辅助性T淋巴细胞亚群Th1和Th2类细胞因子的基因表达与人喉癌的关系

目的：探讨辅助性T淋巴细胞亚群Th1和Th2两类细胞因子在喉癌发生发展中的可能作用,检测其在喉癌组织中的基因表达。方法：采用逆转录一聚合酶链反应(RT-PCR)技术,检测正常人及喉癌组织中Th1和Th2的表达。结果：20例喉癌组织中,以IL-2和IFN-γ为主的介导细胞免疫的Thl类细胞因子,呈强势表达,而以1L-6和IL-10为主的介导体液免疫的Th2类细胞因子基本不表达或表达较弱。结论：喉癌组织Th1类细胞因子呈强势表达,可能是喉癌患者免疫功能相对较强,预后相对较好的原因之一。     

人喉癌下咽癌组织中转化生长因子β1基因的检测

目的 :检测喉癌下咽癌组织中转化生长因子 β1(TGF β1)mRNA的表达 ,探讨其在喉癌、下咽癌发生发展中的可能作用。方法 :取 2 0例喉癌、下咽癌患者术后新鲜组织标本 ,用半定量的逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)方法检测TGF β1的mRNA表达。结果 :检测 2 0例标本 ,其中 17例TGF β1表达阳性 ,且Ⅲ～Ⅳ期表达较Ⅰ～Ⅱ期强。结论 :TGF β1在喉癌、下咽癌中的表达可能是导致喉癌、下咽癌患者免疫功能低下 ,促进肿瘤生长的原因之一     

喉癌、下咽癌组织中环氧化酶-2的表达与临床意义

目的研究喉癌、下咽癌中环氧化酶-2(COX-2)的表达与肿瘤临床病理参数及肿瘤预后的关系.方法应用免疫组化法检测喉癌、下咽癌组织及声带息肉组织中COX-1和COX-2的表达,并分析癌组织中COX的表达强度与肿瘤对应的各项病理参数及与预后的关系.结果喉癌、下咽癌组COX-2阳性表达率为67.5%(27/40),声带息肉组COX-2阳性表达率为0(0/30),COX-2的阳性表达与肿瘤的临床分期、病理分级及预后有关,与淋巴结转移关系不明显.结论COX-2在喉癌、下咽癌组织中表达增高,并与肿瘤的恶性度相关,表明COX-2可能在喉癌、下咽癌的发生发展中起重要的作用.     

RKIP在下咽癌中的表达及意义

目的探讨Raf 1激酶抑制蛋白（Raf 1 kinase inhibitor protein, RKIP）在下咽癌中的表达及其临床意义,通过与癌旁组织RKIP的表达比较,分析RKIP在下咽癌的发生、发展及转移中的作用以及癌旁下咽鳞状上皮中的表达及其临床意义。方法采用免疫组化方法检测46例下咽鳞癌及13例癌旁下咽鳞状上皮组织中RKIP的表达情况。对实验结果进行χ2检验及Wilcoxon检验。结果RKIP在下咽鳞癌中的表达低于癌旁下咽鳞状上皮,差异具有统计学意义（P=0.034）。RKIP在有转移的下咽癌中表达低于无转移的下咽癌,差异具有统计学意义（P=0.020）。RKIP在高、中、低不同分化程度的下咽癌中表达阳性率逐渐下降,差异具有统计学意义（P=0.005）。结论下咽癌的分化程度与RKIP的表达有关,下咽癌淋巴结转移的发生与RKIP低表达及缺失有关。     

紧密连接蛋白-1在下咽鳞状细胞癌组织中的表达及临床意义

目的　研究紧密连接蛋白- 1（z o n u l a occluden-1,ZO-1）在下咽鳞状细胞癌（hypopharyngeal squamous cell carcinoma,HSCC）组织中的表达及临床意义。方法　取HSCC组织标本52例,采用组织芯片免疫组织化学SP法检测其组织芯片中ZO-1蛋白的表达水平,结合随访资料,分析ZO-1表达与临床病理特征及患者预后的 系。结果　ZO-1蛋白在HSCC组织中的表达低于癌旁组织,且其表达水平与肿瘤的分化程度、T分级、肿瘤位置及淋巴转移密切相关。Log-rank单因素分析结果显示肿瘤分化程度、T分级、淋巴结转移、肿瘤位置与HSCC患者的生存预后相关,ZO-1表达水平低的患者生存率低于ZO-1表达水平高的患者。Cox风险回归模型的多因素分析显示肿瘤的分化程度、淋巴结转移、ZO-1表达水平及T分级均是HSCC患者预后不良的独立预后影响因素。结论　ZO-1可能成为HSCC预后的一个独立影响因素,其低表达与HSCC的发生发展密切相关。     

下咽癌喉癌术后广泛下咽及颈段食管缺损修复方法的比较

目的：探讨4种方法Ⅰ期修复下咽癌及晚期喉癌术后广泛下咽及颈段食管缺损的适应证及治疗效果。方法：用健侧喉黏膜瓣修复部分咽部缺损12例(伴颈段食管切除术2例)．胸大肌皮瓣修复部分咽部缺损6例，游离前臂皮瓣修复保留喉的部分下咽切除术2例．游离空肠重建全下咽和食管上段缺损1例。结果：术中无一例死亡，术后无修复组织坏死．全部组织瓣存活。采用健侧喉黏膜瓣修复者，仅1例术前放疗的患者术后发生咽漏；胸大肌皮瓣修复者，1例发生咽漏。全部病例愈合后均可进普通饮食。随访9～84个月，4例出现吞咽梗阻。结论：下咽癌缺损的修复方法各有侧重。肿瘤的部位和大小是选择修复方法最重要的因素；其次，也应仔细考虑减少并发症。     

下咽鳞状细胞癌CAR-EGFR修饰T细胞构建的初步研究

目的　构建具有靶向功能下咽鳞状细胞癌Fadu细胞系,EGFR-CART细胞并进行验证,为CART细胞技术在下咽鳞状细胞癌治疗应用临床前基础进行探索。方法 通过慢病毒转染构建EGFR-CART细胞及CART-对照细胞,FACS荧光检测CART细胞上EGFR抗体的表达,验证Fadu细胞系及HCT-116细胞系中EGFR的表达。结果　成功构建了EGFR-CART细胞及CART-对照细胞,感染效率约为67%,二者在细胞亚群的分布上没有明显区别。靶细胞功能验证发现HCT-116中EGFR低表达,Fadu中EGFR高表达,确定HCT-116作为EGFR-CART的非靶细胞,Fadu作为靶细胞。结论　本研究成功制备并验证了具有靶向功能的下咽鳞状细胞癌Fadu细胞系的EGFR-CART细胞,为CART技术在下咽癌治疗中的应用打下了前期基础。     

MDM2与p27在下咽癌中的表达及其临床意义

目的 :探讨MDM2和 p2 7在下咽癌中的表达与不同的临床病理参数间的关系及其临床意义。 方法 :采用免疫组织化学方法检测 5 9例下咽癌MDM2和 p2 7的表达。 结果 :5 9例下咽癌中MDM 2的高表达率为6 6 .1% ,低表达率为 33.9% ;p2 7的高表达率为 33.9% ,低表达率为 6 6 .1%。MDM 2与p2 7的表达不相关 (P >0 .0 5 )。MDM 2高表达组淋巴结转移率显著高于低表达组 (P <0 .0 1) ;p2 7表达在肿瘤的不同T分级间和不同分化程度间差异均有统计学意义 (P <0 .0 5 )。MDM2高表达组生存率显著低于低表达组 (P <0 .0 1) ;p2 7高表达组生存率显著高于低表达组 (P <0 .0 5 )。结论 :MDM2和 p2 7的表达参与了下咽癌的发生发展 ,两个指标联合检测可更好地预测下咽癌的预后。     

Th1/Th2细胞因子在变应性鼻炎患者中表达

目前,变应性鼻炎发病机制是国内、外研究的热点问题之一,本文主要观察辅助性T细胞亚群相关细胞因子的表达水平变化,为变应性鼻炎的发病机制研究和相应的预防治疗措施提供理论基础。     

晚期下咽癌、喉复发癌术后颈部缺损整复组织的选择

目的:探讨以不同组织移植物Ⅰ期重建晚期下咽癌、喉复发癌术后颈部、下咽食管缺损的适应证及治疗效果。方法:喉复发癌36例, 肿瘤切除后采用胸大肌肌皮 瓣修补组织缺损18例,肩胸皮瓣修补4例,胃代食管修补2例,胸部推移皮瓣重建下颈部与上纵隔组织缺损,并消灭手术死腔12例。晚期下咽癌16例,颈段食管癌8例,以游离空肠整复1例, 健侧喉黏膜瓣修复咽部缺损8例,喉气管代食道8例,胸大肌皮瓣修复咽部缺损2例,胃代食管2例,游离前臂皮瓣修复下咽1例。 结果:术中无一例死亡,术后无修复组织坏死 ,全部组织瓣存活。采用健侧喉黏膜瓣修复者,仅 1例有术前放疗史的患者发生术后咽漏,胸大肌皮瓣 修复者发生咽漏1例,胃代食道术后发生咽漏1例。全部病例愈合后均恢复正常饮食。随访 9～84个月,14例出现吞咽梗阻,可进流质饮食。结论:下咽癌患者术后组织缺损的修复方法各有侧重。肿瘤的部位和手术后组织缺损的大小是选择修复方法的首要因素;其次,应结合患者的年龄和全身状况,考虑减少并发症。     

Fat1蛋白在下咽癌中的表达及在侵袭转移过程中的作用

摘要：目的探讨Fat1蛋白在下咽癌中的表达及其生物学行为。方法应用免疫组织化学染色检测组织中Fat1蛋白的表达水平,采用Kaplan Meier法分析Fat1蛋白的表达与下咽癌患者生存期的关系。siRNA干扰下咽癌Fadu细胞中Fat1蛋白的表达;Western blot 法检测siRNA干扰后Fat1蛋白的表达;CCK 8实验检测细胞增殖能力;克隆形成实验检测细胞成瘤能力;划痕实验、Transwell 小室实验检测其侵袭、迁移能力。结果Fat1蛋白主要在胞浆中表达,在下咽癌复发病例中的表达强度明显低于未复发患者（P=0.001）;低表达组患者总生存时间明显低于高表达组（P=0.001）。体外实验提示,siRNA下调Fat1蛋白后,Fadu细胞生长能力明显高于对照组（P=0.004）,且细胞克隆数也明显高于对照组（P=0.001）;此外,下调Fat1蛋白后,Fadu细胞的迁移能力高于对照组,且细胞穿越小室的细胞数明显高于对照组（P=0.000）。结论Fat1蛋白表达下调提示下咽癌患者预后较差;Fat1蛋白能显著抑制下咽癌细胞的生长、增殖、侵袭、转移能力。     

下咽癌细胞增殖细胞核抗原及其基因的表达研究

目的 :通过对下咽癌细胞增殖细胞核抗原 (PCNA)及其基因的检测 ,以探讨其对下咽癌生物学特性、临床行为及预后的影响。方法 :用免疫组织化学染色SABC法检测 4 8例下咽癌手术标本和同期 1 5例癌旁正常组织标本PCNA的表达 ,计算其增殖指数 ;同时用寡核苷酸探针原位杂交技术检测PCNA的mRNA ,以检验免疫组化与原位杂交结果的一致性。结果 :下咽癌组PCNA增殖指数为 (71 .4 8± 1 1 .1 4 ) % ,对照组为 (2 1 .1 3±1 2 .0 7) % ,其差异有显著性意义 (P <0 .0 5 ) ;PCNA增殖指数与癌的临床分期、组织分化程度及预后相关 ,而与是否有颈淋巴结转移和肿瘤发生部位无明显关系 ,且免疫组化和原位杂交两种检测结果相一致 (符合率为 85 .7% )。结论 :检测下咽癌PCNA的表达可能对判断肿瘤恶性程度及预后有一定的参考价值     

Fhit 蛋白与喉咽癌生物学行为相关性研究

目的：探讨脆性组氨酸三联体（FHIT）基因蛋白Fhit在喉咽癌组织中的表达状况及与该肿瘤生物学行为的可能关系。方法：采用兔抗人Fhit抗体与枸橼酸-微波-SP免疫组织化学方法检测66例喉咽癌标本中Fhit的表达状况,并分析其与组织学分级、淋巴结转移的关系。结果：①喉咽癌组织Fhit表达阳性率为42.42％（28／66）,正常喉咽组织为83.33％（55／66）,二者比较,P〈0．01;②Fhit在高、中、低分化鳞状细胞癌中的表达阳性率分别为65．38％（17／26）、38．10％（8／21）和26．32％（5／19）,各个病理分级之间比较,P〈0．01;③无淋巴结转移组Fhit表达阳性率为75.00％（12／16）,淋巴结转移组为36．OO％（18／50）,P〈0．01。结论：喉咽癌Fhit的表达较正常组织降低,其表达状况与病理分级及淋巴结转移明显相关,提示Fhit表达降低可能对喉咽癌的演化和进展具有重要作用,并有可能成为一个新的预后指标。     

18氟-氟化脱氧葡萄糖在下咽部肿瘤诊断中的作用

目的：研究^18氟—氟化脱氧葡萄糖(^18F-FDG)在下咽部肿瘤诊断中的作用。方法：20例下咽部肿瘤患者均接受^18F-FDG检查及CT、全组内镜(食管、咽喉、气管镜)检查。结果：20例下咽部肿瘤患者^18F-FDG检查结果显示：2例阴性；18例肿瘤原发部位有同位素浓集，其中5例伴异位同位素浓集。对此5例患者进一步临床、病理检查证实：1例食管部占位，2例肺部病变，2例为良性改变。^18F-FDG检查结果显示的病变范围与CT、内镜检查相符。结论：^18F-FDG检查可以提高下咽部肿瘤、尤其是隐匿的并发肿瘤诊断的准确性，明确病变范围，为临床治疗提供依据；同时又是一个简单、易行的下咽部肿瘤的随访检查手段。     

p21WAF1/CIP1和抑制增殖细胞核抗原的表达与下咽癌及喉癌的临床关系

目的：探讨p21^WAF1/CIP1和抑制增殖细胞核抗原(PCNA)的表达与下咽癌、喉癌的分级、转移及预后的关系,了解p21^WAF1/CIP1在下咽癌、喉癌发生、发展中的作用以及与PCNA的相关性。方法：对45例下咽癌、25例声门上型喉癌、23例声门型喉癌标本,用Envision HIS的方法检测p21^WAF1/CIP1、PCNA的表达情况,并分析p21^WAF1/CIP1表达与下咽癌、喉癌临床病理特征、转移、复发和预后的关系。结果：p21^WAF1/CIP1阳性表达率为51.6％(48／93),PCNA的阳性表达率为97.8％(91／93);p21^WAF1/CIP1表达与下咽癌、喉癌患者的年龄、性别、肿瘤分化、远处转移及复发无显著性相关,与肿瘤的原发部位的T分期有显著性相关;p2^WAF1/CIP1的表达还与肿瘤的预后有显著性相关;而PCNA与肿瘤的临床分期及淋巴转移有显著性相关,p21^WAF1/CIP1与PCNA的表达具有相关性。结论：p21^WAF1/CIP1、PCNA是预测肿瘤浸润范围及转移的良好指标,p21^WAF1/CIP1对预后的判定具有一定的指导意义。     

nm23基因产物/NDPK在喉癌、下咽癌中的表达及其临床意义

应用免疫组化LSAB方法，研究61例喉癌、下咽癌手术标本中nm23基因产物／NDPK的表达及其意义。结果显示：①NDPK／nm23和肿瘤的临床分期有良好的负对应关系，即随着临床分期的升高，NDPK／nm23表达率下降；②NDPK／nm23和肿瘤的分化程度呈正对应关系，即随着肿瘤分化程度的降低，NDPK／nm23表达下降；③NDPK／nm23的表达在淋巴结转移组明显低于无淋巴结转移组（P＜0．001）     

3例喉咽癌组织与相邻正常黏膜的基因表达谱差异分析

目的 研究喉咽癌组织与相邻正常黏膜的基因表达谱差异,从基因组水平初步探讨喉咽癌易侵袭和转移的机制。方法 3例经病理证实为鳞状细胞癌的喉咽癌标本和邻近的正常黏膜组织标本,提取细胞总RNA,反转录为Cy3标记的癌旁正常喉黏膜cDNA,及Cy5标记的喉咽癌cDNA,与共有人类癌症相关基因886条的基因表达谱芯片Human Cancer CHIP Ver.4.0进行杂交, 杂交芯片用双通道激光扫描仪进行扫描记录,利用ImaGene分析软件将信号强度数值化。基因显著性表达的判定标准为：每个基因的喉咽癌组织和癌旁正常组织的平均灰度比值R（Cy5/Cy3）相差2倍或2倍以上,则认为差异有统计学意义。结果 在3例样本中重复表达且相差2倍以上的基因共51个,喉咽癌组织表达上调者39个,表达下调者12个。本实验发现显著差异的新基因4个,这些基因序列已被测出,但其功能却未知。其中表达差异非常显著（平均相差5倍以上）的主要包括,上调基因：基质金属蛋白酶-1 （MMP-1）,整合素β4（Integrinβ4）,Bcl-2,CXCL13,黑色素瘤特异性抗原(PRAME );下调基因：早期生长反应基因-1 (early growth respons gene-1, Egr-1),MRP1/ CD9。结论 基因芯片技术可以用来筛选在喉咽癌肿瘤细胞增殖、侵袭、转移过程中发挥重要作用的多种基因,为进一步深入研究提供靶点。     

晚期喉咽癌侵犯颈段食管的围手术期处理

目的 :探讨晚期喉咽癌侵犯颈段食管患者的围手术期处理方法。方法 :侵犯颈段食管的 7例喉咽癌患者中 ,6例行一侧功能性颈廓清 ,喉下咽全切除 ,颈段食管剥脱 ,胃上徙 ,胃咽吻合术 ;1例行一侧根治性颈廓清 ,喉下咽全切除 ,颈段食管剥脱 ,胃大部切除 ,结肠上徙 ,结肠残胃、结肠咽吻合术。术中 5例切除一侧甲状腺。结果 :术后并发胃咽吻合口瘘 1例 ,急性肾功能衰竭 1例 ,所有患者均有不同程度的呕吐及其他消化功能不适 ,经治疗顺利度过围手术期。结论 :加强晚期喉咽癌侵犯颈段食管患者的围手术期处理 ,可使患者顺利接受术后放疗等综合治疗 ,提高肿瘤的治愈率和患者的生存率。