肿瘤微环境中CD8+T细胞分化与免疫治疗的研究进展

CD8⁺ T细胞与机体抗肿瘤免疫反应以及免疫治疗效果密切相关,目前的研究认为该群细胞在肿瘤微环境中的免疫应答受到抑制。CD8⁺ T细胞迁移进入肿瘤微环境后,在进行分化产生效应T细胞的过程中,微环境能通过多种机制削弱CD8⁺ T细胞对肿瘤的杀伤效应,导致肿瘤生长并影响抗肿瘤治疗的效果。我们从肿瘤微环境对CD8⁺ T细胞分化和功能效应的影响因素出发,重点描述以CD8⁺ T细胞分化调节过程为核心的抗肿瘤免疫反应新进展。     

肿瘤特异性CD8+T细胞研究现状

CD8⁺ T细胞是介导抗原特异性免疫应答的主要细胞,其功能状态受到分子机制的精密调控,在肿瘤免疫中发挥关键作用。近年来,基于CD8⁺ T细胞杀伤功能的过继性细胞疗法 （例如TCR-T和CAR-T细胞治疗） 和阻断PD-1抑制性信号的免疫检测点疗法在肿瘤临床治疗中取得了前所未有的效果。但是这些免疫疗法对患者的治疗效果仍然有限,主要表现为免疫治疗抵抗,其中重要的机制是肿瘤抗原特异性CD8⁺ T细胞功能耗竭。因此,免疫治疗研究的热点和难点是探究肿瘤抗原特异性CD8⁺ T细胞功能耗竭的调控机制,并探索干预策略和靶点以增强CD8⁺ T细胞的效应功能,抵抗功能耗竭。本文分别从耗竭 CD8⁺ T 细胞的异质性、对 PD-1 ICB 的响应及表观遗传特征三个方面综述 CD8⁺ T 细胞抗肿瘤免疫应答的研究进展。     

CD8+CD25+调节性T细胞在疾病中的研究进展

CD8⁺CD25⁺Treg具有抑制免疫反应和诱导免疫耐受作用。本文综述了CD8⁺CD25⁺Treg在恶性肿瘤、自身免疫性疾病及其他常见病如哮喘、过敏性疾病、2型糖尿病、子痫前期中的变化及相应的作用机制,CD8⁺CD25⁺Treg在不同疾病中的变化不一致,在恶性疾病中升高,而在自身免疫性疾病中降低。进一步加深对CD8⁺CD25⁺Treg的认识将为疾病的防治及预后提供依据。     

CD4+T细胞极化在炎症性疾病中作用的研究进展

CD4⁺T细胞具有极强的可塑性,其可极化为Th1、Th2、Th17和Treg细胞等各种效应细胞,进而参与多种炎症性疾病的调控,其极化既可促进疾病发生发展,亦可抑制疾病进展。在不同疾病或同一疾病的不同阶段,其极化方向也可能不同。因此,本综述旨在总结并探讨CD4⁺T细胞极化在不同炎症性疾病中的调控作用及其对疾病防治的意义。     

记忆CD8+T细胞亚群在感染和肿瘤免疫应答中的作用

在初次免疫应答的过程中,当抗原被清除以后,大多数效应T细胞凋亡,只有少数细胞存活并分化成稳定、长寿的记忆细胞。与初始T细胞相比,当再次接触同一抗原时,记忆T细胞能够介导快速、强烈、有效的免疫应答[1-3]。记忆细胞高表达抗凋亡分子并以非抗原依赖的方式增殖来维持记忆细胞     

IL-24对非小细胞肺癌患者CD8+T细胞体外功能的影响

目的观察IL-24在体外对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者CD8⁺T细胞功能的影响。方法本研究入组28例NSCLC患者和17例健康对照者,收集外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC)和支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF),分选CD8⁺T细胞,反转录实时定量PCR检测CD8⁺T细胞中IL-24受体(IL-20R1、IL-20R2和IL-22R1)mRNA的相对表达量。不同浓度重组人IL-24(10 ng/ml和100 ng/ml)刺激纯化CD8⁺T细胞后,流式细胞术检测穿孔素和颗粒酶B的表达变化。建立CD8⁺T细胞和NSCLC细胞系NCI-H1882细胞的直接接触和间接接触体外共培养系统,观察IL-24刺激后CD8⁺T细胞诱导靶细胞死亡比例,以及IFN-γ和TNF-α的表达变化。组间比较采用t检验或LSD-t检验。结果CD8⁺T细胞中未检测到IL-22R1 mRNA表达,CD8⁺T细胞中IL-20R1和IL-20R2 mRNA相对表达量在健康对照者和NSCLC患者之间以及在非肿瘤部位和肿瘤部位之间的差异均无统计学意义(P>0.05)。NSCLC患者外周血和肿瘤部位CD8⁺T细胞中穿孔素和颗粒酶B水平显著低于健康对照者和非肿瘤部位(P<0.05),低浓度IL-24(10 ng/ml)刺激不影响CD8⁺T细胞中穿孔素和颗粒酶B水平(P>0.05),而高浓度IL-24(100 ng/ml)则显著提升NSCLC患者CD8⁺T细胞中穿孔素和颗粒酶B水平(P<0.05)。直接接触共培养系统中,高浓度IL-24(100 ng/ml)刺激NSCLC患者肿瘤部位CD8⁺T细胞后可诱导靶细胞死亡比例升高,以及IFN-γ和TNF-α表达升高,而低浓度IL-24(10 ng/ml)刺激对CD8⁺T细胞诱导的靶细胞死亡和细胞因子分泌无显著影响。间接接触共培养系统中,IL-24刺激对CD8⁺T细胞诱导的靶细胞死亡和细胞因子分泌均无显著影响。结论高浓度IL-24在体外可增强NSCLC患者CD8⁺T细胞的直接细胞杀伤功能,但在体内IL-24可能并不影响CD8⁺T细胞的功能。     

Th17细胞联合CD3+CD8-IL-21+T细胞升高与宫颈癌发生发展的关系

目的: Th17细胞在免疫调节中起重要作用,而IL-21与Th17在分化调节和功能行使上密切相关。本研究旨在探讨Th17在宫颈癌发生发展中的作用。方法: 选取37例宫颈癌患者、25例宫颈上皮内瘤变(CIN)患者和18例健康志愿者作为研究对象,用流式细胞分析术检测外周血中Th17细胞及CD3⁺CD8^-IL-21⁺T细胞的比例。分析两者与临床病理指标之间的关系。结果: 与健康对照组相比,Th17细胞及CD3⁺CD8^-IL-21⁺ T细胞比例(占淋巴细胞百分比)在CIN组(P<0.01,P<0.05)及宫颈癌组(P<0.01,P<0.05)均明显升高。此外,2种细胞的比例都与临床分期有关,在晚期宫颈癌组明显升高(均P<0.05),并且有淋巴结转移组或脉管浸润组都明显高于相对应的无转移组(P<0.01, P<0.05)或无浸润组(均P<0.01)。此外,在健康对照组和宫颈癌组,Th17与CD3⁺CD8^-IL-21⁺ T细胞呈正相关,CD3⁺CD8^-IL-21⁺ T细胞的比例还与肿瘤大小有关(P<0.01)。结论: Th17和CD3⁺CD8^-IL-21⁺ T细胞在宫颈癌患者外周血中的比例上调,在宫颈癌的发生发展中可能起着重要作用。     

HIV-1感染疾病缓慢进展者CD8+T淋巴细胞非细胞毒性免疫应答作用的研究

目的 探讨HIV-1感染疾病缓慢进展者CD8+T淋巴细胞非细胞毒性抗病毒应答功能(CNAR)的变化.方法 应用密度梯度离心法、免疫磁珠法纯化健康人CD4+T淋巴细胞和HIV感染者CD8+T淋巴细胞,用HIV毒株SF-33感染健康人CD4+T淋巴细胞,并加入不同疾病进程HIV感染者CD8+T淋巴细胞共培养,收集培养上清,应用ELISA方法测定上清中HIV-1 p24含量.结果 我们研究发现缓慢进展组(slow progressors,SP)、HIV典型进展组(typical progressors,TP)、健康对照组及AIDS组中CNAR功能依次下降(89%>77%>73%>61%),各组间的下降差异均有统计学意义(P<0.05);在HIV感染者中,CNAR功能与CD4+T细胞绝对计数呈显著正相关;与病毒载量无显著相关性.结论 CNAR功能对HIV感染疾病不进展可能具有保护作用.     

肿瘤环境影响抗感染CD8~+T细胞应答启动的初步研究

目的探讨肿瘤环境下,机体对非肿瘤来源的外来微生物抗原特异性CD8+T细胞应答的变化及其可能机制,为肿瘤患者免疫调节治疗提供理论依据。方法在建立小鼠荷瘤模型的基础上,尾静脉感染李斯特菌(OVA-Listeria Monocytogenes,OVA-LM),观察其生存曲线的变化;在荷瘤后感染小鼠模型中,通过流式胞内细胞因子染色和Pentamer染色技术检测小鼠抗OVA257-264表位特异性CD8+T细胞免疫应答的变化;通过标记CFSE的OT-Ⅰ细胞过继转移小鼠,观察体内抗原特异性CD8+T细胞增殖和抗原呈递情况;FACS分析荷瘤情况下小鼠脾脏CD11b+Gr-1+细胞及Treg细胞比例和数量变化。结果荷瘤小鼠感染OVA-LM菌后生存期明显缩短;荷瘤小鼠脾脏抗OVA257-264表位特异性CD8+T细胞免疫应答显著下调;抗原特异性CD8+T细胞增殖速率没有显著变化,但是细胞总数明显下降;荷瘤小鼠脾脏调节性T细胞比例未见明显变化,但CD11b+Gr-1+细胞显著上调。结论荷瘤小鼠抗感染CD8+T细胞免疫反应下降,其脾脏CD11b+Gr-1+细胞显著上调,提示肿瘤环境下脾脏CD11b+Gr-1+细胞升高可能是影响抗感染CD8+T细胞应答的重要因素。     

CD4+T细胞的记忆形成与维持机制

在全球新冠疫情愈发严重的当下,记忆细胞在抗病毒感染中的优势使其受到了广泛的关注。最新的研究发现,CD4⁺记忆T细胞(memory T cell, T_M)的分化与效应应答需要特定抗原提呈细胞与微环境中细胞因子的辅助。它们严密地调控着胞内的转录因子及能量代谢。该文总结并讨论了调控CD4⁺ T_M生成、维持及再次应答的关键机制。在不同疾病背景下精准调控CD4⁺ T_M的数量与功能将会是未来的一个巨大挑战。     

circRNA-1565抑制CD8+T细胞对宫颈癌细胞的杀伤功能研究

目的：探究circRNA-1565对CD8⁺T细胞的作用及其对宫颈癌细胞杀伤能力的影响。方法：磁珠分选并用流式细胞术鉴定CD8⁺T细胞。所得CD8⁺T细胞分为Control组(转染空白质粒)和circRNA-1565组(转染circRNA-1565质粒)。CCK-8和流式细胞术检测Control组和circRNA-1565组CD8⁺T细胞增殖能力和凋亡水平,Western blot检测Control组和circRNA-1565组CD8⁺T细胞Bcl-2、Bax和cleaved-caspase-3表达。将HeLa和SiHa细胞分别与Control组和circRNA-1565组CD8⁺T细胞共孵育(HeLa+CD8⁺T+Vector组、HeLa+CD8⁺T+circRNA-1565组、SiHa+CD8⁺T+Vector组、SiHa+CD8⁺T+circRNA-1565组),...     

T细胞CD4+/CD8+比值及CD4、CD8编码基因单核苷酸多态性与系统性红斑狼疮的关联研究

目的 分析T细胞CD4⁺/CD8⁺比值及CD4、CD8编码基因单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms, SNP)与系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus, SLE)的关联。方法 检测119例SLE患者及117例健康人T细胞亚群水平及CD4、CD8A、CD8B基因14个标签SNP位点基因型,比较组间T细胞亚群及各基因型、等位基因的分布差异,计算比值比(OR)及其95%可信区间(CI)。结果 SLE组CD4⁺ T细胞低于对照组(P>0.05),CD8⁺ T细胞高于对照组(P<0.01),CD4⁺/CD8⁺比值低于对照组(P<0.01)。携带CD4 rs1055141C>T/CT基因型(OR:2.280, 95%CI:1.261～4.123,P<0.01)及T等位基因(OR:2.210, 95%CI:1.293～3.778,P<0.01)、CD8B rs...     

特异性CD8+T细胞与人巨细胞病毒感染

人巨细胞病毒(Human Cytomegalovirus,HCMV)是疱疹病毒科β属的一种双链DNA病毒,在正常人群中普遍易感,在发达国家人群血清HCMV抗体检出率约40％ ～ 60％,而在发展中国家几乎达到100％ [1].与其他人类疱疹病毒不同,HCMV原发性感染通常为隐性感染,临床上表现为无症状状态,潜伏感染是依赖病毒复制的慢性免疫抑制而不是依赖病毒转录模式的改变.对于免疫抑制人群来说,HCMV容易发生激活感染,病毒复制难以控制,可以出现明显的组织损坏.HCMV激活感染是异基因造血于细胞移植和实体器官移植后患者发病率和死亡率不断攀升的主要原因,骨髓抑制、肾毒性、耐药病毒株的出现等治疗的不良反应限制了抗病毒药的抢先治疗[2-3].     

CD4+CD25+调节性T细胞的发育与胸腺CD4-CD25+细胞关联性的探讨

目的:探讨CD4 CD25 调节性T细胞(CD4 CD25 regulatoryTcells,CD4 CD25 Tr)的发育及其与胸腺CD4-CD25 细胞的关系。方法:以流式细胞术检测小鼠从出生至发育成熟过程中,胸腺、脾脏、淋巴结和外周血中CD4 CD25 Tr比例变化,以及胸腺CD4-CD25 细胞比例变化;通过磁激活细胞分选(MACS)从小鼠淋巴结纯化CD4 CD25 T和CD4 CD25-T细胞,经CFDA-SE标记,以多种刺激形式诱导增殖。结果:小鼠出生1d到10周的发育过程中,胸腺CD4 CD25 Tr比例一直比较恒定,但在脾脏、淋巴结和外周血,随鼠龄增加而不断升高,从1d龄到1周时升高最迅速,其后的升高速度逐渐减慢,10周龄时达平台期。胸腺中CD4-CD25 细胞在出生1d的小鼠比例非常高,1d龄到1周龄期间迅速下降,10周龄时达平台期。ConA不能诱导CD4 CD25 Tr和CD4 CD25-T细胞增殖,但CD4 CD25 Tr出现一过性细胞增大;佛波醇酯加离子霉素能诱导CD4 CD25 Tr和CD4 CD25-T细胞增殖;包被的抗CD3抗体加可溶性抗CD28抗体能刺激CD4 CD25-T细胞增殖,但CD4 CD25 Tr不增殖,加入高浓度IL-2,CD4 CD25-T细胞增殖更强,CD4 CD25 Tr出现增殖。结论:胸腺CD4-CD25 细胞很有可能是CD4 CD25 Tr的前体。     

GDF11在体外扩增CD8+记忆干性T细胞的作用

 目的: 探讨生长分化因子11(GDF11)在体外诱导扩增具有干细胞特性的记忆性T细胞(memory stem T cells,Tscm)中的作用,从而进一步提高免疫过继治疗的疗效。方法: 通过密度梯度离心的方法分离健康人的外周血单个核细胞,然后用磁珠分选获得CD8⁺T细胞;随后将所得的细胞分为实验组和对照组,实验组中加入等体积、不同浓度的GDF11,对照组中加入等体积的PBS缓冲液,最后分别在不同时点通过流式细胞术检测2组细胞中Tscm的扩增情况。结果: 在CD8⁺T细胞的体外扩增实验中,GDF11可以显著扩增CD8⁺T细胞;在CD8⁺T细胞的体外培养实验中,GDF11可以显著提高Tscm在CD8⁺T细胞中的比例。结论: GDF11可以有效地在体外扩增CD8⁺Tscm,为提高免疫过继治疗的效率提供了新的方法。     

IL-15/NKG2D轴参与CD8+T细胞旁路激活在病毒感染性疾病中的作用研究进展

近年来研究发现机体免疫系统中CD8⁺T细胞可在细胞因子诱导下,通过T细胞受体(TCR)非依赖的方式被活化,这种活化方式被称为旁路激活。参与CD8⁺T细胞旁路激活的可能途径之一是由白细胞介素15(IL-15)介导并通过自然杀伤细胞2组成员D(NKG2D)激活记忆性CD8⁺T细胞发挥杀伤功能,被称为“固有样细胞毒作用”。目前发现IL-15/NKG2D轴可通过旁路激活CD8⁺T细胞参与急性甲型肝炎、丙型肝炎和获得性免疫缺陷综合征等多种病毒感染性疾病的发病过程,研究IL-15/NKG2D轴参与介导CD8⁺T细胞旁路激活的作用及分子机制是阐明多种感染性疾病免疫发病机制的重要方向之一。     

CD8+T细胞的调节性特性

随着免疫学,内科学及移植学的发展,CD8+T细胞日益受到重视.它不仅是细胞毒性效应T细胞,而且也是具有免疫抑制作用的调节性T细胞.CD8+调节性T细胞在生理条件下对机体自身稳态的维持,以及在器官移植,自身免疫性疾病及病毒感染和肿瘤等病理状态下都起着较为重要的作用.     

CD8+T调节细胞的研究进展

调节性T细胞(Regulation T cell, Treg)是参与外周耐受性调节的一个重要细胞群。目前发现具有耐受调节作用的T细胞包括了CD4+ Treg细胞、 Th3细胞、 Treg1细胞、 NKT(nature killer cells)细胞、 Th17细胞和CD8+Treg细胞等[1]。     

032 CD4+T细胞识别的肿瘤抗原的研究进展

在以往的肿瘤免疫研究中，人们往往关注肿瘤特异性CD8+T细胞的抗肿瘤效应，并由此鉴定出许多CD8+T细胞识别的肿瘤抗原。随着研究的深入，CD4+T细胞在抗肿瘤免疫中的作用逐渐为人们所关注。联合应用MHCⅠ类和MHCⅡ类限制性抗原的肿瘤疫苗将有可能取得更好的抗肿瘤效果。本文就近年来鉴定的CD4+T细胞识别的肿瘤特异性抗原进行了综述。