甲状腺乳头状癌BRAF V600E、TERT和RET分子检测及与临床病理特征的关系

目的 探讨甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma, PTC)中三种驱动基因BRAF V600E、TERT和RET与临床病理特征的关系。方法 收集4 678例PTC,2 637例患者行BRAF V600E和TERT启动子检测(C250T和C228T位点),另2 041例患者行BRAF V600E和RET检测,并分析以上3种基因与临床病理特征的关系。结果 PTC中BRAF V600E、TERT及RET基因阳性检出率分别为88.9%(4 161/4 678)、0.5%(12/2 637)、3.7%(75/2 041)。BRAF V600E突变仅与被膜侵犯及桥本甲状腺炎伴随相关(P<0.05);TERT启动子突变与患者年龄、肿瘤最大径、肿瘤数量、淋巴结转移、TNM分期均有关(P<0.05);RET基因融合与患者性别、肿瘤最大径、淋巴结转移、桥本甲状腺炎伴随有关(P<0.05)。双基因改变患者合计12例,包括1例BRAF V600E突变伴CCDC6-RET(Exon1-Exon12)基因重排变异,1例BRAF V600E突变伴NCOA4-RET(...     

甲状腺乳头状癌BRAF V600E突变与肿瘤相关成纤维细胞的关系

目的 探讨甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcino-ma,PTC)中BRAF V600E突变与肿瘤相关成纤维细胞(cancer-associated fibroblasts,CAF)的关系.方法 收集PTC标本890例,采用ARMS-PCR法检测BRAF V600E基因突变,应用免疫组化EnV...     

BRAF V600E突变的上皮样胶质母细胞瘤临床病理和分子特征

目的:探讨BRAF V600E突变的上皮样胶质母细胞瘤（epithelioid glioblastoma, eGBM）的临床病理特征和分子遗传学改变。方法:回顾性分析四川大学华西医院2012—2019年确诊的16例BRAF V600E突变的eGBM,总结其临床和病理特点及分子遗传学改变。结果:患者年龄7~61岁,中位年...     

甲状腺乳头状癌中CyclinD1表达和BRAF（V600E）突变的相关性及意义

目的：探讨甲状腺乳头状癌( papillary thyroid carcinoma, PTC)中Cyclin D1表达上调和BRAF( V600E)突变的相关性及临床意义,分析二者在PTC发生、发展中的作用。方法采用免疫组化EnVision两步法检测52例PTC和52例甲状腺良性病变(结节性甲状腺肿25例、桥本甲状腺炎15例、滤泡性腺瘤12例)中Cyclin D1的表达;采用PCR法及DNA测序法检测上述标本中BRAF(V600E)突变状况,分析Cyclin D1表达上调和BRAF(V600E)突变的相关性及与PTC临床病理特征的关系。结果52例PTC中Cyclin D1阳性率为84．6%,免疫反应评分(4．6±2．4)与甲状腺良性病变(1．3±1．6)比较差异有统计学意义(t=8．525,P<0．01);Cyclin D1表达上调与肿瘤淋巴结转移、包膜侵犯、肿瘤分期(Ⅲ+Ⅳ期)及BRAF(V600E)突变相关(P<0．05),与患者年龄、性别、肿瘤结节数目及直径无关。52例PTC中BRAF(V600E)突变率63．5%,甲状腺良性病变中突变率为0,差异有统计学意义(P<0．01),BRAF(V600E)突变与肿瘤淋巴结转移、包膜侵犯及肿瘤分期(Ⅲ+Ⅳ期)密切相关(P<0．05),与患者年龄、性别、肿瘤结节数目及直径无关。 BRAF(V600E)突变组中Cyclin D1表达强度更强,阳性率显著高于野生组(突变组100%,野生组57．9%),免疫表达评分均值高于野生组[突变组(5．7±1．6),野生组(4．0±2．5)],两组比较差异有统计学意义(t=2．652,P<0．05)。结论 Cyclin D1表达上调与BRAF(V600E)突变呈正相关,二者与PTC的发生、发展密切相关,可作为评估PTC侵袭转移能力的指标。     

新疆地区甲状腺乳头状癌中BRAF V600E基因的表达及意义

目的探讨新疆地区BRAF V600E基因点突变在甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)中的表达,及其与临床病理特征的关系。方法收集原发性PTC 178例,石蜡包埋组织经QIAGEN试剂盒提取DNA,经Taq Man探针荧光定量PCR技术检测PTC中BRAF基因点突变。结果 178例原发性PTC中BRAF V600E基因点突变142例,突变率为79.8%(142/178)。患者年龄(≥45岁)、肿瘤直径(≤1 cm)、被膜外侵犯BRAF V600E基因点突变率高(P均0.05),而BRAF V600E基因点突变与患者性别、多灶性及淋巴结转移灶和肿瘤部位均无相关性(P均0.05)。结论新疆地区PTC中BRAF V600E基因点突变与临床病理特征密切相关,且具有一定特异性,可作为PTC诊断提供依据。     

甲状腺穿刺细胞学及其BRAF V600E突变检测的临床价值

甲状腺穿刺细胞学检查联合BRAF V600E检测有利于提高术前甲状腺乳头状癌的检出率,而细胞学结果判读的影响因素繁多,BRAF V600E突变的临床应用价值尚不明确。该文就甲状腺穿刺技术进展、甲状腺穿刺细胞学判读、BRAF V600E突变检测及其临床应用予以综述。     

甲状腺乳头状癌合并桥本甲状腺炎中BRAF V600E蛋白的表达及临床意义

目的通过分析BRAF V600E蛋白在甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma, PTC)合并桥本甲状腺炎(Hashimoto’s thyroiditis, HT)中的表达情况,探讨其表达的临床病理意义。方法选取2017年1月～2019年7月间行手术治疗且行中央淋巴结清扫的465例经典型PTC为研究对象,将其分为PTC合并HT组(139/465)和单纯PTC组(326/465),用免疫组化EnVision法检测两组中BRAF V600E蛋白表达情况,并对检测结果及临床病理特征进行统计学分析。结果 PTC合并HT组中BRAF V600E蛋白的阳性率(59.71%)低于单纯PTC组(69.94%),差异有统计学意义(P=0.032);PTC合并HT组中BRAF V600E蛋白阴性组患者发病年龄55岁的比例更高(92.86%);与单纯PTC组相比,PTC合并HT组女性(88.49%)患病率明显高于男性(67.79%),差异有统计学意义(P0.001);PTC中HT或BRAF V600E蛋白表达与肿瘤大小、肿瘤多发、中央区淋巴结转移均无关(P0.05)。结论 PTC合并HT患者BRAF V600E蛋白的阳性率较低。PTC中HT或BRAF V600E蛋白表达与肿瘤大小、肿瘤多发、中央区淋巴结转移无关。     

甲状腺癌中BRAF V600E的临床价值及端粒酶逆转录酶启动子突变的影响

近年来,由于甲状腺癌的发病率越来越高,世界各地的学者开始更多地关注甲状腺癌,对其发病机制、疾病演变及转归预后都进行了探索研究。其中基因分子领域的研究成为热点,如抗鼠科肉瘤病毒癌基因同源物B1(BRAF)突变和端粒酶逆转录酶(TERT)启动子突变等,但目前相关研究尚不成熟,仍有很多问题及挑战亟待解决。本文从基因分子学理论出发,探究BRAF突变在甲状腺乳头状癌的治疗、复发、死亡率及预后评估中的应用价值,以及BRAF突变与TERT启动子突变在甲状腺癌中的相互联系与影响,以供相关学者了解该领域的现状,为今后进一步研究提供一个大致的方向。     

甲状腺乳头状癌中B-raf基因V600E突变的检测方法对比分析

正甲状腺癌是最常见的内分泌恶性肿瘤,女性多于男性,约90%甲状腺癌为甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)~([1])。近年,甲状腺癌的发病率呈上升趋势,B-raf基因与PTC密切相关,最多见的突变位点为V600E,是目前分析和检测的热点~([2])。本文回顾性分析136例PTC的B-raf基因V600E突变,并采用免疫组化Ventana BenchMark法和RT-PCR法进行检测,分析两种方法的一致性,探讨在未能开展基因检测的医院单独行免疫组化法检测的可行性和必要性。     

实时剪切波弹性成像杨氏模量最大值诊断甲状腺乳头状癌BRAF V600E基因突变的价值

目的:探究实时剪切波弹性成像（SWE）杨氏模量最大值诊断甲状腺乳头状癌（PTC）鼠类肉瘤滤过性毒菌致癌同源体B1（BRAF）V600E基因突变的价值。方法:回顾性分析2018年1月~2019年6月宿迁市第一人民医院收治的110例PTC患者共124个结节的临床及超声影像学资料。患者经病理学检查均确诊为PTC,并完成了BRAF V600E基因检测以及SWE检查,临床资料完整。通过比较V600E基因突变型与野生型PTC的SWE检查结果,并绘制患者Emax值的ROC曲线,分析Emax值对PTC患者BRAF V600E基因突变的诊断效能。结果:BRAF基因检测结果显示:124个PTC结节BRAF基因检测V600E野生型共37个,V600E突变型共87个。野生型PTC结节的SWE图像多以蓝色为主,而突变型主要表现为红橙相间彩色混杂的图像。突变组PTC结节Emax、Emean、Eratio值均明显大于野生组,比较差异具有统计学意义（P<0.05）,ROC曲线分析显示:Emax值诊断V600E突变的AUC=0.846>0.5（95%CI:0.808~0.885, P<0.01）;Cut-off值为43.65 kPa,此时敏感度为91.45%,特异性为68.23%。以Emax≥43.65 kPa为临界值对124个结节进行诊断,结果显示:SWE诊断PTC结节为V600E基因突变型90个,野生型34个,正确率为86.29%;SWE诊断结果与基因检测结果一致性显著（Kappa值=0.665, P<0.01）。结论:PTC BRAF V600E基因突变型与野生型的SWE影像学特征具有明显差异,应用SWE的Emax值诊断PTC结节V600E基因突变的正确率和敏感性均较高,诊断价值显著,值得在临床上推广应用。     

分化型甲状腺癌中BRAF V600E突变分析

目的探讨分化型甲状腺癌中BRAF V600E突变与临床病理特征的关系。方法收集甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)80例(其中经典型67例、滤泡亚型8例、嗜酸细胞亚型3例、高细胞亚型2例)、滤泡癌5例,其中30例PTC取相应癌旁组织,全部送基因检测室检测BRAF V600E突变情况。结果 80例PTC中BRAF V600E突变率为65.0%,5例滤泡癌及30例癌旁组织中未发现BRAF V600E突变;BRAF V600E突变与患者年龄、肿瘤包膜侵犯、淋巴结转移及TNM分期有关。PTC亚型中,经典型和高细胞亚型的BRAF V600E突变率较高(70.1%、100.0%),滤泡亚型的突变率较低(33.3%)。结论PTC中BRAF V600E突变可能与患者年龄有一定相关性,还与包膜侵犯、淋巴结转移及TNM分期有关,经典型和高细胞亚型的BRAF V600E突变率较高,明显高于滤泡亚型。     

BRAF VE1抗体在结直肠癌中检测BRAF V600E突变的应用

目的使用BRAF VE1抗体免疫组化法检测结直肠癌样本中BRAF V600E位点突变,并分析其敏感性和特异性。方法采用ARMS法和免疫组化法检测36例结直肠癌组织中BRAF V600E突变状态,并使用测序验证。结果免疫组化法检测结直肠癌样本中BRAF VE1抗体的敏感性为100%,特异性为62.9%。与甲状腺样本BRAF V600E突变相比,结直肠癌标本为细胞质着色,染色呈棕黄色。结论免疫组化法可高效、快速、低成本初步筛选结直肠癌的BRAF V600E突变,但需分子检测进一步确认。     

甲状腺乳头状癌中TZAP的表达及与临床病理特征的关系

目的探讨端粒锌指相关蛋白(telomeric zinc finger-associated protein,TZAP)在甲状腺乳头状癌、癌旁正常组织中的表达及其与临床病理特征的关系。方法采用免疫组化EnVision法检测甲状腺乳头状癌与癌旁正常组织中TZAP的表达,分析其表达与临床病理特征的相关性。结果TZAP在癌旁正常组织的细胞质和细胞核中均阳性(100%,71/71);在甲状腺乳头状癌组织的细胞核中表达下调(52.11%,37/71),两者差异有显著性(P<0.05);TZAP蛋白表达与肿瘤大小(rs=-0.249,P=0.036)、TNM分期(rs=0.264,P=0.026)呈负相关;与淋巴结转移(rs=-0.356,P=0.002)、甲状腺外播散(rs=-0.250,P=0.035)呈正相关。结论TZAP在甲状腺乳头状癌组织中表达下调,其可能参与甲状腺乳头状癌的发生、发展。     

非小细胞肺癌中BRAF V600、EGFR基因突变与临床病理特征的关系

目的探讨非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中BRAF V600、EGFR基因突变及其与临床病理特征的关系。方法采用PCR-DNA测序法检测146例NSCLC标本中BRAF V600、EGFR基因突变情况,并分析基因突变与临床病理特征的关系。结果 BRAF V600基因突变率为7.5%(11/146),与患者吸烟史有关(P=0.045),而与患者性别、年龄、组织学类型及分化程度等无关(P0.05)。EGFR基因突变率为46.6%(68/146),多见于女性、不吸烟、腺癌患者(P0.05)。共检测出4例同时具有BRAF V600(3例V600E及1例V600D)及EGFR基因突变(19号外显子缺失2例,21号外显子L858R突变2例),两者未见相关性(P0.05)。结论 NSCLC患者BRAF V600基因突变与患者性别、年龄、组织学类型及分化程度等无关,多见于无吸烟史患者。     

BRAF V600E突变型胃肠间质瘤13例临床病理及预后分析

目的 探讨BRAF V600E突变型胃肠间质瘤(gastrointestinal stromal tumor, GIST)的临床病理学特征及预后。方法 收集13例BRAF V600E免疫组化阳性GIST,采用ARMS法和Sanger测序进行验证。回顾性分析13例BRAF V600E突变型GIST的临床病理学特征及随访,并采用2008版NIH方案和良恶性分析方法进行生存分析。结果 13例BRAF V600E突变型GIST中男性5例,女性8例。年龄范围41～69岁,平均54.8岁。发病部位：胃5例、十二指肠3例、小肠4例、大网膜1例。肿瘤最大径0.9～25 cm,平均5.3 cm。手术切除标本8例,内镜切除标本5例。梭形细胞型11例,上皮样细胞型2例。NIH危险度分级：极低危5例、低危3例、中危0例、高危5例;中山方法：非恶性5例(良性3例,交界性2例)、低度恶性5例、中度恶性2例、高度恶性1例。随访时间2～84个月,平均32个月,11例无瘤生存,2例术后用伊马替尼分别治疗6个月和15个月后肿瘤进展。NIH高危患者疾病进展率为40%;中山方法的中度恶性疾病进展率为50%,高度恶性疾病进展率...     

探针扩增阻滞突变法与数字PCR法检测甲状腺乳头状癌BRAF基因突变

甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)是甲状腺癌中最常见的类型,约占甲状腺癌的90%[1]。虽然目前绝大多数PTC预后较好,但仍有30%的PTC患者术后出现反复复发及远处转移[2]。Kimura等[3]研究发现70%的PTC可能存在分子改变,包括编码受体酪氨酸激酶RET、神经营养受体酪氨酸激酶-1(NTRK1)基因,以及丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路的两个细胞内效应基因RAS和BRAF。     

甲状腺乳头状癌BRAF基因突变的检测及临床意义

目的 了解甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)BRAF基因T1799A点突变的情况与临床病理学特征的关系.方法 应用聚合酶链反应及DNA直接测序法对43例PTC患者,20例非PTC甲状腺病变患者及40份正常甲状腺组织对照的新鲜标本进行BRAF基因检测.分析BRAF基因突变与性别、发病年龄、原发灶大小、甲状腺包膜外浸润、颈淋巴结转移及远处转移等临床病理学特征的关系.结果 43例PTC中1 7例检出BRAF基因T1799A点突变.检出率为39.5%,而在非PTC甲状腺病变患者和40份正常甲状腺组织未发现T1799A点突变.BRAF基因突变与PTC甲状腺包膜外浸润及颈淋巴结转移密切相关(P<0.05及P<0.05),与性别、发病年龄、原发灶大小及远处转移无关.结论 BRAF基因突变与颈淋巴结转移和甲状腺包膜外浸润密切相关,突变可能增加PTC的侵袭性并影响预后.     

甲状腺乳头状癌BRAF基因突变的检测及临床意义

目的 了解甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)BRAF基因T1799A点突变的情况与临床病理学特征的关系.方法 应用聚合酶链反应及DNA直接测序法对43例PTC患者,20例非PTC甲状腺病变患者及40份正常甲状腺组织对照的新鲜标本进行BRAF基因检测.分析BRAF基因突变与性别、发病年龄、原发灶大小、甲状腺包膜外浸润、颈淋巴结转移及远处转移等临床病理学特征的关系.结果 43例PTC中1 7例检出BRAF基因T1799A点突变.检出率为39.5%,而在非PTC甲状腺病变患者和40份正常甲状腺组织未发现T1799A点突变.BRAF基因突变与PTC甲状腺包膜外浸润及颈淋巴结转移密切相关(P<0.05及P<0.05),与性别、发病年龄、原发灶大小及远处转移无关.结论 BRAF基因突变与颈淋巴结转移和甲状腺包膜外浸润密切相关,突变可能增加PTC的侵袭性并影响预后.     

甲状腺乳头状癌BRAF基因突变的检测及临床意义

目的 了解甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)BRAF基因T1799A点突变的情况与临床病理学特征的关系.方法 应用聚合酶链反应及DNA直接测序法对43例PTC患者,20例非PTC甲状腺病变患者及40份正常甲状腺组织对照的新鲜标本进行BRAF基因检测.分析BRAF基因突变与性别、发病年龄、原发灶大小、甲状腺包膜外浸润、颈淋巴结转移及远处转移等临床病理学特征的关系.结果 43例PTC中1 7例检出BRAF基因T1799A点突变.检出率为39.5%,而在非PTC甲状腺病变患者和40份正常甲状腺组织未发现T1799A点突变.BRAF基因突变与PTC甲状腺包膜外浸润及颈淋巴结转移密切相关(P<0.05及P<0.05),与性别、发病年龄、原发灶大小及远处转移无关.结论 BRAF基因突变与颈淋巴结转移和甲状腺包膜外浸润密切相关,突变可能增加PTC的侵袭性并影响预后.     

甲状腺乳头状癌BRAF基因突变的检测及临床意义

目的 了解甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)BRAF基因T1799A点突变的情况与临床病理学特征的关系.方法 应用聚合酶链反应及DNA直接测序法对43例PTC患者,20例非PTC甲状腺病变患者及40份正常甲状腺组织对照的新鲜标本进行BRAF基因检测.分析BRAF基因突变与性别、发病年龄、原发灶大小、甲状腺包膜外浸润、颈淋巴结转移及远处转移等临床病理学特征的关系.结果 43例PTC中1 7例检出BRAF基因T1799A点突变.检出率为39.5%,而在非PTC甲状腺病变患者和40份正常甲状腺组织未发现T1799A点突变.BRAF基因突变与PTC甲状腺包膜外浸润及颈淋巴结转移密切相关(P<0.05及P<0.05),与性别、发病年龄、原发灶大小及远处转移无关.结论 BRAF基因突变与颈淋巴结转移和甲状腺包膜外浸润密切相关,突变可能增加PTC的侵袭性并影响预后.