PD-1/PD-L1单抗及联合其他疗法增强结直肠癌疗效的研究进展

结直肠癌(colorectal cancer,CRC)是人类常见的肿瘤之一,根据分子标志物不同可将其分为DNA错配修复基因表达缺失型(deficient mismatch repair,dMMR)和错配修复基因表达正常型(proficient mismatch repair,pMMR)CRC.目前,绝大多数CRC患者采...     

错配修复蛋白和p53蛋白表达与结直肠癌的临床病理关系及其相关性

目的探讨错配修复蛋白(mismatch repair protein,MMRP)及p53蛋白在结直肠癌(colorectal cancer,CRC)中的表达,进而分析微卫星不稳定(microsatellite instability,MSI)、p53与CRC临床病理特征的关系及其相关性。方法采用组织芯片及免疫组化法对980例CRC中4种MMRP及p53进行检测,将4种MMMP中的1种及以上表达缺失定为MSI组,全部阳性表达定为微卫星稳定(microsatellite stable,MSS)组。结果 (1)MMRP表达缺失率为11%,MLH1、PMS2、MSH2及MSH6的表达缺失率分别为7.3%、7.1%、2.0%及1.9%;其中共同缺失表达类型为MLH1-PMS2、MSH2-MSH6者分别为52例、14例,统计分析结果显示二者均呈正相关(rs=0.712),4种蛋白均缺失者3例。(2)p53阳性率为59.1%。(3)MSI与患者年龄、肿瘤部位、大小、组织学类型、淋巴结转移、临床分期及Ki-67有关(P0.05)。(4)p53与组织学类型、大体分型、浸润深度、远处转移及Ki-67有关(P0.05)。(5)MSI与p53呈负相关(rs=-0.118)。结论 MLH1、PMS2缺失表达较MSH2和MSH6多见。MLH1与PMS2、MSH2与MSH6常常协同表达或缺失。MSI及p53与CRC临床病理特征关系密切,对预测CRC的风险、恶性程度的评估等具有指导意义。MSI与p53表达呈负相关,提示二者可能参与CRC的不同发生、发展过程。     

结直肠癌中CXCL9的表达及其临床意义

目的检测趋化因子CXCL9在结直肠癌(colorectal cancer,CRC)组织及癌旁组织中的表达,探讨其与临床病理特征及预后的关系。方法应用免疫组化EnVision法检测95例CRC及55例癌旁组织中CXCL9的表达。结果 CRC中CXCL9高表达51例(53.7%,51/95),癌旁组织中高表达11例(20.0%,11/55)。CXCL9在CRC中高表达发生率显著高于癌旁组织(P0.05)。CXCL9高表达和肿瘤分化程度高、未达浆膜浸润、淋巴结无转移及TNM低分期具有相关性(P0.05)。CXCL9高表达CRC患者的5年无瘤生存期及总生存期明显高于低表达组(P0.05)。结论 CXCL9可能参与CRC的发生、发展,其高表达提示CRC患者预后较好。     

胃黏液腺癌、印戒细胞癌及非黏液腺癌中PD-L1、错配修复蛋白及HER-2的表达及意义

目的 探讨胃黏液腺癌(mucinous gastric adenocarcinoma, MGC)、印戒细胞癌(signet ring cell carcinoma, SRC)及胃非黏液腺癌(non-mucinous gastric adenocarcinoma, NMGC)中PD-L1、错配修复蛋白及HER-2的表达及意义。方法 收集2018年3月～2022年2月唐山市工人医院诊治的349例胃腺癌患者,其中MGC 14例、SRC 34例、NMGC 301例,对其PD-L1、错配修复蛋白及HER-2免疫组化及FISH检测结果进行统计分析。结果 MGC的肿瘤体积大于SRC及NMGC,MGC中PD-L1的阳性率(0)低于NMGC(23.6%),MGC中错配修复缺陷(deficient mismatch repair, dMMR)发生率(50%)高于SRC(5.9%)及NMGC(8.6%)(P<0.05)。结论 MGC具有独特的临床病理和分子学特征,其可能对化疗和免疫治疗获益产生不利影响。     

新疆汉族及维吾尔族结直肠癌原发灶与转移灶中KRAS基因突变分析

目的观察新疆地区汉族、维吾尔族人群中结直肠癌(colorectal cancer,CRC)原发灶与转移灶中KRAS基因状态的差异及其与CRC患者临床病理特征之间的关系。方法收集2012年~2014年间新疆地区汉族及维吾尔族CRC标本189例,其中52例有配对转移灶。采用突变扩增阻滞系统(amplification refractory mutation system,ARMS)进行KRAS基因12、13密码子已知常见突变位点检测。结果KRAS基因在CRC原发灶病例中汉族、维吾尔族的突变率分别为42.8%(62/145)、43.2%(19/44),两者差异无显著性(P0.05),T3/T4期及有淋巴结转移的病例中突变率较高(P0.05),但与患者性别、民族、年龄、分化程度、TNM分期、有无远处转移、原发灶所在的部位均无相关性(P0.05)。KRAS基因在CRC转移灶中汉族、维吾尔族的突变率分别为33.3%(12/36)、31.3%(5/16),两者差异无显著性(P0.05),并发现年龄≥65岁者突变率较高(P0.05),与所研究的其他临床病理特征无相关性。52例转移灶中KRAS基因的突变率为32.7%(17/52),而对应的原发灶突变率达50%(26/52),明显高于转移灶(P0.000 1),转移灶突变类型与原发灶一致。结论 KRAS基因在浸润较深、有淋巴结转移及65岁以上发生转移的CRC中突变率较高,在原发灶的突变率高于配对转移灶。KRAS基因突变率在新疆汉族、维吾尔族CRC患者中差异无显著性,提示KRAS基因突变促进CRC的进展,并且在原发灶中更易发生突变,但汉族、维吾尔族间无差异。     

炎症诱导酶在结直肠癌中的表达及其临床病理意义

目的 检测环氧化酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)和诱导型氮氧合酶(inducible nitric oxidesynthase,iNOS)在结直肠癌(colorectal carcinoma,CRC)中的表达,为研究炎症与CRC发生的关系提供理论依据.方法 应用流式细胞术和SP法免疫组化检测100例CRC及11例癌旁正常黏膜中COX-2和iNOS的表达,并结合临床病理因素进行分析.结果 免疫组化显示,COX-2在CRC中表达阳性率为76.00%,而正常黏膜中只有9.10%,差异有显著性(P<0.05).COX-2表达阳性率在CRC淋巴结转移组和无淋巴结转移组分别为87.50%(42/48)、65.38%(34/52),两组比较差异有显著性(P<0.05);FCM检测发现,高、中、低分化组平均FI值分别为2.47±1.41、2.70±1.08、3.01±1.26,各组COX-2的表达均高于正常黏膜组(1.00±0.28)(P<0.01);CRC淋巴结转移组(2.45±1.41)高于无淋巴结转移组(1.61±1.27)(P<0.05).CRC中iNOS表达阳性率(81.00%)高于正常黏膜(27.27%,P<0.05),有淋巴结转移组的阳性率(91.67%)高于无淋巴结转移组(71.15%,P<0.05).COX-2与iNOS表达呈正相关(P<0.05).结论 在CRC中COX-2和iNOS表达异常增高,在CRC中COX-2和iNOS的表达与淋巴结转移密切相关,可能在CRC的进展及转移中有重要作用.     

结直肠癌组织乳脂肪球表皮生长因子8蛋白表达与临床病理特征和患者生存率的关系

目的:探讨乳脂肪球表皮生长因子8(MFG-E8)蛋白在结直肠癌(CRC)组织中的表达及其与临床病理特征和患者生存率的关系。方法:留取手术切除CRC癌组织(CRC组)及相应癌旁组织(Control组)各88例,应用免疫组织化学法(SP法)检测癌组织及癌旁组织MFG-E8蛋白表达,统计分析各组MFG-E8蛋白高表达率的差异,以及CRC组中MFG-E8低表达组、阳性表达组和强阳性表达组患者临床病理因素和总生存率的差异。结果:CRC组癌组织MFG-E8蛋白高阳性表达率为73.86%(65/88),显著高于Control组28.41%(25/88)(P0.01)。MFG-E8蛋白表达强度仅与淋巴结转移有关(P0.05),而与患者年龄、临床T和M分类、临床分期及肿瘤分型无显著相关(P0.05);MFG-E8阴性表达组及强阳性表达组患者总生存率均显著低于阳性表达组(P0.01)。结论:MFG-E8在CRC患者癌组织中阴性表达及强阳性表达均可促进CRC的淋巴结转移,并提示预后较差。     

结直肠癌中错配修复蛋白缺陷与NTRK基因融合的相关性分析

目的探讨结直肠癌中错配修复蛋白缺陷(dMMR)与NTRK基因融合的相关性。方法收集南京大学医学院附属鼓楼医院病理科2015—2019年诊断为结直肠癌的组织蜡块830例, 分别运用免疫组织化学和荧光原位杂交(FISH)检测830例甲醛固定石蜡包埋(FFPE)肿瘤组织中错配修复蛋白表达情况以及NTRK1/2/3基因断裂情况。比较dMMR型和错配修复蛋白无缺陷(pMMR)结直肠癌中NTRK1/2/3基因融合的发生率, 进一步运用FFPE样本进行RNA Seq二代测序检测, 分析融合伴侣和融合方式。结果 830例原发性结直肠癌FFPE样本均成功进行免疫组织化学和FISH检测。dMMR病例82例(9.88%), pMMR病例748例(90.12%)。其中MLH1蛋白缺失比例为9.04%(75/830), PMS2蛋白缺失比例为9.04%(75/830), MSH2蛋白缺失比例为2.53%(21/830), MSH6蛋白缺失比例为4.10%(34/830), MLH1和PMS2共缺失比例为8.67%(72/830), MSH2和MSH6共缺失比例为2.17%(18/830)。伴有dMMR肿瘤与pM...     

APRIL调节基质金属蛋白酶的表达对结直肠癌细胞转移侵袭能力的影响

目的 研究增殖诱导配体(a proliferation-inducing ligand,APRIL)对结直肠癌(colorectal cancer,CRC)细胞转移侵袭能力和基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)表达的影响,以进一步明确APRIL在CRC转移中的作用.方法 APRIL基因的小干扰RNA质粒载体(siRNAAPRIL)转染人CRC细胞SW480,APRIL重组蛋白(rhAPRIL)刺激CRC细胞HCT-116,Transwell小室转移及侵袭试验分析APRIL对CRC细胞转移及侵袭能力的影响;RT-PCR、ELISA检测MMPs的表达变化.结果 siRNA-APRIL转染的SW480细胞Transwell小室试验转移及侵袭细胞数显著减少(P＜0.05),rhAPRIL刺激的HCT-116细胞Transwell小室试验转移及侵袭细胞数显著增多(P＜0.05);MMP-2、MMP-9及TIMP-1 mRNA,分泌型的MMP-2、MMP-9蛋白表达在转染或刺激前后差别均有统计学意义(P＜0.05);MMP的抑制剂GM6001处理后,SW480对照组和rhAPRIL刺激后的HCT-116细胞Transwell小室侵袭细胞数显著减少(P＜0.05).结论 APRIL通过调节MMPs的表达促进结直肠癌的侵袭和转移,可为结直肠癌转移的干预及治疗提供新的靶点.     

circPSMC3在结直肠癌组织中的表达及对CRC细胞增殖和转移的影响

目的 研究环状RNAPSMC3(circPSMC3)在结直肠癌(CRC)组织中的表达水平及临床意义,探讨circPSMC3对CRC细胞增殖和转移的作用及作用机制.方法 采用荧光定量PCR(qRT-PCR)检测circPSMC3在CRC和癌旁组织中的表达水平,分析circPSMC3的表达与CRC患者临床病理参数的关系.采用qRT-PCR检测circPSMC3在CRC细胞SW480、SW620和HT29及正常结肠细胞系NCM460的表达水平.选择circPSMC3低表达的CRC细胞系转染对照mimic和circPSMC3 mimic,CCK8实验检测circPSMC3对CRC细胞增殖能力的影响,Transwell实验检测circPSMC3对CRC细胞转移能力的影响.Western blot检测各组细胞中PI3K/AKT信号通路相关蛋白pPI3K和pAKT的表达及其下游蛋白β-catenin、cMYC和MMP2的表达.结果 circPSMC3在CRC组织中的表达显著低于其在癌旁组织中的表达(P<0.05),circPSMC3在CRC中的低表达与临床分期晚期和淋巴结转移相关(P<0.05).circPSMC3在CRC细胞系中的表达显著低于正常结肠细胞系NCM460的表达,在SW480细胞中的表达最低(P<0.05).转染circPSMC3 mimic后SW480细胞的增殖和转移能力均降低(P<0.05).circPSMC3抑制CRC细胞中PI3K/AKT的信号相关蛋白pPI3K和pAKT的表达及其下游蛋白β-catenin、cMYC和MMP2的表达.结论 circPSMC3在CRC组织中低表达,且其表达水平与临床分期和淋巴结转移有关.circPSMC3可能通过调控PI3K/AKT信号通路抑制CRC细胞增殖和转移能力.     

CDH1基因多态与结直肠癌和肝癌发生、进展的关系

目的 探讨CDH1基因C-160A多态与结直肠癌(colorectal cancer,CRC)和肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)发病风险和肿瘤分级分期的关系.方法 采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法 检测374例CRC与324名对照以及180例HCC与209名对照的CDH1 C-160A基因型分布及差异.结果 CDH1 C-160A基因型分布在CRC-对照和HCC-对照人群间差异均无显著性(P>0.05).然而,高TNM分期(Ⅲ Ⅳ)CRC组中A基因型(CA AA)频率显著低于低TNM分期者(Ⅰ Ⅱ)(P=0.008);淋巴结转移阳性CRC组中A基因型频率显著低于转移阴性者(P=0.016);远处转移阳性CRC组中A基因型频率也低于转移阴性者,但差异无统计学意义(P=0.169).高T分期(T2～T4)HCC组中A基因型频率低于T1期者,但差异未达到统计学意义(P=0.066).结论 CDH1 C-160A与CRC和HCC的发病风险无关,但-160A可能对CRC肿瘤进展具有保护作用.     

结直肠癌中IGF-1、IGFBP-3、MMP-14的表达及意义

目的探讨胰岛素样生长因子-1(insulin-like growth factor-1,IGF-1)、胰岛素样生长因子结合蛋白-3(insulin-like growth factor binding protein-3,IGFBP-3)及基质金属蛋白酶-14(matrix metalloproteinases-14,MMP-14)在结直肠癌(colorectal cancer,CRC)中的表达及临床意义。方法采用免疫组化MaxVision法检测70例CRC、30例结直肠腺瘤(colorectal adenoma,CRA)及20例正常肠黏膜组织(对照组)中IGF-1、IGFBP-3及MMP-14的蛋白表达,并进行统计学分析。结果 IGF-1、MMP-14蛋白在CRC组织中的表达高于CRA、对照组,且与CRC浸润深度、有无淋巴结转移及临床分期有关(P 0. 05); IGFBP-3蛋白在CRC组织中的表达低于CRA、对照组,与CRC有无淋巴结转移及肿瘤分期有关(P 0. 05)。IGF-1、MMP-14与IGFBP-3蛋白表达呈负相关关系(r=-0. 804/-0. 460,P 0. 01),IGF-1与MMP-14呈正相关关系(r=0. 443,P 0. 05)。结论 IGF-1、IGFBP-3、MMP-14与CRC的发生、发展密切相关,联合检测三者有助于CRC的诊断及预后。     

结直肠癌错配修复蛋白与临床病理特征的关系

目的:分析结直肠癌(Colorectal cancer,CRC)患者错配修复(Mismatch Repair,MMR)蛋白与临床病理特征的关系.方法:选取2018年10月～2021年10月于本院接受根治术治疗的116例CRC患者作为研究对象.于根治术中采集患者病理标本,检测MMR蛋白表达情况和CRC组织的临床病理特征,分析MMR蛋白表达与临床病理特征的关系.结果:所有患者中,MMR蛋白表达阳性者94例,MMR蛋白表达缺失者22例;其中MutL同源物1(MutL homolog 1,MLH1)、减数分裂后分离蛋白2(Post-meiotic segregation 2,PMS2)、MutL同源物2(MutS protein homolog 2,MSH2)、MutL同源物6(MutS homolog 6,MSH6)蛋白表达缺失者分别为9例、11例、6例、6例,MLH1和PMS2蛋白共同缺失者4例,MSH2和MSH6蛋白共同缺失者6例,未见4种蛋白共同缺失患者.不同肿瘤TNM分期、肿瘤部位、肿瘤直径、分化程度患者的MMR蛋白表达缺失具有明显差异(P<0.05);MMR蛋白表达与肿瘤部位、肿瘤TNM分期、分化程度、肿瘤直径呈正相关(P<0.05).结论:CRC患者MMR蛋白缺失与肿瘤部位、肿瘤TNM分期、分化程度、肿瘤直径呈正相关.     

胃神经内分泌癌合并微卫星不稳定性一例

错配修复功能缺陷和微卫星不稳定性(MSI)对多种肿瘤的预后判断、药物疗效和Lynch综合征筛选有明确的指导意义。胃神经内分泌癌合并MSI病例报道少见,临床诊断中容易被忽视。该文分析1例胃神经内分泌癌合并MSI病例的临床资料、组织学特征、免疫表型及MSI检查,并复习相关文献,以期进一步探究具有该类特征性改变的肿瘤临床病理特征。     

EGFR和Ki-67在肠癌组织中的表达及临床意义

目的:探讨表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)和Ki-67在结直肠癌(colorectal cancer,CRC)组织中的表达及临床意义.方法:应用免疫组织化学染色检测100例CRC组织中EGFR和Ki-67蛋白的表达,并分析其与临床病理特征的关系.结果:EGFR,Ki-67在CRC中的阳性表达率分别为70.0％,85.0％.EGFR的阳性表达在结直肠癌的不同分化程度和TNM分期中差异有统计学意义(P＜0.05),与淋巴结转移呈正相关(P＜0.05).Ki-67的表达与结直肠癌组织分化程度、淋巴结转移和肿瘤原发部位有关(P＜0.05).在CRC组织中,Ki-67与EGFR蛋白呈显著正相关(r=0.581,P＜0.001).结论:EGFR和Ki-67蛋白的表达与组织分化程度及淋巴结转移密切相关,二者的联合检测有助于结直肠癌恶性程度的判断和预后的估计.     

重度烫伤小鼠血清及去补体后血清诱导巨噬细胞凋亡作用的体外实验研究

目的　探讨重度烫伤小鼠血清及去补体血清在体外诱导腹腔巨噬细胞 (pMФs)凋亡及其机制。方法　采用小鼠 30 %TBSAⅢ度烫伤模型 ,分为正常对照组、烫伤组、去补体烫伤组 ,检测各组伤后 6h血清对体外培养的pMФs分泌超氧阴离子 (O2- )和一氧化氮 (NO)产量的影响 ,碘化丙锭 (PI)染色流式细胞术及凋亡电泳试验测定pMФs的凋亡情况。结果　与正常对照测值比较 ,烫伤血清诱导pMФs分泌较多的O2- 和NO ,去补体后烫伤血清诱导O2- 和NO的分泌量显著降低。烫伤血清诱导pMФs凋亡明显增加 ,去补体后烫伤血清和活性氧阻断剂PDTC及NO阻断剂AG能阻断绝大部分pMФs的凋亡。结论　重度烫伤小鼠血清补体能在体外诱导pMФs凋亡 ,O2- 和NO等炎性介质在其中发挥了重要作用     

CD4~+CD25~+FOXP3~+调节性T细胞及其亚型在结直肠癌组织中分布和临床意义的研究

目的:探讨CD4~+Cff25~+FOXP3~+调节性T细胞(Treg)及其亚型在结直肠癌组织(colorectal carcinoma,CRC)的分布和临床病理特征的关系.方法:收集42例CRC新鲜手术标本,应用冰冻切片、免疫组织化学SP法检测肿瘤组织和癌旁组织中FOXP3~+阳性细胞数,分析其与临床病理特征的相关性;应用双重免疫组化检测FOXP3和ICOS表达,分析FOXP3~+ICOS~+Treg和FOXP3~+ICOS-Treg两种细胞亚型分布情况.结果:CRC患者肿瘤组织中FOXP3分布显著多于癌旁组织,差异显著(P＜0.001);中低分化组Treg细胞数明显高于高分化组(P＜0.01);淋巴结转移组Treg细胞数明显高于无淋巴结转移组(P＜0.05);无远处转移组Treg细胞数明显高于有远处转移组(P＜0.05);FOXP3+ICOS+Treg细胞亚群在CRC组织中高表达,与癌旁组织相比差异显著(P＜0.01).结论:CRC的发生发展与其癌组织局部微环境中Treg数量变化相关,Treg在CRC组织过量表达可能是导致肿瘤免疫逃逸的重要因素之一;抑制CRC微环境中浸润性Treg细胞功能可提高肿瘤局部免疫治疗效果.     

结直肠癌中DNA错配修复功能缺陷与血管密度的相关性

目的:探讨DNA错配修复功能缺陷(deficient mismatch repair,dMMR)在结直肠癌中的临床病理特征及与血管密度的关系.方法:选取2016年1月至2018年12月因结直肠癌于广州市红十字会医院住院行根治手术的患者样本.采用免疫组织化学法检测101例患者样本中MMR蛋白(MLH1、MSH2、MSH6...     

新型脱细胞半月板细胞外基质的制备及其生物相容性的研究

目的探索新型脱细胞半月板细胞外基质(d MECM)的制备方法,并对其细胞相容性进行研究。方法无菌条件下收集新鲜的猪半月板组织,切碎,采用湿法粉碎、差速离心的方法制备dM ECM生物材料。通过天狼猩红、甲苯胺蓝染色方法分别比较天然半月板与dM ECM中胶原以及糖胺聚糖含量的区别;采用Hoechst 33258荧光染色法观察脱细胞后dM ECM中DNA残留情况。将P3代的兔内侧半月板细胞种植在铺有dM ECM的盖玻片上,体外培养7 d后行扫描电镜检测其细胞相容性。结果本实验制备的dM ECM天狼猩红、甲苯胺蓝染色均呈阳性,并且与天然半月板染色类似;dM ECM行Hoechst33258染色呈阴性;扫描电镜结果显示种植于d MECM表面上的半月板细胞黏附紧密,可见大量细胞ECM的分泌。结论本实验制备的dM ECM可以很好地保留天然半月板ECM成分,有效地去除DNA物质,并且具有良好的生物相容性,是未来半月板组织工程领域非常有前景的支架材料。     

大肠癌中微卫星位点不稳定性检测的研究

微卫星不稳定性（MIN）是错配修复基因突变的表型标记，是结直肠癌（CRC）发生的一个新机理。目前，大部分文献报道认为，MIN为HNPCC和其他HNPCC相关癌易患者提供新的筛选方法。在CRC中检测有关微卫星位点的不稳定性，将有助于进一步阐明CRC的发生机制，明确有关基因的作用，选择合适的MIN位点还为CRC的诊断、鉴别诊断和估计预后提供帮助。