苏木酮A抑制顺铂所致肾损伤中炎症介质的表达

目的探讨苏木酮A(sappanone A,SA)能否逆转顺铂(Cisplatin,CP)所致的肾毒性损害。通过SA干预CP所致肾损伤,观察炎症因子的改变,探讨SA逆转CP肾损伤可能的机制,为临床使用SA改善CP所致肾损害的应用提供实验理论依据。方法将Balb/c小鼠随机分为5组(每组8只):空白对照组(Control组)、CP组、干预组(CP+SA低剂量组、CP+SA中剂量组、CP+SA高剂量组)。全自动生化分析仪测定小鼠血清中BUN和Cr的含量; HE染色后于光镜下观察肾脏病理组织学变化;实时荧光定量PCR检测肾组织中TNF-α、IL-1β的表达。ELISA法检测TNF-α、IL-1β蛋白表达水平。Western blot法检测肾组织中p-p65、p65、IκB、p-IκB及β-actin的表达。结果 (1) SA能够逆转CP所致肾组织损伤和肾功能降低;(2) SA能够逆转CP引起的肾组织中炎症因子表达的增加,且呈剂量依赖性;(3) SA能够降低CP所致的肾组织中p-NF-κB p65的表达。结论SA能够逆转CP所致的肾损伤,可能与改善炎症反应有关,其机制可能与抑制NF-κB的激活有关。     

鹿茸水提物减轻顺铂所致的小鼠肾损伤

目的:探讨梅花鹿二杠茸和三岔茸水提物对顺铂(CDDP)所致小鼠肾损伤的影响。方法:采用灌胃给药方式,用顺铂(15 mg/kg)诱导小鼠肾损伤模型,测定小鼠肾脏指数(KI)、血清肌酐(SCr)、血尿素氮(BUN)、肾脏组织中超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及丙二醛(MDA)含量,并对肾脏组织进行HE染色,观察肾脏病理学变化,研究梅花鹿二杠茸和三岔茸的水提物各剂量对小鼠肾损伤的影响。结果:与顺铂组相比,各剂量鹿茸水提物可显著降低CDDP诱导肾损伤小鼠SCr、BUN水平及肾脏MDA含量,提高SOD和GSH-Px的活性(P0.05);明显改善肾组织病理学形态,减轻CDDP对肾小管上皮细胞的损伤程度,且同等浓度下,与三岔茸相比,二杠茸水提物能更好地改善肾功能及减轻病理损伤。结论:鹿茸水提物减轻顺铂引起的小鼠肾损伤,其作用机制可能与鹿茸水提物增强小鼠肾脏组织的抗氧化能力有关。     

葡萄籽原花青素对顺铂所致小鼠肾毒性作用的影响

 目的:探讨葡萄籽原花青素（GSP）对顺铂（CP）肾毒性作用的防护及可能机制。方法:雄性C57小鼠分为4组：正常对照组（N组,n=10）、CP组（腹腔注射20 mg/kg CP,n=20）、GSP组（第1天及第3天灌胃GSP 500 mg/kg,n=15）和CP+GSP组（腹腔注射CP 30 min前给予500 mg/kg GSP灌胃,第3天灌胃等量的GSP,n=20）。给药后第5天取血,肾组织病理HE染色,应用蛋白印迹法和免疫组化法检测小鼠葡萄糖调节蛋白78(GRP78)和磷酸化细胞外信号调节激酶(p-ERK)的蛋白表达。结果:与N组比较,CP组肾脏指数升高,血尿素氮和血清肌酐水平升高（P＜0.05）,肾病理损伤明显,肾组织GRP78和p-ERK蛋白表达增加（P＜0.05）。与CP组相比,CP+GSP组肾脏指数降低,血尿素氮和血清肌酐水平下降（P＜0.05）,肾病理损伤减轻,GRP78和p-ERK蛋白表达明显降低（P＜0.05）。结论:GSP能明显降低CP所致的肾毒性,其机制与GSP下调CP导致的内质网应激有关。     

Fgl2在顺铂诱导的小鼠急性肾损伤中的作用及机制研究

目的 研究纤维蛋白原样蛋白2(fibrinogen-like protein 2,Fgl2)在顺铂诱导的小鼠急性肾损伤(cisplatin-induced acute kidney injury,Cis-AKI)中的作用及其机制.方法 选取8～10周,雄性,体质量(20±2)g,C57BL/6背景的野生型的Fgl2+/...     

真武汤对阿霉素所致大鼠肾损伤的治疗作用

 目的：研究真武汤对阿霉素肾病模型（adriamycin nephropathy,AN）大鼠足细胞裂孔隔膜蛋白分子（podocin和nephrin）表达的影响,探讨其防治阿霉素肾病大鼠蛋白尿的机制。方法：采用常规生化、病理方法（包括HE染色、Masson染色及电镜）观察真武汤对AN模型所致纤维化大鼠肾功能、肾组织形态学变化及羟脯氨酸（Hyp）含量的改善作用;采用蛋白免疫印迹等方法探索真武汤对足细胞标志蛋白podocin和nephrin信号分子表达的影响。结果：模型组大鼠尿蛋白（TP）、血尿素氮(BUN)和血清肌酐（SCr）显著增加,肌酐清除率（CCr）显著下降（P<0.05）;Hyp显著增加（P<0.05）;肾组织podocin和nephrin蛋白表达水平显著降低（P<0.05）;肾小管萎缩,基底膜增厚;足突扁平、融合、消失。肾小球集中现象明显;部分肾小管扩张,肾小管上皮细胞变性,蛋白管型明显;肾间质纤维组织增生和较多炎症细胞浸润。与模型组相比,各治疗组TP、BUN和SCr均有一定程度的下降,CCr显著提高;Hyp明显下降（P<0.05）;真武汤组肾组织podocin和nephrin蛋白表达水平显著提高（P<0.05）;肾组织病变程度轻于模型组。结论：真武汤能减少阿霉素肾病大鼠肾组织羟脯氨酸含量,改善肾功能及减轻病理损伤。 真武汤降低模型大鼠蛋白尿的作用可能与其维持足细胞podocin和nephrin的表达有关。     

脂氧素A4对横纹肌溶解所致急性肾损伤大鼠肾的保护作用

目的:探讨脂氧素A4(LXA4)是否能减轻横纹肌溶解所致急性肾损伤(AKI)大鼠肾损害程度并探讨其机制。方法:将SD大鼠随机分成健康对照组、AKI组和LXA4干预组(造AKI模型同时腹腔注射LXA4);采用大鼠双侧后腿注射甘油建立横纹肌溶解所致AKI动物模型。常规生化方法检测血肌酐、血尿素氮的水平,HE染色观察肾脏组织学改变,ELISA法检测血清TNF-α及IL-6水平,比色法检测肾组织MPO的活性,Western blot法检测肾组织NF-κB的蛋白表达。结果:与AKI组相比,LXA4干预组的血尿素氮及肌酐水平明显下降(P<0.05),肾脏病理损害明显改善;血清TNF-α及IL-6水平表达明显下降(P<0.05),肾组织MPO的活性及NF-κB表达明显下降(P<0.05)。结论:LXA4对横纹肌溶解所致急性肾损伤有明显的保护作用,可能与LXA4降低肾组织NF-κB活化,减少炎症因子的产生和炎症细胞的浸润有关。     

白藜芦醇联合顺铂对神经胶质瘤细胞的作用

目的： 探讨白藜芦醇联合顺铂对神经胶质瘤细胞C6 的作用。方法：不同浓度的白藜芦醇与顺铂单独联合 作用于神经胶质瘤细胞C6,24、48 h 和72 h 后,CCK8法检测增殖,并选出合适浓度进行后续试验;不同浓度的 药物作用于细胞24 h 后,吖啶橙法观察细胞形态变化、流式细胞仪检测细胞凋亡、细胞周期和免疫印迹检测蛋白 Bax、Bcl-2 和p-Erk1/2 变化。结果：白藜芦醇与顺铂能协同抑制神经胶质瘤细胞C6 的增殖。联合用药后细胞周 期抑制在S 期。免疫印迹结果显示凋亡蛋白Bax 的表达量增加,而凋亡抑制蛋白Bcl-2 的表达量减少,细胞外调 节蛋白激酶p-Erk1/2 的表达量减少。结论：白藜芦醇与顺铂联合对神经胶质瘤细胞具有相互增敏作用,能够协同 抑制细胞增殖,并通过Ras-Raf-MEK-Erk 信号通路促进其凋亡。     

褪黑素对缺氧状态下N2A细胞的抗氧化应激作用及机制研究

目的探究褪黑素(MT)对缺氧状态下小鼠神经母细胞瘤(N2A)细胞超氧化物歧化酶(SOD)、氧自由基(ROS)、丙二醛(MDA)含量变化的影响。方法取原代培养的小鼠神经母细胞瘤细胞随机分为对照组、缺氧组、MT治疗组,治疗组以5μg/m L的褪黑素工作液孵育24 h建立治疗模型。除对照组外的细胞培养箱中通入95%N2+5%CO2的混合气体,在低浓度血清中培养24 h,使细胞处于氧胁迫状态,建立N2A细胞缺血缺氧模型。采用黄嘌呤氧化法、荧光定量检测法及硫代巴比妥酸比色法检测N2A细胞内SOD、ROS、MDA含量变化。结果与对照组相比,缺氧组与MT治疗组的SOD表达量均有明显降低,差异具有统计学意义(P0.05);MT治疗组与缺氧组相比细胞SOD表达量有显著恢复,差异具有统计学意义(P0.05)。与对照组相比缺氧组与MT治疗组的ROS、MDA表达量均有明显升高(P0.05),MT治疗组与缺氧组相比细胞ROS、MDA表达量有显著恢复,差异具有统计学意义(P0.05)。结论褪黑素对继发性缺血缺氧神经细胞损伤具有保护作用,其机制可能与褪黑素通过直接清除细胞内的自由基或者上调细胞内抗氧化物的表达水平相关。     

不同剂量补肾方药对顺铂所致大鼠肾毒性的影响

目的：观察不同剂量中药对顺铂(DDP)所致大鼠肾毒性的影响。方法：经尾静脉注射DDP诱发大鼠肾毒性,同时给大鼠灌服不同剂量益气补肾中药,观察大鼠肾组织在光镜及电镜下形态的改变,并检测大鼠血清尿素氮(BUN)的含量。结果：中剂量益气补肾中药能明显减轻DDP所致大鼠的肾损害,并使BUN含量明显降低。结论：适当剂量的益气补肾中药是拮抗DDP引起的肾毒性的有效药物。     

应激在急性出血坏死性胰腺炎所致肺损伤中的作用

目的:通过复制大鼠急性出血坏死性胰腺炎(AHNP)模型,探讨在AHNP的发病过程中,应激与AHNP及其所致肺损伤的关系。方法:用5%牛磺胆酸钠溶液逆行胰胆管注射制作大鼠AHNP模型。将实验动物随机分为A-C3组,A组为假手术组,B组为AHNP组,C组在制成AHNP模型后给予甲吡酮(metyrapone)以控制应激反应的程度,观察大鼠血清中皮质醇,C反应蛋白(CRP)及血清淀粉酶的含量,以及肺及胰腺的病理组织学。结果:C组动物血清中皮质醇、CRP及淀粉酶的含量明显低于对照组,肺及胰腺的损害程度,明显低于对照组(P＜0.05)。结论:应激在急性出血坏死性胰腺炎并发肺损伤的过程中起了重要作用。运用特异性抗应激药物可以明显减轻其所致的肺损伤。     

丹参酮ⅡA增强顺铂抗子宫内膜癌Ishikawa细胞的作用

目的 探讨丹参酮ⅡA增强顺铂抗子宫内膜癌Ishikawa细胞的作用及其分子机制.方法 体外培养并取对数生长期子宫内膜癌Ishikawa细胞,设空白对照组、丹参酮ⅡA组(10 μg/ml)组、顺铂(10 μg/ml)组和联合干预组[丹参酮ⅡA(10 μg/ml)+顺铂(10 μg/ml)].采用CCK-8法检测各组细胞的增殖活性,细胞划痕实验检测各组细胞的迁移能力,Western blotting实验检测各组细胞的Caspase-3蛋白表达情况.结果 空白对照组、丹参酮ⅡA组、顺铂组、联合干预组细胞增殖活性分别为2.46±0.06、1.92±0.04、1.61±0.06、0.38±0.03,联合干预组细胞增殖活性低于顺铂组,差异有统计学意义(P＜0.05);而4组细胞在48h时的划痕愈合率分别为(0.93±0.01)％、(0.26±0.07)％、(0.43±0.06)％、(-0.01±0.00)％,与其他各组比较,联合干预组细胞的愈合率最低,差异有统计学意义(P＜0.05);联合干预组Cleaved-Caspase-3蛋白表达量高于顺铂组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 丹参酮ⅡA具有增强子宫内膜癌Ishikawa细胞顺铂化疗效果的潜在作用,其机制可能与抑制细胞迁移及调节Caspase-3凋亡相关蛋白表达有关.     

氧自由基在顺铂诱导的鼠急性肾衰中的作用

由缺血再灌注或肾中毒诱发的肾功能不全中,氧自由基起重要作用,本文研究了自由基清除剂对顺铂诱导的急性肾衰（ＡＲＦ）的影响。１３７只雄性ＳｐｒａｇｕｅＤａｗｌｅｙ大鼠,体重２８０～３２０ｇ,随机分为６组：１组,盐水处理对照组（２６只）;２组,顺铂处理组（３７只）;３组,顺铂处理加二甲基硫脲（ＤＭＴＵ,自由基清除剂）组（２８只）;４组,顺铂加苯甲酸钠（另一种自由基清除剂）组（６只）;５组,顺铂加游离超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）组（７只）;６组,顺铂加卵磷脂超氧化物歧化酶（ＬＳＯＤ）组（３３只）。处理５…     

顺铂的多靶性对癌细胞成分的作用

用昆明种小鼠腹水肝癌细胞3×10~6/ml,给顺铂10μg/ml,分别作用1、2、5、14、24小时。给药组和对照组分别用Rhodamine-phalloidin 10μg/ml标记癌细胞膜下和分离的核内肌动蛋白微丝,吖啶橙10 μg/ml标记分离的核内DNA,FITC 10μg/ml标记分离的核内染色质蛋白,用MPV-2显微分光光度计进行观察和测定含量变化。顺铂作用1小时后,癌细胞膜下肌动蛋白微丝     

乙莫克舍增强顺铂对肺癌细胞系A549的抑制作用

目的探讨化学药物顺铂与肉毒碱棕榈酰基转移酶1(CPT1)小分子抑制剂乙莫克舍(etomoxir)对肿瘤细胞增殖及迁移的影响。方法分别用顺铂(7.5μmol/L)、etomoxir(75μmol/L)及顺铂联用etomoxir处理人非小细胞肺癌细胞系A549 72 h,CCK8检测A549的增殖作用;Transwell细胞迁移实验检测A549的迁移能力;annexin V/PI检测A549细胞凋亡;用etomoxir和顺铂联合治疗,裸鼠皮下成瘤模型检测该种联合治疗方法对肿瘤生长的影响。结果顺铂联用etomoxir后,肿瘤细胞生长及迁移能力受到明显抑制(P0.05),并且肿瘤细胞的凋亡有明显增加(P0.05);另外顺铂联用etomoxir治疗后,小鼠肿瘤的生长受到明显抑制(P0.05)。结论顺铂联用etomoxir可以降低肿瘤细胞增殖能力,增强肿瘤细胞凋亡,提高肿瘤细胞对化疗药物的敏感性,进而抑制肿瘤在裸鼠体内的生长。     

顺铂联合DC疫苗对荷瘤小鼠抗肿瘤作用观察

目的:观察顺铂联合DC疫苗对荷瘤小鼠抗肿瘤作用。方法:用终浓度20μg/ml的顺铂处理体外培养的小鼠黑色素瘤B16或B16-hsp70L1细胞,24小时后,Western blot方法观察HMGB1、hsp70蛋白表达;用顺铂处理的B16或B16-hsp70L1细胞裂解液负载DC,LPS诱导成熟,流式细胞仪分析DCs表面MHCⅠ、ICAM-1、CD86的表达。制备荷瘤小鼠模型,给荷瘤小鼠经腹腔注射顺铂(100μg/只),瘤内注射DC疫苗(3×106/只),观察肿瘤生长曲线、荷瘤小鼠脾脏中肿瘤抗原特异性CD8+T淋巴细胞IFN-γ的分泌及CTL活性。结果:顺铂显著促进B16或B16-hsp70L1细胞HMGB1的表达,对hsp70蛋白表达影响不明显;顺铂处理的B16或B16-hsp70L1细胞裂解液负载DC后,MHCⅠ、ICAM-1及CD86表达率分别为41%、39%、42%和47%、41%、42%;顺铂联合DC疫苗不仅显著抑制荷瘤小鼠肿瘤增殖(P0.05),对荷瘤小鼠脾脏CD8+T淋巴细胞IFN-γ的分泌及CTL活性也有明显的提高。结论:顺铂处理的B16细胞裂解液可诱导DC活化;联合DC疫苗后不仅显著抑制荷瘤小鼠肿瘤生长,对肿瘤特异性免疫应答也具有一定的促进作用。     

N-乙酰半胱氨酸对碘海醇所致糖尿病大鼠肾损伤的保护作用

目的观察N-乙酰半胱氨酸对碘海醇所致糖尿病大鼠肾损伤的保护作用,从而对临床治疗碘海醇导致的糖尿病肾损伤提供理论依据。方法清洁级糖尿病大鼠45只,体重250～300 g,通过股静脉注射碘海醇法建立糖尿病对比剂肾损伤模型,模型成功后,随机分为碘海醇组(NL组)、N-乙酰半胱氨酸组(NAL组),假手术组(Sham组),分别于建模后24h、48h、72h处死大鼠,观察各组大鼠血肌酐(Scr)和血尿素氮(BUN)的浓度;HE染色观察肾脏病理学变化;ELISA检测血清中总超氧化物歧化酶(T-SOD)、丙二醇(MDA)和谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)的含量浓度;TUNEL检测肾上皮细胞凋亡情况;Westernblot检测Bcl-2、Bax、caspase-3蛋白表达。结果 NL组肾损伤严重,细胞凋亡明显,血浆总Scr、BUN、MDA、Bax、caspase-3水平明显升高,T-SOD、GPX、Bcl-2明显降低。N-乙酰半胱氨酸可以减轻碘海醇所致的糖尿病大鼠肾损伤,抑制细胞凋亡,血浆总T-SOD、GPX、Bcl-2明显升高,Scr、BUN、MDA、Bax、caspase-3明显降低。结论 N-乙酰半胱氨酸对糖尿病肾损伤大鼠的保护作用可能与其调控肾脏组织中Bcl-2、Bax及caspase-3蛋白表达介导肾小管上皮细胞凋亡有关。     

胃肠肽在应激所致结肠动力紊乱中的可能作用

胃肠肽在应激所致结肠动力紊乱中的可能作用桂先勇（第三军医大学三院消化科）潘国宗，柯美云，陆国钧（北京协和医院消化内科）大多数胃肠肽是胃肠运动调节机制中的重要成分。应激所致结肠运动异常是否涉及某些胃肠肽的变化，尚乏研究。本工作旨在探讨应激后胃肠肽释放量...     

p38 MAPK在顺铂诱导肾小管上皮细胞凋亡中的作用

目的:探讨p38 MAPK在顺铂诱导大鼠近端肾小管上皮细胞(RPTC)凋亡中的作用。方法:首先采用Western blot实验检测0、5、10和20μmol/L顺铂处理24 h对细胞凋亡的影响,确定最佳处理剂量;而后采用20μmol/L顺铂联合50 mg/L p38 MAPK抑制剂SB203580刺激RPTC,实验分为对照组、顺铂组及顺铂+SB203580(加入SB203580处理RPTC 1 h后再给予顺铂处理24 h)。采用相差荧光显微镜观察和流式细胞术分析顺铂处理后RPTC的凋亡情况;采用Ac-DEVD-AFC试剂盒检测RPTC裂解液中的caspase活性;Western blot实验检测p38、磷酸化p38、cleaved PARP和cleaved caspase-3等的蛋白水平;pH计检测顺铂处理后RPTC外环境pH值改变。结果:20μmol/L顺铂处理RPTC 24 h,可以明显诱导细胞凋亡;顺铂处理15 min后RPTC中p38 MAPK开始磷酸化并达到高峰。顺铂处理后12.08%的RPTC呈凋亡形态,具有增强的caspase活性,并且cleaved PARP和cleaved caspase-3水平明显升高(P0.05);p38 MAPK抑制剂SB203580可抑制p38的磷酸化,降低RPTC的凋亡率和caspase活性,并减少cleaved PARP和cleaved caspase-3的蛋白水平。同时,SB203580可逆转顺铂诱导的RPTC培养基pH值的改变。结论:p38 MAPK的磷酸化在顺铂诱导的RPTC凋亡中发挥作用。顺铂诱导RPTC凋亡后,可改变细胞外酸性环境,并可被p38 MAPK抑制剂SB203580所抑制。     

CXCR1/2拮抗剂G31P对大剂量顺铂所致小鼠急性肝损伤的保护作用

目的利用趋化因子受体拮抗剂G31P探讨CXC趋化因子在大剂量顺铂(DDP)所致小鼠急性肝损伤中的作用及其可能的作用机制。方法利用大剂量DDP(15 mg/kg体质量)诱导小鼠急性肾功能衰竭的动物模型,C57BL/6小鼠被随机分为DDP用药组、DDP+G31P用药组(G31P用药组)和生理盐水(NS)对照组。15 mg/kg体质量DDP单次腹腔内注射,500μg/kg体质量G31P每日皮下注射1次,连用3 d,等量NS对照。分别取每组小鼠各10只,观察其用药后的反应及生存时间。取对照组小鼠及DDP用药后3、6、24、48 h的DDP用药组和G31P用药组小鼠各10只,称重后内眦静脉取血检测肝、肾功能。剖腹取肝组织,制备10%肝组织匀浆检测其中髓过氧化物酶(MPO)及白细胞介素6(IL-6)的含量,HE染色进行肝组织形态学观察。结果 DDP用药后1周内,70%的DDP用药组小鼠死亡,而G31P用药组小鼠全部存活。DDP用药后48 h小鼠出现急性肾功能衰竭,G31P可有效预防DDP所致的小鼠肾损害。DDP用药3～6 h后,小鼠外周血谷丙转氨酶(ALT)增高,并出现肝细胞变性、灶状坏死及炎细胞浸润;G31P能有效预防大剂量DDP所致的肝细胞坏死及炎细胞浸润。此外,DDP用药后6 h,G31P用药组小鼠肝组织MPO及IL-6的含量显著低于DDP用药组小鼠(P<0.01)。结论 G31P通过抑制中性粒细胞在肝组织内浸润及MPO和IL-6在肝组织内的释放从而对DDP所致的肝损害有保护作用,提示CXC趋化因子在大剂量DDP所致肝肾损害中发挥重要作用。