面口部三叉神经躯体性初级传入和内脏性初级传入三叉神经脊束间质核汇聚的电镜研究

本教研室既往研究曾发现三叉神经脊束间质核不仅接受支配面、口部皮肤和粘膜的下牙槽神经、舌神经和眶下神经等三叉神经范围的初级传入,还接受舌咽、迷走神经的内脏初级传入。继之又证明,投射于三叉神经脊束间质核的舌神经眶下神经和舌咽、迷走神经的初级传入终末都主要分布在相当于闩水平的三叉神经脊束间质核的梭形、柱状膨大部分,且两者的终末分布区存在着明显的重叠。因此设想,此两种传入终末可能汇聚于三叉神经脊束间质核内的神经元并与之形成突触联系。为了证实此点,本研究将HRP和神经毒ricin分别注入于舌咽、迷走神经和眶下神经,在电镜下对它们的终末分布状态和联系进行了探索,发现有多数的此两类终末与树突分别构成突触连结;还发现一些标记的和溃变的终末共同汇聚于同一间质核神经元,其数量分别占标记末总数的1．43％和变性终末总数的6．57％。本文首次在形态学上证明直接来自三叉神经躯体性和来自Ⅸ、X脑神经内脏初级传入终末汇聚于间质核神经元形成双重突触连结。推率,来源不同的外周躯体性和内脏性传入信息可能 藉此汇聚而互相作用实现功能上的整合。     

舌咽、迷走神经初级传入与三叉神经初级传入在三叉神经脊束间质核的汇聚

三叉神经脊束间质核是位于三叉神经脊束内的一些灰质团块，三叉神经的一些分支和舌咽、迷走神经均有初级传入纤维投射于此核．为了更确切地认识这些传入投射在此核内的分布范围及其相互关系，本文在光学显微镜下详细观察了Nissl引染色和未染色的透明大鼠脑切片，利用计算机图像分析技术首先重塑此核的立体构形，继之又重塑了经HRP跨节追踪方法显示的三叉神经分支的舌神经、眼下神经以及舌咽、速走神经初级传入终末向此核内投射的立体分布状况．结果显示三叉神经脊束间质核在吻尾方向上整体呈连续且中间膨大的桂形佳状结构；投射于此核的各神经的终末量多少、分布区域虽然都不尽相同，但三叉神经躯体初级传入和Ⅸ、X脑神经内脏初级传人终末在此梭形结构中段膨大部呈明显的重叠分布。本文结果为内脏传入和面目部躯体使人信息在三叉神经脊柬问质核神经元的汇聚提供了形态学根据．     

内脏伤害性传入信息向三叉神经脊束间质核的投射

舌咽、迷走神经向三叉神经脊束间质核的投射纤维除传递非伤害性内脏信息者外是否也含内脏伤害性传入？尚未见报道。本文综合应用：（1）福尔马林刺激舌咽、迷走神经支配的一些内脏诱导FOS蛋白表达；（2）抽除外周神经节观察三叉神经脊束间质核内一些与伤害性信息传递有关的神经递质的变化；（3）运用荧光金逆行追踪与免疫组化相结合的双重反应等方法，对大鼠投射至三叉神经脊束间质核的舌烟、迷走神经初级传入纤维中是否含传递伤害性刺激信息的成分进行了研究。结果证明：(1)2％福尔马林刺激大鼠软腭、咽、食道和胃后，三叉神经脊束间质核内有大量FOS阳性神经元表达，这些阳性神经元与舌咽、迷走神经初级传入分布区基本一致。（2）抽除一侧舌咽、谈走神经报及其神经节后，术侧三叉神经脊束间质核内SP、CGRP等和痛传递有关的神经肽及BSI-B_4阳性终末与对侧比较明显减少。（3）荧光金微量注入三叉神经脊束间质核后，在舌咽、迷走神经节的下节内发现被荧光金逆标的细胞中分别有10％和12％呈SP、CGRP阳性，此两种双重阳性细胞分别占SP、CGRP阳性细胞的33．3%和278％。以上结果提示，三叉神经脊束间质核接受舌咽、迷走神经的传入纤维中有一部分传递内脏伤害性信息。     

猫三叉神经脊束间质核的细胞构筑学研究

用Nissl法和Golgi法，对猫三叉神经脊束间质核的位置、形态和细胞构筑进行了研究。确认，此核位于三叉神经脊束核尾侧亚核和极间亚核尾段的外侧、背侧的三叉神经告束内，吻尾长约8mm，主要包括二个部分。（1）在尾侧亚核至极间亚核尾段的外侧，细胞集聚呈不连续带状，与内侧的Ⅰ、Ⅱ层间有“蒂”相连；（2）在尾侧亚核吻段和极间亚核尾段的背侧，细胞集聚呈不规则片状，也与I、Ⅱ层相连续，但未形成明显的“蒂”。此核的细胞多为小（直径8～15μm）至中等大小（15～25μm），胞体为圆形，卵圆形或梭形，偶见大细胞（＞25μm），呈多角形或三角形．细胞的形态特征与员测亚核Ⅰ、Ⅱ层细胞相似，似为由Ⅰ、Ⅱ层延伸而来者．根据其位置、细胞构筑和纤维联系的全面观察，本文推测此核与口面部伤害性刺激的传递有密切关系。     

大鼠三叉神经脊束间质核内接受面口部躯体伤害性信息的calbindinD-28k神经元向孤束核的投射

为探讨三叉神经脊束间质核内的 calbindin D-2 8k神经元是否接受并传递面口部躯体伤害性信息到孤束核 ,本研究应用荧光金逆行束路追踪结合 FOS和 calbindin D-2 8k免疫荧光组织化学技术 ,观察了三叉神经脊束间质核的 calbindin D-2 8k和FOS双重免疫反应阳性的神经元向孤束核的投射。向右侧孤束核内注射荧光金并向右侧上、下唇皮下注射福尔马林 ,发现荧光金逆标细胞和 FOS免疫反应阳性细胞主要分布于注射侧的三叉神经脊束间质核的背侧边缘旁核和三叉旁核 ;大量的 calbindinD-2 8k免疫阳性细胞分布于双侧三叉神经脊束间质核内。此处的大部分荧光金逆标细胞 (约 74.4% )呈 calbindin D-2 8k免疫反应阳性。在此二者的双重阳性细胞中 ,又有一部分 (约 41.0 % )为同时呈 FOS免疫反应阳性的三重阳性神经元。结果提示 ,三叉神经脊束间质核内接受面口部躯体伤害性信息的 calbindin D-2 8k神经元可直接投射至孤束核 ,calbindin D-2 8k神经元可能在躯体伤害性信息经三叉神经脊束间质核向孤束核的传递过程中发挥重要作用     

大鼠三叉神经脊束间质核内接受内脏伤害性信息的含CB神经元向孤束核的投射

目的 探讨大鼠三叉神经脊束间质核(INV)内接受内脏伤害性信息的含calbindin D-28K(CB)神经元与孤束核(NTS)的投射联系。方法 用福尔马林刺激上消化道，应用荧光金(FG)逆行束路追踪结合Fos和CB的免疫荧光组织化学三重标记法。结果 INV的背侧边缘旁核(PaMd)和三叉旁核(PaV)内可见到大量FG逆标细胞，以注射FG的同侧为主。大部分FG逆标细胞(约71.2％)为CB免疫反应阳性。部分FG和CB双标记神经元(约31．5％)同时呈Fos免疫反应阳性的三重标记。结论 INV内部分接受内脏伤害性刺激的CB神经元可直接投射至NTS，含CB的神经元在内脏伤害性信息经INV向NTS的传导通路中，可能发挥重要作用.     

三叉神经躯体传入成分向孤束核投射的间接途径—HRP跨节和逆行追踪技术的光镜和电镜研究

用HRP跨节及逆行追踪的光镜和电镜技术探索了三叉神经(TGN)躯体性传入成分向孤束核(NTS)的间接投射通路。HRP微量注射于闩平面的NTS后,逆行标记细胞出现于与TGN尾侧亚核背外部邻接的脊束内的间质核。同时,此核又是TGN的舌神经和眶下神经初级传入的投射部位。电镜观察发现,HRP标记的舌神经和眶下神经初级传入终末与间质核内神经元的树突形成较多的突触连接。有部分标记终末与向NTS投射的神经元的逆行标记树突和树突棘在间质核内形成突触连接。另外,本文研究证明,间质核和TGN尾侧亚核浅层的细胞构筑基本相同,且有些间质核的细胞团系由尾侧亚核浅层结构向脊束内突入而形成,故可将两者视为一个统一体。据此,本文作者认为,TGN和NTS之间存在着经间质核中继的两级神经元传入通路,经此通路传入的冲动应属于躯体性质。推测由两级神经元组成的这个通路可能是针刺TGN领域体表穴位调控孤束核内脏机能的结构基础。     

大鼠三叉神经脊束间质核内内脏神经初级传入终末与NOS阳性投射神经元的联系

目的　探查间质核 (INV)内内脏传入终末与向臂旁核 (PBN)投射的NOS阳性神经元之间的联系。　方法　逆行、跨神经节追踪以及免疫荧光组织化学方法 ,结合激光共聚焦扫描显微镜观察。　结果　PBN内注射四甲基罗丹明 (TMR)后 ,逆行标记细胞主要位于注射侧的INV ,大多属 2 0 μm以下的中、小型细胞。NOS阳性细胞与TMR逆行标记细胞分布区域重叠。NOS TMR双标记细胞分别占NOS阳性细胞总数的 5 4 8% (17 31)和TMR逆行标记细胞总数的 34% (17 4 9)。舌咽和迷走神经内注射生物素化葡聚糖胺 (BDA)跨神经节标记的内脏神经初级传入终末点状膨体贴近双标记细胞胞体 ,呈紧密接触状。　结论　可能存在经INV向PBN投射的内脏伤害性信息传导通路 ,作为神经递质和神经信息分子的NO可能参与其内脏伤害性信息的传递和调控     

内脏和躯体初级传入冲动在猫骶髓后连合核的汇聚

用玻璃微电极细胞外记录的方法，观察了在电刺激猪盆神经和胫神经或机械性刺激会阴部时骶髓后连合核神经元自发放电频率的变化．共记录了80个单位放电神经元，其中13个为无关单位．电反应类型有3种：长潜伏期长串反应，短潜伏期长串反应，抑制性反应．在所观察的对刺激呈有效反应的67个单位中，30个（44．78％）对躯体和内脏刺激均起反应，其中，12个对盆神经和胫神经传入冲动都起反应；18个对盆神经和会阴部躯体感受野的传入呈汇聚性反应．对会阴部感受野施加各种机械性刺激，鉴定此汇聚神经元为WDR神经元．67个有效反应单位中还有5个（7.46％）只对内脏传入冲动，32个（47.76％）仅对躯体传入冲动做出反应．本研究从电生理学上验证了本教研室在形态学上发现的盆腔内脏（膀胱）初级传入和坐骨神经躯体初级传入在骶髓后连合核神经元的汇聚，并对汇聚的类型和意义进行了观察和讨论．     

三叉神经脊束核内SP神经的单胺神经支配——化学损毁及免疫细胞化学电镜研究

本文应用化学损毁与免疫细胞化学相结合的方法在亚细胞水平研究了SP神经的单胺神经支配。结果证实在大鼠三叉神经脊束核尾侧亚核内广泛存在着因5,7—DHT损毁所致的变性单胺(主要是5-HT)神经纤维和SP样免疫反应的树突和轴突。单胺能神经和SP样神经结构可分别与未标记的结构形成突触联系。而且,在这两种不同化学性质的神经结构之间存在着轴—树和轴—轴突触。在所有这些突触结构中,单胺能神经末梢均为突触前成分,SP终扣则为突触后成分。突触前、后膜大多呈对称性。以上实验结果可以为解释单胺(主要是5-HT)帮SP在三叉神经脊束核尼侧亚核中参与疼痛和镇痛的机制提供超微结构依据。     

大鼠中脑导水管周围灰质－中缝大核－三叉神经脊束核尾侧亚核通路的电镜研究

用ＰＨＡ－Ｌ顺行追踪和ＨＲＰ逆行追踪结合的方法，在电镜下观察到来自中脑导水管周围灰质的ＰＨＡ－Ｌ顺行标记轴突终末与中缝大核向三叉神经脊束核尾侧亚核投射的ＨＲＰ逆行标记神经元形成以非对称性为主的轴树突触。另外，发现顺行标记的轴突终末也与中缝大核内其它神经元之间形成多种突触联系。本研究结果首次在突触水平证明了中脑导水管周围灰质中缝大核－三叉神经脊束核尾侧亚核的间接通路，同时又发现中脑导水管周围灰质下行投射的终末与中缝大核内的神经元成分之间还形成比较复杂的突触联系，并对之进行了讨论。     

三叉神经一级传入纤维与小脑联系的形态学研究

本研究用脑纤维束剥离、Fink-Heimer和HRP法追踪了猫、狗和人的三叉神经一级传入小脑的纤维。脑纤维束剥离法,用猫、狗和人脑各10个;Fink-Heimer法,用成体猫7只,成体狗3匹,HRP法,用成体猫6只。通过仔细观察综合分析,结论如下: 1.猫、狗和人都有三叉神经一级传入纤维进入小脑。该束纤维进入小脑后,一些纤维投射于小脑蚓部Ⅵ、Ⅶ叶,另一些纤维投射于同侧小脑CrⅠ(相当人小脑的上半月叶)和CrⅡp(相当人小脑的下半月叶后部)。並终止于该区皮质的颗粒层内。 2.在小脑CrⅠ CrⅡp区城内,有三叉神经和迷走神经一级传入纤维的会聚区。这种现象可能为认识小脑参与体躯与内脏传入冲动的整合提供新的形态学资料。     

三叉神经初级传入纤维与孤束核的联系——HRP跨越神经节追踪研究

本文用HRP跨节追踪技术在光镜下观察了猫的眶上神经、眶下神经、耳颞神经、颊神经、舌神经和下牙槽神经的初级传入纤维向孤束核的投射状况。另外,向舌咽、迷走和鼓索神经也注入HRP进行了观察和对比。结果表明,上述三叉神经各分支中只有舌神经和下牙槽神经向孤束核投射。舌神经的标记出现于孤束核的闩以上部分,以三叉神经吻侧亚核尾段水平的部位最为浓密,标记终末多分布于腹外侧亚核、中间亚核和内侧亚核。下牙槽神经只有少量标记终末呈斑块状局限分布于闩附近的孤束核间质亚核区,小部分投射于连合核。舌咽神经投射至孤束核全长,以内侧亚核区为最多。迷走神经的大量纤维主要投射于极间亚核平面的孤束核。鼓索神经大部投射至孤束核吻极段。本文对比分析了三叉神经初级传入与Ⅶ、Ⅸ、Ⅹ神经内脏传入在孤束核分布的相互关系,结合文献讨论了投射到孤束核的三叉初级传入神经的性质。     

大鼠迷走神经初级传入纤维向孤束核投射的定位、定性研究

为了探索迷走神经向孤束核(NTS)投射纤维的性质及分布特征,本文应用(1) 免疫细胞化学技术对NTS及结状神经节(NG)内ENK、SP、CGRP和VIP等四种活性物质的存在及分布进行了普查;(2) 用HRP跨越神经节追踪技术探索了迷走神经初级传入纤维在NTS内的投射定位;(3) 用HRP逆行标记技术和免疫细胞化学双重标记法结合切断实验印证了NG内神经元向NTS投射的纤维性质。结果证明:NST内含有此四种活性物质的阳性纤维和终末,主要分布于连合核及NTS内侧部,即相当于内侧亚核、中间亚核的区域。NTS中段的尾侧及尾段的吻侧阳性纤维和终末密度最高。此四种活性物质以SP样和L-ENK样阳性成分最为密集,VIP样次之,CGRP样密度最低。NG内亦存在含此四种活性物质的阳性神经元,其中L-ENK样阳性神经元是本文首次发现的,跨节追踪证明的迷走神经初级传入纤维向NTS的投射部位与这四种性质的纤维扣终末密集区大体上一致。逆行追踪与免疫细胞化学相结合的结果证明NG内存在此四种性质的双重标记细胞。切断一侧NG中枢端发现在术侧NTS内此四种活性物质的阳性纤维和终末的密集区都出现“脱落现象”,说明NG内含此四种活性物质的神经元都向NTS投射。