的鼻黏膜毒性。结果:α-细辛脑纳米粒平均粒径265.4 nm,多分散系数(PDI)0.038,载药量12.40%,包封率55.86%,α-细辛脑以分子状态分散或非晶型状态存在于PLA载体中,体外释放包括速释和缓释,呈双相动态,PLA-α-细辛脑纳米粒混悬液鼻腔给药后对鼻黏膜组织无明显的毒性作用。结论:有机溶剂挥发法制备的PLA-α-细辛脑纳米粒表征与鼻黏膜毒性试验结果表明该制剂适合于鼻腔给药。     

PLA-α-细辛脑纳米粒经鼻腔、静脉给药后药物动力学研究

采用乳化溶剂挥发法制备聚乳酸(PLA)-α-细辛脑纳米粒,并与静脉注射给药比较,研究PLA-α-细辛脑纳米粒鼻腔给药后药物的体内分布及脑组织的靶向性。结果显示:鼻腔给药和静脉注射后的脑靶向系数分别为1.65与1.16,PLA-α-细辛脑纳米粒鼻腔给药后的绝对生物利用度为74.2%,脑靶向效率为142.24%,鼻-脑传递百分比为29.83%。荧光标记法显示,PLA-α-细辛脑荧光纳米粒经鼻腔给药后,香豆素-6在脑组织中的荧光强度最大,达到脑靶向给药的目的;PLA-α-细辛脑荧光纳米粒静脉注射给药后,香豆素-6在肝组织中的荧光强度远高于鼻腔给药,表明PLA-α-细辛脑纳米粒经鼻腔给药可降低药物导致的肝毒性。此外,PLA-α-细辛脑荧光纳米粒经鼻腔给药后,香豆素-6在肺组织中的荧光强度较弱,解决了气流粉碎法制备的α-细辛脑干粉经鼻腔给药到达肺部量较多的缺点。体内研究表明:与静脉注射相比,PLA-α-细辛脑纳米粒鼻腔给药后的脑靶向性优于静脉注射。     

α-细辛脑原位凝胶体外分析方法的建立

目的:建立α-细辛脑原位凝胶含量测定和体外释放度测定方法。方法:采用HPLC法,SHIM-PACK VP-ODS色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相甲醇-水(75∶25),检测波长258 nm,采用磷酸盐缓冲溶液(p H 7.4)作为释放液。结果:含量测定中α-细辛脑在10.4~104 mg·L-1与峰面积具有良好的线性关系(r=1),平均回收率100.6%,RSD 2.2%。体外释放度试验中α-细辛脑在2.06~82.4 mg·L-1线性较好(r=0.999 9),平均回收率95.83%,RSD 2.5%。结论:建立的分析方法具有专属性好、准确和可靠的特点,可为后续研究奠定基础。     

运用HPLC和GC-MS研究开心散有效抗抑郁成分大鼠吸收情况

目的:明确开心散提取物经大鼠灌胃后有效抗抑郁成分的吸收情况。方法:用水蒸气蒸馏法回收石菖蒲挥发油部分,用50%乙醇提取开心散复方有效成分,按原方比例予Wistar大鼠灌胃,分离含药血清和脑组织。含药血清经HPLC检测,定性分析有效抗抑郁成分人参皂苷Rb1、人参皂苷Rg1、3,6,-二芥子酰基蔗糖;脑组织匀浆离心后分离上清液,经萃取后,GC-MS定性分析复方中石菖蒲挥发油有效抗抑郁成分α-细辛醚和β-细辛醚入脑情况。结果:HPLC得到人参皂苷Rb1、人参皂苷Rg1、3,6,-二芥子酰基蔗糖;GC-MS得到α-细辛醚和β-细辛醚。结论:开心散的5种有效抗抑郁成分均能被大鼠吸收,进一步明确了开心散抗抑郁疗效的物质基础。     

运用HPLC和GC-MS研究开心散有效抗抑郁成分作用研究

目的:明确开心散提取物经大鼠灌胃后有效抗抑郁成分的吸收情况。方法:用水蒸气蒸馏法回收石菖蒲挥发油部分,用50%乙醇提取开心散复方有效成分,按原方比例予Wistar大鼠灌胃,分离含药血清和脑组织。含药血清经HPLC检测,定性分析有效抗抑郁成分人参皂苷Rb1、人参皂苷Rg1、3,6’-二芥子酰基蔗糖;脑组织匀浆离心后分离上清液,经萃取后,GC-MS定性分析复方中石菖蒲挥发油有效抗抑郁成分α-细辛醚和β-细辛醚入脑情况。结果:HPLC得到人参皂苷Rb1、人参皂苷Rg1、3,6’-二芥子酰基蔗糖;GC-MS得到α-细辛醚和β-细辛醚。结论:开心散的5种有效抗抑郁成分均能被大鼠吸收,进一步明确了开心散抗抑郁疗效的物质基础。     

星点设计-效应面法优化α-细辛脑纳米粒原位凝胶的处方及其体外释放性能考察

目的:优选温敏型α-细辛脑纳米粒原位凝胶的处方并考察其体外释放行为,为脑靶向性制剂的研究提供参考。方法:以泊洛沙姆407和泊洛沙姆188质量分数为自变量,胶凝温度为因变量,通过多元线性回归及二项式拟合建立因变量与各自变量之间的数学关系,采用星点设计-效应面法优选α-细辛脑纳米粒原位凝胶的处方。以人工模拟鼻液为释放介质考察该制剂的体外释放特性。结果:α-细辛脑纳米粒原位凝胶的最佳处方组成为21.85%泊洛沙姆407和3.8%泊洛沙姆188;胶凝温度(33.7±0.1)℃,72 h内α-细辛脑的累积释放量70.42%。结论:温敏型α-细辛脑纳米粒鼻用原位凝胶具有较好的缓释作用,优选的处方可为α-细辛脑新型给药途径制剂的开发提供参考。     

α-细辛脑乳液型与溶液型注射剂的体内药动学和分布比较

目的:比较α-细辛脑乳液型(脂肪乳)与溶液型注射剂的体内药动学行为和组织分布情况,为拓展注射剂类型奠定基础。方法:以α-细辛脑市售注射剂(溶液)为对照,尾静脉注射给药,HPLC测定大鼠血浆和小鼠组织中的药物浓度,进行相应数据处理和结果分析。结果:大鼠单剂量静注α-细辛脑脂肪乳和溶液后,其平均血药浓度-时间曲线相似并均符合二室模型,但脂肪乳的组织分布能力强于溶液;小鼠单剂量静注脂肪乳和溶液后,α-细辛脑在小鼠肺中的分布相似,但脂肪乳增加了α-细辛脑在肝、脾中的分布,减少了其在心、肾、脑中的分布。结论:α-细辛脑脂肪乳与溶液静注后的血药浓度相似,但脂肪乳显著改变了α-细辛脑的体内组织分布。     

液固压缩技术速释α-细辛脑的机制探讨

目的:探讨液固压缩技术使α-细辛脑快速溶出的机制.方法:以聚山梨酯-80为液体赋形剂,微晶纤维素PH-101为载体材料,微粉硅胶(R) 200为涂层材料,制备药液比1∶4的α-细辛脑液固压缩片,比较其与市售普通片的溶出度,通过测定X-射线衍射(XRD)和崩解时限,探讨该压缩片的速释机制.结果:液固压缩片中α-细辛脑在5 min时,溶出度＞80％.XRD表明液固压缩片中无α-细辛脑的特征峰.结论:采用液固压缩技术可改善药物润湿性,增加药物溶出时有效表面积,使难溶性药物快速溶出.     

石菖蒲开窍醒神物质基础的药学系列研究

目的 探讨石菖蒲开窍醒神作用的物质基础。方法 采用气相色谱-质谱联用(GC-MS)法建立石菖蒲挥 发油特征指纹图谱;采用GC-MS及HPLC法比较石菖蒲、水菖蒲、九节菖蒲成分的异同;采用GC-MS法分析水煎液 与醇提液主要化学成分;采用HPLC法测定β-细辛醚、α-细辛醚含量;采用GC-MS法分析挥发油入脑成分。结果 以 甲基丁香酚、顺式甲基异丁香酚、反式甲基异丁香酚、γ-细辛醚、β-细辛醚、α-细辛醚6个特征成分为指标, 建立了挥发油的GC-MS指纹图谱辨识技术;石菖蒲、水菖蒲及九节菖蒲挥发油以及β-细辛醚、α-细辛醚的含量 存在明显差异,不应混用;在GC-MS可检出成分中,石菖蒲水煎剂、醇提液除含挥发油外,尚含有2,3-二氢-3,5二 羟基-6-甲基-4H-吡喃-4-酮(4H-Pyran-4-one,2,3-dihydro-3,5-dihydroxy-6-methyl-)与5-羟甲基糠醛(2- Furancarboxaldehyde,5-[hydroxymethyl]-)等成分;精制β-细辛醚纯度达99％以上;6批次药材中β-细辛 醚含量为1．09％-2．87％,α-细辛醚含量为0．011％-0．172％;顺式甲基异丁香酚、γ-细辛醚、β-细辛醚、α-细 辛醚4个挥发油成分能进入脑组织。结论 石菖蒲挥发油及β-细辛醚可能是药效活性的最主要有效部位(成分)。     

气相色谱法同时测定川芎中藁本内酯、川芎嗪和α-细辛脑的含量

目的:建立GC同时测定川芎中藁本内酯、川芎嗪和α-细辛脑含量的分析方法。方法:采用三氯甲烷超声浸提法对川芎饮片进行提取,提取液采用气相色谱内标法建立含量测定方法并进行测定。结果:藁本内酯、川芎嗪和α-细辛脑分别在35.72~1 072 ng,0.313 9~9.417 ng,0.122 9~3.687 ng范围内对照品峰面积和内标峰面积之比与对照品进样量均呈良好的线性关系(r≥0.999);平均加样回收率分别为96.1%、100.2%、102.1%(RSD3%,n=6)。结论:该方法简便快速,结果准确可靠,方法重复性好,可用于川芎饮片的质量控制。     

细辛脑脂质体的制备及包封率的测定

细辛脑(asarone)[1],即α-细辛脑(2,4,5-三甲氧基-1-丙烯基苯,又名α-细辛醚),是中药石菖蒲的主要有效成分。近年来的研究认为,α-细辛脑在抗菌消炎上的作用突出,与青霉素有良好的可比性;同时具有确实的祛痰、止咳、平喘、利胆、解痉和抗惊厥作用。同时在抗癫痫大发作上,α-细辛脑通过提高脑组织的兴奋阈,减弱来自病灶的兴奋扩散,从而对癫痫大发作的治疗效果突出,治疗效果与苯妥英钠有良好的可比性,可作为防治癫痫大发作的首选     

离子液体顶空微萃取-气相色谱/质谱法研究细辛挥发油中的化学成分

目的建立了以离子液体为萃取溶剂的顶空微萃取-气相色谱-质谱联用的方法鉴定细辛药材中挥发油的成分,为细辛的临床合理用药提供依据。方法以离子液体为萃取溶剂,中空纤维为溶剂载体,水浴85℃顶空回流提取2h,之后将中空纤维置于甲醇中超声解吸附,利用溶剂间的熔点差异,在0℃环境下离子液体凝固成固态后,取液态的甲醇溶液进样分析。结果在本文所提供的条件下,共鉴定出细辛挥发油中31种挥发性化合物。结论实验方法简单、准确,提取效率高,可用于细辛挥发油中的成分的快速鉴定,并且为进一步合理开发利用细辛药材提供有效的科学依据。     

α-细辛脑雾化吸入佐治小儿毛细支气管炎的疗效观察

目的观察α-细辛脑雾化吸入佐治小儿毛细支气管炎的临床疗效。方法对2004年10月—2006年3月收治住院的60例毛细支气管炎随机分作治疗组30例和对照组30例,2组均采用相同的综合治疗,而治疗组在综合治疗的基础上在雾化液中加用α-细辛脑,每日2次。结果治疗组在症状、体征的消失及治愈时间上均优于对照组(P<0.01)。结论α-细辛脑雾化吸入佐治小儿毛细支气管炎的疗效显著,值得推广应用。     

脑肿消方对局灶脑缺血大鼠脑组织TNF-α、ET表达的影响

目的:通过观察脑肿消方对脑缺血大鼠脑组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、内皮素(ET)表达的影响,探讨其脑保护机制.方法:建立局灶性脑缺血大鼠模型,用SP免疫组化方法检测脑组织TNF-α、ET的表达.结果:脑肿消方大、小剂量组和维脑路通组均能不同程度地减少脑组织TNF-α、ET的表达,以脑肿消方大剂量组作用最优.结论:脑肿消方对脑缺血大鼠有防治作用,其机制可能与抑制TNF-α、ET的表达,降低一氧化氮(NO)水平,减少其引发的一系列病理损害有关.     

α-细辛脑原位凝胶对卵清蛋白致大鼠哮喘影响的研究

目的:研究α-细辛脑原位凝胶穴位注射对卵清蛋白致大鼠支气管哮喘的作用机制。方法:雄性大鼠按体重随机分为正常组,模型组,羊肠线埋线组(4cm/只),空白原位凝胶组(25mg/kg),α-细辛脑原位凝胶组(25mg/kg),实验第1d和第8d分别通过腹腔、两侧腹股沟及两前足跖注射抗原液,每处0.2ml,2次致敏;第15d起用1%OVA生理盐水溶液超声雾化30min诱喘,每天1次,连续雾化一周复制大鼠哮喘模型。各组大鼠末次激发24h后,股动脉采血和取肺组织。用四川大学图象图形研究所Biomias2001图象分析系统,对肺组织HE切片进行嗜酸性粒细胞及浆细胞计数;ELISA测定大鼠血清中免疫球蛋白E(Ig E)、特异性免疫球蛋白E(s Ig E)、γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素4(IL-4)的表达情况。结果:α-细辛脑原位凝胶(25mg/kg)穴位埋植能明显改善模型大鼠肺的病理情况,降低血清中Ig E、s Ig E、IL-4的含量,升高IFN-γ的含量。结论:α-细辛脑原位凝胶(25mg/kg)穴位埋植对支气管哮喘具有较好的治疗作用,为治疗支气管哮喘提供新的给药方式和途径。     

高效液相色谱法同时检测石菖蒲中β-细辛醚、α-细辛醚的含量

目的:建立石菖蒲药材中β-细辛醚、α-细辛醚的HPLC含量测定方法,并对石菖蒲药材进行质量评价。方法:采用岛津高效液相色谱仪,对样品的前处理方法、色谱柱、检测波长、流动相等分析条件进行了优化筛选,并对分析方法的线性范围、精密度、重复性、稳定性、准确度进行考察,建立同时检测β-细辛醚、α-细辛醚的石菖蒲药材质量控制方法。结果:采用Kromasil C18色谱柱,柱温35℃,流动相甲醇-水(含0.1%甲酸)(70∶30)等度洗脱,检测波长257 nm。回归方程β-细辛醚为Y=2×106X+205.93(r=0.999 9,0.026 96~0.539 2μg),α-细辛醚Y=6×106X-117.6(r=0.999 9,0.016 04~0.320 8μg);方法精密度β-细辛醚RSD 0.119%,α-细辛醚RSD 0.116%;重复性试验β-细辛醚RSD 0.877%,α-细辛醚RSD 0.815%;稳定性试验室温下20 h内样品中β-细辛醚RSD 0.42%,α-细辛醚RSD 0.25%;准确度β-细辛醚平均回收率为97.7%(RSD1.9%),α-细辛醚平均回收率为102.3%(RSD 1.5%)。所收集的石菖蒲样品中β-细辛醚含量1.12%~3.51%,α-细辛醚含量0.03%~1.01%。结论:该方法快速、准确、重复性好,可用于石菖蒲药材的质量评价。     

高效液相色谱法同时测定还脑益聪方中α-细辛醚、β-细辛醚和细辛醛的含量

目的:应用高效液相色谱法测定还脑益聪方中α-细辛醚、β-细辛醚和细辛醛的含量。方法:采用Agilent Extend-C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,用甲醇-水(含0.1%甲酸)梯度洗脱,检测波长265 nm,柱温30℃,进样量20μL,流速为1 m L/min,分别检测还脑益聪方中α-细辛醚、β-细辛醚和细辛醛含量,并用石菖蒲样品作对照。结果:石菖蒲样品和还脑益聪方中α-细辛醚的含量分别为1.274 2,3.489 1 mg/g,β-细辛醚含量分别为7.630 1,35.836 0 mg/g,细辛醛含量分别为0.833 7,7.808 3 mg/g。结论:还脑益聪方中α-细辛醚、β-细辛醚和细辛醛含量分别是石菖蒲样品的2.7倍、4.7倍和9.4倍,提示整方配伍后可提高三者的溶出率。     

α-细辛脑-羟丙基β-环糊精包合物的制备

目的：研究α-细辛脑-（HP-β-CD）包合物的制备工艺。方法：以包合率为指标,比较超声波,饱和水溶液法,研磨法的包合效果,确定最优包合方法;采用正交实验,考察仪一细辛脑与HP—B—CD比例、包合温度、包合时间对包合率的影响;以包合率和细辛脑的溶解度验证包合条件。结果：用超声波法包合率最高;最佳包合工艺条件为：α-细辛脑与HP-β-cD比例为1．4,包合温度为35℃,包合时间为4h;采用最佳条件验证,α-细辛脑的包合率为33．4％,α-细辛脑溶解度提高了14倍多。结论：该工艺简便,重复性好,能使α-细辛脑的溶解度得到提高,适用于α-细辛脑包合。     

石菖蒲投料顺序对复方麝香注射液的质量影响

目的：考察石菖蒲不同投料顺序对复方麝香注射液的质量影响。方法：采用不同的投料顺序,分别将石菖蒲置于提取罐的最上层、中上层、中下层和底部,研究复方麝香注射液中α-细辛醚和β-细辛醚的含量变化。结果：不同的投料顺序对复方麝香注射液中的α-细辛醚和β-细辛醚的含量有很大的影响。结论：调整石菖蒲的投料顺序,使其位于上部,以保证复方麝香注射液中α-细辛醚和β-细辛醚的含量稳定。     

细辛脑溶解度及羟丙基环糊精包合作用的考察

目的 考察溶剂、温度及环糊精对细辛脑溶解度的影响.方法 利用HPLC-UV法,测定细辛脑在不同溶剂、不同温度及不同浓度环糊精溶液下的溶解度.结果 细辛脑在水中的溶解度小,在茶油、乙醇、甲醇中溶解度较大,环糊精可以增加其在水中溶解的量.结论 细辛脑为水难溶性成分,采用高浓度环糊精可以有效增加其在水中的溶解量.