宫颈癌组织及细胞株中长链非编码RNA CCAT1 的表达水平及意义

目的:研究宫颈癌组织及细胞株中长链非编码RNA肠癌相关转录因子1(CCAT1)的表达水平及意义。方法:采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测2015年1月至2017年6月接受宫颈癌根治术的48例宫颈癌患者的癌组织、对应癌旁正常组织(距癌3 cm)以及人正常宫颈鳞状细胞系ECT1/E6E7、宫颈癌细胞系Hela、C33A中CCAT1的表达,并分析其临床意义;应用小分子RNA(siRNA)分别转染人宫颈癌细胞系Hela、C33A,构建CCAT1低表达细胞系,采用细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测CCAT1对人宫颈癌细胞增殖的影响,流式细胞仪检测各组细胞周期,蛋白印迹(Western blot)法检测CCAT1对人宫颈癌细胞中RAS相关区域家族1A蛋白(RASSF1A)、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)表达的影响。结果:与癌旁正常组织相比,人宫颈癌组织中CCAT1的表达显著升高(P0.05);与正常宫颈细胞ECT1/E6E7相比,宫颈癌细胞系Hela、C33A中CCAT1的表达显著升高(P0.05);TMN分期较晚、肿瘤大、有淋巴结转移的宫颈癌患者宫颈癌组织中CCAT1相对表达量更高(P0.05);不同年龄、分化程度患者中CCAT1的表达无显著性差异(P0.05);与siRNA-NC组相比,转染siRNA-CCAT1的Hela、C33A细胞中CCAT1、细胞增殖活性、cyclin D1蛋白的表达显著降低,RASSF1A蛋白的表达显著升高。结论:CCAT1的表达上调与宫颈癌发生发展密切相关,沉默CCAT1的表达会抑制宫颈癌细胞的增殖,可能与上调RASSF1A的表达、下调cyclin D1的表达有关。     

乳腺癌组织中长链非编码RNA-00707的表达及与分子病理分型的相关性

目的 探讨长链非编码RNA-00707(long-chain non-coding RNA-00707,Linc00707)在乳腺癌组织中定性与定量表达,及其与乳腺癌分子病理分型的相关性.方法 建立人源脂肪间充质干细胞与人乳腺癌MCF7细胞间接共培养体系,采用LncR-NAs芯片技术获得Linc00707,应用RNAs...     

长链非编码RNA在神经发生中的调控作用

<正>基因组计划的研究成果表明,哺乳动物基因组中仅仅只有不到1%的序列能够转录为mRNA,剩下大部分基因组序列转录为之前被称为"转录噪音"的非编码RNA(noncoding RNA,ncRNA)~([1])。而lncRNA是ncRNA家族中最大的一类~([2])。近几年来,随着二代测序技术的广泛应用,lncRNA的神秘面纱才逐渐被揭开。许多研究表明,lncRNA虽然不编码蛋白质,但它有多种功能,包括招募转录因子来调控基因     

阿尔茨海默病小鼠脑组织长链非编码RNA与信使RNA表达谱及调控网络的分析

目的 分析阿尔茨海默病（AD）小鼠脑组织长链非编码RNA（LncRNA）和信使RNA（mRNA）表达谱,构建竞争内源性RNA（ceRNA）调控网络,探讨差异表达LncRNA在AD发病机制中的潜在作用。方法 选取3只10月龄雄性APP/PS1转基因小鼠作为AD组,3只年龄及体质量相匹配的普通C57小鼠作为对照组。使用基因芯片技术检测2组小鼠脑组织LncRNA和mRNA的表达,筛选出差异表达的LncRNA和mRNA。对部分差异表达的LncRNA进行实时定量聚合酶链反应（qRT-PCR）。对差异表达的mRNA进行基因本体论（GO）和京都基因、基因组百科全书（KEGG）通路分析。随机挑选6个差异表达LncRNA构建ceRNA网络,进行AD的靶基因功能预测分析。结果 与对照组相比,AD组小鼠脑组织差异表达1.5倍以上的LncRNA有933个,其中上调222个,下调711个;差异表达1.5倍以上的mRNA有529个,其中上调189个,下调340个。qRT-PCR检测结果显示,AD组与对照组比较,7个差异表达的LncRNA上调或下调趋势与基因芯片结果一致,差异均有统计学意义（P值均<0.05）。GO和KEGG通路分析结果显示,差异表达基因主要参与氨基酸代谢、炎症反应和免疫反应。ceRNA调控网络靶基因的功能富集分析显示,LncRNA在胰岛素抵抗以及糖尿病并发症中的AGE-RAGE信号通路中显著富集。结论 AD小鼠脑组织LncRNA表达谱发生显著变化,由LncRNA Dgkb、Svip等构建的ceRNA调控网络有助于增进对AD发病分子机制的研究,差异表达的LncRNA或通路有可能成为潜在的治疗靶点。     

长链内含子非编码RNA在基因表达过程中的调控作用

在绝大多数人类基因中都存有非蛋白编码RNA(non-coding RNA,ncRNA).长链内含子ncRNA(long intronic non-coding RNA,lincRNA)是众多ncRNA中的一员,而内含子区域则是具有调节性的ncRNA的关键源.长链内含子ncRNA可通过作为短链RNA的前体、或是与启动子元...     

长链非编码RNA调控巨噬细胞功能的作用机制研究进展

长链非编码RNA(lncRNA)是一类本身不编码蛋白、转录本长度超过200 bp的RNA。lncRNA最初被认为是RNA聚合酶Ⅱ转录的副产物,是一种“噪音”,不具有生物学功能。但近年研究证实,lncRNA参与X染色体沉默、染色体修饰和基因组修饰、转录激活、转录干扰、核内运输等过程,其调控作用被越来越多研究者关注。多个研究表明lncRNA在机体炎症反应过程中发挥重要作用。作为免疫细胞的巨噬细胞在机体免疫功能发挥和炎症反应过程中居主导地位,本文就lncRNA对巨噬细胞的调控作用及机制进行综述。     

长链非编码RNAs调控骨稳态研究进展

骨形成和骨吸收是骨稳态维持的两个重要过程,骨稳态失衡可导致多种骨代谢疾病的发生。长链非编码RNAs(lncRNAs)是一类几乎不具有编码功能的RNAs,在调节基因表达、生命发育及疾病发生发展中起重要调控作用。在骨代谢疾病中多种lncRNAs表达异常,lncRNAs通过调节成软骨分化、成骨分化和骨基质矿化过程,调控骨的形成。并通过影响破骨细胞的分化和成熟,参与骨吸收过程的调节。     

luminal A型乳腺癌组织中长链非编码RNA ENST00000460164的表达及对细胞周期的影响

目的明确lncRNA-ENST00000460164在人luminal A型乳腺癌组织中的表达及作用。方法用RT-q PCR检测ENST00000460164在17例配对的luminal A型乳腺癌及癌旁组织中的表达。将pll3.7-ENST00000460164-shRNA及pll3.7空载体转染MCF-7细胞,用流式细胞计量技术和Western blot检测转染后MCF-7细胞周期及其关键蛋白cyclin D1和P16INK4A的表达。结果长链非编码RNA ENST00000460164在luminal A型乳腺癌组织中呈高表达趋势;在MCF-7细胞中敲低ENST0000460164后,G1期明显延长,S期明显缩短(P0.05);G1期关键调控蛋白cyclin D1表达水平明显降低,P16INK4A表达明显上调(P0.05)。结论 ENST00000460164在luminal A型乳腺癌组织中呈高表达状态;ENST00000460164可能通过调控cyclin D1或者P16INK4A的表达改变细胞周期。     

缺氧诱导血管内皮细胞中长链非编码RNALINC01116的表达及其功能的初步研究

目的探讨缺氧条件下人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)中长链非编码RNA(long non-coding RNA,lnc RNA)LINC01116的表达及其在炎症分子表达调控中的作用。方法采用三气培养箱模拟缺氧环境(1%O_2),常氧对照组细胞于普通培养箱(21%O_2)中常规培养。采用实时荧光定量PCR检测LINC01116及各炎症分子的m RNA水平。Western blot检测缺氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor 1 alpha,HIF-1α)蛋白水平,并用葡萄糖转运体-1(glucose transporter 1,GLUT-1)的转录表达水平反映HIF-1的转录活性。免疫荧光法检测核转录因子NF-κB(nuclear factor of kappa B,NF-κB)活性亚基p65在细胞中的分布,并计算p65入核的细胞比例。结果 q RT-PCR的结果显示,缺氧条件下,LINC01116在HUVEC中持续高表达,与常氧对照组相比,差异均具有统计学意义(P<0.01)。经脯氨酸羟化酶抑制剂(DMOG)和去铁酰胺(DFX)处理后,常氧培养HUVEC中HIF-1α蛋白表达和GLUT-1的转录表达增加,LINC01116表达增高,与溶剂对照组相比,差异均具有统计学意义(P<0.01)。经YC-1和小干扰RNA处理后,缺氧培养HUVEC中HIF-1α蛋白表达和GLUT-1的转录表达下降,LINC01116的表达显著下降,与各对照组相比,差异均具有统计学意义(P<0.01)。缺氧24 h时,HUVEC中炎症分子TNF-α、IL-1β、ICAM、E-SELECTIN的m RNA水平增加,干扰LINC01116表达后,上述炎症分子的m RNA水平显著降低(P<0.01)。免疫荧光的实验显示,缺氧24 h后,细胞核内p65的分布增加,而干扰LINC01116表达后,p65入核的细胞比例下降,与对照组相比,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论缺氧通过HIF-1途径诱导血管内皮细胞LINC01116的表达增加;LINC01116可以通过调控p65入核,调节内皮细胞炎症分子的表达,参与介导缺氧血管内皮细胞炎症反应。     

长链非编码RNA MEG3对肿瘤细胞调控作用的研究进展

长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)是一类长度超过200 nt的不编码蛋白的RNA分子。lncRNA最初被认为是转录噪音,在近年的研究中发现越来越多功能性的lncRNA,其重要性才渐渐被阐述。母系表达基因3(materally expressed gene 3,MEG3)是一种由母系印记基因编码的lncRNA,在对其功能的研究中发现MEG3几乎参与了所有的生理和病理过程,其在多种肿瘤中表现出抑制作用。本文就lnc RNA MEG3对肿瘤细胞调控的作用机制作一综述。     

血浆长链非编码RNA GAS5表达与妊娠期糖尿病胰岛素抵抗的相关性分析

目的 探讨血浆长链非编码RNA(lncRNA)GAS5与妊娠期糖尿病(GDM)患者胰岛素抵抗(IR)的关系。方法 选取171例孕妇并根据OGTT结果分为糖耐量正常(NGT)组、GDM组。采集患者临床资料,实时荧光定量PCR测定血浆LncRNA GAS5水平,分析GDM患者血浆LncRNA GAS5水平与IR的关系。结果 依据孕24～28周OGTT结果进行GDM筛查,其中GDM患者共28例,GDM发病率为16.37%(28/171)。相较于NGT组,GDM组LDL-C、LncRNA GAS5水平降低,FPG、1hPG、2hPG、TG、FIns、HOMA-IR增高(P<0.05)。GDM患者血浆lncRNA GAS5水平与TG不相关(P>0.05),与HDL-C呈正相关,与FPG、1hPG、2hPG、LDL-C、TC、FIns、HOMA-IR呈负相关(P<0.05)。FPG、FIns、lncRNA GAS5是HOMA-IR的影响因素。结论 GDM患者血浆LncRNA GAS5水平降低,且与GDM患者IR相关。     

长链非编码RNA SNHG5在胰腺癌中的表达及作用研究

目的 研究长链非编码RNA小核仁RNA宿主基因5(lncRNA SNHG5)在胰腺癌组织中的表达水平及其临床意义,并探讨lncRNA SNHG5在胰腺癌中的生物学作用.方法 采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测lncRNA SNHG5在42例胰腺癌组织及其邻近的非癌组织中的相对表达量,并分析胰腺癌组织中SNHG...     

长链非编码RNA对神经干细胞的调控作用及其机制

正长链非编码RNA(LncRNA)作为一种重要的细胞功能调控因子引起越来越多广泛的关注。它是一种长度在200-100000 nt之间的RNA分子,位于细胞核或细胞质内,不编码蛋白质。在基因组转录产物中,lncRNA所占数量比例远远超过编码RNA的比例,与DNA、RNA、蛋白质相互作用参与细胞内多种调控过程,在生命活动调控网络中有极其重要的作用。lncRNA目前是遗传学研究的热点之一。近年来许多研究表明,lncRNA在神经干细胞的自我更新、增殖和分化中     

不同放射敏感性食管癌细胞株长链非编码RNA HOTAIR表达水平的分析

目的分析放射敏感性不同食管癌细胞株长链非编码RNA HOTAIR的表达水平及其与放射敏感性之间的关系。方法以3种食管癌细胞(KYSE510、ECA109、KYSE410细胞)为研究对象。采用RT-qPCR检测细胞中HOTAIR mRNA表达水平,采用平板克隆形成实验检测不同剂量X射线照射下的存活分数(survival fraction, SF)。采用t检验或方差分析差异,Pearson法进行相关性分析。结果 3种食管癌细胞(KYSE510、ECA109、KYSE410)2 Gy照射细胞SF2分别为0.38±0.04、0.63±0.03、0.67±0.05,KYSE410的放射敏感性最低,KYSE510放射敏感性最高。HOTAIR mRNA表达水平与SF2呈正相关(r=0.790,P0.05)。KYSE510细胞HOTAIR表达水平放疗前比放疗后高2.30倍,KYSE410细胞HOTAIR表达水平放疗后比放疗前高2.81倍。结论 HOTAIR可能成为食管癌细胞放疗敏感性的预测分子,其高表达提示放疗抵抗。     

肺癌组织中长链非编码RNA-H9的表达与患者免疫功能、炎症反应因子及预后的关系

目的:探讨肺癌组织中长链非编码RNA-H19的表达与患者免疫功能、炎症因子以及临床预后的关系.方法:纳入接受手术治疗的80例肺癌患者,qRT-PCR法检测肺癌及癌旁组织中LncRNA-H19的表达;免疫比浊法检测患者血清免疫球蛋白;流式检测T细胞亚群;ELISA法检测炎症反应因子的表达.比较LncRNA-H19的表达及...     

长链非编码RNA GASL1在乳腺癌组织及细胞系中的表达及作用

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA) GASL1在乳腺癌中的表达及其对乳腺癌癌细胞增殖和凋亡的影响。方法RT-qPCR检测癌组织、癌旁组织、多个乳腺癌细胞系(MDA-MB-231、MDA-MB-468和SK-BR-3)及正常乳腺细胞HBL-100中lncRNA GASL1的表达水平。MCF-7细胞经pc DNA3. 1质粒过表达lncRNA GASL1,或siRNA干扰lncRNA GASL1表达后,运用MTT法检测细胞增殖; caspase-3活力检测试剂盒检测caspase-3活力; Western blot检测Bax和Bcl-2蛋白表达。结果 LncRNA GASL1在乳腺癌组织和乳腺癌细胞中表达水平降低(P 0. 05);过表达lncRNA GASL1可抑制MCF-7的增殖,促进其凋亡(P0. 05);干扰lncRNA GASL1表达可促进MCF-7的增殖,抑制其凋亡(P0. 05)。结论 lncRNA GASL1在乳腺癌中表达水平降低,通过调节乳腺癌细胞增殖和凋亡参与乳腺癌的发生发展。     

长链非编码RNA调控肿瘤细胞凋亡的研究进展

长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)是一类长度>200个核苷酸、通常不编码蛋白质的RNA。近年研究表明,lncRNA在肿瘤的的发展过程中发挥抑癌或促癌作用,参与细胞增殖、凋亡等过程。本综述简要介绍lncRNA的生物学功能及其调控细胞凋亡的研究进展。     

长链非编码RNA CRNDE调控胶质瘤细胞凋亡

目的 探讨长链非编码RNA CRNDE在胶质瘤细胞凋亡中发挥的功能和可能的作用机制.方法 将CRNDE基因干扰siRNA转染人胶质瘤U87细胞系,利用PE Annexin-V/7-AAD双染,流式细胞仪检测细胞凋亡情况,并利用Western方法检测细胞凋亡关键蛋白的表达变化.结果 siRNA干扰CRNDE表达的胶质瘤细胞中,细胞凋亡程度增加,凋亡相关蛋白Caspase3、Caspase7、Caspase9、PARP表达量明显升高.结论 CRNDE可能通过降低凋亡相关蛋白活性及表达水平,抑制胶质瘤细胞凋亡能力.