免疫分型在慢性粒单核细胞白血病鉴别诊断中的应用价值

目的探讨免疫分型在慢性粒单核细胞白血病鉴别诊断中的应用价值。方法选取2017年3月至2018年6月慢性粒单核细胞白血病患者46例为慢性组,另选择同期急性单核细胞白血病患者46例为急性组。两组患者均实施多参数流式细胞术检测,记录并比较两组骨髓标本免疫表型特点。结果慢性组HLA-DR减弱、CD14拖尾、CD15减弱、CD2、CD56异常表达均多于急性组,同时慢性组存在2种及以上抗原表达异常率高于急性组(P均0.05)。慢性组患者幼稚细胞比例低于急性组(P0.05),成熟单核细胞比例高于急性组(P0.05)。结论多参数流式细胞术免疫分型能获得单核细胞异常抗原的表达信息,急性患者的CD14拖尾的单核细胞比例较低,可作为急、慢性单核细胞白血病的鉴别诊断指标。     

多参数流式细胞术在慢性粒单核细胞白血病、骨髓增生异常综合症及急性单核细胞白血病免疫表型鉴别中的应用及其意义

本研究应用多参数流式细胞术分析慢性粒单核细胞白血病(CMML),骨髓增生异常综合症(DMS)以及急性单核细胞白血病(AML-M5b)的免疫表型特点,探究其在诊断及鉴别诊断上述疾病中的意义和价值。应用多参数流式细胞术比较分析14例CMML患者、48例MDS患者、46例AML-M5b患者及18例正常人骨髓标本的免疫分型特点。结果表明,CMML患者单核细胞比例明显高于MDS、AML-M5b患者及正常人骨髓(P<0.05),后3者之间无显著差别。MDS患者骨髓原始细胞比例明显高于正常骨髓标本(P<0.05),但与CMML患者无明显差别。AML-M5b患者骨髓成熟粒细胞比例较CMML、MDS患者及正常骨髓标本明显减低(P<0.05)。MDS、AML-M5b及CMML患者骨髓CD45/SSC特点与正常骨髓标本均存在一定差异。CMML患者骨髓具有CD2、CD56异常表达及CD14拖尾现象,与MDS、AML-M5b及正常骨髓标本相比差异显著(P<0.05)。MDS与CMML患者骨髓单核细胞CD15表达缺失或减低现象较正常骨髓标本及AML-M 5b患者显著,且CMML患者异常率高于MDS患者(P<0.05),两者粒细胞群均有显著CD13/CD11b/CD16表达规律异常现象,但两者间无显著差异。其他抗原表达呈不同程度异常,无统计学差异。结论 MDS、CMML及AML-M5b骨髓细胞免疫表型均具有各自的特点及不同程度的相似处。多参数流式细胞术综合分析其免疫表型,对于区分CMML、MDS以及AML-M5b具有重要鉴别意义。其中单核细胞比例增高,伴有CD2、CD56异常表达,CD14拖尾现象,CD15缺失或减低及成熟粒细胞CD13-CD11b-CD16表达规律异常,对CMML诊断具有重要意义。     

慢性粒单核细胞白血病的诊断进展

正慢性粒单核细胞白血病(chronic myelomonocytic leukaemia,CMML)是一种骨髓造血干细胞的克隆性疾病,外周血中单核细胞计数增多(1×109/L)而骨髓中出现骨髓病态造血和骨髓增殖是其特点~([1])。鉴于CMML兼有骨髓增生异常综合征(myelodysplastic syndromes,MDS)和骨髓增殖性肿瘤(myeloproliferative neoplasms,MPN)的双重特征,将其划     

细胞免疫表型检测在慢性粒单核细胞白血病诊断和治疗监测中的应用

目的评估流式细胞仪细胞免疫表型检测(FCI)在慢性粒单核细胞白血病(CMML)诊断和监测治疗反应中的临床价值和意义。方法采用多色FCI分析法和形态学观察法对109例CMML患者和39例随访患者的骨髓标本的免疫表型和形态学进行检测和评价,并对结果进行统计学分析。结果采用FCI测得骨髓单核细胞百分比为15%。与形态学分出的单核细胞百分比相关(r=0.35,P=0.000 3)。96%患者单核细胞FCI发生改变;FCI观察到的CMML粒细胞生成障碍为91.7%明显高于形态学方法测得的82.6%(χ~2=4.10,P0.05)。CMML患者FCI CD34+细胞测定结果为中位数0.7%(范围0.15%~11.60%),但其免疫表型改变非常显著改变个数的中位数为7(范围1~11个)。91%患者出现1阶段原始血细胞缺失或明显减少。39例随访患者中35例使用低甲基化剂(HMA)治疗和4例等待治疗患者的骨髓样品CD34+原始细胞均被检测到持续的免疫表型改变,对HMA治疗有应答的13例患者单核细胞CD14表达均正常;而40.9%(9/22)HMA治疗无应答者单核细胞CD14表达发生改变(P=0.030),4例接受造血干细胞移植治疗的患者免疫表型于移植后均正常。结论 CMML患者的CD34+细胞,单核细胞和粒细胞表现出多种FCI异常,FCI能够将恶性增生从反应性单核细胞增多中区分出来,同时也可用于监测CMML患者治疗反应。     

免疫表型在B慢性淋巴细胞白血病诊断和鉴别诊断中的意义

目的 研究免疫表型在B慢性淋巴细胞白血病(B-CLL)诊断和鉴别诊断中的意义.方法 以45例患者外周血或骨髓为标本,应用三色直接免疫荧光标记法,多参数流式细胞术检测和分析其免疫表型特征.结果 典型的B-CLL患者表达CD5、CD19、CD20和CD23,其中CD5CD19双阳性表达率为100%.3例多毛细胞白血病(HCL)患者CD5均为阴性,对其中2例进行CD25检测,均为阳性.2例B-幼淋细胞白血病(B-PLL)患者CD23均为阴性,1例CD5阳性.另外2例疑为套细胞淋巴瘤(MCL)患者其表型为CD19、CD5及CD20阳性表达,cD23阴性.结论 免疫表型对B-CLL诊断有重要价值,同时检测CD19、CD5、CD20、CD23及sIgM等多个抗原,可以使大多数B-CLL得以确诊,极少数患者需结合细胞遗传学、分子生物学和病理学等手段综合分析得出明确诊断.     

流式细胞术在159例急性白血病免疫分型中的应用

目的探讨急性白血病免疫分型的特点及其临床意义。方法利用CD45／SSC双参数散点图设门方法进行三色流式细胞术免疫表型分析。结果（1）在119例AML患者中髓系相关抗原CD13（91．59％）、CD117（86．97％）和CD33（84．03％）阳性表达率最高,还有14．28％的AML患者伴有淋系抗原的表达,主要为CD7（14．28％）和CD19（1．68％）。29例出ALL患者,CD19和HLA-DR全部阳性（100％）,其次为cD34（92．03％）、CD22（62．07％）。11例T-ALL患者,CD7表达的阳性率最高（100％）,CD3（72．73％）和032（63．64％）次之。（2）AML患者中,除大多数AML-M3患者CD34和HLA-DR为阴性表达外,其他亚型患者CD13、CD117、CD33、CD34和HIA-DR均为高表达。结论在流式细胞仪上采用CD45／SSC双参数散点图设门方法进行三色流式细胞术分析,使得免疫分型的结果更为可靠。     

多参数流式细胞术在白血病免疫分型中的应用探讨

目的 探讨多参数流式细胞术(FCM)在白血病免疫分型中的应用.方法 利用CD45/SSC 设门的四色荧光FCM检测339例白血病患者骨髓细胞表面标记.结果 339例白血病中急性髓系白血病(AML)150例,占44.2%,髓系抗原表达率以CD33(86.7%)最高,其余从高到低依次为CD117、CD3、cMPO、CD15.淋巴细胞性白血病183例,占54.0%,其中急性B淋巴细胞白血病(ALL-B)110例、急性T淋巴细胞白血病(ALL-T)27例、慢性淋巴细胞白血病(CLL)46例.ALL-B淋巴系抗原表达率以CD19最高,其余由高到低依次为cCD79a、CD10、CD22、CD20,ALL-T淋巴系抗原表达率以CD7最高,其余由高到低依次为CD2、CD5、CD3.髓系白血病中常见交叉表达淋巴系抗原CD56、CD7、CD9.ALL中常见交叉表达髓系抗原CD13、CD33,CD14的表达与单核细胞白血病相关.结论 应用多参数FCM能对白血病进行分型,对于白血病的诊断治疗和预后判断均有重要价值.     

112例成人急性白血病免疫分型

目的 探讨成人急性白血病（AL）免疫分型标准及其意义,了解成人AL抗原表达规律和免疫亚型分布情况。方法 细胞膜抗原采用单克隆抗体双色直接免疫荧光标记法,胞浆内抗原采用单色直接免疫荧光标记法及流式细胞术,分型标准试用抗体积分系统。结果 （1）未分化型占0.9%;单纯型占51.8%,其中急性髓系白血病（AML）占34.8%,B淋巴细胞白血病（B-ALL）占13.4%,T淋巴细胞白血病（T-ALL）占3.6%;变异型占38.4%,其中髓系占27.7%,淋巴细胞系占10.7%;混合型占8.9%。（2）AL患者CD34阳性占50%,M3患者HLA-DR均为阴性,AML变异型伴CD7阳性最常见,然后依次为CD10阳性,CD19阳性、CD20阳性,B-ALL变异型依次为CD13阳性,CD33阳性,CD7阳性,T-ALL变异型依次为CD33阳性,CD10阳性,CD19阳性,混合型以B淋巴细胞和随细胞系共同表达最多（70%）,其次为T、B、髓细胞系共表达（20%）及T细胞系和髓细胞系共表达（10%）。结论 本方法直接准确地反映成人AL免疫分型特点,特别是采用数字化分型指标。简洁、客观、易于掌握。     

180例急性白血病流式细胞术免疫分型的特点分析

为了探讨急性白血病的免疫表型特征与诊断价值，采用流式细胞术三色免疫荧光直接标记技术检测白血病患者，根据抗体积分系统进行分型。结果显示，三染色标记法检测180例白血病患者中，急性淋巴细胞白血病(ALL)患者除均表达淋系抗原外，同时有49．4％伴髓系抗原(CD13，CD33)的表达；急性髓细胞白血病(AML)患者除均表达髓系抗原外，同时有43．2％伴淋系抗原(CD4，CD7)表达。结论：流式细胞仪三色免疫荧光直接标记法进行白血病免疫分型能确诊一些特殊类型的白血病．对于急性白血病的诊断治疗和预后判断均有很大帮助。     

异基因造血干细胞移植治疗慢性粒单核细胞白血病及幼年型粒单核细胞白血病

本研究探讨异基因造血干细胞移植治疗慢性粒单核细胞白血病（CMML）及幼年粒单核细胞型白血病（JMML）的疗效及其影响因素.对3例CMML及2例JMML患者接受异基因造血干细胞移植治疗的临床资料进行多参数分析.结果表明,造血干细胞在5例患者中均成功植入,除1例JMML死于移植后并发症外,余4例至今无病生存.移植前疾病负荷、染色体核型及Ⅱ-Ⅳ度aGVHD的发生均对CMML的复发率或无病生存率有相关的影响;低剂量预处理方案优于清髓性预处理方案,而HLA的相合度及干细胞的来源均不影响总的生存率及无复发生存率,在JMML患者中脐带血造血干细胞移植的移植失败率明显高于骨髓或外周血造血干细胞移植;移植前脾脏的大小及是否行脾切除或者脾区照射对移植结果无影响,而移植年龄、GVHD的发生及HbF的水平对移植复发率均有重要意义.结论：异基因骨髓造血干细胞是治疗CMML及JMML的有效方法,但仍存在一系列问题需要解决.     

流式细胞术在白血病免疫分型上的应用（待续）

流式细胞术(Flow－Cytometry简称FCM),是近年随着细胞生物学,分子生物学,分子免疫学,激光技术,电子计算机技术等学科的高度发展而形成的一种对细胞或其它生物粒子的结构、功能以及相互间作用进行多参数分析的技术,国外已广泛应用于临床诊断、治疗监视和基础研究. 流式细胞术的应用范围非常广,当前已广泛应用于细胞表面抗原决定簇的分析,细胞DNA含量分析,细胞周期分析,淋巴细胞亚群分析,自身抗体测定,白血病免疫分型,微小残留病灶(MRD)检测,血栓与止血分析,肿瘤细胞标志物及基因产物研究,粘附分子测定,细胞凋亡分析,肿瘤多药抗药性基…     

流式细胞术在白血病免疫分型上的应用（续完）

4 FCM对白血病的免疫分型要求和注意点11、12、1 4．1 在CD45弱阳性区未见到细胞群时,首先应考虑是否为分化程度较高的白血病,因为CD45－SSC设门依赖于细胞的分化程度,当慢性淋巴细胞白血病(CLL)和成熟人T细胞淋巴瘤白血病(ATL)等已经分化的白血病.病变细胞与正常的成熟细胞分离是较困难的,因此这些患者在肿瘤细胞比率高的前题下,有必要对CD45强阳性区仔细加以分析后进行判断. 4．2 由于骨髓细胞成份复杂,又极易凝固,故应以肝素处理后的针刺,并立即制成细胞悬液.已经被固定或冷冻的标本不宜用FCM进行白血病的免疫分型. 4．3 由…     

201例成人急性白血病免疫分型特点

目的探讨成人急性白血病(AL)三色流式细胞术免疫分型的特点。方法采用CD45/SSC双参数散点图设门方法进行三色流式细胞术免疫表型分析。结果156例急性髓细胞系白血病(AML)主要表达CD117(90.38%)、CD13(87.18%)、CD33(71.79%)、CD34(67.74%)、HLA DR(60.90%)。33.98%的AML患者伴有淋系抗原表达,最常见为CD7(24.36%)。B细胞系急性淋巴细胞白血病(ALL)35例(17.4%),主要表达CD19(100.00%)、HLA DR(100.00%)、CD10(74.29%)、CD34(60.00%)、CD20(31.40%)。T细胞系ALL10例(4.98%),主要表达CD7(80.00%)、CD2(60.00%)。24.5%的ALL表达髓系相关抗原,主要是CD13(17.80%)及CD33(11.10%)。结论流式细胞仪三色荧光标记法进行AL免疫分型,对白血病的准确诊断和分型有重要的指导意义。     

201例成人急性白血病免疫分型特点

目的 探讨成人急性白血病(AL)三色流式细胞术免疫分型的特点。方法 采用CD45／SSC双参数散点图设门方法进行三色流式细胞术免疫表型分析。结果 156例急性髓细胞系白血病(AML)主要表达CD117(90．38％)、CD13(87．18％)、CD33(71．79％)、CD34(67．74％)、HLA-DR(60．90％)。33．98％的AML患者伴有淋系抗原表达,最常见为CD7(24．36％)。B细胞系急性淋巴细胞白血病(ALL)35例(17．4％),主要表达CD19(100．00％)、HLA-DR(100．00％)、CD10(74．29％)、CD34(60．00％)、CD20(31．40％)。T细胞系ALL 10例(4．98％),主要表达CD7(80．00％)、CD2(60．00％)。24．5％的ALL表达髓系相关抗原,主要是CD13(17．80％)及CD33(11．10％)。结论 流式细胞仪三色荧光标记法进行AL免疫分型,对白血病的准确诊断和分型有重要的指导意义。     

流式细胞术-白血病免疫分型规范化

近十年来流式细胞术已被我国各级医院较广泛采用,主要用途之一是测定血液恶性肿瘤的免疫表型。流式细胞术的免疫分型（FCM－IM）可为白血病与淋巴细胞增殖性疾病（LPO）提供准确的数据。国际上公认是诊断血液系统恶性疾病一项不可缺少的标准,还可提供指导治疗的相关信息。图1与图2示某些白血病与LPDs典型的免疫表型。值得注意的是变异是常见的。现提出以下几点注意事项以使实验结果更为可靠并减少实验室间的差异：①用直接免疫标记法及多色分析法。②CD45／SSC设门法优于FSC／SSC设门法,可更清楚地显示不正常细胞群体。在原／幼细胞少时尤为明显。③结论中详细描述不正常细胞群的表型较计算各标志细胞的百分数更为重要。④用直接标记,多色分析法时不再以20％为正常值界线。⑤由于抗体／抗原的多向性,白血病细胞抗原表达的不保真性以及白血病细胞生物学的多变性,单纯依靠FCM术数据勿轻易诊断杂合性或双表型白血病。流式细胞仪不是细胞计数器,其实验结果须结合临床和其它有关信息综合判断。     

流式细胞术对急性白血病免疫分型的临床意义

目的探讨流式细胞术(FCM)在急性白血病免疫分型中的临床意义。方法利用CD45/SSC设门的四色荧光FCM检测42例急性白血病病人骨髓细胞表面标记。结果分别以cCD3c、CD79a、cMPO作为T-ALL、B-ALL、AML的系列特异性标记。30例AML中cMPO阳性率为90.0%;12例B-ALL中cCD79a阳性率为91.7%.42例患者中有交叉免疫标记的占40.5%,其中髓系白血病中常见交叉表达淋系抗原CD56、CD7、CD19、CD10;淋巴细胞白血病中常见交叉表达髓系抗原CD13、CD33等。M2出现交叉表达现象最多见,阳性率为76.9%,常见表达CD56。伴CD56、CD7交叉表达的AML预后差。结论利用流式细胞术进行免疫表型分析对急性白血病的诊断及预后判断具有重要临床意义。     

慢性粒单核细胞白血病分子遗传学异常研究进展

正慢性粒单核细胞白血病(CMML)是一种骨髓造血干细胞的克隆性疾病,兼具有骨髓病态造血和骨髓增殖双重特征,2008年世界卫生组织(WHO)将其归类于骨髓增生异常综合征/骨髓增殖性肿瘤(MDS/MPN)。其发病机制尚不清楚,其主要特点是单核细胞增多伴病态造血。符合诊断的患者中具有相似临床表型,可以是多个分子事件造成的,不同的分子事件可能影响一个共同的分子途径,也有可能是不同的致病途径     

87例成人急性白血病三色流式细胞术免疫分型

目的探讨成人急性白血病( AL)免疫分型标准及其意义,了解成人 AL抗原表达规律和免疫亚型分布情况.方法细胞膜抗原采用单克隆抗体三色直接免疫荧光标记法,胞浆内抗原采用双色直标法用流式细胞术测定.分型标准试用抗体积分系统.结果 (1)未分化型 2.3%;单纯型 54.0%,其中急性髓系白血病( AML) 43.6%,淋系 10.3%;变异型 37.9%,其中髓系 28.7%,淋系 9.1%;混合型 5.7%. (2)AL患者 CD34、 CD38 HLA- DR均阳性约 70%, M3患者 HLA- DR与 CD34均阴性, CD38强阳性; AML变异型伴 CD7、 CD19 阳性最常见,其次为 CD2、 CD4、 CD56 ; B- ALL变异型依次为 CD33、 CD13阳性. CD117对髓系特异性强.结论本方法直接准确地反映成人 AL免疫分型特点.     

慢性粒—单核细胞白血病—附16例分析

为重新全面认识慢性粒－单核细胞白血病特征。对１６例ＣＭＭＬ患者的临床实验室资料进行分析。结果；ＣＭＭＬ患者起病症状多为非特异性，外周血可出现少量原幼粒，单核细胞，成熟单核细胞比例均为〉０．１０，骨髓原始，早幼粒细胞多〉０．０５，原幼单核细胞〉０；０５，成熟单核细胞〉０．２０，伴有明显的二或三系病态造血。     

双系表型急性白血病的免疫分型特点及疗效分析

本研究探讨双表型急性白血病(biphenotypic acute leukemia,BAL)的免疫分型特点及疗效分析。采用流式细胞术四色免疫荧光直接标记技术与CD45/SSC设门分析技术检测45例疑似BAL患者,根据欧洲白血病免疫分类组(EGIL)积分标准进行分型。结果表明,45例疑似BAL患者中My/B-ALL的有23例,均共同表达cCD79a和cMPO,胞膜抗原CD19表达量最高,其次为CD10;My/T-ALL有18例,均共同表达cCD3和cMPO,胞膜中CD7表达最高,其次为CD5;T系和B系抗原共同表达的有4例,均共同表达cCD3和cCD79a。BAL患者中30例表达cTdT,25例表达CD34,31例表达CD117;My/B-ALL与My/T-ALL患者抗原表达中,CD33表达率高于CD13。CD34+的My/B-ALL的CR率低于CD34-My/B-ALL的CR率,CD34+My/T-ALL的CR率低于CD34-My/T-ALL的CR率。结论:双表型急性白血病以My/B-ALL系抗原共同表达最常见,其次为My/T-ALL。cCD3、cCD79a、cMPO对诊断及鉴别双表型急性白血病极为重要。流式细胞术是诊断双表型急性白血病最特异的方法。低分化细胞的BAL的临床预后不佳。