FNAB联合BRAF基因突变检测在术前甲状腺结节诊断中的应用

目的探讨术前甲状腺结节诊断中细针穿刺活检(fine-needle aspiration biopsy,FNAB)联合丝/苏氨酸特异性激酶基因V600E(BRAF V600E)突变检测的应用价值。方法选取88例甲状腺结节患者,经超声检查TI-RADS分级Ⅳ~Ⅴ级,均行FNAB联合BRAF V600E突变检测,并分析其在术前诊断中的应用价值。结果随着TI-RADS分级的增高BRAF突变阳性率显著增高(P0.05),在恶性病变中BRAF V600E突变率较高(80.4%),FNAB检测与术后病理符合率为71.6%,联合BRAF V600E突变检测与术后病理符合率为86.4%,联合检测明显优于单独FNAB检测(χ~2=5.783,P=0.016)。结论术前行FNAB联合BRAF V600E突变检测能够精确FNAB的诊断,提高术前诊断率。     

甲状腺穿刺细胞学及其BRAF V600E突变检测的临床价值

甲状腺穿刺细胞学检查联合BRAF V600E检测有利于提高术前甲状腺乳头状癌的检出率,而细胞学结果判读的影响因素繁多,BRAF V600E突变的临床应用价值尚不明确。该文就甲状腺穿刺技术进展、甲状腺穿刺细胞学判读、BRAF V600E突变检测及其临床应用予以综述。     

新疆地区甲状腺乳头状癌中BRAF V600E基因的表达及意义

目的探讨新疆地区BRAF V600E基因点突变在甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)中的表达,及其与临床病理特征的关系。方法收集原发性PTC 178例,石蜡包埋组织经QIAGEN试剂盒提取DNA,经Taq Man探针荧光定量PCR技术检测PTC中BRAF基因点突变。结果 178例原发性PTC中BRAF V600E基因点突变142例,突变率为79.8%(142/178)。患者年龄(≥45岁)、肿瘤直径(≤1 cm)、被膜外侵犯BRAF V600E基因点突变率高(P均0.05),而BRAF V600E基因点突变与患者性别、多灶性及淋巴结转移灶和肿瘤部位均无相关性(P均0.05)。结论新疆地区PTC中BRAF V600E基因点突变与临床病理特征密切相关,且具有一定特异性,可作为PTC诊断提供依据。     

一种BRAF基因突变检测方法的建立

目的 建立一种适用于临床样品检测的BRAF基因V600E突变的检测方法.方法 利用已知BRAF基因野生型、突变型样品,以BRAF基因15外显子V600E突变为靶位点设计特异性扩增引物和测序引物,建立BRAF基因V600E突变的SYRB Green PCR-Sanger测序检测方法,并对该方法进行方法学评价和21例结直肠癌临床样品检测.结果 成功建立了BRAF基因V600E突变SYRB GreenPCR-Sanger测序检测方法,该方法的灵敏度达5.0×101拷贝/ul,检测线性范围5×101～ 5×107拷贝/ul,且检测的重复性好.检测21例结直肠癌临床样品,突变率为9.5％(2/21).结论 成功建立了BRAF基因V600E突变SYRB Green PCR-Sanger测序检测方法,该方法可用于临床样品的检测.     

甲状腺乳头状癌BRAF V600E、TERT和RET分子检测及与临床病理特征的关系

目的 探讨甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma, PTC)中三种驱动基因BRAF V600E、TERT和RET与临床病理特征的关系。方法 收集4 678例PTC,2 637例患者行BRAF V600E和TERT启动子检测(C250T和C228T位点),另2 041例患者行BRAF V600E和RET检测，并分析以上3种基因与临床病理特征的关系。结果 PTC中BRAF V600E、TERT及RET基因阳性检出率分别为88.9%(4 161/4 678)、0.5%(12/2 637)、3.7%(75/2 041)。BRAF V600E突变仅与被膜侵犯及桥本甲状腺炎伴随相关(P<0.05);TERT启动子突变与患者年龄、肿瘤最大径、肿瘤数量、淋巴结转移、TNM分期均有关(P<0.05);RET基因融合与患者性别、肿瘤最大径、淋巴结转移、桥本甲状腺炎伴随有关(P<0.05)。双基因改变患者合计12例，包括1例BRAF V600E突变伴CCDC6-RET(Exon1-Exon12)基因重排变异，1例BRAF V600E突变伴NCOA4-RET(...     

甲状腺乳头状癌中CyclinD1表达和BRAF（V600E）突变的相关性及意义

目的：探讨甲状腺乳头状癌( papillary thyroid carcinoma, PTC)中Cyclin D1表达上调和BRAF( V600E)突变的相关性及临床意义,分析二者在PTC发生、发展中的作用。方法采用免疫组化EnVision两步法检测52例PTC和52例甲状腺良性病变(结节性甲状腺肿25例、桥本甲状腺炎15例、滤泡性腺瘤12例)中Cyclin D1的表达;采用PCR法及DNA测序法检测上述标本中BRAF(V600E)突变状况,分析Cyclin D1表达上调和BRAF(V600E)突变的相关性及与PTC临床病理特征的关系。结果52例PTC中Cyclin D1阳性率为84．6%,免疫反应评分(4．6±2．4)与甲状腺良性病变(1．3±1．6)比较差异有统计学意义(t=8．525,P<0．01);Cyclin D1表达上调与肿瘤淋巴结转移、包膜侵犯、肿瘤分期(Ⅲ+Ⅳ期)及BRAF(V600E)突变相关(P<0．05),与患者年龄、性别、肿瘤结节数目及直径无关。52例PTC中BRAF(V600E)突变率63．5%,甲状腺良性病变中突变率为0,差异有统计学意义(P<0．01),BRAF(V600E)突变与肿瘤淋巴结转移、包膜侵犯及肿瘤分期(Ⅲ+Ⅳ期)密切相关(P<0．05),与患者年龄、性别、肿瘤结节数目及直径无关。 BRAF(V600E)突变组中Cyclin D1表达强度更强,阳性率显著高于野生组(突变组100%,野生组57．9%),免疫表达评分均值高于野生组[突变组(5．7±1．6),野生组(4．0±2．5)],两组比较差异有统计学意义(t=2．652,P<0．05)。结论 Cyclin D1表达上调与BRAF(V600E)突变呈正相关,二者与PTC的发生、发展密切相关,可作为评估PTC侵袭转移能力的指标。     

实时剪切波弹性成像杨氏模量最大值诊断甲状腺乳头状癌BRAF V600E基因突变的价值

目的:探究实时剪切波弹性成像（SWE）杨氏模量最大值诊断甲状腺乳头状癌（PTC）鼠类肉瘤滤过性毒菌致癌同源体B1（BRAF）V600E基因突变的价值。方法:回顾性分析2018年1月~2019年6月宿迁市第一人民医院收治的110例PTC患者共124个结节的临床及超声影像学资料。患者经病理学检查均确诊为PTC,并完成了BRAF V600E基因检测以及SWE检查,临床资料完整。通过比较V600E基因突变型与野生型PTC的SWE检查结果,并绘制患者Emax值的ROC曲线,分析Emax值对PTC患者BRAF V600E基因突变的诊断效能。结果:BRAF基因检测结果显示:124个PTC结节BRAF基因检测V600E野生型共37个,V600E突变型共87个。野生型PTC结节的SWE图像多以蓝色为主,而突变型主要表现为红橙相间彩色混杂的图像。突变组PTC结节Emax、Emean、Eratio值均明显大于野生组,比较差异具有统计学意义（P<0.05）,ROC曲线分析显示:Emax值诊断V600E突变的AUC=0.846>0.5（95%CI:0.808~0.885, P<0.01）;Cut-off值为43.65 kPa,此时敏感度为91.45%,特异性为68.23%。以Emax≥43.65 kPa为临界值对124个结节进行诊断,结果显示:SWE诊断PTC结节为V600E基因突变型90个,野生型34个,正确率为86.29%;SWE诊断结果与基因检测结果一致性显著（Kappa值=0.665, P<0.01）。结论:PTC BRAF V600E基因突变型与野生型的SWE影像学特征具有明显差异,应用SWE的Emax值诊断PTC结节V600E基因突变的正确率和敏感性均较高,诊断价值显著,值得在临床上推广应用。     

分化型甲状腺癌中BRAF V600E突变分析

目的探讨分化型甲状腺癌中BRAF V600E突变与临床病理特征的关系。方法收集甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)80例(其中经典型67例、滤泡亚型8例、嗜酸细胞亚型3例、高细胞亚型2例)、滤泡癌5例,其中30例PTC取相应癌旁组织,全部送基因检测室检测BRAF V600E突变情况。结果 80例PTC中BRAF V600E突变率为65.0%,5例滤泡癌及30例癌旁组织中未发现BRAF V600E突变;BRAF V600E突变与患者年龄、肿瘤包膜侵犯、淋巴结转移及TNM分期有关。PTC亚型中,经典型和高细胞亚型的BRAF V600E突变率较高(70.1%、100.0%),滤泡亚型的突变率较低(33.3%)。结论PTC中BRAF V600E突变可能与患者年龄有一定相关性,还与包膜侵犯、淋巴结转移及TNM分期有关,经典型和高细胞亚型的BRAF V600E突变率较高,明显高于滤泡亚型。     

BRAF基因突变在甲状腺乳头状癌中的临床意义

目的：探讨BRAF V600E基因突变与甲状腺乳头状癌的临床相关性。方法：采用PCR技术和直接测序法,对63例甲状腺乳头状癌患者和45例其他类型甲状腺疾病患者石蜡组织BRAF V600E基因突变进行检测。结果：甲状腺乳头状癌组中32例存在突变;而在其他类型甲状腺疾病组中未发现突变。BRAF V600E基因突变在甲状腺乳头状癌不同肿瘤直径组之间的比较差异以及在有无区域淋巴结转移组之间的比较差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论：BRAF V600E基因突变与甲状腺乳头状癌的发生、肿瘤的大小和区域淋巴结的转移有关。     

BRAFV600E基因突变对甲状腺良恶性结节鉴别的临床意义

目的分析BRAF~(V600E)基因突变在甲状腺良恶性结节鉴别诊断中的应用价值。方法对2015年10月～2018年2月南昌大学第二附属医院诊治的284例行甲状腺结节切除术或细针穿刺活检术的甲状腺结节患者进行分析,经病理学诊断分为良性结节组(A组)和恶性结节组(B组);B组按BRAF~(V600E)基因检测结果分为B1组(BRAF~(V600E)基因突变型组)、B2组(BRAF~(V600E)基因野生型组)。比较实验对象资料、甲状腺功能、BRAF~(V600E)基因突变情况;比较B组患者各临床病理特征分层的BRAF~(V600E)基因突变率。结果 A组未见BRAF~(V600E)基因点突变,B组BRAF~(V600E)基因突变率为59.0%,两组差异有统计学意义(P0.05)。B组中甲状腺乳头状癌患者BRAF~(V600E)基因突变率为64.58%。甲状腺滤泡状癌及髓样癌中均未检测到BRAF~(V600E)基因突变。B组BRAF~(V600E)基因突变率在结节是否多灶性、结节直径、患者性别方面差异无统计学意义(P0.05);在患者年龄≥45岁、结节点状钙化、包膜外浸润、颈部淋巴结转移、合并桥本甲状腺炎、甲状腺影像报告和数据系统分类分层中BRAF~(V600E)基因突变率的差异有统计学意义(P0.05)。结论 BRAF~(V600E)基因在鉴别甲状腺良恶性结节方面作用显著,且在甲状腺乳头状癌中突变率高,在甲状腺乳头状癌诊断中特异性好。     

甲状腺乳头状癌BRAF V600E突变与肿瘤相关成纤维细胞的关系

目的探讨甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma, PTC)中BRAF V600E突变与肿瘤相关成纤维细胞(cancer-associated fibroblasts, CAF)的关系。方法收集PTC标本890例,采用ARMS-PCR法检测BRAF V600E基因突变,应用免疫组化EnVision两步法检测α-SMA的表达以标记CAF的增生,分析两者的相关性及与临床病理特征的关系。结果 PTC中CAF增生率为85.51%,CAF增生与PTC腺外侵犯、钙化有关。BRAF V600E突变率为70.67%,BRAF V600E突变与肿瘤直径、被膜侵犯、CAF增生相关,BRAF V600E突变与患者性别、年龄、病灶数量、腺外侵犯、钙化、TNM分期、淋巴结转移均无关。结论 CAF增生提示肿瘤侵袭能力增强,BRAF V600E突变的PTC细胞可能与CAF相互作用,改变肿瘤微环境,使PTC更易发生腺外侵犯。     

BRAF VE1抗体在结直肠癌中检测BRAF V600E突变的应用

目的使用BRAF VE1抗体免疫组化法检测结直肠癌样本中BRAF V600E位点突变,并分析其敏感性和特异性。方法采用ARMS法和免疫组化法检测36例结直肠癌组织中BRAF V600E突变状态,并使用测序验证。结果免疫组化法检测结直肠癌样本中BRAF VE1抗体的敏感性为100%,特异性为62.9%。与甲状腺样本BRAF V600E突变相比,结直肠癌标本为细胞质着色,染色呈棕黄色。结论免疫组化法可高效、快速、低成本初步筛选结直肠癌的BRAF V600E突变,但需分子检测进一步确认。     

甲状腺乳头状癌合并桥本甲状腺炎中BRAF V600E蛋白的表达及临床意义

目的通过分析BRAF V600E蛋白在甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma, PTC)合并桥本甲状腺炎(Hashimoto’s thyroiditis, HT)中的表达情况,探讨其表达的临床病理意义。方法选取2017年1月～2019年7月间行手术治疗且行中央淋巴结清扫的465例经典型PTC为研究对象,将其分为PTC合并HT组(139/465)和单纯PTC组(326/465),用免疫组化EnVision法检测两组中BRAF V600E蛋白表达情况,并对检测结果及临床病理特征进行统计学分析。结果 PTC合并HT组中BRAF V600E蛋白的阳性率(59.71%)低于单纯PTC组(69.94%),差异有统计学意义(P=0.032);PTC合并HT组中BRAF V600E蛋白阴性组患者发病年龄55岁的比例更高(92.86%);与单纯PTC组相比,PTC合并HT组女性(88.49%)患病率明显高于男性(67.79%),差异有统计学意义(P0.001);PTC中HT或BRAF V600E蛋白表达与肿瘤大小、肿瘤多发、中央区淋巴结转移均无关(P0.05)。结论 PTC合并HT患者BRAF V600E蛋白的阳性率较低。PTC中HT或BRAF V600E蛋白表达与肿瘤大小、肿瘤多发、中央区淋巴结转移无关。     

甲状腺细针穿刺细胞学漏诊与误诊15例分析

目的探讨甲状腺细针穿刺细胞学(fine needle aspiration cytology,FNAC)诊断甲状腺良、恶性病变漏诊率与误诊率。方法收集980例甲状腺患者在超声引导下行FNAC检查,并分析15例甲状腺FNAC检查漏诊与误诊的原因,以及195例穿刺后行手术患者的FNAC诊断结果与术后病理诊断的一致性。结果FNAC结果提示恶性检出率为11.4%(112/980),穿刺后行手术的患者195例,术后病理诊断良性128例,FNAC诊断符合率为91.40%(117/128)。术后病理诊断,乳头状癌60例,FNAC诊断符合率为92.22%(56/60);FNAC检查误诊11例,漏诊4例。结论超声引导下甲状腺FNAC检查对甲状腺术前良、恶性病变的诊断,尤其对乳头状癌的诊断有一定的漏诊率和误诊率,存在一定的局限性。随着细胞学研究的不断深入,联合基因学及免疫组化协助诊断,更好地提高甲状腺FNAC的诊断水平。     

BRAF V600E和TERT启动子突变与甲状腺乳头状癌临床病理特征的关系

目的探讨鼠类肉瘤滤过性酶菌致癌同源体B1(BRAF)V600E基因突变和端粒酶逆转录酶(TERT)启动子突变在甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)中的发生率及其与临床病理特征的关系。方法收集62例PTC患者新鲜冷冻组织进行显微切割,收集癌细胞并提取DNA,PCR扩增后利用测序法对PTC患者BRAF V600E和TERT启动子突变进行检测,并收集62例患者的临床病理资料进行统计学分析。结果 62例PTC中58例(94%)在BRAF T1799A处发生突变。有13例(21%)在TERT启动子C228T处发生突变。PTC患者中,BRAF V600E基因突变仅与肿瘤大小有关(P0.05),TERT启动子突变与PTC患者年龄、肿瘤大小有关(P0.05)。结论 BRAF和TERT启动子突变对PTC患者的临床病理表现产生一定影响,对患者的预后评估具有指导意义。     

比较实时荧光 PCR 法与 Sanger 测序法检测甲状腺乳头状癌BRAF基因突变

目的：分析实时荧光PCR(real-time PCR)法与Sanger测序法检测甲状腺乳头状癌患者BRAF V600E基因突变的阳性率及符合率。方法收集312例甲状腺乳头状癌手术切除标本,分别采用real-time PCR法和Sanger测序法检测甲状腺乳头状癌中BRAF V600E基因突变情况。结果312例甲状腺乳头状癌标本real-time PCR法和Sanger测序法检出BRAF基因突变的阳性率分别为65．4%(204/312)、63．8%(199/312)。 BRAF基因突变与患者性别无关,与患者年龄相关;两种方法检测结果总符合率为98．4%。结论 real-time PCR法适用于BRAF基因突变的检测。     

BRAF V600E基因突变在发育不良痣综合征的黑色素瘤中的表达及意义

目的探讨源于发育不良痣综合征的黑色素瘤中BRAF基因的突变及其与预后的关系。方法收集2006年1月1日～2016年12月31日甘肃省人民医院发育不良痣综合征患者,术后病理检查均为黑色素瘤者5例,组织标本行BRAF V600E基因突变检测。结果源于发育不良痣的黑色素瘤免疫组化标记HMB-45、Melan-A蛋白高表达,肿瘤组织均无BRAF V600E基因突变,随访患者健康状况良好。结论源于发育不良痣综合征的黑色素瘤极少有BRAF V600E基因突变,比其他来源的黑色素瘤侵袭性低,预后相对较好。     

cyclin D1表达及分子检测在术前甲状腺细针穿刺不确定性病变中的诊断价值探讨

目的评估细胞周期蛋白D1(cyclin D1)免疫细胞化学染色联合小组合的分子检测, 在Bethesda分类(TBSRTC)不确定类别(Ⅲ～Ⅴ级)细胞学诊断中的价值。方法收集2018年12月至2021年12月北京医院病理科96例有组织病理学随访结果、术前穿刺细胞学诊断为TBSRTC Ⅲ、Ⅳ及Ⅴ级的病例。细胞学涂片经退染cyclin D1免疫细胞化学染色, 及刮取涂片行BRAFV600E单基因或5基因(BRAF、N-RAS、H-RAS、K-RAS和TERT)检测。利用受试者工作特征曲线(ROC)和ROC曲线下面积(AUC)评估cyclin D1诊断甲状腺恶性肿瘤的最佳临界值。通过交叉列联表评价各指标的特异度、灵敏度、阳性预测值(PPV)和阴性预测值(NPV), 并评价其诊断的准确性。结果入组的96例甲状腺结节中, 细胞学诊断TBSRTC Ⅲ级42例, Ⅳ级10例, Ⅴ级44例。其中女性79例, 男性17例, 中位年龄47岁(范围25～75岁)。甲状腺细胞cyclin D1核染色阳性阈值设定为7.5%, 其诊断甲状腺恶性肿瘤的PPV为100%, NPV为57.1%, 灵敏度为81.0%, ...     

TI-RADS联合超声造影在甲状腺良恶性结节鉴别诊断中的应用价值

目的:旨在分析甲状腺影像学报告数据系统(TI-RADS)、超声造影(CEUS)及两者联合运用在甲状腺良恶性结节鉴别诊断中的应用价值。方法:选取重庆市中医院2015年1月~2016年12月收治的87例甲状腺结节患者作为研究对象,患者均行CEUS、TI-RADS及两者联合检查,以手术病理学检查结果为金标准,比较3种检查方式的甲状腺良恶性结节灵敏度、特异度及准确率。结果:87例患者中共有117个甲状腺结节,良性结节95个,恶性结节22个,结节最大直径0.54~5.19 cm,平均直径(1.50±0.76)cm;TI-RADS分级诊断甲状腺良恶性结节灵敏度、特异度、准确度分别为45.45%(10/22)、64.21%(61/95)、60.68%(71/117);甲状腺良恶性结节在早期增强强度、增强均匀、周边环状增强图像中存在明显差异(P0.05),CEUS诊断甲状腺良恶性结节灵敏度、特异度、准确度分别为72.72%(16/22)、92.63%(88/95)、91.45%(104/117);72.72%(16/22)、74.73%(71/95)、74.35%(87/117);95.45%(21/22)、31.57%(30/95)、43.58%(51/117);TI-RADS分级联合CEUS诊断甲状腺良恶性结节灵敏度、特异度、准确度分别为90.90%(20/22)、95.78%(91/95)、94.87%(111/117)。结论:TI-RADS联合CEUS可有效提高甲状腺良恶性结节鉴别诊断的灵敏度、特异度及准确率。     

恶性黑色素瘤患者肿瘤组织中BRAF基因突变的?分子病理检测

目的:探讨恶性黑色素瘤患者肿瘤组织中BRAF基因突变情况.方法:应用Taqman-ARMS方法检测164例恶性黑色素瘤患者肿瘤组织中BRAF基因突变情况.结果:恶性黑色素瘤患者肿瘤组织中BRAF基因总突变率为11.59%(19/164),均为V600E突变,BRAF基因突变在黑色素瘤亚型和临床分期Ⅰ或Ⅱ中差异有统计学意义(P<0.05).结论:恶性黑色素瘤患者中BRAF基因存在一定的突变率,且慢性日光损伤型或非慢性日光损伤型及Ⅲ或Ⅳ期恶性黑素瘤BRAF基因突变多见.