溶组织内阿米巴分子生物学的近代进展

最近发现溶组织为阿米巴包含两种不同的基因型，潜在致病株和非致病株。致病株对宿主组织的破坏作用是由植物血凝素类粘附受体介导的细胞作用、成孔肽参与的细胞融解作用和半胱氨酸蛋白酶的过度表达所导致的。相关基因的抽提为详细研究基因结构和操纵阿米巴细胞的功能提供了手段。     

溶组织内阿米巴的致病株与非致病株对中性粒细胞的粘附作用

溶组织内阿米巴与宿主细胞的粘附是其致病的关键。作者对溶组织内阿米巴8个致病株和9个非致病株虫体与人的多形核粒细胞(PMNs)的粘附活性进行测定,并研究碳水化合物、细胞骨架和血清因子对其粘附的影响。用阿米巴滋养体与PMNs粘附形成玫瑰花结试验检测,表明致病株和非致病株     

用半乳糖特异粘附植物血凝素的单克隆抗体鉴别溶组织内阿米巴致病和非致病株

据报道,通过薄层淀粉凝胶电泳及已糖激酶和磷酸葡萄糖变位酶的同工酶,可区分溶组织内阿米巴的致病和非致病的阿米巴酶株群。本实验共用18个致病株和30多个非致病株。进行植物血凝素的纯化,抗植物血凝素单克隆抗体的制备、纯化及用~(125)I标记,用放射免疫测定(RIA)法、Western blot技术以及阿米巴滋养体粘附红细胞试验等,进一步研究鉴定溶组织内阿米巴的致病与非致病株。     

病毒与溶组织内阿米巴的致病力

溶组织内阿米巴有致病和不致病二型。这二型根据Sargeaunt等介绍的同功酶电泳方法是很容易鉴别的,也曾发现溶组织内阿米巴被病毒寄生,但至今未曾发现病毒的存在与阿米巴的致病力相关。检查了3株溶组织内阿米巴的培养物并测定了它们的酶谱,有2株为致病型,1株为非致病型。致病株无菌培养于TPS-1培养基中,非致病株则培养于有克氏锥虫的TPS-1培养基中。     

阿米巴病的研究现状

1.侵袭性阿米巴病的宿主及寄生虫特异性仅有小部分感染溶组织内阿米巴的个体会发展为有症状的侵袭性阿米巴病。一种假说认为溶组织内阿米巴存在致病株和非致病株。另一种假说则认为所有溶组织内阿米巴均能导致侵袭性阿米巴病,但阿米巴的毒力是不稳定的。无症状的阿米巴肠遭感染和有症状的阿米巴病的临床分离物的同工酶谱是不同的,但不是固定不变的。一个无症状肠道感染者的溶组织内阿米巴分离株克隆,体外与从侵袭性阿米巴结肠炎患者分离的经射线照射的细菌接触,其酶谱从“非致病性”转化为“致病性”,并具备侵袭性阿米巴株的致病特征。     

成孔蛋白在寄生虫致病中的作用

近十年来,成孔蛋白(Pore-forming proteins,PFPs)已从各种免疫细胞和非致病性细菌中分离得到,而许多寄生虫也可产生这种蛋白。本文简要介绍PFPs在寄生虫的生存和致病中的作用。溶解宿主细胞:两种可由PFPs致病的寄生虫为溶组织内阿米巴和福氏耐格里阿米巴。离体试验中溶组织内阿米巴破坏靶细胞     

“致病性”和“非致病性”溶组织内阿米巴有不同的核糖体RNA基因

溶组织内阿米巴感染多数是无症状的。用生物化学方法可以分辨出两种虫型。解释这一所见有两种假设:(1)存在两个形态学上不能区分的虫种,其中一种可致病;(2)只有一个虫种,它是以两种可相互转换的形式存在,其中一型能引起疾病。如果溶组织内阿米巴是一个虫种,那么这两型的rRNA基因应当不存在任何差异。作者研究了假设的两型溶组织内阿米巴核糖体RNA(rRNA)基因,取18个致病株和13个非致病株,经培养     

阿米巴中的核糖体DNA质粒

在大多数有机体中,核内核糖体RNA(rRNA)基因是一组位于一条或多条染色体上的呈串联排列的高度重复序列,然而阿米巴中的这些基因大多位于染色体外的环状分子中。本文作者以溶组织内阿米巴为例,并结合其他阿米巴株的一些研究发现,介绍了阿米巴中环状rDNA的发现、溶组织内阿米巴rDNA质粒的特点及其复制、转录等情况,为进一步探讨这种寄生虫的生理特点、致病机制和诊断方法,提供新的线索。     

用限制性核酸内切酶酶切扩增的基因组DNA方法分析溶组织内阿米巴的致病性

在巴西东北部地区,腹泻疾病常见,曾有溶组织内阿米巴高度流行的报道,然而从血清学研究和分离虫株酶谱分析表明这些溶组织内阿米巴大多是非致病株。本文采用聚合酶链反应(PCR)和限制性核酸内切酶酶切相     

棘阿米巴滋养体对HeLa细胞的细胞毒性作用

目的　探讨处于不同分类地位的 5株棘阿米巴滋养体对人HeLa细胞的细胞毒性作用。方法　将 5株不同虫株的棘阿米巴滋养体分别与体外培养的人HeLa细胞混合 ,观察其对肿瘤细胞的影响。并采用光镜确定肿瘤细胞的形态学变化特征 ,采用MTT(四甲基偶氮唑盐 )法检测并比较这 5种棘阿米巴对肿瘤细胞作用的差异。结果　MTT法显示 ,当棘阿米巴滋养体与HeLa细胞以 1∶1比例混合时 ,对肿瘤细胞表现出较强的细胞毒性作用。该作用不仅具时间依赖性 ,且因棘阿米巴的虫株不同而异。光镜下染色标本显示 ,经 5株棘阿米巴滋养体作用后的肿瘤细胞均出现了核染色质边集浓缩和胞膜出空泡等细胞凋亡的形态学特征。结论　这 5株棘阿米巴滋养体对HeLa细胞均有不同程度的细胞毒性作用 ,并诱导肿瘤细胞发生细胞凋亡。     

溶组织内阿米巴致病问题的研究进展

前言1875年Losch首先发现了溶组织内阿米巴,并初步研究了它的致病性,认为阿米巴可加剧肠道原有的炎症,并导致大肠溃疡的发展。以后人们对阿米巴致病问题开展了大量的研究。现几乎公认:溶组织内阿米巴是阿米巴病的病原体;从无症状感染者和临床感染者分离到的虫株之间没有本质的区别,它们均有潜在的致病性。但是否发病,宿主的因素起重要作用。由于人们从不同的角     

溶组织内阿米巴:杂交克隆的增殖及其特性

由于缺乏合适的方法把外源的DNA转移至溶组织内阿米巴和其他原虫体内,故对溶组织内阿米巴致病的遗传机制以及与宿主之间反应的关系了解甚微。作者按前人报道方法制备溶组织内阿米巴克隆突变株,采用细胞融合技术,以聚乙二醇融合两种不同表     

特定培养基中溶组织内阿米巴的附着与短期保持动力和活力

溶组织内阿米巴以其附着、伸展和运动为基本特性,这些特性在致病过程中是重要的,为了研究这些特性,确定其最低的生理要求,因而作此体外培养观察。实验用的虫株有溶组织内阿米巴的HM-1株、200:NIH株和HK-9株。作者设计一种保存培养基(MM-1培养基)以保持     

性激素对溶组织内阿米巴致病力的影响

溶组织内阿米巴致病力与虫株毒力、机体防御功能有关,而人群中男性阿米巴肝脓肿的发生率远高于女性,女性中又以生育期发病率最高,妊娠期危险性远高于非妊娠期。胆固醇能提高阿米巴的毒力和宿主易感性已为国内外学者所证实。性激素与胆固醇同属类固醇物质,是否有类同作用,我们做了体外与体内实验观察。     

Entamoeba dispar内不存在类似溶组织内阿米巴ariel基因家族的基因

溶组织内阿米巴和非致病的E.dispar关系密切,但在遗传学上又存在明显差异。虽然两者都寄生在人体肠道内,但难以从形态学上区分。溶组织内阿米巴能入侵组织,并引起出血性肠炎或肠外脓肿;而E.dispar为一种非致病寄生原虫。由于两者在遗传背景、细胞生物学及宿主方面高度相似,所以比较两者之间的差异能为分析、鉴别肠道内寄生原虫的致病因素提供一条途径。为此,作者用68种溶组织内阿米巴cDNA探针,对脉冲凝     

溶组织内阿米巴同工酶的初步研究

本文对3株溶组织内阿米巴(Entamoeba histo-lytica)和1株侵入内阿米巴(Entamoeba invadens)的匀浆液用琼脂糖凝胶电泳法进行同工酶谱分析研究。这4株阿米巴分别多菌培养72h和2wk后收集离心浓缩,加入酶稳定液,冻融数次,高速离心,提取阿米巴细胞匀浆液。并以各株伴随细菌作对照。分别检测阿米巴4种酶的同工酶,即L-苹果酸:辅酶I     

多聚酶链反应分析溶组织内阿米巴的致病性

从急性阿米巴痢疾患者粪便中分离所得的溶组织内阿米巴虫株SH-3、SH-6、SH-8的DNA和包囊携带者粪便中分离所得的溶组织内阿米巴 SH-5、SH-7的 DNA应用多聚酶链反应技术扩增30个周期后作琼脂糖凝胶电泳分析,发现致病性引物 P_(11)、P_(12)可使SH-8虫株的DNA增殖;而非致病性引物P_(13)、P_(14)可使SH-3、SH-5、SH-6和SH-7虫株的DNA增殖。另外,酶株群分析和单克隆抗体反应也显示SH-8为致病性虫株,而另4株虫株均属于非致病性虫株,与多聚酶链反应的结果相一致。提示,致病性虫株与非致病性虫株的基因有区别,多聚酶链反应对溶组织内阿米巴进行基因分析是一种敏感和特异的新方法。     

影响溶组织内阿米巴致病力的生物因素

溶组织内阿米巴的致病作用受多种因素影响。生物因素通过对阿米巴毒力、致病性以及宿主的机能状态、免疫调节等方面的作用,影响阿米巴病的发生与发展。无菌培养的阿米巴在仓鼠肝内不产生肝脓肿,在豚鼠盲肠内也不发生侵袭性病变,阿米巴只有和细菌相互作用后,才有明显的致病性和使宿主发生肝脓肿的能力。细菌可提供适宜的理化、营养条件和附加体样致病因子,以及在消除毒性分子、加强酶的功能、促进与阿米巴的粘附等方面起作用。迄今已在阿米巴内区分出三种病毒。病毒在核内大量复制,形成微丝,导致核溶解、阿米巴死亡。病毒基因还可整合到阿米巴的DNA上。阿米巴似可作为甲肝病毒的传播媒介。艾滋病患者合并的阿米巴病病变往往更为严重。霉菌寄生于阿米巴内,显示对核的破坏作用;阿米巴病合并念珠菌和放线菌感染时,病变加剧。和弓形体一起培养的阿米巴,对肠上皮细胞损害力增强。感染了血吸虫、粪类圆线虫、鞭虫等的患者,肠道常发生急性炎症反应,致使肠上皮细胞变性、渗出、坏死,局部抗溶组织内阿米巴感染的能力降低,促进阿米巴的入侵。另外,蠕虫感染后,宿主全身免疫功能减退,白蛋白下降、贫血以及巨噬细胞活力受抑,也有利于阿米巴病的发生与发展。     

几种肠道原虫主要表面蛋白的研究进展

在溶组织内阿米巴、隐孢子虫和蓝氏贾第鞭毛虫的致病过程中,一些表面蛋白发挥着重要的作用,介导了原虫与宿主细胞的粘附以及侵入宿主细胞的过程,本文综述了其主要表面蛋白的研究进展以及在诊断和治疗中的应用。     

溶组织内阿米巴毒力恢复前后同工酶的电泳

同工酶的电泳谱是溶组织内阿米巴的重要特征之一。大体上,Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ、Ⅺ、Ⅻ、ⅩⅢ、ⅩⅣ型与侵袭性的阿米巴病有关,其他型别则是非致病的。作者检测了9株溶组织内阿米巴虫株的同工酶谱。这些虫株是NIH:200、P、251、R、449、364、270、33和22。其中NIH:200株在TPS-Ⅰ培养基中作无菌培养,其他