翼状胬肉中MMP-2,TIMP-2和TGF-β1的表达意义

目的:探讨MMP-2及其抑制剂TIMP-2和影响它们作用的TGF-β1在翼状胬肉中的表达及意义。方法:采用Maxvision免疫组化技术检测在20例翼状胬肉和10例正常球结膜中MMP-2、TIMP-2及TGF-β1的表达,并比较两组中表达的差异。结果:MMP-2和TGF-β1在翼状胬肉中的表达的阳性率显著高于正常球结膜中它们的阳性表达率(z=-4.618,-4.376,P<0.01),而TIMP-2在两组中的表达差异无显著性(z=-1.319,P>0.05)。经Spearman等级相关检验分析,在翼状胬肉中,MMP-2和TGF-β1的阳性表达率存在正相关(r=0·686,P<0.01);而MMP-2和TGF-β1与TIMP-2阳性表达率之间无相关(r=-0.410,-0.143,P>0.05)。结论:TGF-β1介导的MMP-2和TIMP-2表达失衡在翼状胬肉的发生、发展及侵犯角膜过程中发挥着重要的作用。     

基质金属蛋白酶-1及其抑制剂和转化生长因子-β1在翼状胬肉中的表达及意义

目的探讨基质金属蛋白酶-1(matrix metalloproteinase-1,MMP-1)及其抑制剂金属蛋白酶组织抑制因子-1(tissue inhibitor of metalloproteinase-1,TIMP-1)和影响两者作用的转化生长因子β1(transforming growth foctor-β1,TGF-β1)在翼状胬肉头部组织中的表达及意义.方法采用免疫组化技术检测MMP-1、TIMP-1及TGF-β1在翼状胬肉头部(22例)和正常结膜(12例)中的表达.结果MMP-1与TGF-β1在翼状胬肉头部组织中的阳性表达率显著高于正常结膜(P＜0.01),而TIMP-1的表达差异无显著性(P＞0.05).经Spearman等级相关分析可知,翼状胬肉中MMP-1与TGF-β1阳性表达间存在正相关(r=0.625,P＜0.01);TIMP-1与TGF-β1阳性表达间无相关性(r=-0.0512,P＞0.05).结论MMP-1,TIMP-1及TGF-+β1可能积极参与翼状胬肉发生、发展过程中的基质重构与角膜Bowman's膜的破坏.     

小鼠单纯疱疹病毒性角膜炎中基质金属蛋白酶的表达及活性研究

目的 探讨角膜感染Ⅰ型单纯疱疹病毒(HSV-1)后基质金属蛋白酶(MMPs)及其组织抑制剂(TIMPs)在角膜中的分布及酶活性表达。方法 BALB／c小鼠眼角膜接种HSV-1(KOS株)以诱发单纯疱疹病毒性角膜炎(HSK)。分别收集正常眼球及感染后第2、7、14及28天的感染眼球。应用免疫组织化学法和Western blot方法检测MMP-2、-8、-9及TIMP-1、-2在角膜组织中的表达,并应用酶谱(Zymography)技术检测MMPs的酶活性。结果 感染后第2天,感染眼的MMP-2、-9及TIMP-1、-2表达比未感染眼增加且表达主要位于浅表基质层及上皮下的炎性细胞中。感染后第14和28天可见坏死性角膜炎及角膜溃疡形成,同时角膜基质和浸润的炎性细胞中尤其溃疡处,可见MMP-2、-9及TIMP-1、-2表达显著增加。溃疡区域有大量MMP-8阳性染色的中性粒细胞。角膜感染HSV-1后,明胶酶(MMP-2、-9)活性和胶原酶(MMP-8)活性均增强。结论 HSV-1角膜感染后,由角膜细胞和浸润的炎性细胞分泌产生的MMPs可能对上皮性角膜炎与溃疡形成过程起重要的促进作用。MMPs与TIMPs的相互作用可能对HSK的坏死性病变起重要调节作用。（中华眼科杂志,2004,40：395-399)     

基质金属蛋白酶2和金属蛋白酶2组织抑制因子及转化生长因子β1在糖尿病性白内障患者晶状体上皮细胞的表达及意义

目的探讨基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase-2, MMP-2)、金属蛋白酶2组织抑制因子(tissue inhibitor of metalloproteinase 2,TIMP-2)及转化生长因子β1(transforming growth foctor beta,TGF-β1)在糖尿病性白内障患者的晶状体上皮细胞中的表达及意义.方法应用免疫组化技术检测23例糖尿病性白内障患者和7例正常人的晶状体上皮细胞中MMP-2、TIMP-2及TGF-β1的表达,并进行比较.结果糖尿病性白内障患者晶状体上皮细胞中MMP-2和TGF-β1的阳性表达率与正常人比较,差异均有非常显著意义(χ2＝24.548,16.78;P<0.01),而糖尿病性白内障患者晶状体上皮细胞中TIMP-2的阳性表达率与正常人比较,差异无显著意义(χ2＝0.621,P>0.05).经Spearman等级相关分析,晶状体上皮细胞中,MMP-2和TGF-β1的阳性表达率存在正相关(r=0.516, P<0.01);MMP-2和TGF-β1与TIMP-2阳性表达率间均无相关(r=-0.045,0.042;P>0.05).结论TGF-β1介导的MMP-2和TIMP-2表达失衡在糖尿病性白内障患者晶状体前、后囊膜下纤维化的发生和发展过程中起重要作用.     

组织因子途径抑制物2对角膜基质细胞表达MMPs的影响

目的:探讨组织因子途径抑制物(TFPI-2)与体外角膜基质细胞基质金属蛋白酶(MMPs)表达的关系。方法:体外兔角膜基质细胞原代、传代培养;脂质体介导人类TFPI-2真核表达载体pBos-Cite-neo/TFPI-2转染基质细胞,G418筛选阳性细胞,RT-PCR和Western-blot技术检测转染前后三组角膜基质细胞(转染TFPI-2基因组K-TFPI-2、转染空载体组K-V、未转染组K-P)中TFPI-2mRNA以及相应蛋白质的表达水平;利用明胶酶谱法分析比较转染前后三组角膜基质细胞表达MMPs的活性差异。结果:K-TFPI-2组角膜基质细胞TFPI-2mRNA和蛋白质的表达较K-P和K-V组显著上调(mRNA:0.79±0.02vs0.51±0.03和0.48±0.02,P=0.000和P=0.000;蛋白质:24.5±0.8vs15.5±0.5和14.9±0.9,P=0.000和P=0.000);与K-P和K-V组相比,K-TFPI-2组细胞表达MMP-1,2的活性下降(MMP-1:12.3±0.7vs16.7±1.2和15.9±0.7,P=0.001和P=0.003;MMP-2:15.4±1.3vs18.2±1.1和17.8±1.1,P=0.027和P=0.046)。结论:TFPI-2表达可明显抑制角膜基质细胞表达MMPs的活性,为进一步开展角膜新生血管性疾病的基因治疗提供实验依据。     

转化生长因子β1对培养的人RPE细胞MMP和TIMP-1 mRNA表达的影响

目的研究转化生长因子β1(transforming growth factorβ1,TGF-β1)对培养的人视网膜色素上皮(human retinal pigment epithelium,hRPE)细胞MMP-2、MMP-9和TI MP-1表达的影响。方法采用半定量RT-PCR检测hRPE细胞中MMP-2、MMP-9和TI MP-1的表达,及不同浓度TGF-β1(0.01μg·L-1、0.1μg·L-1、1μg·L-1、10μg·L-1)对hRPE细胞表达MMP-2、MMP-9和TI MP-1的影响。结果培养的人RPE细胞中MMP-2,MMP-9和TI MP-1的mRNA均有表达。TGF-β1能上调MMP-2mRNA的表达,并呈剂量依赖性。低浓度(0·01μg·L-1、0.1μg·L-1)TGF-β1处理RPE细胞后,可下调TI MP-1mRNA的表达,随着TGF-β1浓度的增加(1μg·L-1、10μg·L-1),TI MP-1mRNA的表达可轻微上调,但与对照组相比没有显著性差异。结论TGF-β1能上调培养的hRPE细胞中MMP-2mRNA的表达,引起MMP-TI MP平衡的直接改变,可能在玻璃体视网膜病理机制中有利于RPE细胞的迁移。     

氧化损伤对视网膜色素上皮细胞中基质金属蛋白酶表达的影响

目的探讨氧化损伤对体外培养的人视网膜色素上皮(RPE)细胞金属蛋白酶(MMP-2,9)及其组织抑制剂(TIMP-1)表达的影响。方法将不同浓度的H2O2处理传代的细胞，检测活力后，采用明胶酶谱法和RT—PCR技术定量分析RPE细胞中MMP-2，9的蛋白水平和mRNA含量。采用RT—PCR和ELISA分别测定TIMP-1的mRNA表达和培养液中的浓度。结果不同浓度H2O2对RPE细胞增殖没有影响，MMP-2均呈高表达，但mRNA和蛋白均没有变化；MMP-9表达相对弱，且随着H2O2浓度的升高而增强，ELISA法检测不同浓度H2O2处理的RPE细胞培养液中TIMP-1浓度无显著差别。结论不同H2O2浓度下MMP-2、TIMP表达无明显差异，MMP-9随着H2O2浓度增加表达增强，表明糖尿病视网膜病变中存在的氧化损伤导致MMP-9表达升高。     

羊膜移植对兔角膜碱烧伤早期MMP-2和TIMP-2表达的影响

目的研究羊膜移植在兔角膜碱烧伤早期治疗中的作用机制。方法对60只新西兰白兔随机分为碱烧伤组、羊膜移植组及正常对照组,实验组建立角膜碱烧伤模型,羊膜移植组于烧伤后30min实施羊膜移植手术。术后14、30、60d,观察分析角膜病理组织学改变;并应用计算机图像分析系统对角膜组织中基质金属蛋白酶-2（Matrix metalloproteinase-2,MMP-2）和基质金属蛋白酶组织抑制剂-2（Tissue inhibitors of metalloproteinase-2,TIMP-2）的表达进行半定量测定。结果羊膜移植组角膜浸润及角膜基质坏死溃疡程度均较同期碱烧伤组为轻,角膜MMP-2的表达显著降低（P〈0.05）,而TIMP-2表达显著升高（P〉0.05）。结论羊膜移植可提高角膜TIMP-2表达的水平并抑制MMP-2的活性,从而在角膜碱烧伤的早期治疗中起到抑制角膜炎症和溃疡的作用。     

抗青光眼眼表药物与人结膜成纤维细胞TGF-β、MMP的表达

目的:评估抗青光眼眼表药物对原发性开角型青光眼患者结膜成纤维细胞培养中转化生长因子β及基质金属蛋白酶表达水平的影响。方法:用逆转录-聚合酶链式扩增方法(RT-PCR)评估TGF-β的三种异形体(TGF-β1、TGF-β2、TGF-β3)以及MMP的三种异形体(MMP-2、MMP-3、MMP-9)在POAG患者的HTF中在mRNA水平上的表达;用酶联免疫吸附实验(ELISA)方法测定经体内、体外抗青光眼眼表药物处理后的POAG患者的HTF细胞培养基中TGF-β1在蛋白水平上的表达。所有实验均以健康组作为对照。结果:TGF-β1、TGF-β2及TGF-β3在mRNA水平上均被HTF表达,且青光眼组在TGF-β2和TGF-β3的mRNA水平上的表达均显著高于对照组。正常对照组在蛋白水平上未测定出转化生长因子β1的表达,青光眼组中转化生长因子β1的表达显著(P<0.01)。青光眼组与对照组的结膜成纤维细胞培养经过体外拉坦前列素滴眼液的处理后,条件培养基中的转化生长因子β1的表达水平相比较未被处理过的培养基中的表达水平显著提高约4倍(P<0.01),青光眼组与对照组相比较组间无差异。MMP-2和MMP-9在结膜成纤维细胞中均有表达,其中,青光眼组MMP-9的扩增产物中mRNA含量显著低于对照组,约为对照组的1/1000。结论:体内及体外实验中,青光眼组HTF细胞培养中在mRNA及蛋白水平上增高的TGF-β三种异形体的表达可能导致青光眼组HTF细胞增殖的提高;青光眼组HTF细胞培养中在mRNA水平上缺失的MMP-3和降低的MMP-9的表达可能导致POAG患者结膜下胶原增生,结膜瘢痕化;细胞增殖的提高以及变异的TGF-β与MMP的表达均可能与本研究中POAG患者至少1a的抗青光眼眼表药物的持续使用有关;而三者均会促进抗青光眼滤过术后的切口愈合,从而影响手术效果。     

形觉剥夺下雏鸡后极部巩膜中MMP-2 TIMP-2及RARβ表达变化

目的 分析雏鸡形觉剥夺性近视眼及形觉剥夺性近视恢复眼后极部巩膜中基质金属蛋白酶2(matrix metallopmteinaae 2,MMP-2)、组织金属蛋白酶抑制剂2(tissue inhibitor of matrix metallopro-teinase 2,TIMP-2)及视黄酸受体-β(retinoic acid receptor-β,RARβ)的水平及其相关性.方法 选用新孵出家鸡75只,半透明眼罩遮盖的方法对左眼进行形觉剥夺,分为形觉剥夺组,遮盖14d;形觉剥夺恢复组,遮盖11d后,去遮盖3d.右眼为对照眼.取直径8mm的后极部眼组织块,分离出巩膜纤维层和软骨层.RT-PCR检测MMP-2、TIMP-2及RARβ mRNA的相对含量,并将MMP-2、TIMP-2 mRNA水平分别与RARβ的mRNA水平作线性相关分析.结果 形觉剥夺14d后,纤维层中MMP-2的表达增强(P<0.01),TIMP-2的表达减弱(P<0.01);去剥夺3d后,MMP-2的表达减弱(P<0.01),而TIMP-2的表达恢复到接近对照眼的水平(P>0.05).软骨层表达没有明显变化.形觉剥夺14d后,RARβ的表达均增强,但纤维层中的表达更为强烈(P<0.01).去剥夺3d后,RARβ的表达均明显下降(P<0.01).MMP-2与RARβmRNA水平呈正相关(P<0.05,r=0.944);TIMP-2与RARβmRNA水平呈负相关(P<0.05,r=-0.863).结论 雏鸡形觉剥夺性近视眼及形觉剥夺性近视恢复眼后极部巩膜纤维层中MMP-2、TIMP-2及RARβ的水平均发生明显变化,并有相关性.RARβ参与了巩膜纤维层细胞外基质的降解过程.     

康柏西普对豚鼠形觉剥夺性近视的干预作用及相关机制分析

目的　探讨抗新生血管生长因子融合蛋白康柏西普（Conbercept）球结膜下注射对豚鼠形觉剥夺性近视的干预作用及其可能的作用机制。方法　普通级3周龄断乳花色豚鼠48只随机分为空白对照组、单纯手术组、生理盐水组、Conbercept组，每组各12只。其中空白对照组豚鼠不作处理，单纯手术组、生理盐水组、Conbercept组使用眼睑缝合法遮盖右眼，生理盐水组、Conbercept组分别在缝合时、缝合后7 d右眼球结膜下注射0.05 mL生理盐水、0.5 mg（0.05 mL）Conbercept。记录各组眼睑缝合前及缝合后7 d、14 d时的眼轴长度、屈光度，并取后极部巩膜组织采用RT-PCR、Western blot方法检测各组豚鼠巩膜中基质金属蛋白酶2（MMP-2）、基质金属蛋白酶抑制剂-2（TIMP-2）、转化生长因子（TGF）-β1、TGF-β2 mRNA和蛋白表达情况。结果　眼睑缝合后7 d、14 d，单纯手术组较空白对照组豚鼠右眼眼轴长度、屈光度均增加，MMP-2、TGF-β2 mRNA和蛋白相对表达量均增加，TGF-β1、TIMP-2相对表达量均减少，差异均具有统计学意义（均为P<0.05）；单纯手术组与生理盐水组各指标相比差异均无统计学意义（均为P>0.05)。眼睑缝合后7 d，与生理盐水组相比，Conbercept组眼轴长度、屈光度及TIMP-2、TGF-β1 mRNA和蛋白相对表达量差异均无统计学意义（均为P>0.05），MMP-2、TGF-β2 mRNA和蛋白相对表达量均减少，差异均有统计学意义（均为P<0.05）；眼睑缝合后14 d时，与生理盐水组相比，Conbercept组眼轴长度、屈光度及MMP-2、TGF-β2、TGF-β1 mRNA和蛋白相对表达量差异均有统计学意义（均为P<0.05）。结论　0.5 mg Conbercept球结膜下注射可延缓豚鼠形觉剥夺性近视形成，且可能是通过调节巩膜中的MMP-2、TGF-β1、TGF-β2表达而发挥作用。     

血管内皮生长因子-A165对形觉剥夺性近视豚鼠巩膜重塑的影响

目的：探讨玻璃体腔内注射血管内皮生长因子-A165(VEGF-A165)对形觉剥夺性近视(FDM)豚鼠巩膜重塑的影响。方法：健康3周龄三色豚鼠120只随机分为6组，每组20只，其中空白组不做任何干预，FDM组仅建立FDM模型，PBS组建立FDM模型前玻璃体腔内注射PBS缓冲液2.5μL，1ng组、5ng组、10ng组建立FDM模型前玻璃体腔内分别注射VEGF-A165 1、5、10ng。用半透明气球遮盖豚鼠右眼14d建立FDM模型，造模前后测量豚鼠右眼屈光度和眼轴长度，造模14d后采用高效液相色谱法检测视网膜中多巴胺(DA)含量，用RT-PCR、Western blot法检测巩膜中基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶抑制剂-2(TIMP-2)、转化生长因子(TGF)-β1、TGF-β2、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的mRNA和蛋白表达情况。结果：造模前，各组豚鼠右眼屈光度和眼轴长度均无显著差异(P&#x003E;0.05)。造模14d后，与空白组相比，FDM组豚鼠右眼近视度数升高，眼轴增长，视网膜中DA含量减少，巩膜中MMP-2、TGF-β2、α-SMA表达量均增加，TIMP-2、TGF-β1表达量均减少(P&#x003C;0.01)； 与FDM组相比，1ng组、5ng组、10ng组豚鼠右眼近视度数均降低，眼轴增长趋势均减缓，视网膜中DA含量均增加，巩膜中MMP-2、TGF-β2、α-SMA表达量均减少，TIMP-2、TGF-β1表达量均增加(P&#x003C;0.01)，且随着玻璃体腔注射VEGF-A165浓度的升高，豚鼠右眼近视度数逐渐升高，眼轴逐渐延长，视网膜中DA含量逐渐减少，巩膜中MMP-2、TGF-β2、α-SMA表达量均逐渐增加，TIMP-2、TGF-β1表达量均逐渐减少。结论：玻璃体腔内注射VEGF-A165可以增加FDM豚鼠视网膜中DA含量，影响巩膜中MMP-2、TIMP-2、TGF-β1、TGF-β2、α-SMA的表达，抑制巩膜重塑，其中1ng VEGF-A165效果最明显。     

Ets-1、MMP-1及TIMP-1在视网膜母细胞瘤中的表达

目的探讨E26转录因子-1(E26 transformation-specific-1,Ets-1),基质金属蛋白酶-1(matrix metalloproteinase-1,MMP-1)及其抑制剂(tissue inhibitor of matrix metalloproteinase-1,TIMP-1)在视网膜母细胞瘤(Retinoblastoma Rb)中的表达及其与肿瘤的浸润及转移的关系.方法以免疫组织化学法检测视网膜母细胞瘤中的Ets-1,MMP-1和TIMP-1的表达,并以免疫组织化学法检测视网膜母细胞瘤中CD34的表达,计算肿瘤的微血管密度值(microvessel density,MVD).并依肿瘤的分级进行统计学处理.结果Ets-1和MMP-1在视网膜母细胞瘤中呈高表达,TIMP-1呈低表达.Ets-1和MMP-1主要表达于癌细胞胞浆中.Ets-1和MMP-1高表达组的微血管密度明显高于Ets-1和MMP-1低表达组(P＜0.01).结论Ets-1和MMP-1的高表达及TIMP-1的低表达可能与视网膜母细胞瘤的转移浸润有关.     

碱烧伤小鼠行羊膜移植后MMP及TIMP表达的变化

目的:通过检测羊膜移植对小鼠角膜碱烧伤后不同时间点基质金属蛋白酶(metalloproteinases,MMP-2,8,9)及金属蛋白酶组织抑制剂(tissue inhibitor of metalloproteinases,TIMP-1,2)的表达,探讨羊膜移植在碱烧伤病程中所起的作用。方法:将40只Balb/c小鼠随机分为实验组和对照组,采用1mol/L氢氧化钠溶液烧伤小鼠角膜;实验组小鼠右眼行羊膜移植加睑裂缝合术,对照组仅行睑裂缝合术。分别在羊膜移植后的第0,2,7,14d处死小鼠,应用Western blot检测不同时间点MMP-2,8,9及TIMP-1,2的表达,增强化学发光法(enhanced chemiluminescent,ECL)对结果进行分析。结果:对照组角膜中MMP-2,8,9在第2d出现表达,第14d达到峰值,且表达主要位于基质层及上皮下的炎性细胞中。碱烧伤后第2d TIMP-1仅微弱表达,第7d可见表达增加,第14d到达峰值。TIMP-2第2d即可见表达增加,后持续增强。实验组各时间点MMP-2,8,9表达均低于对照组(P<0.01),TIMP-1,2的表达均高于对照组(P<0.01)。结论:行羊膜移植可通过抑制MMP的表达,促进TIMP表达,从而抑制和延迟碱烧伤后角膜炎性浸润及溃疡的发生和发展,对碱烧伤后角膜的重塑起着重要作用。     

基质金属蛋白酶及其组织抑制剂在糖尿病小鼠视网膜组织中的表达

目的:探讨基质金属蛋白酶(MMP-2、MMP-9)及其组织抑制剂(TIMP-2)在糖尿病视网膜病变(DRP)发生发展中的作用及其机制。方法:用免疫组织化学方法和计算机-图像分析技术研究C57BL/KsJdb/db糖尿病小鼠视网膜组织中MMP-2、MMP-9和TIMP-2的表达情况,并观察糖尿病小鼠视网膜毛细血管及其基底膜的超微结构改变,其db/ 型同性同窝瘦型鼠为对照;用SAS软件对实验结果进行统计学处理。结果:随病程进展,糖尿病小鼠视网膜毛细血管基底膜进行性增厚,MMP-2和MMP-9在糖尿病小鼠视网膜组织中的表达显著性降低(P <0.05),而TIMP-2的表达显著性升高(P <0.05),同一病程阶段的MMP-2/TIMP-2的比值显著性降低(P <0.05)。结论:随着病程进展,由于TIMP-2表达的增高,通过与MMP-2以1:1的比例结合成复合物的形式抑制了MMP-2的活性,另外又有MMP-9的表达随病程进展显著下降,这可能是导致DRP早期视网膜毛细血管基底膜进行性增厚的原因。     

三种视网膜病视网膜前膜中基质金属蛋白酶及其天然抑制分子的表达

目的 研究增殖性糖尿病视网膜病变(proliferative diabetic retinopathy,PDR)、增殖性玻璃体视网膜疾病(proliferative vitreoretinopathy,PVR)和急性视网膜坏死(acute retinalnecrosis,ARN)患者视网膜前膜中基质金属蛋白酶(matrixmetalloproteinases:MMPs)及其天然抑制物(tissueinhibitorsofmetalloproteinages,TIMPs)的表达情况.方法 玻璃体手术中剥取PVR、PDR和ARN患者的视网膜前膜,同供体眼视网膜作为正常对照,冰冻切片后进行免疫组织化学染色,包括:MMP-1,MMP-2,MMP-3,MMP-7,MMP-9,TIMP-1和TIMP-2.结果 正常视网膜中能够观察到MMP-1,MMP-3,TIMP-1和TIMP-2的表达,在PVR、PDR和ARN患者标本中各种分子的表达都增强,尤以MMP-2,MMP-3和MMP-7明显.结论 正常视网膜中存在MMPs和TIMPs分子维持着细胞外基质动态的平衡,在PVR,PDR和ARN患者中MMP-2,MMP-3和MMP-7等MMPs分子表达增强,在其病变过程中可能起重要作用.     

E26转录因子-1、基质金属蛋白酶-1及其抑制剂在脉络膜黑色素瘤中的表达及意义

目的 探讨E26转录因子-1（E26ts-1）、基质金属蛋白酶-1（MMP-1）及其抑制剂（TIMP-1）在脉络膜黑色素瘤中的表达及其与肿瘤浸润及转移的关系。 方法 以免疫组织化学法检测78例葡萄膜黑色素瘤患者中的E26ts-1，MMP-1和TIMP-1的表达，并按肿瘤细胞的形态进行分型:梭型细胞型，类上皮细胞型和混合细胞型。进行临床随访，计算平均生存时间，以SPSS 10.0统计软件包进行统计学处理。 结果 78例脉络膜黑色素瘤患者中，梭型细胞型21例，类上皮细胞型34例，混合细胞占23例。TIMP-1呈低表达，E26Ts-1和MMP-1在三种类型的脉络膜黑色素瘤中均有表达;表达强度为梭型细胞型、混合细胞型和类上皮细胞型依次递增。共回访37例患者，其中梭型细胞型18例，平均生存时间为（78.33±24.69）个月;混合细胞型10例，平均生存时间（61.44±20.46）个月;类上皮细胞型9例，平均生存时间（36.76±12.19）个月。患者生存时间与E26ts-1及MMP-1的表达强度呈负相关（P＜0.01）。 结论 E26Ts-1和MMP-1的高表达及TIMP-1的低表达可能与脉络膜黑色素瘤的转移浸润有关。 (中华眼底病杂志, 20063, 22:174-176)     

基质金属蛋白酶抑制剂GM6001干预外伤性增生性玻璃体视网膜病变的研究

目的 观察外伤性增生性玻璃体视网膜病变(tPVR)和外伤后应用GM6001的大鼠视网膜组织基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、MMP-9及基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)、TIMP-2在病程中的表达变化.评价GM6001干预tPVR的效果.设计 实验研究.研究对象 SD大鼠108只.方法 将大鼠随机分为生理盐水(实验对照)组、tPVR组和外伤后应用GM6001组.分别于外伤后1、3、7、14、21、28天(d)对各组大鼠视网膜组织MMP-2、MMP-9及TIMP-1、TIMP-2的表达进行Western印迹法检测.主要指标 大鼠视网膜组织MMP-2、MMP.9及TIMP-1、TIMP-2的表达情况.结果 Western印迹法结果显示大鼠视网膜中的MMP-2在tPVR组外伤后3、7、14、21、28 d表达显著增高;外伤后14、21、28 d,应用GM6001组MMP-2表达明显低于tPVR组.MMP-9在tPVR组各个亚组表达显著增高;外伤后1、3、7、14、21 d,应用GM6001组与tPVR组比较,MMP-9表达明显降低.tPVR组大鼠视网膜中的MMP-2/TIMP-2比值在14、21、28 d增高,在外伤后应用GM6001组明显低于tPVR组.MMP-9/TIWP-1比值在tPVR组各个亚组均增高,在外伤后应用GM6001组均明显低于tPVR组.结论 MMP-2与TIMP-2、MMP-9与TIMP-1失衡参与了tPVR发生发展的病理过程,GM6001可促进其动态平衡重新建立,在干预tPVR的发生发展中起重要作用.     

白细胞介素-1α对猪小梁细胞基质金属蛋白酶／基质金属蛋白酶抑制剂表达的影响

背景房水外流通路的阻塞或小梁网细胞外基质（ECM）的异常堆积导致房水流畅系数降低是引起眼压升高的原因之一,基质金属蛋白酶（MMPs）和组织金属蛋白酶抑制剂（TIMPs）的平衡对ECM的代谢至关重要,白细胞介素-1α（IL-1α）可以通过调节MMPs的表达而调节房水的外流。目的研究猪重组IL-1α对体外培养的猪眼小梁细胞MMP-2、MMP-3及TIMP-1表达的影响。方法从猪眼取出带有小梁组织的巩膜,用组织块培养法培养小梁细胞并进行传代,第3代的猪小梁细胞应用纤维连接蛋白（FN）和层黏连蛋白（LM）进行鉴定。第3代小梁细胞血清饥饿培养24h后分为2组,对照组加入无血清培养基,IL组加入10m／L IL-1α,分别培养30min。采用细胞免疫化学法分析IL组MMP-2、MMP-3及TIMP-1蛋白在培养小梁细胞中的表达;采用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）法检测小梁细胞中MMP-2mRNA、MMP-3mRNA及TIMP-1 mRNA的表达,并与对照组的检测结果进行比较。结果传3代的细胞对FN和LM呈现阳性反应。与对照组比较,IL组小梁细胞中MMP-3和TIMP-1蛋白的表达量（A值）明显升高,差异均有统计学意义（t=-7．694、t=-5．199,P〈0．05）,但2组间小梁细胞中MMP-2表达的差异无统计学意义（t=-2．365,P〉0．05）。IL组小梁细胞中MMP-3mRNA和TIMP-1mRNA的表达量（A值）明显高于对照组,差异均有统计学意义（t=-3．025、t=-1．921,P〈0．05）,而2组间小梁细胞中MMP-2mRNA的表达差异无统计学意义（t=-1．173,P〉0．05）。结论外源性IL-1α能增加猪眼小梁细胞中MMP-3、TIMP-1的表达,引起MMP-3／TIMP-1平衡改变,促进小梁网ECM的分解,增加房水外流,而对MMP-2的表达无影响。     

Relationship of MMP-2 or TGF-β2 levels in human vitreous with axial length

目的:探究高度近视患者眼轴与玻璃体中MMP-2和TGF-β2水平的相关性.方法:研究患者玻璃体切除术中获取玻璃体样本55份.依据角膜表面曲率大小及眼轴长度,将研究对象分为两组:即高度近视组(25例):SE>-6.00D,AL≥26.00mm和对照组或非高度近视组(30例):SE<-6.00D,AL<26.00mm.利用ELISA的方法测量研究对象玻璃体MMP-2和TGF-β2浓度.结果:高度近视组玻璃体MMP-2浓度(96.87±55.95ng/mL)显著高于对照组(77.24±41.81ng/mL,P<0.05),但与眼轴没有相关性(r=0.088,P=0.544).高度近视组(3729.08±1890.88pg/mL)与对照组(3926.00±1333.88pg/mL,P<0.05)TGF-β2浓度具有显著差异性,且TGF-β2浓度与眼轴长度呈负相关(r=-0.344,P=0.014).结论:人玻璃体中MMP-2和TGF-β2两种分子浓度在高度近视进展中具有重要作用,TGF-β2浓度与眼轴长度具有相关性.