铁棒锤中二萜生物碱成分及其生物活性

目的:研究铁棒锤中二萜生物碱的成分及其生物活性。方法:采用正相硅胶柱色谱、羟丙基葡聚糖凝胶柱色谱、半制备高效液相色谱等方法分离纯化,理化性质及现代波谱技术鉴定其结构。通过MTT法评价化合物2~8的细胞毒活性。结果:从铁棒锤根部的乙醇提取物中分离鉴定出8个二萜生物碱,分别为3-脱氧乌头碱(1),3-乙酰乌头碱(2),乌头碱(3),次乌头碱(4),8-O-methyl-14-benzoylaconine(5),spicatine A(6),aldohypaconite(7),hokbusine A(8)。化合物3对肺癌A549细胞、肺癌1299细胞具有较强的细胞毒活性,化合物2,4~8则表现出较弱的细胞毒活性。结论:二萜生物碱是铁棒锤药材的主要及有效化学成分,其中6~8为首次从该植物中分离得到。化合物2~8均表现出一定的细胞毒活性。     

伏毛铁棒锤根部二萜生物碱的研究

 目的研究伏毛铁棒锤根部的二萜生物碱成分。方法采用正、反相硅胶柱色谱分离纯化,根据理化性质和波谱数据鉴定结构。结果从伏毛铁棒锤根部的乙醇提取物中分离鉴定出11个二萜生物碱,分别为3-脱氧乌头碱(Ⅰ)、3-脱氧乌头原碱-8-亚油酸酯(Ⅱ)、3-乙酰乌头碱(Ⅲ)、16,17-二氢-12β,16β-环氧欧乌头碱(Ⅳ)、尼奥灵(Ⅴ)、宋果灵(Ⅵ)、乌头原碱-8-亚油酸酯(Ⅶ)、乌头碱(Ⅷ)、12-表-欧乌头碱(Ⅸ)、欧乌头碱(Ⅹ)和6-O-去甲基尼奥灵(Ⅺ)。结论二萜生物碱是伏毛铁棒锤药材的主要化学成分,其中Ⅱ,Ⅳ～Ⅶ和Ⅺ为首次从该植物中分离得到。     

民族药铁棒锤炮制减毒原理初步研究

目的:研究铁棒锤不同炮制方法的炮制减毒原理。方法:采用高效液相色谱法和急性毒性试验比较铁棒锤炮制前后化学成分和毒性的变化。结果:生品中的主要毒性成分为乌头碱、去氧乌头碱和3-乙酰乌头碱,炮制品中这3种生物碱的含量降低,苯甲酰乌头原碱的含量增加,新出现了polyschistine-D,beyzoyldeoxyaconine,16-epi-pyroaconitine,16-epi-pyrodeoxya-conitine等生品中所不含的生物碱,从结构上分析,这些新增的成分由乌头碱等毒性成分转化而来。结论:铁棒锤的炮制减毒原理与乌头碱等有毒成分通过酯键水解和高温热解的方式转化成毒性小的成分有关,不同炮制方法均能够达到减毒的目的。     

不同炮制方法对民族药铁棒锤中生物碱含量的影响

目的:探讨不同民族医的炮制方法对铁棒锤药材中毒性成分和有效成分含量的影响,为研究其炮制机制和提高饮片质量提供依据。方法:采用藏医、羌医和回医的特色方法对铁棒锤进行炮制,结合超声波和酸溶碱沉方法从不同炮制品中提取出乌头生物碱,利用紫外光谱对经过酸性染料络合的生物碱进行分析,检测其中总生物碱、酯型生物碱和非酯型生物碱的含量。结果:铁棒锤生品经过不同方法炮制后,其总生物碱、酯型生物碱和非酯型生物碱的含量均有所降低;煮制使酯型生物碱含量从0.23mg/g降至0.03mg/g,非酯型生物碱含量从0.63mg/g降至0.11mg/g,而青稞酒炒制能较好地保存铁棒锤活性。结论:用辅料青稞酒对铁棒锤进行炮制能较大程度地降低毒性并保存活性,起到"减毒存效"的作用,可见藏医的炮制技术更趋科学和合理。     

伏毛铁棒锤地上部分生物碱成分研究

首次从优毛铁棒锤Aconilumflavum地上部分（花、茎、叶）中分离出4个生物碱结晶。经鉴定晶Ⅰ为脱氧乌头碱（deoxyaconitine），晶Ⅱ为3-乙酰乌头碱（3－acetylaconitine），晶Ⅲ为乌头碱（aconitine），晶Ⅳ待鉴定。乌头碱的收率为0．12％（块根中乌头碱收率为0．20％），薄层层析鉴定地上部分与块根的生物碱基本一致，为开发3-乙酰乌头碱寻找了新的资源。     

人工种植伏毛铁棒锤的化学成分研究

目的 研究人工种植伏毛铁棒锤的化学成分.方法 采用超声波乙醇提取法和正、反相硅胶柱色谱分离纯化,根据理化性质和波谱数据鉴定结构.结果 从人工种植的伏毛铁棒锤中分离鉴定出11个化合物,分别为3脱氧乌头碱(Ⅰ)、3-乙酰乌头碱(Ⅱ)、乌头碱(Ⅲ)、3-脱氧乌头原碱-8亚油酸酯(Ⅳ)、尼奥灵(Ⅴ)、宋果灵(Ⅵ)、乌头原碱-8亚油酸酯(Ⅶ)、16,17-二氢-12β,16β-环氧欧乌头碱(Ⅷ)、12-表-欧乌头碱(Ⅸ)、欧乌头碱(Ⅹ)和6-O-去甲基尼奥灵(Ⅺ).结论 人工种植的伏毛铁棒锤的化学成分与已报道野生的基本相同,人工种植的伏毛铁棒锤能够满足药用需要.     

正交试验优化铁棒锤生物碱提取工艺

目的:优选铁棒锤生物碱的最佳提取工艺。方法:选择溶剂、提取次数、洗涤次数为考察因素,以总生物碱的含量为考察指标,采用正交试验法优选铁棒锤生物碱的最佳提取工艺。结果:铁棒锤生物碱的最佳提取工艺为浸提次数3次,提取溶剂为乙醚-三氯甲烷(3∶1),洗涤1次。结论:优选得到的提取工艺稳定性好、得率高、简便可行。     

宁夏不同地域伏毛铁棒锤茎中总生物碱含量分析比较

目的：考察并比较宁夏不同地域伏毛铁棒锤茎中总生物碱含量。方法：样品经732型阳离子交换树脂处理,以乌头碱为对照采用紫外分光光度法测定总生物碱的含量。结果：宁夏种苗园伏毛铁棒锤茎中总生物碱含量最高,为54．67mg·g^-1。结论：实验结果可见,宁夏种苗园伏毛铁棒锤茎总生物碱含量最高,为日后最大化有效利用资源提供了实验支持。     

羌药铁棒锤炮制品的抗炎镇痛作用及初步安全性评价

目的：观察羌药铁棒锤炮制品的抗炎、镇痛作用及初步安全性评价。方法：KM小鼠单次灌胃给药后,观察铁棒锤生品及不同炮制品的中毒情况,计算LD50或最大给药量;分别采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀模型和琼脂致小鼠肉芽肿模型观察铁棒锤炮制品的抗炎活性;冰醋酸致小鼠扭体实验观察炮制品的镇痛活性。结果：铁棒锤生品的LD50为0.9605g·kg-1,而160~180℃、200~220℃和240~260℃砂炒炮制品的最大给药量分别为17.492、16.836和16.840g·kg-1。其中160~180℃和200~220℃砂炒炮制品均能显著降低二甲苯所致的小鼠耳廓肿胀,并对琼脂致小鼠肉芽肿有明显的抑制作用,对小鼠冰醋酸致扭体疼痛,能明显减少动物扭体次数,延长扭体潜伏期,表现出一定的抗炎、镇痛作用,尤以160~180℃砂炒炮制品疗效更优。结论：铁棒锤生品毒性较大,经炮制后毒性明显降低,其中以160~180℃砂炒炮制品疗效更优,具有明确的抗炎、镇痛作用,适用于临床内服,这也体现了中医 “减毒存性”的炮制特色。     

铁棒锤药材质量标准研究

铁棒锤来源于毛茛科植物铁棒锤Aconitum pen-dulumBusch·和伏毛铁棒锤A·flavumHand-·Mazz·的干燥子根。别名:铁牛七(陕西)、断肠草、两头尖、磨三转(甘肃)、乌药(青海)、一枝箭、三转半(四川)、一支蒿(宁夏)。西北各省及上海市药材标准均有收载。其性热,味辛、苦,有大毒;归心、肾、脾经;具有活血祛瘀,祛风除湿,止痛消肿的功效。多数地区用其子根,个别省份用其地上部分。据报道其子根中含有乌头碱、去氧乌头碱、3-乙酰乌头碱....     

民族药铁棒锤炮制前后乌头碱和3-脱氧乌头碱含量的HPLC分析

目的:探讨藏医、羌医和回医所采用的不同炮制方法对民族药铁棒锤中乌头碱和3-脱氧乌头碱等毒性成分含量的影响,考察炮制与毒性的相关性.方法:采用HPLC方法,色谱柱为Kromasil C18(250 mm ×4.6 mm,5 μm),流动相:甲醇-水-三乙胺(95∶5∶0.3);流速:1.0 mL/min;检测波长:235 nm;柱温:25℃.结果:与生品相比,各炮制品中乌头碱和3-脱氧乌头碱含量均有所降低,其中,温度是破坏两者双酯型结构和降低毒性的最主要因素.结论:所测成分色谱峰均能达到基线分离,方法稳定,藏医采用的方法较多且减毒效果最好.     

铁棒锤快速繁殖体系的建立

目的建立铁棒锤高效快速繁殖体系。方法以铁棒锤越冬芽为外植体,用不同的培养基、激素和附加物组合培养。结果培养基MS+2,4-D 2.0 mg/L+NAA0.4 mg/L+活性炭(AC)1.5 g/L+聚乙烯吡咯烷酮(PVP)1 g/L有利愈伤组织的形成;培养基MS+6-BA2.5 mg/L+NAA0.2 mg/L+AC 1.5 g/L+PVP 1 g/L有利于成芽;培养基MS+6-BA3.5 mg/L+NAA0.1 mg/L+2,4-D 0.1 mg/L+AC 1.5 g/L+PVP 1 g/L有利芽增殖;培养基1/2 MS+NAA 0.2 mg/L+AC 1.5 g/L+PVP 1.0 g/L有利于根的生成。结论以种子发芽苗为外植体进行离体培养,可以实现铁棒锤种苗的工业化快速繁殖。     

狭序唐松草中双苄基异喹啉生物碱成分的研究

目的研究毛茛科唐松草属植物狭序唐松草Thalictrumatriplex中双苄基异喹啉生物碱成分。方法采用硅胶和氧化铝柱色谱,葡聚糖凝胶SephadexLH-20柱分离纯化得到化合物,并通过理化常数测定和光谱分析鉴定化学结构。结果从狭序唐松草根中分离得到5个双苄基异喹啉生物碱化合物,根据光谱和理化数据分析,鉴定5个化合物分别为:去氢大叶唐松草任(dehydrothalifaberine,Ⅰ)、高原唐松草亭(thalifarentine,Ⅱ)、大叶唐松草任(thalifaberine,Ⅲ)、唐松草亭(thalistine,Ⅳ)、唐松草西宾(thaliracebine,Ⅴ)。结论所有化合物均为首次从该植物中分离得到。     

HPLC法测定附子与其炮制品中双酯型生物碱

目的 通过测定附子及熟附片(干片蒸制)、黑顺片、熟附片(鲜片蒸制)、盐附子、炮附片中次乌头碱、乌头碱、新乌头碱的量,揭示炮制减毒的科学内涵.方法 样品采用10％氨水浸润,乙醚超声提取的方法;色谱柱为Agilent Zorbax SB-C18柱(4.6 mm× 150 mm,5μm);流动相为乙腈-0.2％冰醋酸(浓氨水调节pH为7.29)(28∶72);检测波长235 nm;结果与生附子相比,次乌头碱、乌头碱、新乌头碱在清水黑顺片、盐附子等炮制品中的量大大降低;结论本实验从化学的角度阐释了附子炮制减毒的科学依据.     

川乌氯仿部位的化学成分研究

目的研究川乌氯仿部位的化学成分。方法通过硅胶、碱性氧化铝柱色谱进行分离纯化,并根据理化性质和波谱数据鉴定化合物的结构。结果分离得到9个化合物,分别鉴定为次乌头碱（1）、金色酰胺醇酯（2）、乌头碱（3）、松胞素B2（4）、宋果灵（5）、新乌头碱（6）、多根乌头碱（7）、北乌碱（8）、附子灵（9）。结论化合物2为首次从乌头属植物中分离得到,化合物4为首次从植物界中分离得到。     

德钦乌头中的二萜生物碱

目的 研究乌头属植物德钦乌头Aconitum ouvrardianum根的二萜生物碱类化学成分.方法 采用反复硅胶柱色谱进行分离纯化,根据谱学数据和对照TLC分析鉴定化合物的结构.结果 从德钦乌头根的醋酸乙酯提取物中分离得到12个化合物,分别鉴定为塔拉乌头胺(1)、彭乌碱乙(2)、卡马考宁(3)、黄草乌碱亭(4)、粗茎乌头碱甲(5)、贡乌生(6)、14-乙酰黄草乌碱亭(7)、展花乌头碱(8)、黄乌宁(9)、膝乌亭丁(10)、异塔拉乌头定(11)、翠雀它灵(12).结论 12个化合物均为C-3位或C-6位无含氧取代的C19-二萜生物碱,且均为首次从该植物中分离得到.乌头碱型C19-二萜生物碱为德钦乌头药材的主要药用化学成分.     

HPLC测定附子及其炮制品中3种双酯型生物碱的含量

目的：建立同时测定附子中3种双酯型生物碱——新乌头碱、乌头碱、次乌头碱含量的HPLC分析方法。方法：Zorbax Eclipse XDB ₁₈柱,40 mmol乙酸铵缓冲液-乙腈,梯度洗脱,流速1.0 mL·min^-1,检测波长230 nm。结果：3种双酯型生物碱新乌头碱、乌头碱、次乌头碱均达到了较好的分离,分别在0.035 7～1.784 μg（r=0.999 9）,0.012 6～0.632 μg（r=0.999 7）和0.033 4～1.672 μg（r=0.999 7）呈良好的线形关系。结论：该方法简便、快速、灵敏,可有效地用于附子的鉴别和内在质量控制。