鸡胚胎微量血采集和其血红蛋白叶酸盐水平测定及意义

建立了１０日龄鸡胚胎微量血采集方法，尿绒膜血管采血量约为１００μｌ／胚胎，制成的纸血片再用微生物法测定其血红蛋白叶酸盐含量（叶酸盐／血红蛋白；μｇ／ｇ）。实验结果表明，滴至在鸡胚胎内壳膜表面的叶酸（ｆｏｌｉｃａｃｉｄ，ＦＡ）和同型半胱氨酸（ｈｏｍｏｃｙｓｔｅｉｎｅ，ＨＣＹ）均能在短期内迅速通过内壳膜和尿绒膜而被吸收入血。滴注５μｇＦＡ后，血红蛋白叶酸盐吸收高峰时间点为６０ｍｉｎ时，剂量为２２．２６μｇ／ｇ。单纯滴注ＨＣＹ（８μｍｏｌ／胚胎）对胚胎血红蛋白叶酸盐水平影响不大（Ｐ＞０．０５）。ＦＡ和ＨＣＹ联合给药６０ｍｉｎ后，胚胎血红蛋白的叶酸盐水平明显下降（Ｐ＜０．００１），呈拮抗作用。此外，还评价了实验方法的优缺点     

鸡胚微量中同型半胱氨酸,叶酸,HCY—2抗体水平和MTHFR基因型检测？…

为建立鸡胚胎尿绒膜一血采集方法和检测胚胎血中同型半胱氨酸（ＨＣＹ）、叶酸、ＨＣＹ－２抗体及亚甲基四氢叶酸还原酶（ＭＴＨＦＲ）基因型变化情况,采用ＨＰＬＣ法测血浆总ＨＣＹ,ＰＣＲ－ＲＦＬＰ法测纸血片ＭＴＨＦＲ,ＳＬＩＳＡ法测血清ＨＣＹ－２抗体和微生物法测纸血片血红蛋白叶酸盐。结果发现连续７ｄ给Ｄ．Ｌ－ＨＣＹ后,鸡胚血浆总ＨＣＹ浓度（１０６．９２μｍｏｌ／Ｌ）显著高于正常对照组（１４．１６μｍｏｌ／Ｌ     

同型半胱氨酸致细胞凋亡与畸胎发生的关系

为探讨胚胎细胞凋亡在同型半胱氨酸（ｈｏｍ ｏｃｙｓｔｅｉｎｅ, Ｈ Ｃ Ｙ）致胚胎神经管畸形和先天性心脏畸形中的作用,作者建立了２种鸡胚胎定位注射技术,观察 Ｈ Ｃ Ｙ 对６日龄胚胎的发育毒性。采用流式细胞仪、组织病理、透射电镜、原位末端标记、甲绿 派若宁双染 Ｄ Ｎ Ａ 和 Ｒ Ｎ Ａ 方法,探讨 Ｈ Ｃ Ｙ 激发细胞凋亡在畸胎发生中的作用。应用 Ｈ Ｐ Ｌ Ｃ法检测胚胎血浆总 Ｈ Ｃ Ｙ 水平的变化。结果不同位点微注射 Ｈ Ｃ Ｙ（４～８μｍ ｏｌ／胚胎）后,均可造成胚胎中枢神经系统和心脏畸形,但其所致后果不同。畸形的主要表现是异位心、心包积液、心内膜垫缺损、脑膨出、脑裂和小头等,其它表现还有体位异常、发育迟缓和死亡。 Ｈ Ｃ Ｙ 能明显干扰胚胎细胞周期,抑制胚胎细胞 Ｄ Ｎ Ａ 和 Ｒ Ｎ Ａ 的合成。在胚胎脑和心脏区域,观察到凋亡的神经细胞、心肌细胞及血管内皮细胞等,均明显高于正常组。发现 Ｈ Ｃ Ｙ 所致细胞线粒体的变异（例如：线粒体肿胀、气球样变、嵴损伤及电子密度增高等）与胚胎细胞凋亡关系密切。胚外膜滴注 Ｈ Ｃ Ｙ 后,胚胎血浆 Ｈ Ｃ Ｙ 在１２０分钟时达高峰值（８０５８μｍ ｏｌ／ Ｌ）,显著高于正常对照组;同时滴注叶酸（５μｇ／胚胎）可明显?     

血液透析病人血浆总同型半胱氨酸水平及其影响因素

目的　为探讨国内血液透析病人血浆总同型半胱氨酸 (tHCY)水平及其影响因素 ,以及与N2 ,N10-亚甲基四氢叶酸还原酶 (MTHFR)基因的关系。方法　分别采用高效液相 (HPLC)法和聚合酶链反应 -限制性片段长多态性 (PCR -RFLP)法检测血液透析病人在透析前后血浆tHCY水平和MTHFR基因型 ,及血液透析的相关指标。结果　血液透析病人血浆tHCY水平为 (32 0± 8 5) μmol/L ,明显高于正常对照组 (P <0 0 1) ;血液透析对tHCY的清除率为 (19 8± 6 2 ) % ;MTHFR基因第 6 77位点C/C正常纯合者占 75% (12 / 16 ) ,C/T杂合突变者占 2 5% (4/ 16 ) ,未发现T/T纯合突变者 ;C/T杂合突变组血浆tHCY水平为 (34 3± 4 2 ) μmol/L ,C/C正常纯合组为 (2 8 4± 5 8) μmol/L ,两组比较差异无显著性 ;血浆tHCY水平与血浆白蛋白水平呈正相关 (r =0 6 0 )。结论　本研究结果提示血液透析病人血浆tHCY水平升高 ,血液透析对同型半胱氨酸有一定的清除作用。血液透析病人MTHFR基因C6 77T突变与高同型半胱氨酸血症的关系有待进一步证实     

神经管畸形病因的基因学研究进展

神经管畸形 (ｎｅｕｒａｌｔｕｂｅｄｅｆｅｃｔｓ ,ＮＴＤｓ)是影响我国和世界人口素质的最常见和最严重的出生缺陷性疾病 ,其病因和发病机理至今仍不十分清楚。已知在孕前 1个月至孕后 3个月补充叶酸可以预防 60 %到 75 %左右的ＮＴＤｓ的发生〔1〕,其余40 %到 2 5 %ＮＴＤｓ的发生则可能是环境因素和遗传因素相互作用的结果。近年来与ＮＴＤｓ相关的基因多态性及高同型半胱氨酸血症日益受到人们的重视。本文从叶酸和同型半胱氨酸 (ｈｏｍｏｃｙｃｔｅｉｎ ,ＨＣＹ)代谢、神经管组织学等方面的相关基因研究进行综述。1　叶酸和ＨＣＹ代谢…     

同型半胱氨酸诱发鸡胚神经管畸形及叶酸的保护作用

为了揭示同型半胱氨酸（ｈｏｍｏｃｙｓｔｅｉｎｅ，ＨＣＹ）是否能导致胚胎发生神经管畸形（ＮＴＤｓ）和可能的致畸机制及验证叶酸和ＶＢ１２的干预效果，本研究应用鸡胚致畸试验、扫描电镜观察、尼罗兰盐活体染色、原位ＤＮＡ片段末端标记、甲基绿—派若宁染色显示核酸法、叶酸和Ｂ１２干预实验等方法检测了用ＨＣＹ（０～１６μｍｏｌ／胚胎）的不同胚龄胚胎１２７４只。结果显示ＨＣＹ对神经胚形成期和器官形成期的胚胎均有显著的致畸性并呈剂量－反应关系（Ｐ＜０．０００１），鸡胚发生ＮＴＤｓ的主要表现是露脑，裂脑和脊柱裂。首次发现ＨＣＹ能诱发神经系统细胞凋亡过度，其部位与ＮＴＤｓ发生部位相吻合。ＨＣＹ能抑制卵黄囊血管分化；损伤羊膜组织及细胞超微结构，如微绒毛变短，胞膜上出现空洞样变等。注射５μｇ叶酸明显拮抗ＨＣＹ（８μｍｏｌ／胚胎）的致畸性，ＮＴＤｓ发生率由４３．５％降至０（Ｐ＜０．０５）；注射１μｇＶＢ１２不能明显保护胚胎（Ｐ＞０．０５）。本研究结果说明ＨＣＹ能诱导胚胎发生ＮＴＤｓ；细胞凋亡在ＮＴＤｓ发生过程中起重要作用；叶酸能有效地预防ＮＴＤｓ；ＨＣＹ自身所诱发的ＮＴＤｓ可能是多种机制相互作用或联合作用的结果     

血清中Cu、Zn、Pb、Cd的连续测定

近年来 ,用原子吸收法测血清中的Ｃｕ、Ｚｎ、Ｐｂ、Ｃｄ已有报道。本文采用微分电位溶出法 ,仪器设备简单 ,造价低 ,样品前处理简单 ,操作简便 ,便于推广。该方法灵敏度高 ,精密度好 ,因此可以获得较满意的结果。仪器和试剂　 ( 1 )仪器 :ＭＰ - 1型溶出分析仪 (山东电讯七厂 ) ,三电极系统 (玻碳汞膜工作电极 ,铂对电极 ,饱和甘汞参比电极 )微波炉消化器。 ( 2 )试剂 :ＨＮＯ3 (Ｇ .Ｒ)、ＨＣｌ(Ｇ .Ｒ)、ＨＣｌＯ4(Ｇ .Ｒ)、ＮＨ3 -ＮＨ4Ｃｌ缓冲液、Ｈｇ 浓度为 2× 1 0 -4 ｍｏｌ/Ｌ镀汞液、1 0 0 μｇ/ｍｌ锌标准溶液、1 0 0 μｇ/ｍ…     

Atorvastatin(A)与Fenofibrate(F)对2型糖尿病人血浆脂蛋白、及其亚类分布与血液流变学参数影响的比较

13名 2型糖尿病人其中男 5,女 5,平均年龄 :6 0 0± 6岁 ,体重指数 30 0± 30ｋｇ/ｍ2 ,病程 12± 7年 ,血红蛋白ＡＩＣ7 3± 1 1% ,ＬＤＣ -Ｃｈ >135ｍｇ/ｄＬ ,ＴＧ >2 0 0ｍｇ/ｄＬ。在给予Ａ(10 0ｍｇ/ｄ) ,Ｆ(2 0 0ｍｇ/ｄ) 6周后结果发现 ,Ａ能降低所有亚型ＬＤＬ水平 (ＬＤＬ -Ｃｈ下降了 2 9% ;Ｐ <0 0 1)包括密度较小的低密度脂蛋白 (ＬＤＬ)。Ｆ则是主要降低ＴＧ浓度 (ＴＧ浓度降低39% ,Ｐ <0 0 0 5) ,导致ＬＤＬ亚型分布变迁 ;ＬＤＬ下降 13%而中间密度脂蛋白 (ＩＬＤＬ)上升 36 %。Ａ与Ｆ分别使血浆ＨＤＬ -Ｃｈ增高 10 %…     

高甲硫氨酸饮食对动脉损伤的实验研究

目的　观察甲硫氨酸诱发高同型半胱氨酸血症对动脉的损伤作用。方法　新西兰白兔 1 8只 ,随机分为甲硫氨酸组 (M组 )和对照组 (C组 )各 9只。 M组每日先喂含 3%甲硫氨酸饲料 2 0 g后 ,再喂予与 C组相同的饲料 ,不限量。1 6wk末处死留血测甲硫氨酸、同型半胱氨酸和其他生化指标 ,同时留主动脉进行病理学检查。结果　两组血浆蛋白、血糖和血脂无显著性差异 (P>0 .0 5)、M组甲硫氨酸和同型半胱氨酸分别为 2 9.97± 5.34μ mol/L和 1 3.30± 2 .1 9μ mol/L,显著高于 C组的 1 9.78± 1 .97μmol/L和 5.36± 1 .1 9μ mol/L(P<0 .0 1 )。光镜检查显示 M组主动脉内膜剥脱、内弹力膜断裂、内膜下胶原纤维增生且暴露、中膜弹力纤维断裂。结论　甲硫氨酸诱发的同型半胱氨酸血症对动脉具有显著的损伤作用     

同型半胱氨酸与脑梗死关系的实验研究

目的探讨血浆同型半胱氨酸和脑梗死之间的关系。方法测定120例脑梗死患者及41例健康对照者的血浆同型半胱氨酸、维生素B12和叶酸水平。结果脑梗死组的血浆同型半胱氨酸水平(17.15±4.63)μmol/L显著高于对照组(10.12±2.62)μmol/L,P<0.01;血浆同型半胱氨酸水平与叶酸和维生素B12均呈负相关;男女患者之间同型半胱氨酸的差异有显著性(P<0.01);高血压脑梗死患者的同型半胱氨酸水平高于单纯脑梗死患者(P<0.01)。结论同型半胱氨酸是脑梗死的一个重要发病因素,血浆同型光胱氨酸水平与叶酸和维生素B12均呈负相关,雌激素水平对血浆同型半胱氨酸也有影响,高同型半胱氨酸血症与高血压性脑梗死有关。     

96孔板微生物法微量测定血浆和红细胞内叶酸含量

目的　了解正常人血浆和红细胞内叶酸含量。方法在 96孔细胞培养板中应用L .casie和叶酸培养基对 59例健康青年人的血浆和红细胞内叶酸含量进行微量测定。结果血浆叶酸含量为 (8 2± 2 9) μg L ;红细胞内叶酸含量为 (337 5± 91 0 ) μg L。批内试验 :(1 2 4± 0 3) μg L ,CV =2 2 % ;批间试验 :(1 3 3± 0 6) μg L ,CV =4 7%。平均回收率 1 0 0 1 %。结论 96孔板微生物法微量测定叶酸其方法准确、灵敏度高、重复性好 ,操作简便、样本量微 ,适用于各种生物组织样本的检测     

同型半胱氨酸与血管疾病研究进展

同型半胱氨酸 (ｈｏｍｏｃｙｓｔｅｉｎｅ,ＨＣＹ)是蛋氨酸代谢过程中产生的一种含硫氨基酸。 1 969年Ｍｃ Ｃｕｌｌｙ提出ＨＣＹ可能是致动脉粥样硬化的一个重要因素。近年研究表明它与外周血管疾病、心血管疾病、脑血管疾病等有密切关系。大量的临床研究和流行病学已证实 ,高同型半胱氨酸血症是心、脑血管病的新的、独立的危险因子。1　正常参考值ＨＣＹ血浆中存在形式有蛋白质中的二硫化同型半胱氨酸、同型半胱氨酸二硫化合物、二硫化合态和其他硫氢混合物、同型半胱氨酸单体。在以上 4类化合物中约 75 %～ 90 %是与蛋白质结合为混合的二…     

高同型半胱氨酸血症与Ⅱ型糖尿病死亡危险性

型糖尿病患者的死亡率是非糖尿病者的 2～ 4倍。高同型半胱氨酸血症是近来认识到的一个心血管疾病危险因素 ,它独立于一些主要的危险因素 ,如糖尿病、高血压、高胆固醇血症及吸烟。估计高同型半胱氨酸血症(>1 4μmol/L)的发生率在一般人群为 5 %～30 %。一项元分析表明 ,每日服用叶酸 0 .5～5 .0 mg可以在 6周内使血清总同型半胱氨酸 (t Hcy)降低 1 5 %～ 40 %。此外 ,估计 t Hcy降低 5 μmol/L 可以使心血管疾病死亡危险性降低～ 1 0 %。荷兰学者研究了高同型半胱氨酸血症与糖尿病二者的共同作用 ,即对受试者 5年死亡危险性的影响。该研…     

不稳定心绞痛患者血管性假血友病因子及同型半胱氨酸水平的改变

目的　观察不稳定心绞痛患者血管性假血友病因子 (vWF)及同型半胱氨酸 (Hcy)水平的变化。方法　不稳定心绞痛患者 4 4例及冠状动脉造影正常患者 17例在入院次晨空腹采血 ,而健康体检人群 2 0例在当日空腹采血 ,测定vWF及Hcy水平。结果　不稳定心绞痛患者vWF及Hcy水平 [vWF(194 .36± 32 .2 3) % ,Hcy(12 .89± 5 .18) μmol L]较冠状动脉造影正常患者 [vWF(16 9.0 0± 2 0 .6 9) % ,Hcy(7.4 0± 5 .18) μmol L]和健康体检人群 [vWF(15 3.0 0±2 4 .73) % ,Hcy(4 .98± 1.5 9) μmol L]均明显升高。 结论　vWF及Hcy水平的改变可能参与了不稳定心绞痛的病理生理过程     

充血性心衰(CHF)时呼吸肌功能紊乱

作者测定 2 4 4名相继入院ＣＨＦ病人的最大吸氧压 (Ｐｉｍａｘ) ,其中男性 2 0 7名 ,女 34名 ,缺血性 75名 ,特发性扩张性心肌病 169名 ,平均年龄 (5 4± 11)岁 ,其左室射血分数 (ＬＶＥＦ) (2 2± 16) % ,ＣＨＦ病人的Ｐｉｍａｘ低于2 5名正常对照者 (7 6± 3 3)ｖｓ (10 5± 3 7)ｋＰａ ;Ｐ =0 0 0 1。 5 7名病人 (2 3% )死于 2 3± 16个月的随访期 ,死前Ｐｉｍａｘ更低为 (6 3± 3 2 )ｋｐ ,而幸存者为 (8 1±3 2 )ｋｐ(Ｐ =0 0 14)。多因素Ｃｏｘ相对危险度分析Ｐ=0 0 3,单因素分析Ｐ =0 0 0 1,强烈提示Ｐｉｍａｘ为呼吸肌功能紊…     

同型半胱氨酸对鸡胚早期心血管发育的影响

目的探讨同型半胱氨酸与胚胎早期心血管发育的关系,了解叶酸和维生素Ｂ１２是否能缓解同型半胱氨酸的心血管发育毒性。方法采用鸡胚孵化、电镜观察、甲基绿派洛宁染色、原位ＤＮＡ片段末端标记、叶酸和维生素Ｂ１２的干预试验等方法。结果同型半胱氨酸（０～１６．０μｍｏｌ／胚胎）能干扰２天和４天龄胚胎心脏发育和血管分化,其作用随着剂量的增加而增强,呈剂量反应关系;８．０μｍｏｌ／胚胎同型半胱氨酸诱发的心脏缺陷率分别为２４．１％和２５．０％,对卵黄囊血管的抑制率达６０７％。≥４．０μｍｏｌ／胚胎同型半胱氨酸能损伤心肌细胞及其细胞器结构,并抑制细胞ＤＮＡ和ＲＮＡ的合成。首次发现８．０μｍｏｌ／胚胎同型半胱氨酸可诱导早期心肌细胞发生过度凋亡（２．７％）,明显高于正常对照组（０．０８％）。叶酸能拮抗同型半胱氨酸的心血管毒性,其效果大于维生素Ｂ１２。结论同型半胱氨酸是一种新的能损害心血管发育的危险因素;叶酸能有效地拮抗同型半胱氨酸的发育毒性;细胞凋亡可能与心血管畸形的发生有关。     

成人血清同型半胱氨酸水平与代谢综合征及各组分的关系

目的　探讨成人血清同型半胱氨酸水平和代谢综合征及其各组分的相关性。方法　采用定点连续抽样方法选取2012年9至12月在北京阜外医院进行健康体检的成人为研究对象,共594人入选,其中160人存在代谢综合征、434名无代谢综合征。入选者均检测血同型半胱氨酸水平及其他生化指标并收集人体测量学指标,采用Binary Logistic回归分析对同型半胱氨酸水平和代谢综合征及其各组分的相关性进行评价。结果　代谢综合征组和非代谢综合征组的血同型半胱氨酸水平差异无统计学意义［(12.2±7.0)μmol/L 比 (12.6±8.4)μmol/L,P＞0.05］;高同型半胱氨酸血症者（≥15 μmol/L）和正常者（＜15 μmol/L）相比,代谢综合征和其各代谢异常的发生率（代谢综合征 27.3% 比 26.9%;血压异常27.3% 比19.6%;高三酰甘油50.0% 比48.3%;高密度脂蛋白胆固醇异常39.8% 比 36.6%;血糖异常30.7% 比 32.6%; 腹型肥胖31.8% 比 31.2%）差异均无统计学意义（P均＞0.05）;存在不同代谢组分数量（0~5）的受检者间同型半胱氨酸水平［（12.3±7.4）μmol/L;（12.4±6.7）μmol/L;（13.2±11.2）μmol/L;（12.5±7.8）μmol/L;(11.2±2.7)μmol/L;（12.4±4.3）μmol/L］ 差异均无统计学意义（P均＞0.05）。校正年龄、性别、体质量指数、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇和超敏C反应蛋白等混杂因素后,代谢综合征及其各组分对高同型半胱氨酸血症的预测均无统计学意义（P均＞0.05）。结论　在无明确冠状动脉性心脏病证据的人群中,高同型半胱氨酸血症与代谢综合征及其代谢异常组分间无相关性,二者可能存在不同的致心血管疾病的机制。     

老年冠心病患者血浆同型半胱氨酸水平及叶酸的干预效果

研究结果表明 ,血浆同型半胱氨酸 (Hcy)升高与冠心病(CAD)的发生和发展密切相关。我们旨在了解老年CAD患者血浆Hcy、叶酸和维生素B12 的变化特点及叶酸的干预效果。选择 2 0 0 0年 6月至 2 0 0 2年 4月在我院行冠状动脉 (冠脉 )造影确诊为冠心病 (1支以上主要冠脉狭窄≥ 5 0 % )的患者 94例 ,男 5 8例 ,女 36例 ,年龄 38～ 77岁 ,平均 (5 2± 17)岁。其中年龄≥ 6 0岁 5 1例 (A组 ) ,男 32例 ,女 19例 ,平均年龄 (6 7± 6 )岁 ;<6 0岁 4 3例 (B组 ) ,男 2 6例 ,女 17例 ,平均年龄 (5 1± 8)岁。另外选择同期冠脉造影未见明显狭窄的老年…     

同型半胱氨酸对大鼠胚胎肢芽细胞增殖的分化的影响

目的 进一步研究同型半胱氨酸（ＨＣＹ）的致畸性及作用机制。方法 应用大鼠胚胎肢芽细胞微团培养法了解ＨＣＹ对胚胎肢芽细胞增殖和分化的影响。结果 随着剂量的增加,ＨＣ Ｙ表现了对胚胎肢芽细胞的促进和抑制双相作用。半数抑制分化浓度（ＩＣ５０）是５,０ｍｍｏｌ／Ｌ,当加入Ｓ９时,ＩＣ５０减至３．５ｍｍｌ／Ｌ;半数抑制增殖浓度是９．５ｍｍｏｌ／Ｌ,当加入Ｓ９时,ＩＣ５０为５．８ｍｍｏｌ／Ｌ。结论 ＨＣＹ对胚     

氨体舒通与依那普利联用对慢性心力衰竭患者左室功能的影响

1　对象与方法研究对象为 1999年 11月至 2 0 0 0年 11月 ,在本院住院ＬＶＥＦ≤ 4 0 %的ＣＨＦ患者 2 0例 ,其中男 12例 ,女 8例 ,平均年龄 (6 2 0± 10 2 )岁。患者随机分为两组。观察组 :应用氨体舒通与依那普利 ;对照组应用依那普利与安慰剂 ,两组均进行ＣＨＦ的常规治疗。观察时间为 6个月。本研究选择对象肾功能均正常。两组病例经统计学处理各评定指标的差异无显著性。2　结果结果显示 :⑴血压 :观察组降低 (11 2± 5 5 / 9±2 5 )ｍｍＨｇ ,对照组降低 (8 3± 3 6 / 6 0± 4 6 )ｍｍＨｇ ,Ｐ<0 0 5。⑵左室舒张末容积 :观察…