消化性溃疡及胃癌患者血清CagA VacA抗体研究

细胞毒素相关蛋白（ｃｙｔｏｔｏｘｉｎａｓｓｏｃｉａｔｅｄｐｒｏｔｅｉｎ，ＣａｇＡ）和空泡形成毒素（ｖａｃｕｏｌａｔｉｎｇｃｙｔｏｔｏｘｉｎ，ＶａｃＡ）是幽门螺杆菌（Ｈｐ）相应的ＣａｇＡ，ＶａｃＡ基因编码产生的两种蛋白质，是Ｈｐ的重要致病因子，也作为Ｈｐ毒力分型的标志［１］，与消化性溃疡（ＰＵ）、胃癌有密切关系［２，３］，由于Ｈｐ菌株类型的分布存在明显的地区差异［４，５］．我们检测了本地区ＰＵ和胃癌患者的血清ＣａｇＡ，ＶａｃＡ抗体，旨在探讨我国东南沿海地区ＣａｇＡ，ＶａｃＡ与ＰＵ及胃癌的关系．１　…     

江苏省胃癌高发区幽门螺杆菌感染与胃癌、基因突变之间的关系

目的研究江苏省胃癌高发区幽门螺杆菌（Ｈｐ）感染及其毒力因子与胃癌、基因突变之间的关系。方法用酶链免疫吸附测定（ＥＬＩＳＡ）、免疫印迹及聚合酶链反应单链构象多态性分析（ＰＣＲＳＳＣＰ）等方法,分析了５０例胃癌及５０例配对胃炎患者的Ｈｐ感染、Ｈｐ的细胞毒素相关蛋白（ＣａｇＡ）、空泡细胞毒素（ＶａｃＡ）情况及胃粘膜ｐ５３基因第５～８外显子的突变。结果胃癌组中Ｈｐ阳性率及ＣａｇＡ阳性率均显著高于胃炎组,ｐ５３基因突变与Ｈｐ感染有非常显著的相关性,而与ＣａｇＡ、ＶａｃＡ的表达无关。结论Ｈｐ（尤其是ＣａｇＡ阳性菌株）感染能增加胃癌的发病风险,在Ｈｐ致癌过程中ｐ５３等基因突变可能起了关键的作用,研究结果为根治Ｈｐ以预防胃癌发生提供了实验依据。     

球形幽门螺杆菌致细胞空泡变性毒力研究

目的 揭示球菌幽门螺杆菌致细胞空泡变性毒力的变异情况。方法 采用延期培养和加亚抑菌浓度抗生素,对细胞毒相关蛋白基因阳性（ｃａｇＡ＾＋）,和细胞空泡毒素基因阳性（ｖａｃＡ＾＋）的高毒株幽门螺杆菌（Ｈｐ）进行球形诱变,进而检测该Ｈｐ至Ｈｅｌａ细胞空泡变性的毒力,并用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ、ＰＣＲ及ＰＣＲ－ＳＳＣＰ技术,分析球形Ｈｐ蛋白产物及决定细胞空泡变性的ｃａｇＡ和ｖａｃＡ基因的变异情况。结果与结论 球形     

具有cagA,vacA基因的幽门螺杆菌感染与胃,十二指肠疾…

为初步探讨南京地区具有ｃａｇＡ，ｖａｃＡ基因幽门螺杆菌的感染状况以及ｃａｇＡ，ｃａｃＡ基因的存在与表达和胃，十二指肠疾病的关系，利用ＰＣＲ技术扩增ｃａｇＡ，ｖａｃＡ基因，对１０４份临床分离Ｈｐ基因进行检测分析。结果：（１）消化性溃疡患者ｃａｇＡ＾＋，ｖａｃＡ＾＋Ｈｐ感染率高于慢性胃炎患者，（２）ｃａｇＡ＾＋组胃炎炎症的急性活动程度重于ｃａｇＡ＾－组，而ｃａｇＡ＾＋组肠上皮化生率与ｃａｇＡ＾－组间无     

具有cagA、vacA基因的幽门螺杆菌感染与胃、十二指肠疾病的关系

为初步探讨南京地区具有ｃａｇＡ、ｖａｃＡ基因幽门螺杆菌（Ｈｐ）的感染状况以及ｃａｇＡ、ｖａｃＡ基因的存在与表达和胃、十二指肠疾病的关系，利用ＰＣＲ技术扩增ｃａｇＡ、ｖａ－ｃＡ基因，对１０４份临床分离Ｈｐ菌进行检测分析。结果：（１）消化性溃疡患者ｃａｇＡ＋、ｖａｃＡ＋Ｈｐ感染率高于慢性胃炎患者（χ２＝１０．６，Ｐ＜０．０１）；（２）ｃａｇＡ＋组胃炎炎症的急性活动程度重于ｃａｇＡ－组（χ２＝９．９９，Ｐ＜０．０１），而ｃａｇＡ十组肠上皮化生率与ｃａｇＡ－组间无显著差异（χ２＝１．６４，Ｐ＞０．０５）；（３）胃癌患者以ｃａｇＡ＋、ｖａｃＡ＋菌株及ｃａｇＡ－、ｖａｃＡ＋菌株感染多见，胃癌感染后者的６例均为腺癌。结果提示消化性溃疡患者以具有ｃａｇＡ、ｖａｃＡ基因的Ｈｐ感染多见；ｃａｇＡ基因的存在与表达可能与炎症的急性活动程度有关，而与肠化生无关；ｃａｇＡ、ｖａｃＡ基因的存在与表达可能均与肿瘤的形成有关，ｖａｃＡ基因是否与腺癌形成有关，有待研究。     

高效表达幽门螺杆菌cag A蛋白工程菌的构建

幽门螺杆菌 (Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒｐｙｌｏｒｉ,Ｈｐ)是引起人类慢性活动性胃炎、消化性溃疡的主要病原菌 ,并与胃癌的发生密切相关。对Ｈｐ毒力因子进行的研究表明 :尿素酶、空泡毒素 (ＶａｃＡ)及细胞毒素相关蛋白Ａ(ＣａｇＡ) ,是引起人类严重胃部疾患的主要致病因素[1] 。其中ｃａｇＡ基因已被克隆并进行了序列分析[2 ] 。研究还证实ｃａｇＡ基因的存在是产生有活性的空泡毒素所必须的 ,并能促进细胞因子ＩＬ 8的释放及激活转录因子ＮＦ κＢ ,加重胃黏膜的组织损伤 ,故而目前认为含ｃａｇＡ基因的Ｈｐ菌株是高毒株[3 ] 。我国人群…     

幽门螺杆菌vacA基因分型与毒素活性关系的研究进展

ｖａｃＡ基因编码ＶａｃＡ毒素是幽门螺杆菌产生的重要毒力因子，使细胞发生空泡变性，ｖａｃＡ基因信号序列和中区序列的不同可在各菌株间表现为五种不同的基因表现型，各型与毒素的活性关系密切，主要是由于不同细胞表面有针对毒素的各型特异性受体，ＶａｃＡ毒素显示了这两个不同的受体结合点。     

cagA基因与细胞因子在幽门螺杆菌致病中的作用

近来发现部分幽门螺杆菌（Ｈｐ）菌株能表达细胞空泡毒素（ｖａｃＡ）和细胞空泡毒素相关蛋白（ｃａｇＡ）。我们应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术检测ＨｐｃａｇＡ基因，对Ｈｐ进行基因分型，并检测胃黏膜孵育上清中白细胞介素（ＩＬ）８、ＩＬ６、肿瘤坏死因子α（...     

幽门螺杆菌cagA基因的克隆表达及其产物的应用

目的体外表达ＣａｇＡ蛋白，发展快速而简便的检测ｃａｇＡ＋Ｈｐ感染的免疫学方法．方法用ＰＣＲ技术克隆ｃａｇＡ基因５端片段（８５４ｂｐ）于ｐＢＶ２２０中，在ＤＨ５α中温度诱导表达Ｍｒ３８０００的单体ＦＣａｇＡ，复性后分别作阴离子交换及凝胶柱层析，Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ鉴定ＦＣａｇＡ的抗原性．以重组ＦＣａｇＡ为抗原，通过制备胶体金及免疫胶体金，建立了斑点金免疫渗滤试验（ＤＩＧＦＡ）快速检测ｃａｇＡ＋Ｈｐ感染的方法．结果ＦＣａｇＡ具有抗原性．以该抗原所建立的斑点金免疫渗滤试验（ＤＩＧＦＡ）快速检测ｃａｇＡ＋Ｈｐ感染的方法仅需２ｍｉｎ～３ｍｉｎ可完成，无需特殊设备，并可单人份操作．经过与ＥＩＡ法对比检测２６２例患者血清，本方法的特异性为９８５％，敏感度为９６８％．结论具有抗原活性的ＦＣａｇＡ蛋白的表达及ＤＩＧＦＡ检测抗ＣａｇＡ抗体方法的建立，对ＣａｇＡ＋Ｈｐ感染的流行病学研究具有重要意义     

幽门螺杆菌CagA与胃十二指肠溃疡发病关系的病例对照研究

近年研究表明,消化性溃疡（ＰＵ）的发生是众多因素共同作用的结果．幽门螺杆菌（Ｈｐ）的感染与溃疡的发生密切相关,Ｈｐ感染后能否致病取决于其不同的毒力株．研究认为,Ｈｐ毒素在ＰＵ的发生中起着极其重要的作用,产生细胞毒素相关蛋白Ａ（ＣａｇＡ）及细胞空泡毒素Ａ（ＶａｃＡ）Ｈｐ菌株具有很强的致病能力,而一半以上的Ｈｐ菌株表达ＣａｇＡ,ＣａｇＡ与慢性胃炎及ＰＵ有密切关系［１］．我们采用病例对照研究方法,旨在探讨国人ＣａｇＡ阳性Ｈｐ感染及相关危险因素与ＰＵ发病的关系．１　材料和方法１．１　材料　采用病例对照研…     

人胃粘膜分离的幽门螺杆菌菌株的基因型和表现型

幽门螺杆菌（Ｈｐ）感染与慢性活动性胃炎、溃疡病、胃腺癌或ＭＡＬＴ淋巴瘤相关。Ｉ型Ｈｐ菌株具有空泡毒素（ＶａｃＡ）和细胞毒素相关抗原（ＣａｇＡ），可能与引起特殊的胃病有关。近年的兴趣之一是发现与Ｌｅｗｉｓ~ｂ血型抗原结合的Ｈｐ粘附蛋白一粘附素。表达粘附素的Ｈｐ菌株含有功能性ＢａｂＡ２基因，而另一些菌株中相应ＢａｂＡ１基因缺少一个开放读码框而不能翻译。作者研究了溃疡病（ｎ＝１３）、胃腺癌（ｎ＝１１）、ＭＡＬＴ淋巴瘤（ｎ＝１１）和胃窦炎（ｎ＝１８）患者的Ｈｐ００２分离株，对这些疾病与ＶａｃＡ、ＣａｇＡ…     

幽门螺杆菌致病因子与胃粘膜病理变化的关系

在众多幽门螺杆菌 (Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒｐｙｌｏｒｉ,Ｈｐ)的感染者中 ,仅少部分发展为消化性溃疡、胃癌或粘膜相关淋巴样组织淋巴瘤 (ｍｕｃｏｓａａｓｓｏｃｉａｔｅｄｌｙｍｐｈｏｉｄｔｉｓｓｕｅｌｙｍｐｈｏｍａ ,ＭＡＬＴｏｍａ)等较为严重的疾病 ,这促使了人们对Ｈｐ致病因子及致病机理的研究。在Ｈｐ的致病因子中 ,空泡形成毒素(ｖａｃｕｏｌａｔｉｎｇｃｙｔｏｔｏｘｉｎ ,ＶａｃＡ)、细胞毒素相关蛋白 (ｃｙｔｏｔｏｘｉｎａｓｓｏｃｉａｔｅｄｐｒｏｔｅｉｎ ,ＣａｇＡ)是最早发现的并非存在于所有Ｈｐ的蛋白 ,它们的致病…     

幽门螺杜菌cagA,vacA基因的调查及其临床意义

目的 调查广州地区患者感染幽门螺杆菌（Ｈｐ）的细胞毒素相关基因（ｃａｇＡ）及空泡毒素基因（ｖａｃＡ）亚型的流行情况,探讨Ｈｐ ｃａｇＡ及ｖａｃＡ亚型与Ｈｐ相关性胃肠疾病间的关系。方法 自广州地区不同疾病患乾胃黏膜中分离得到１９１株Ｈｐ,抽提各株菌的总ＤＮＡ,采用特定引物对各株菌ｃａｇＡ３’端、ｖａｃＡ中间序列（ｍ）及信号序列（ｓ）进行ＰＣＲ检测。结果 广州地区Ｈｐ ｃａｇＡ阳性者占８５．３％（１６     

具有cagA,vacA基因的幽门螺杆菌与胃肠疾病

Ｈｐ感染后可导致不同的临床及病理结果，受感染者可形成慢性胃炎，胃或十二指肠球部溃疡、甚至胃癌。造成上述不同结果的机制尚不清楚。近年随着分子生物学技术的发展及应用，认为Ｈｐ菌株中ｃａｇＡ、ｖａｃＡ基因的存在与表达可能与上述结果的形成有关。本文就ｃａｇＡ、ｖａｃＡ基因的检测及其在胃肠疾病中的致病作用作一综述。     

重视对幽门螺杆菌感染临床结局多样性的研究

幽门螺杆菌(Ｈｐ)在人群中的感染率高达40%～60%,感染后可产生不同结局:多数仅有不同程度的慢性胃炎,10%～15%可发生消化性溃疡,极少数可发生胃恶性肿瘤。阐明Ｈｐ感染致病多样性的机制对于Ｈｐ感染预后的判断和临床防治有重要意义,对其机制的探讨成了Ｈｐ研究中的新热点,现就此问题作一简述。一、Ｈｐ因素Ｈｐ的致病性与其毒力因子有关,后者主要由其基因型所决定。Ｈｐ菌株的基因型存在着显著多态性,与其致病性有密切的关系,是造成Ｈｐ感染后不同临床结局的重要因素。1空泡毒素Ａ(ＶａｃＡ)和细胞毒相关基因(ＣａｇＡ)蛋白:ＶａｃＡ和Ｃａ…     

在CagA阳性或阴性的幽门螺杆菌感染人群患上胃癌的风险性

幽门螺杆菌（Ｈｐ）感染一向被认为是胃窦和胃体部腺癌的一种危险因素。流行病学研究显示，感染Ｈｐ可增加肠道型癌症和扩散型癌症的危险达３～６倍。近年来，国际癌症研究机构将Ｈｐ命名为致癌质１组。在非感染性危险因素中，饮食、吸烟和社会经济状况具有一定的影响，宿主的遗传特征如ＡＢＯ血型对感染可能也有影响。Ｈｐ菌株有两种，其中一种含有与细胞毒素表达相关的基因，即所谓ＣａｇＡ基因，另一种无这种基因。ＣａｇＡ蛋白的表达很易用ＣａｇＡ特异抗体作出诊断。在美国，ＣａｇＡ阳性Ｈｐ菌株引起的胃粘膜炎症比ＣａｇＡ阴性菌株…     

幽门螺杆菌毒力因子VacA和CagA的分子生物学

幽门螺杆菌毒力因子ＶａｃＡ和ＣａｇＡ的分子生物学王思平王孟薇解放军总医院西院消化科北京市１００８５３ＳｕｂｊｅｃｔｈｅａｄｉｎｇｓＨｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒｐｙｌｏｒｉ；ｂａｃｔｅｒｉａｌｔｏｘｉｕｓ；ｖｉｒｕｌｅｎｃｅ主题词螺杆菌，幽门；细菌毒素...     

幽门螺杆菌感染对胃黏膜上皮细胞增殖的影响

空泡毒素 (ＶａｃＡ)是幽门螺杆菌 (Ｈｐ)的重要致病因素。根据其编码基因ｖａｃＡ信号序列的不同可分为ｓ1ａ ,ｓ1ｂ ,ｓ1ｃ和ｓ2型。ｖａｃＡｓ1ａ型菌株与胃十二指肠疾病的关系更为密切 ,可能是致胃十二指肠疾病的高毒力菌株。不同ｖａｃＡ类型的菌株对于上皮细胞增殖的影响存在差异[1] 。因此 ,我们主要观察感染ｖａｃＡｓ1ａ阳性Ｈｐ菌株 ,ｖａｃＡｓ1ａ阴性Ｈｐ菌株及Ｈｐ阴性的慢性胃炎和十二指肠球部溃疡 (ＤＵ)患者胃黏膜上皮细胞增殖情况 ,以探讨Ｈｐ及其不同菌株感染对细胞增殖的影响以及其可能的作用机制。材料与方法一、标本中…     

细胞毒素相关抗原(cagA)基因在中国人幽门螺杆菌中的分布及其临床意义

目的研究细胞毒素相关抗原（ｃａｇＡ）基因在幽门螺杆菌（Ｈｐ）菌株中的分布，从而明确中国人感染Ｈｐ菌株的毒力状况。方法采用特异性引物扩增ＨｐｃａｇＡ基因的２９７ｂｐ片段，对７４个临床分离Ｈｐ菌株采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）进行分型。同时收集患者的胃镜诊断及胃窦病理资料。结果９０．５％的Ｈｐ菌株含有ｃａｇＡ基因，其中消化性溃疡（ＰＵ）患者感染菌株ｃａｇＡ基因携带率（９４．９％）高于慢性胃炎患者（８５．７％），但二者差异无显著性（Ｐ＞０．０５）。病理资料显示，Ⅰ、Ⅱ型菌株均可引起胃窦的慢性炎症，但严重程度Ⅱ型菌株（ｃａｇＡ－）高于Ⅰ型（ｃａｇＡ＋，Ｐ＜０．０５），二者在致活动性胃炎、肠上皮化生、胃粘膜萎缩及淋巴滤泡形成方面比较，差异无显著性（Ｐ＞０．０５）。结论中国人感染ＨｐⅠ型菌株比例较西方国家高，但ｃａｇＡ基因尚不能作为区分Ｈｐ感染致不同胃肠道疾病的单一指标。     

定量检测幽门螺杆菌细胞毒素相关蛋白基因A方法的建立

目的建立定量检测幽门螺杆菌（Ｈｐ）细胞毒素相关蛋白基因Ａ（ｃａｇＡ）的方法。方法以含ＨｐｃａｇＡ片段的质粒（ｐＭＣ３）作为外参照品，在微孔板中对聚合酶链反应（ＰＣＲ）扩增ｃａｇＡ的产物进行辣根过氧化物酶标记探针的杂交及酶促显色以定量检测ｃａｇＡ阳性Ｈｐ。结果当ＰＣＲ反应体系中原始模板为１～１０５拷贝，循环次数小于或等于２５时，原始模板以相对固定的指数形式增加，在该范围内适宜定量分析。通过对２０份已知Ｈｐ菌株ｃａｇＡ的检测，符合率达１００％，观察结果的敏感度较电泳法提高了２００倍。定量检测不同胃黏膜组织中ｃａｇＡ阳性Ｈｐ，检出底线为６拷贝／毫克组织。结论本方法特异性强，敏感度高，对研究Ｈｐ与消化道疾病的关系及建立定量检测其他微生物的方法均有实用价值