神经节苷脂对APP/PSl双转基因AD小鼠海马PI3K表达的影响

目的本实验利用APP/PS1双转基因阿尔茨海默病(AIzheimer disease,AD)小鼠模型,观察神经节苷脂对AD小鼠学习记忆能力及海马磷脂酰肌醇3激酶(phosphoinositide 3-kinases,PI3K)表达的影响。方法 APP/PS1双转基因模型小鼠20只,随机分为AD模型组(10)和神经节苷脂(GM1)组(10),再取同窝阴性小鼠10只,作为对照组。经跳台试验和水迷宫试验进行行为学测试,用免疫组化方法和Western blot方法检测各组小鼠海马PI3K的表达变化。结果与对照组相比,AD模型组小鼠的学习和记忆成绩明显降低(P0.05);相比于AD模型组小鼠,GM1组小鼠的学习和记忆成绩明显提高(P0.05)。免疫组化和Western blot结果显示,GM1组小鼠和对照组小鼠海马PI3K蛋白阳性表达的平均光密度值显著高于AD模型组,P0.05。结论 AD小鼠海马区PI3K的表达上调可能是GM1改善AD小鼠学习和记忆功能的机制之一。     

神经节苷脂对APP/PSI双转基因AD小鼠海马caspase-3和iNOS表达的影响

目的本实验利用APP/PS1双转基因阿尔茨海默病(AIzheimer disease,AD)小鼠模型,观察神经节苷脂对AD小鼠学习记忆能力及海马caspase-3与诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达的影响。方法 APP/PS1双转基因模型小鼠20只,随机分为AD模型组(10)和神经节苷脂(GM1)组(10),再取同窝阴性小鼠10只,作为对照组。经跳台试验和水迷宫试验进行行为学测试,用免疫组化方法Western blot方法检测各组小鼠海马caspase-3与iNOS的表达变化。结果 AD模型组小鼠的学习和记忆成绩明显低于对照组(P0.05),而GM1组小鼠明显高于AD模型组(P0.05)。AD模型组小鼠海马caspase-3与iNOS蛋白阳性表达的平均光密度值显著高于GM1组小鼠和对照组小鼠(P0.05)。结论下调AD小鼠海马区caspase-3与iNOS的表达可能是GM1改善AD小鼠学习和记忆功能的机制之一。     

盐酸多奈派齐对APP/PSl双转基因AD小鼠海马PI3K表达的影响美满霉素对帕金森病大鼠黑质多巴胺能神经元损伤的保护作用

目的本实验利用APP/PS1双转基因阿尔茨海默病(AIzheimer disease,AD)小鼠模型,观察盐酸多奈派齐对AD小鼠学习记忆能力及海马磷脂酰肌醇3激酶(phosphoinositide 3-kinases,PI3K)表达的影响。方法 APP/PS1双转基因模型小鼠20只,随机分为AD模型组(10)和盐酸多奈派齐组(10),再取同窝阴性小鼠10只,作为对照组。经跳台试验和水迷宫试验进行行为学测试,用免疫组化方法检测各组小鼠海马PI3K的表达变化。结果与对照组相比,AD模型组小鼠的学习和记忆成绩明显降低(<0.05);相比于AD模型组小鼠,盐酸多奈哌齐组小鼠的学习和记忆成绩明显提高(<0.05)。免疫组化检测结果证明,盐酸多奈哌齐组小鼠和对照组小鼠海马PI3K蛋白阳性表达明显增加,平均光密度值分别为(0.48±0.19)和(0.74±0.22),显著高于AD模型组(0.31±0.10,<0.05)。Western blot结果发现,盐酸多奈哌齐组小鼠和对照组小鼠海马PI3K蛋白的平均光密度值分别为(0.39±0.09)和(0.61±0.21),显著高于AD模型组(0.26±0.07,<0.05)。结论 AD小鼠海马区PI3K的表达上调可能是盐酸多奈哌齐改善AD小鼠学习和记忆功能的机制之一。     

盐酸多奈派齐对APP/PSI双转基因AD小鼠海马PI3K表达的影响

目的 本实验利用APP/PS1双转基因阿尔茨海默病(AIzheimer disease,AD)小鼠模型,观察盐酸多奈派齐对AD小鼠学习记忆能力及海马磷脂酰肌醇3激酶(phosphoinositide 3-kinases,PI3K)表达的影响.方法 APP/PSI双转基因模型小鼠20只,随机分为AD模型组(10)和盐酸多奈派齐组(10),再取同窝阴性小鼠10只,作为对照组.经跳台试验和水迷宫试验进行行为学测试,用免疫组化方法检测各组小鼠海马PI3K的表达变化.结果 与对照组相比,AD模型组小鼠的学习和记忆成绩明显降低(P＜0.05);相比于AD模型组小鼠,盐酸多奈哌齐组小鼠的学习和记忆成绩明显提高(P＜0.05).免疫组化检测结果证明,盐酸多奈哌齐组小鼠和对照组小鼠海马PI3K蛋白阳性表达明显增加,平均光密度值分别为(0.48±0.19)和(0.74±0.22),显著高于AD模型组(0.31±0.10,P＜0.05).Western blot结果发现,盐酸多奈哌齐组小鼠和对照组小鼠海马PI3K蛋白的平均光密度值分别为( 0.39±0.09)和(0.61±0.21),显著高于AD模型组(0.26±0.07,P＜0.05).结论 AD小鼠海马区PI3K的表达上调可能是盐酸多奈哌齐改善AD小鼠学习和记忆功能的机制之一.     

外源性NGF对APP/PS1转基因小鼠学习记忆能力的影响

目的观察外源性神经生长因子(nerve growth factor,NGF)对APP/PS1转基因小鼠学习记忆能力的影响和环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(cAMP response element bling protein,CREB)蛋白的调节作用。方法实验分为野生组(雄性5月龄C57BL/6小鼠6只,鼻腔给予生理盐水),AD组(雄性5月龄APP/PS1小鼠6只)和AD+NGF组(雄性5月龄APP/PS1小鼠6只,鼻腔给予小鼠NGF治疗14w),应用Morris水迷宫检测小鼠的学习记忆能力变化,应用Western blot检测小鼠脑内CREB蛋白、p-CREB蛋白的表达。结果 AD+NGF组小鼠的潜伏期和找到平台前所经过的总路程均显著低于AD组小鼠,经过目标平台位置的次数明显高于AD组小鼠,游泳总路程和平均游泳速度均明显低于AD组小鼠。外源性NGF上调APP/PS1转基因小鼠脑内CREB蛋白和p-CREB蛋白的表达。结论外源性NGF改善APP/PS1转基因小鼠的学习记忆能力可能与上调CREB和p-CREB蛋白的表达相关。     

神经节苷脂对脑缺血再灌注大鼠海马CREB表达的影响

目的探讨单唾液酸神经节苷脂(GM1)对脑缺血再灌注大鼠海马cAMP反应元件结合蛋白(CREB)表达的影响。方法 72只SD大鼠随机分为:假手术组(Sham,8只)、神经节苷脂治疗组(GM1,32只)、缺血再灌注组(I/R,32只)。GM1治疗组和I/R组依据缺血后再灌注的不同时间点再细分为6h、12h,24h、3d,共4个小组。应用免疫组织化学方法和Western blot方法检测各组大鼠海马CREB蛋白的表达。结果免疫组织化学方法检测时发现,缺血处理后,CREB表达水平迅速增高,在6h时最高,之后持续激活,至12h时开始降低,与假手术组相比,CREB阳性产物的平均光密度值(MOD)显著升高(P0.01);与相同时间点的缺血组比较,GM1治疗组的CREB蛋白阳性表达水平明显升高(P0.01)。Western blot方法也得到了相同的结论。结论 GM1对脑缺血再灌注损伤的神经保护作用可能与上调CREB蛋白的表达相关。     

miR-142通过FMRP介导上调APP/PS1小鼠海马神经元PSD95和Synapsin I表达改善学习记忆能力

目的 探讨miR-142通过FMRP介导调控APP/PS1小鼠海马神经元内PSD95和Synapsin I的表达及对学习记忆能力的影响。方法 将10月龄APP/PS1小鼠随机分成AD组、sh-miR-NC组、sh-miR组,同月龄的C57BL/6小鼠作为Control组,利用Morris水迷宫行为学实验检测小鼠的学习记忆能力,用Western blot和免疫荧光方法检测FMRP、PSD95和Synapsin I在各组小鼠海马神经元中的表达情况。结果 APP/PS1小鼠学习记忆能力明显下降;沉默miR-142明显改善APP/PS1小鼠的学习记忆能力,使APP/PS1小鼠海马神经元低表达的FMRP、PSD95和Synapisin I等蛋白逆转上调。结论 miR-142通过结合FMRP上调APP/PS1小鼠海马神经元内PSD95和Synapsin I的表达水平,改善学习记忆能力。     

亚甲蓝对APP/PS1转基因小鼠学习记忆及海马结构内GFAP表达的影响

目的:观察亚甲蓝对APP/PS1转基因小鼠学习记忆及胶质纤维酸性蛋白(Glial fibrillary acidic pro-tein,GFAP)在海马结构表达变化的影响。方法:20只3月龄APP/PS1小鼠,随机分2组,每组10只,对照组:自由饮水;治疗组:根据小鼠饮水量将亚甲蓝加入日常饮水中(25 mg/kg/d)连用4个月至7月龄。水迷宫测试观察其行为学的改变,免疫组化、Western Blot和TUNEL染色法观察GFAP在海马结构的表达及神经元的凋亡情况。结果:水迷宫测试结果显示亚甲蓝喂养组APP/PS1转基因小鼠第2～4 d的平均潜伏期显著低于对照组小鼠的潜伏期,说明治疗组与对照组相比在7个月时出现明显差异(P<0.05);免疫组化和Western结果显示治疗组海马结构内的GFAP在APP/PS1转基因小鼠的表达下调(P<0.05)。TUNEL染色法显示治疗组海马CA1、CA3区和齿状回TUNEL阳性细胞数较对照组明显减少(P<0.05)。结论:亚甲蓝能够下调APP/PS1小鼠海马结构内GFAP蛋白的表达,并通过抑制海马结构神经元的凋亡,提高APP/PS1小鼠的认知能力。     

β淀粉样蛋白及代谢酶类在阿尔茨海默病和糖尿病模型小鼠脑内的表达

目的观察阿尔茨海默病(AD)和糖尿病模型小鼠脑内β淀粉样蛋白(Aβ)及代谢相关酶类的表达情况,以便从分子水平找到糖尿病并发AD的实验室依据。方法 5月龄双转基因痴呆症模型小鼠(APP/PS1双转基因小鼠)、ob/ob T2DM肥胖模型小鼠和野生型C57BL/6J小鼠为对照,分别用免疫组化染色、ELISA和Western blot检测脑内老年斑(SP)、Aβ含量及Aβ代谢酶类的表达情况。结果 APP/PS1小鼠大脑皮质及海马均可见一定数量的SP;ob/ob小鼠大脑皮质内偶可见SP,而对照组未见SP。与对照小鼠相比,APP/PS1与ob/ob小鼠脑内Aβ40、Aβ42的含量明显升高(P0.05);但APP/PS1小鼠脑内Aβ水平显著高于ob/ob小鼠(P0.05)。APP在APP/PS1小鼠脑内的表达显著高于其他两组小鼠;在ob/ob小鼠脑内的表达要强于对照小鼠(P0.05)。Aβ生成的关键酶BACE1在APP/PS1与ob/ob小鼠脑内的表达显著高于对照小鼠(P0.05),但其在APP/PS1小鼠脑内的表达要强于ob/ob小鼠(P0.05)。Aβ降解的关键酶IDE在APP/PS1与ob/ob小鼠脑内的表达显著低于对照小鼠(P0.05),且在ob/ob小鼠脑内表达最低。结论 Aβ生成与降解的异常以及其异常聚集沉积不仅发生在早期AD脑内,同时也发生在T2DM脑内,提示Aβ过表达可能是促进2型糖尿病并发AD的重要原因之一。     

高压氧通过激活CREB/BDNF信号通路减轻阿尔茨海默病小鼠海马神经元突触损伤

目的:探讨高压氧(hyperbaric oxygen,HBO)对阿尔茨海默病APP/PS1转基因(trangenic,TG)小鼠海马神经元突触损伤的影响及其作用机制。方法:将6月龄雄性APP/PS1 TG小鼠随机分为TG组、HBO组及环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(cAMP response element binding protein,CREB)抑制剂H89组,每组10只;另取10只同龄雄性野生型(wild-type,WT)C57BL/6小鼠作为阴性对照组(WT组)。HBO和H89组小鼠进行高压氧治疗6个疗程;WT组及TG组小鼠不给予治疗。Morris水迷宫实验检测各组小鼠学习记忆能力;筑巢实验检测小鼠智力改变;尼氏染色检测各组小鼠海马神经元中尼氏体表达;real-time PCR检测小鼠海马区CREB及脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)mRNA的表达;Western blot检测小鼠海马区突触素(synapsin,SYN)、突触后致密区蛋白95(postsynaptic density protein 95,PSD95)、生长相关蛋白43(growth-associated protein 43,GAP43)、CREB、磷酸化CREB(p-CREB)及BDNF的蛋白水平。结果:与WT组相比,TG组小鼠学习记忆能力降低,筑巢分数显著降低,海马区尼氏体数量显著减少,CREB及BDNF mRNA相对表达显著减少,SYN、PSD95、GAP43、p-CREB及BDNF蛋白水平显著降低(P0. 05)。与TG组相比,HBO组小鼠学习与记忆能力改善,小鼠筑巢分数显著增加,海马区神经元排列整齐且尼氏体数量增加,CREB及BDNF mRNA相对表达显著增加,SYN、PSD95、GAP43、p-CREB及BDNF蛋白水平显著升高(P0. 05)。与HBO组相比,H89组小鼠学习记忆能力及筑巢分数显著降低,海马区尼氏体数量减少,CREB及BDNF mRNA相对表达显著减少(P0. 05),SYN、PSD95、GAP43、p-CREB及BDNF蛋白水平显著降低(P0. 05)。结论:HBO能改善APP/PS1 TG小鼠的学习记忆能力,其机制可能与激活CREB/BDNF信号通路,减轻小鼠海马神经元突触损伤有关。     

电针对阿尔茨海默病小鼠海马神经元突触损伤及对CREB/BDNF信号通路的影响

目的探讨电针对APP/PS-1转基因小鼠海马神经元突触损伤及对CREB/BDNF信号通路的影响。方法将7月龄APP/PS-1转基因小鼠随机分为模型组、电针组及药物组,每组10只;另取10只同龄C57BL/6小鼠作为对照组。电针组针刺百合、印堂穴,并接入电针仪,20 min/次/天,共治疗15天;药物组给予盐酸多奈哌齐灌胃治疗;对照组及模型组不予以治疗。Morris水迷宫检测各组小鼠学习记忆能力;筑巢实验检测小鼠智力改变;尼式染色检测各组小鼠海马尼氏体变化;Western blot检测小鼠海马区SYN、PSD95、GAP43、CREB、pCREB及BDNF蛋白表达。结果 Morris水迷宫结果显示,与对照组相比,模型组小鼠逃避潜伏期增加,穿越平台次数减少,在目标象限停留时间减少;电针及药物组小鼠逃避潜伏期减少,穿越平台次数增加,在目标象限停留时间延长。模型组筑巢分数较对照组明显降低,电针及药物组小鼠筑巢分数明显增加。电针及药物组小鼠海马区神经元排列整齐且尼氏体数量增加,SYN、PSD95及GAP43蛋白表达增加。电针及药物组小鼠海马区pCREB及BDNF蛋白表达较模型组增加。结论电针减轻小鼠海马神经元突触损伤,改善APP/PS-1转基因小鼠的学习记忆能力,可能与调控CREB/BDNF信号通路相关蛋白表达有关。     

电针对AD模型幼鼠学习记忆功能和海马突触可塑性的影响

目的：研究电针刺激“百会”“风府”和双侧“肾俞”对阿尔茨海默病（AD）模型幼鼠海马区突触可塑性的影响。方法：24只6周龄雄性APP/PS1转基因小鼠作为AD幼鼠模型,随机分为电针穴位组和AD模型组,每组12只;12只同月龄C57BL/6J小鼠作为正常对照组。电针刺激“百会”“风府”和双侧“肾俞”穴位,每天1次,每次20 min,每周休息1 d,连续干预16周。Morris水迷宫检测各组小鼠的学习记忆功能;Golgi染色检测海马CA1区树突棘数量;透射电镜观察海马CA1区神经元突触结构;实时荧光定量PCR和Western blot分别检测海马脑源性神经营养因子（BDNF）、突触小泡蛋白（SYN）和N-甲基-D-天冬氨酸受体2B亚基（NR2B）的mRNA和蛋白表达水平。结果：与正常对照组比较,AD模型组小鼠学习记忆功能明显下降;海马神经元树突棘部分丢失,数目减少（P<0.05）;海马区突触数量减少,结构模糊不清;海马BDNF、SYN和NR2B的mRNA和蛋白表达水平均显著降低（P<0.01或P<0.05）。与AD模型组比较,电针穴位组小鼠学习记忆功能明显增强;海马神经元树...     

激活APP/PS1小鼠β_2-AR增强海马神经元再生并改善记忆缺失

目的:研究β_2-肾上腺素受体(β_2-AR)对阿尔茨海默病(AD)APP/PS1转基因小鼠海马神经元再生和学习记忆的作用。方法:12只AD小鼠随机分为APP/PS1组和APP/PS1+Clen组,另选6只野生型小鼠作为对照组(WT)。APP/PS1+Clen组于第8月龄起行腹腔注射β_2-AR激动剂Clenbuterol(Clen)2 mg/kg/d,持续2个月。APP/PS1组和WT组均接受等量的0.9%生理盐水稀释的DMSO。给药后对小鼠进行Morris水迷宫试验检测小鼠的学习记忆能力,后取脑切片进行PSA-NCAM免疫组织化学染色。结果:与APP/PS1组相比,APP/PS1+Clen组逃避潜伏期明显缩短,而目标象限停留时间及经过平台次数明显增加(P0.05)。免疫组织化学法显示APP/PS1+Clen组小鼠海马区PSA-NCAM表达增强。结论:通过Clenbuterol激活APP/PS1小鼠β_2-AR可增强海马神经元再生并改善记忆缺失。     

BDNF在APP/PS1转基因小鼠皮层和海马内的表达及其对学习记忆能力的影响

目的:探究脑源性神经生长因子(BDNF)在野生型小鼠和APP/PS1双转基因小鼠大脑内的表达变化及其对学习记忆能力的影响。方法:选择野生型小鼠和APP/PS1双转基因小鼠作为研究对象,刚果红染色标记Aβ斑,TUNEL法检测细胞凋亡,采用免疫荧光和Western blot方法检测BDNF在野生型和APP/PS1双转基因小鼠皮层和海马内的表达,Morris水迷宫检测小鼠的空间学习记忆能力。结果:APP/PS1双转基因小鼠皮层和海马区都形成Aβ斑,且12月龄小鼠Aβ斑的数量多于6月龄(P0.05)。12月龄APP/PS1双转基因小鼠皮层和海马区神经元凋亡的数量多于野生型小鼠(P0.01)。野生型小鼠皮层和海马区BDNF的表达量高于APP/PS1双转基因小鼠(P0.01)。水迷宫检测显示,APP/PS1双转基因小鼠的逃逸潜伏期长于野生型小鼠,而60 s内穿越平台所位象限的次数少于野生型小鼠,且游泳轨迹杂乱无章。结论:APP/PS1双转基因型小鼠皮层和海马区BDNF的表达量低于野生型小鼠,并伴随着神经元凋亡的增加,且空间学习记忆能力降低。这些结果提示APP/PS1双转基因小鼠学习记忆能力的降低可能与BDNF表达减少导致神经元凋亡增加有关,这也许是阿尔茨海默病的病理机制之一。     

阿尔茨海默病合并2型糖尿病模型小鼠海马血管损伤与认知改变

目的 探讨2型糖尿病（T2DM）对阿尔茨海默病（AD）脑血管发育的影响,及其对AD病理发生的影响机制。 方法 40只6月龄APP/PS1转基因小鼠及同窝野生型小鼠采用高糖高脂饲料喂养6个月后,即各组小鼠12月龄时,连续4 d腹腔注射 1% 链脲佐菌素溶液,建立AD合并T2DM模型小鼠及单纯T2DM模型小鼠。设立4个组别：正常对照组、AD组、T2DM组、AD合并T2DM组,每组小鼠各10只。通过小鼠跳台实验检测小鼠学习记忆能力,墨汁灌注观察小鼠海马区血管形态,油红O染色、免疫荧光实验检测小鼠海马区各病理指标变化。 结果 与正常对照组相比,AD合并T2DM模型小鼠学习与记忆能力明显下降(P<0.05),海马区血管变细、密度明显减低(P<0.05),脂质沉积增多并出现小血管渗漏,且其海马区β-淀粉样前体蛋白裂解酶1（BACE-1）、核因子（NF)-κB与基质金属蛋白酶（MMP)-9表达增多(P<0.05)。 结论 T2DM对小鼠学习记忆功能起负作用,通过促进AD病理变化加速AD模型小鼠脑血管病变,MMP-9的异常表达也可能是引起AD血管病变的原因之一。     

艾司西酞普兰对APP/PS1小鼠海马神经元突触功能及对BDNF-TrkB-CREB信号通路的影响

目的探讨艾司西酞普兰对APP/PS-1小鼠海马神经元突触功能及与BDNF-TrkB-CREB信号通路的关系。方法将7月龄APP/PS-1转基因小鼠随机分为模型组及艾司西酞普兰组,每组10只;另取10只同龄C57BL/6小鼠作为阴性对照组。给予10 mg/kg艾司西酞普兰灌胃治疗,连续8周,每天一次;对照组及模型组给予等体积生理盐水。Morris水迷宫检测各组小鼠学习记忆能力;尼式染色检测各组小鼠海马DG区尼氏体变化;酶联免疫吸附实验(ELISA)检测小鼠海马区乙酰胆碱酯酶(AChE)及胆碱乙酰转移酶(ChAT);Western blot检测小鼠海马区SYN、PSD95、GAP43、BDNF、TrkB、p-TrkB、CREB及p-CREB蛋白表达。结果艾司西酞普兰组改善APP/PS-1小鼠认知功能,小鼠逃避潜伏期减少,穿越平台次数增加,在目标象限停留时间延长,小鼠海马DG区神经元排列整齐且尼氏体数量增加,下调AChE,上调ChAT表达,且能增加SYN、PSD95及GAP43蛋白表达;此外,艾司西酞普兰还能显著增加小鼠海马区BDNF、p-TrkB及p-CREB蛋白表达,与模型组相比,差异有统计学意义(P0.05)。结论艾司西酞普兰改善小鼠海马神经元突触功能,提高APP/PS-1小鼠的学习记忆能力,可能与调控BDNF-TrkBCREB信号通路相关蛋白表达有关。     

西红花苷对阿尔茨海默病大鼠学习记忆及海马LTP的影响

目的:探讨西红花苷对阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)大鼠空间学习记忆能力对海马LTP的影响。方法:健康成年SD大鼠,随机分为正常对照组、AD模型组、西红花苷(低、中、高剂量)组Morris水迷宫实验检测空间学习记忆能力,电生理实验检测海马LTP,Western Blot检测海马GAP-43蛋白表达。结果:AD模型组大鼠寻找水下平台的潜伏期时间较对照组延长(P0.01),西红花苷各剂量组寻找水下平台的潜伏期时间从第二天起,较AD模型组均缩短(P0.01),西红花苷中剂量组和高剂量组的潜伏期时间均短于低剂量组(P0.05),中、高剂量组间的潜伏期时间在各实验日均未见有无显著性统计学差异。强直性高频刺激海马诱发电位的幅值比较,AD模型组低于对照组(P0.01),西红花苷各剂量组高于AD模型组(P0.05),且西红花苷中、高剂量组高于低剂量组(P0.05)。西红花苷各剂量组海马GAP-43表达低于对照组(P0.01),高于AD模型组(P0.01)。结论:西红花苷对AD大鼠学习记忆能力有一定改善作用,增强海马LTP和GAP-43的表达。     

淫黄葛复合剂对阿尔茨海默病小鼠行为学和海马解聚素金属蛋白酶10表达的影响

目的 探讨淫羊藿、黄芪、葛根有效组分复方对阿尔茨海默病（AD）模型小鼠行为学和海马CA3区解聚素金属蛋白酶10（ADAM10）表达的影响。方法 10月的雄性APPswe/PS1dE9双转基因模型小鼠30只随机分为复方组、模型组和去铁斯诺(DFX)组,10月龄的雄性C57BL/6 J小鼠10只作为正常对照组。用药结束后,采用Morris水迷宫检测各组小鼠学习记忆能力,并于水迷宫后取出小鼠的脑组织,应用免疫荧光、Real-time PCR和Western blotting方法检测各组小鼠海马CA3区ADAM10的表达。结果 水迷宫实验结果显示,与正常对照组小鼠相比,模型组小鼠的逃避潜伏期、游泳距离和游泳时间均明显延长(P＜0.05),穿越平台区域次数和平台区域停留时间明显减少(P＜0.05),首次穿越平台的逃避潜伏期明显延长(P＜0.05);与模型组小鼠相比,复方组和DFX组逃避潜伏期、游泳距离和游泳时间明显缩短(P＜0.05),穿越平台区域次数和平台区域停留时间明显增多(P＜0.05),首次穿越平台的逃避潜伏期明显缩短;复方组和DFX组相比,逃避潜伏期、游泳距离和游泳时间及跨台次数差异无显著性 (P＞0.05),穿越平台区域次数、平台区域停留时间和首次穿越平台的逃避潜伏期差异无显著性 (P＞0.05)。与正常对照组小鼠相比,模型组小鼠海马CA3区ADAM10的表达增高(P＜0.05);与模型组相比,复方组和DFX组小鼠海马CA3区DAM10的表达降低(P＜0.05);复方组和DFX组相比,ADAM10表达水平差异无显著性 (P＞0.05)。结论 应用淫羊藿、黄芪、葛根有效组分复方可以改善APPswe/PS1dE9双转基因AD模型小鼠的学习记忆能力,其机制可能与下调ADAM10的表达减少神经元的损伤和死亡有关。     

β-蜕皮甾酮对APP/PS-1转基因小鼠学习记忆能力及海马Bcl-2、Bax蛋白表达的影响

目的观察β-蜕皮甾酮对APP/PS-1转基因小鼠学习记忆能力及海马Bcl-2、Bax蛋白表达的影响。方法取C57小鼠6只及APP/PS-1转基因小鼠12只,C57小鼠为对照组(Control)、APP/PS-1小鼠12只随机分为模型组(APP/PS-1)和实验组(APP/PS-1+20HE),实验组APP/PS-1转基因小鼠按14.4mg/kg的剂量灌胃β-蜕皮甾酮,每日一次,对照组及模型组小鼠灌胃等量蒸馏水,连续灌胃8周,Morris水迷宫检测小鼠学习记忆能力,尼氏染色观察各组小鼠海马组织病理学变化,免疫组化法观察海马Bcl-2和Bax蛋白表达的变化。结果模型组小鼠与对照组小鼠相比,认知能力明显下降(P<0.01),海马Bcl-2和Bax蛋白表达均增加。实验组与模型组相比,学习记忆能力明显改善(P<0.01),Bcl-2蛋白的表达增加,Bax蛋白的表达减少。结论β-蜕皮甾酮能够改善转基因小鼠的学习记忆能力,可能与促进海马Bcl-2蛋白表达和抑制Bax蛋白表达有关。     

基于齿状回神经元树突棘形态探讨ROCK2敲减改善APP/PS1小鼠认知功能的作用机制

目的：观察海马区敲减Rho相关激酶2(ROCK2)对阿尔茨海默病模型APPswe/PS1dE9(APP/PS1转基因小鼠的干预效果，并探索其对海马齿状回区神经元树突棘形态的影响及潜在机制。方法：选用雄性8月龄的C57BL/6及APP/PS1小鼠，随机分为4组，分别为野生型（WT）组（8只）、APP/PS1小鼠生理盐水（NS）组（8只）、APP/PS1小鼠敲减对照（shRNA）组（12只）和APP/PS1小鼠ROCK2敲减（shROCK2）组（12只）。通过腺相关病毒共转染shRNA的方法，下调APP/PS1转基因小鼠双侧海马区神经元ROCK2蛋白表达，实现海马区局部神经元ROCK2敲减。利用水迷宫和Y迷宫实验检测小鼠的认知功能；免疫荧光染色和Western blot检测AD相关病理改变；激光共聚焦和Imairs软件观察并分析海马齿状回区神经元的树突棘形态变化；Western blot检测海马组织中突触相关蛋白的表达水平。结果：水迷宫实验中，与WT组的小鼠相比，NS和shRNA组小鼠到达平台的时间、到达平台的距离及第一次进入平台所在象限的时间均显著增加（P<0.05或P<0....