在体与离体肺模型肺泡液体清除率的比较

目的研究大鼠在体与离体动物模型肺泡液体清除率。方法将Evans蓝（0．15mg／mL）标记5％白蛋白等渗生理盐水溶液及特布他林、氨氰吡咪混合后分别灌注到在体与离体大鼠肺内，根据灌注前及孵育后白蛋白浓度的变化计算肺泡液体清除率。结果在体和离体大鼠肺泡液体清除率在15min内差异无显著性，30min离体大鼠肺泡液体清除率是在体大鼠的83％，1h离体大鼠肺泡液体清除率仅为在体大鼠的60％。氨氯吡咪分别使在体和离体肺脏肺泡液体清除率降低了54＋3％和50．4％，特布他林分别使在体和离体肺脏肺泡液体清除率增加了49．7％和44．5％。结论虽然离体肺模型肺泡液体清除率低于在体肺模型，但两者对于药物的反应都是相似的。肺脏离体短时间内。可用于肺泡液体清除功能的研究。     

油酸诱导的急性肺损伤模型肺泡液体清除能力的室验研究

目的 探讨油酸诱导的急性肺损伤模型肺泡内液体的清除能力。方法 油酸静脉注射复制急性肺损伤模型。清洁级雄性大鼠51只随机分为正常组、急性肺损伤组和特布他林治疗组。动脉血气、肺组织病理学检测评估肺损伤程度,电镜下观察急性分离的肺泡Ⅱ型上皮细胞的变化,重力法测定血管外肺水量（EVLWI）。结果 急性肺损伤组大鼠肺损伤评分（6.37±1.26）分、血管外肺水量（4.02±0.69）mL/g显著高于正常组[(1.39±0.5)分和（2.73±0.50）ml/g,均P< 0.0５];特布他林治疗后大鼠肺损伤评分（5.23±1.14）分和血管外肺损伤量（3.50±0.45）mL/g较急性肺损伤显著下降（均P< 0.0５）。电镜下观察急性肺损伤组肺泡Ⅱ型上皮细胞细胞形状不规则,染色质边集,线粒体肿胀,板层小体排空及空泡化等;经特布他林治疗后,电镜观察大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞线粒体肿胀程度及板层小体排空程度较急性肺损伤组轻。结论 油酸致急性肺损伤大鼠肺泡液体清除能力下降,特布他林可以减轻肺组织及肺泡Ⅱ型上皮细胞的损伤,提高肺水清除能力。     

营养不良性肺水肿大鼠肺泡液体清除机制的研究

目的 探讨营养不良性肺水肿大鼠肺泡液体清除功能的变化及其机制.方法 制备营养不良性肺水肿大鼠动物模型,分别于48 h和120 h测定大鼠肺泡液体清除率(AFC)、总肺水量(TLW)和肺血管外水量(EVLW).将钠通道阻断剂氨氯吡咪、Na-K-ATP酶阻断剂哇巴因及β2受体激动剂特布他林分别灌注到正常及禁食120 h大鼠的肺泡腔内,测定AFC的变化.结果 大鼠禁食48 h AFC(19.7 ±3.22％)与正常大鼠AFC( 18.5±2.21％)比较没有明显变化;120 h时AFC(9.50±2.19％)明显降低.氨氯吡咪、哇巴因明显降低营养不良性肺水肿大鼠AFC (P ＜0.05),特布他林对营养不良性肺水肿大鼠AFC的作用与对照组大鼠比较差异无显著性(P＞0.05).结论 营养不良性肺水肿与钠通道及Na-K-ATP酶及的活性被抑制,导致肺泡液体清除能力降低有关.     

特布他林短时间作用增强急性肺损伤大鼠肺泡液清除的机制与αENaC的相关性

目的 探讨β2受体激动剂特布他林短时作用增强成体大鼠肺泡液清除的机制与肺泡上皮钠离子通道α亚基(αENaC)的相关性.方法 建立油酸急性肺损伤(ALI)大鼠模型;以PaO2、氧合指数,肺组织HE染色,血管外肺水含量(EVLW)为指标验证特布他林经气管给药作用1h促进ALI大鼠肺泡液重吸收的效果:通过实时荧光定量RT-PCR、Western blot测定各组大鼠肺组织的αENaC mRNA、αENaC蛋白的表达并比较它们的差异.结果 特布他林治疗组大鼠的PaO2、氧合指数、EVLW较ALI组有显著差异;各组大鼠αENaC mRNA、αENaC蛋白表达差异无统计学意义.结论 特布他林经气管给药作用1 h能显著促进ALI大鼠肺泡液重吸收;特布他林短时作用增强成体大鼠肺泡液清除没有通过αENaC基因表达实现.     

烟雾吸入伤后肺泡上皮液体清除机能的变化及其意义

观察烟雾吸入伤后肺泡上皮液体清除功能的变化及其意义。方法 :Wistar大鼠 4 2只 ,随机分为正常对照组 (C组 )、烟雾致伤组 (I组 )、阿咪洛利组 (A组 )、哇巴因组 (O组 )、阿咪洛利加哇巴因组 (AO组 )和特普他林组 (T组 )。采用大鼠烟雾吸入伤模型。伤后 2 4h测定肺泡内液体清除率 (ALC)、总肺水量 (TLW )和肺血管外肺水量 (EVLW )。结果 :I组ALC降低 4 6.8% ,TLW和EVLW进一步增加 ;AO组ALC则降至最低点 ,TLW和EVLW升至最高点。而T组ALC明显增高 ,TLW和EVLW显著减少。ALC与TLW和EVLW之间显著相关。结论 :肺泡上皮液体清除功能障碍是烟雾吸入伤后早期肺水肿形成的因素之一。     

乌司他丁对大鼠单肺移植后缺血再灌注损伤的作用

目的研究乌司他丁(UTI)在大鼠原位异体左肺移植模型中对供肺缺血再灌注损伤的治疗作用。方法16只接受原位异体左肺移植的SD大鼠随机分为2组,每组8只。对照组受体在供肺通气和再灌注开始时静脉注射生理盐水,UTI治疗组大鼠也在供肺通气和再灌注开始时接受UTI10 000U/kg,静脉注射。2h再灌注后取供肺肺静脉血测血气,处死动物,取部分供肺行组织学观察,其余部分保存于液氮中,测量供肺干湿重比,提取肺匀浆,测量髓过氧化物酶浓度(MPO),细胞间黏附分子-1(ICAM-1)的mRNA表达和IL-8浓度。结果在UTI组,供肺肺静脉血气示PaO2/FiO2显著高于对照组[(38.62±0.75)kPavs(31.57±1.85)kPa,P<0.05)],移植肺干湿重比[(4.74±0.28)vs(5.00±0.12),P<0.05]、ICAM-1mRNA表达和MPO[(0.63±0.23)vs(0.84±0.22),P<0.05]浓度均低于对照组,病理示治疗组组织损伤轻于对照组。但治疗组IL-8[(173.43±27.64)vs(76.22±12.42),P<0.001]浓度显著高于对照组。结论UTI对大鼠单肺移植模型中移植肺的缺血再灌注损伤有保护作用。     

苯肾上腺素对离体大鼠肺泡液体清除率的影响

目的 探讨α-肾上腺素能受体激动剂苯肾上腺素对离体大鼠肺泡液体清除率的影响及其影响的机制。方法应用5％等渗白蛋白溶液和不同的药物灌注到离体的大鼠的肺泡腔内，根据灌注前及其孵育1h后白蛋白浓度的变化来计算肺泡液体清除率。结果苯肾上腺素可以显著地提高离体大鼠的肺泡液体清除率，并且呈现剂量依赖性。α1-及其β1-,β2-肾上腺素能受体抑制剂可以显著地抑制苯肾上腺素引起的肺泡液体清除率的提高，但α2-肾上腺素能受体激动剂对苯肾上腺素提高肺泡液体清除率的作用没有影响。结论α-肾上腺素能受体激动剂苯肾上腺素可以显著提高离体大鼠的肺泡液体清除率，呈现剂量依赖性。并且可能是通过作用于α1-和β-肾上腺素能受体的结果。     

急进高原大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞超微结构与肺泡液体清除率变化

目的 研究急进高原肺损伤大鼠肺脏超微结构及肺泡液体清除率(alveolar liquid clearance,ALC)的变化规律,并探讨二者间的内在关系.方法 将大鼠暴露于高原低氧环境,分别于1、24、48、72 h测定基础ALC,取病理切片观察肺脏超微结构的变化.并对上述结果进行相关分析.结果 急进高原大鼠暴露于高原低氧24 h后ALC (22.60±3.41％)与正常大鼠ALC(41.14±9.36％)比较有明显变化(P＜0.05),内皮细胞出现损伤,而上皮细胞无明显结构变化;48 h时ALC(25.28±6.30％)明显降低(P＜0.05),肺泡上皮细胞的结构和上皮细胞间的紧密连接并无明显损伤;72 h ALC(45.52±10.05％)无明显变化(P＞0.05),但肺泡上皮细胞结构被破坏.结论 高原低氧致急进大鼠ALC降低,但肺泡上皮屏障结构无明显改变,提示急进高原大鼠肺泡内液体的储积与钠水通道有关.     

全肝缺血再灌注小鼠肺泡巨噬细胞Toll样受体2/4的表达

目的:探讨小鼠肝脏缺血再灌注时肺泡巨噬细胞Toll样受体2/4的表达及意义.方法:24只BALB/c小鼠随机分为假手术组(n=6)和肝脏缺血再灌注组(n=18)2组,并于再灌注1 h、6 h、12 h后通过支气管肺泡灌洗获取肺泡巨噬细胞,采用荧光定量PCR及流式细胞学检测其TLR2/4 mRNA和蛋白的表达.同时检测支气管肺泡灌洗液中肿瘤坏死因子α的水平、肺组织湿干重比值及髓过氧化物酶活性,并进行肺组织学评分.结果:与假手术组比较,肝脏缺血再灌注组各时点肺泡巨噬细胞Toll样受体2/4蛋白及mRNA表达均增高(P＜0.01),TLR2表达水平持续升高(P＜0.01),TLR4在6 h达到峰值(P＜0.01).肝脏缺血再灌注时,支气管肺泡灌洗液中肿瘤坏死因子α的水平6 h最高(P＜0.01,肺组织湿干重比值、髓过氧化物酶含量及肺组织学评分均从1 h开始增加,并在12 h达到峰值(P＜0.01).结论:肝脏缺血再灌注后肺泡巨噬细胞表面Toll样受体2/4被激活,并参与了肺损伤的过程.     

大鼠低氧肺损伤的超微结构及肺泡液体清除功能的变化

目的 研究肺损伤大鼠肺泡液体清除率(alveolar fluid clearance,AFC)及肺脏超微结构的变化规律,并探讨二者的内在联系.方法 雄性Wistar大鼠120只,体重300～380 g,随机分成12组,低氧大鼠暴露于10%的氧浓度,分别于24、48和72 h测定基础AFC、特布他林作用后AFC、总肺水量(total lung water,TLW),并取病理切片观察肺脏超微结构的变化.结果 大鼠暴露于10%的氧浓度24 h后AFC(18.7±3.19%)与正常大鼠AFC(18.9±2.26%)比较没有明显变化,内皮细胞出现损伤改变,而上皮细胞并没有明显的结构变化;48 h时AFC(13.6±2.60%)明显降低,但肺泡上皮细胞的结构和上皮细胞紧密连接并无明显损伤;72 h AFC(9.93±1.95%)进一步降低,且经特布他林作用后AFC(12.7±2.64%)仍低于对照组基础AFC,肺泡上皮细胞的结构破坏.结论 当轻、中度损伤时,虽AFC降低,但肺泡上皮屏障的结构可以没有明显改变,对药物有较好的反应性.     

油酸诱导的急性肺损伤模型肺泡液体清除能力的实验研究

目的 探讨油酸诱导的急性肺损伤模型肺泡内液体的清除能力.方法 清洁级雄性大鼠51只随机分为正常组、急性肺损伤组和特布他林治疗组.油酸静脉注射复制急性肺损伤模型.动脉血气、肺组织病理学检测评估肺损伤程度,电镜下观察急性分离的肺泡Ⅱ型上皮细胞的变化,重力法测定血管外肺水量(EVLWI).结果 急性肺损伤组大鼠肺损伤评分为(6.37±1.26)分、血管外肺水量为(4.02±0.69)mL/g,显著高于正常组[(1.39±0.5)分和(2.73±0.50)mL/g],均P<0.05;特布他林治疗后大鼠肺损伤评分为(5.23±1.14)分,血管外肺水量为(3.50±0.45)mL/g,较急性肺损伤组显著下降(均P<0.05).电镜下观察急性肺损伤组肺泡Ⅱ型上皮细胞形状不规则,染色质边集,线粒体肿胀,板层小体排空及空泡化等;经特布他林治疗后,电镜观察大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞线粒体肿胀程度及板层小体排空程度较急性肺损伤组轻.结论 油酸致急性肺损伤大鼠肺泡液体清除能力下降,特布他林可以减轻肺组织及肺泡Ⅱ型上皮细胞的损伤,提高肺水清除能力.     

Effect of β3-adrenergic agonists on alveolar fluid clearance in hypoxic rat lungs

Background Recent research suggests that β2-adrenergic agonists increase alveolar fluid clearance （AFC） under physiologic and pathologic conditions. It is unknown whether β3-adrenergic agonists also increase AFC under pathologic conditions. The aim of this study was to investigate the effect of β3-adrenergic agonists on AFC following hypoxic lung injury and the mechanisms involved. Methods Hypoxic rats were exposed to 10% oxygen. BRL-37344 （133-adrenergic agonist） or CGP-12177 （selective β3-adrenergic agonist） alone or combined with β receptor antagonists, sodium channel blockers, or Na＋/＋~-ATPase blockers were perfused into the alveolar space of rats exposed to 10% oxygen for 48 hours. Total lung water content （TLW） and AFC were measured. Results AFC did not change for the first 24 hours but then decreased after 48-hour exposure to 10% oxygen. The perfusion of BRL-37344 or CGP-12177 significantly increased AFC in normal and hypoxic rats. The AFC-stimulating effect of CGP-12177 was lowered with amiloride （a Na＋ channel blocker） and ouabain （a Na~/K~-ATPase inhibitor） by 37% and 49%, respectively. Colchicine significantly inhibited the effect of CGP-12177. Conclusions These findings suggest that β3-adrenergic agonists can increase AFC during hypoxic lung injury in rats and accelerate the amelioration of pulmonary edema.     

激活大麻素受体2可减轻实验性脓毒症大鼠的急性肺损伤

目的 探讨激活大麻素受体2(CB2)对大鼠脓毒症急性肺损伤的保护作用及机制。方法 将48只SD大鼠随机分为对照组、模型组、CB2激动剂组和P38 MAPK抑制剂组（12只/组）。对照组腹腔注射生理盐水,其余3组均腹腔注射脂多糖造模6 h;CB2激动剂组在注射脂多糖前30 min腹腔注射CB2激动剂JWH133(3 mg/kg),P38 MAPK抑制剂组在CB2激动剂组基础上提前30 min腹腔注射P38 MAPK抑制剂SB203580(5 mg/kg)。观察和检测肺组织病理学、含水率、液体清除率、炎症因子的变化情况,肺组织CB2、紧密连接的基因及蛋白表达情况以及P38 MAPK磷酸化情况。结果 与对照组相比,模型组大鼠的肺泡结构破坏严重,液体清除率、肺组织中CB2、occludin和ZO-1蛋白的mRNA及蛋白表达降低,肺组织含水率、P38 MAPK的磷酸化程度、肺灌洗液中TNF-α、IL-1β均增加,差异有统计学意义（P<0.05）。与模型组相比,CB2激动剂组肺泡形态有所恢复,但仍有炎性浸润,肺组织含水率、P38 MAPK磷酸化程度、肺灌洗液中TNF-α、IL-1β降低,液体...     

特普他林对油酸肺损伤后肺水肿的抑制作用

目的 观察特普他林对油酸致伤大鼠肺损伤后肺水肿的影响.方法 随机将大鼠分为正常对照组(C组)、油酸致伤组(I组)和特普他林治疗组(T组),T组于伤后1h经气管滴注特普他林(1×10-4M)溶液5ml/kg.分别于6、12、24h时相点检测总肺水量(TLW)、肺血管外肺水量(EVLW)和肺微血管通透性(PMVP),并同步检测动脉血气参数.结果 油酸致伤后大鼠PMVP 显著增高,TLW和EVLW明显增加, PaO2显著下降;特普他林治疗后,TLW、EVLW和PMVP均较油酸致伤组显著降低(P＜0.01),低氧血症明显改善.结论 特普他林明显降低油酸型肺损伤大鼠的肺微血管通透性和肺含水量,改善换气功能,对急性肺损伤后肺水肿有一定的治疗作用.     

甲型流感病毒对于在体大鼠肺泡上皮液体清除的影响

 目的探讨甲型流感病毒（A/PR/8/34 株,H1N1）对在体大鼠肺泡液体清除率（AFC）的影响,以及β1-肾上腺素能受体激
动剂地诺帕明对于在体大鼠AFC 的影响机制。方法将SD大鼠分为正常对照组、H1N1 感染模型组、感染后地诺帕明干预组。
研究H1N1 感染后AFC 的变化以及地诺帕明的调节作用,并应用ELISA 方法检测肺组织内环腺苷酸（cAMP）、环鸟苷酸
（cGMP）的水平。结果正常对照组AFC 为（17.25±1.01）%,肺干湿重比（W/D）为4.99±0.02;H1N1 感染组AFC 降为（9.15±
1.01）%,W/D升高至6.77±0.13。干预组可以显著地提高H1N1 感染后的AFC［（14.41±1.41）%］,W/D 为5.98±0.22。正常肺组织
内cAMP活性为（2.73±0.06）nmol·mg^-1·mg^-1,cGMP 的活性为（5.10±1.88）pmol·mg^-1·mg^-1。H1N1 感染组肺组织内的cAMP 明显
下降［（1.43±0.06）nmol·mg^-1·mg^-1］,cGMP 水平升高［（7.34±0.40）pmol·mg^-1·mg^-1］,应用地诺帕明可以提高肺组织内的cAMP 的
活性［（2.06±0.16）nmol·mg^-1·mg^-1］,cGMP的活性下降为［（6.16 ±1.36）pmol·mg^-1·mg^-1］。结论H1N1 感染可导致大鼠AFC 明显
下降、肺水肿加重。地诺帕明可以提高在体H1N1 感染大鼠模型的AFC、减轻肺水肿,并可以逆转感染组cAMP/cGMP 的下降。
说明β1-肾上腺素能受体激动剂提高AFC 及减低肺水肿可能是通过cAMP-PKA 信号转导途径完成。     

Nrf2激活对新生大鼠高氧致肺损伤的保护作用

目的 观察NF-E2相关因子2（Nrf2）激动剂对高氧致新生大鼠肺组织细胞凋亡的影响,探讨Nrf2激活是否对高氧致新生大鼠肺损伤具有保护作用。方法 将足月顺产SD 新生大鼠90只随机分为空气对照组( N组)、高氧组( O 组)和Nrf2组,每组各30只。O 组和Nrf2组新生鼠于出生后第1 d、第2 d分别腹腔注射生理盐水0.2 mL或Nrf2激动剂莱菔硫烷0.2 mL（30 mg/kg）,N组不予任何干预。O组和Nrf2组新生大鼠于第1次注射后置入氧体积分数>95%的高氧环境中持续饲养4 d,N组则持续于空气中饲养。3组新生大鼠麻醉后取肺组织,采用TUNEL染色比较3组新生大鼠肺泡细胞的凋亡指数(AI),采用免疫组化染色检测Nfr2在肺组织中的表达。结果 O组新生大鼠肺泡细胞AI值〔(28.8±3.0)%〕高于N组〔(0.7±0.6)%〕和Nrf2组〔(7.2±0.8)%〕,差异有统计学意义（P<0.01）。O组(926.80±130.51)和Nrf2组(1 038.40±151.12)肺组织Nrf2表达差异无统计学意义（P>0.05),但与N组(30.03±9.99)比较均明显增高,差异有统计学意义（P<0.01）。结论 Nrf2激动剂可减少高氧致新生大鼠肺泡细胞凋亡,对高氧引起的肺损伤具有一定的保护作用。     

精氨酸抗利尿激素对急性肺损伤大鼠肺水肿液的清除作用

目的探讨精氨酸抗利尿激素（AVP）对急性肺损伤肺水肿液清除作用。方法48只健康成年的雄性SD大鼠随机分为对照
组、模型组（ALI组）、AVP组,观察各组肺组织病理形态学、肺水含量、肺泡上皮通透性及肺泡液体清除率（AFC）变化,测定肺泡
上皮钠通道（ENaC）和钠/钾ATP 酶（Na+, K+-ATPase）表达情况。结果经AVP治疗后,模型组肺泡上皮通透性（0.27±0.15 vs
0.59±0.19）及肺水含量（5.01±1.59 vs 8.67±1.79）减轻,AFC 增加（23.56±4.51 vs 8.28±3.57）,α-ENaC（1.296±0.322 vs 0.349±
0.141）和α1-Na+,K+-ATPase表达增加（1.421±0.389 vs 0.338±0.186）,均有显著差异（P<0.05）。结论AVP能促进AFC,其作用途
径可能是上调α-ENaC和α1-Na+,K+-ATPase通道蛋白实现的。
     

无心跳供体大鼠同种异体左肺原位移植模型的热缺血时限

 目的 建立无心跳供体（NHBD）大鼠同种异体左肺原位移植模型，比较不同热缺血时间（WIT）对大鼠移植肺功能和结构的影响。方法 将32只SD大鼠按供受体随机配对成16对，分成4组，分别为有心跳供体组（对照组，HBD）、NHBD热缺血1 h组、（实验组，NHBD1h）、热缺血2 h组（实验组，NHBD2h）和热缺血3 h组（实验组，NHBD3h），每组4对。供肺摘取后置于4℃低钾右旋糖苷（LPD）液中4 h。采用三“袖套”套管法行左肺原位移植术。测定和观察移植前、移植后10 min、1 h和2 h的右颈动脉血气，移植后2 h的左肺静脉血气、移植肺湿/干重比和组织形态学改变。结果 NHBD1h组移植肺再灌注10 min、1 h和2 h所采集的右颈动脉血PaO2数值（177.8 ± 15.5、162.0 ± 19.3和195.5 ± 26.4）和对照组HBD组（187.3 ± 34.4、191.8 ± 36.6和198.8 ± 36.6）的差别没有统计学意义；再灌注10 min和2 h，NHBD2h组右颈动脉血PaO2数值（154.8 ± 25.2和116.5 ± 32.1）以及NHBD3h组（121.0 ± 28.2和88.3 ± 23.6）和对照组的差别有统计学意义（P<0.05）。移植肺再灌注2 h后，NHBD1h组左肺静脉血PaO2数值与对照组的差别没有统计学意义（132.3 ± 33.8 vs. 143.8 ± 17.1），NHBD2h和NHBD3h组与对照组的差别均有统计学意义（78.8 ± 16.1 vs. 143.8 ± 17.1，70.8 ± 15.5 vs. 143.8 ± 17.1，P<0.05）。NHBD3h组的湿/干重比数值和肺损伤程度病理评分与对照组的差别有统计学意义（P<0.05）。结论 本实验成功建立了NHBD大鼠同种异体左肺原位移植模型，在本实验动物模型中，大鼠可以耐受的WIT为1 h。