热休克蛋白在脑缺血性损伤中的作用研究进展

脑缺血后虽然总蛋白的合成下降 ,但某些蛋白质合成增加 ,如热休克蛋白 (ＨＳＰ) [1] 。这是脑缺血早期引起一系列应激反应 ,诱导有关基因表达 ,合成相关的应激蛋白。ＨＳＰ被认为是脑缺血性损伤时敏感且可靠的标志之一 ,并认为对神经有保护作用。目前对脑缺血引起脑内ＨＳＰ基因表达 ,合成ＨＳＰ与脑细胞功能状态 ,损伤时程以及保护机制之间关系的研究日益受到重视。1　ＨＳＰ的命名、分类和功能1 1　ＨＳＰ的命名　 196 2年Ｒｉｔｏｓｓａ在观察果蝇幼虫唾液腺细胞多丝线粒体在过热环境中形态变化时首先发现热休克(Ｈｅａｔｓｈｏｃｋ ,Ｈ…     

热适应与热休克蛋白研究进展

人类对热环境的适应是一个广泛的综合性的问题。热适应在人体的多个水平出现 ,比如 :器官水平、细胞水平、亚细胞水平〔1〕。热休克蛋白 ((ｈｅａｔｓｔｒｅｓｓｏｒｓｈｏｃｋｐｒｏｔｅｉｎｓ,ＨＳＰ)是机体在应激情况下迅速合成的一组蛋白质。近年 ,热适应时机体ＨＳＰ变化与ＨＳＰ在热适应中的作用研究方面报道并不多 ,现综述如下 :1　ＨＳＰ生物学功能及基因调控从原始细菌到人 ,所有的生物在温度提高到正常生理体温之上时都会引起热应激反应 (Ｈｅａｔｓｔｒｅｓｓｒｅｓｐｏｎｓｅ)。它包括基因表达的一系列复杂变化 ,其结果是合成了…     

低水平辐射所致细胞增殖刺激效应的自由基机理

低水平辐射所致增殖刺激效应是近 10年来放射生物学研究的热点之一。国内外学者从不同角度对其机理进行了探索。有研究表明 ,低水平辐射可使细胞ｃ ｆｏｓ、ｃ ｊｕｎ、ｃ ｍｙｃ等基因表达增强 ,从而产生刺激效应[1 ] 。也有人认为 ,低水平辐射是通过ＤＮＡ损伤来影响细胞内的转录和复制因子 ,从而改变信息传递过程[2 ] 。还有学者提出低水平辐射可引起诱导蛋白的产生 ,后者可诱导细胞增殖[3 ] 。Ｂｕｒｄｏｎ[4] 曾经报道 ,超氧自由基 (Ｏ- ·2 )在哺乳动物细胞增殖中起着十分重要的作用。为此笔者研究了低水平辐射能否刺激细胞释放Ｏ- ·…     

白细胞介素-12抗乙型肝炎病毒作用机制的研究进展

白细胞介素 12 (ＩＬ 12 )是由巨噬细胞、Ｂ淋巴细胞等抗原递呈细胞在免疫应答中产生的细胞因子。近年研究表明 :ＩＬ 12是一种重要的抗乙型肝炎病毒 (ＨＢＶ )细胞因子[1] 。本文就近年来有关ＩＬ 12抗ＨＢＶ作用机制综述如下。1　ＩＬ 12的来源及生物学效应ＩＬ 12最初称作自然杀伤细胞刺激因子 (ｎａｔｕｒａｌｋｉｌｌｅｒｃｅｌｌｓｔｉｍｕｌａｔｏｒｙｆａｃｔｏｒ,ＮＫＳＦ) [2 ] 或细胞毒性淋巴细胞成熟因子 (Ｃｙｔｏｔｏｘｉｃｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅｍａｔｕｒａｔｉｏｎｆａｃｔｏｒ ,ＣＬＭＦ) [3 ] 。现已证明 :ＮＫＳＦ与Ｃ…     

热休克蛋白在心肌缺血再灌注损伤中的作用

热休克蛋白是近年来研究较多的生物体内内源性保护因子 ,许多原因如高温、缺血、缺氧均可使热休克蛋白合成增加 ,且生成量与心肌保护程度呈直接关系。其中时间因素很重要。本篇就热休克蛋白及其与心肌缺血再灌注损伤之间的关系作一综述。1　热休克蛋白概述　　热休克蛋白 (ＨｅａｒｔＳｈｏｃｋＰｒｏｔｅｉｎ ,ＨＳＰ)是指细胞在应激原诱导下生成的一组蛋白质 ,最早由Ｒｉｔｏｓｓａ〔1〕于 196 2年在果蝇唾液腺中发现 ,直到 1974年Ｔｉｓｓｅｒｅｓ将其从果蝇体中分离出来 ,并命名为热休克蛋白。热休克蛋白是一类在进化上高度保守、广泛存…     

创伤骨科转基因治疗的研究进展

基因治疗是借助基因转移 (ｇｅｎｅｔｒａｎｓｆｅｒ)或基因转染 (ｇｅｎｅｔｒａｎｓｆｅｃｔｉｏｎ)技术将具有生物学作用的基因材料或信息(称为目的基因 )转入细胞内 ,以改变细胞的功能来治疗或预防疾病[1 ] 。可以通过病毒载体、脂质体或基因枪将基因转入到细胞内。基因治疗为疾病的防治开辟了一条新途径。目前 ,通过体内 (ｉｎｖｉｖｏ)和体外 (ｅｘｖｉｖｏ)基因转移技术 ,将编码核酸或蛋白质的调节因子 (如生长因子及其受体、转录因子等 )的基因成功地转入了骨骼肌肉系统的组织中 ,包括骨、关节软骨、半月板、肌腱、韧带等组织[2 ] ,…     

氦氖激光诱导瘢痕成纤维细胞凋亡的体外实验

细胞凋亡不仅参与正常创伤愈合的组织重建 ,而且在异常创伤愈合如增生性瘢痕 (ｈｙｐｅｒｔｒｏｐｈｉｃｓｃａｒ,ＨＳ)和瘢痕疙瘩等过程中亦发挥重要作用[1 ] ,细胞凋亡不足或延迟不仅导致ＨＳ形成 ,而且阻碍ＨＳ成熟消退[1 3 ] 。因此 ,诱导或调控细胞 (主要是成纤维细胞 )凋亡是防治ＨＳ的一条快速、有效途径。笔者以氦氖(Ｈｅ -Ｎｅ)激光作为成纤维细胞凋亡诱导因素 ,首次发现一定功率密度Ｈｅ -Ｎｅ激光重复照射能引起培养瘢痕成纤维细胞凋亡 ,这也许为临床上采用低强度激光防治ＨＳ提供了实验依据资料与方法1.取材 :ＨＳ患者 6例均符…     

白介素11抗辐射损伤作用的研究进展

自从 1990年克隆白介素 11(ＩＬ 11)ｃＤＮＡ以来 ,对ＩＬ 11的分子生物学研究取得了很大进展。美国ＧｅｎｅｔｉｃｓＩｎｓｔｉ ｔｕｔｅＩｎｃ.利用基因工程技术获得的重组人ＩＬ 11(ｒｈＩＬ 11)已于 1997年获准上市 ,治疗放、化疗后血小板减少症效果较好[1] 。国内同类产品在进行临床前评价。现将国外ｒｈＩＬ 11抗辐射损伤作用的研究综述如下。1 ＩＬ 11的生物学特性人ＩＬ 11的基因长度为 7ｋｂ ,由 5个外显子和 4个内含子组成 ,位于 19号染色体 ,有 2个长度为 1 5和 2 5ｋｂ的ＲＮＡ转录体。人ＩＬ 11的ｃＤＮＡ编码 199个氨基酸组…     

辐射诱导细胞凋亡的基因调控

ｐ５３和Ｂｃｌ－２家族在辐射诱导的细胞凋亡中起着中心作用，可调节许多凋亡相关基因的转录与表达，从而调控细胞凋亡；ｃ－ｍｙｃ是一个双向的调控基因，可因细胞生长条件的不同而不同；ＩＣＥ基因家族蛋白则在调控细胞凋亡过程中使一些有关蛋白底物酶解。这些基因及其它凋亡相关基因并不孤立存在，而是互相联系、互相作用，共同调节细胞的增殖、分化与凋亡。     

一种不配对粘末端连接的新策略

整合素是粘附分子的一个家族 ,是由α和 β亚基通过非共价键连接而形成的一类异二聚体 ,目前已发现 2 0多种[1] 。α4 β7就是其中一种 ,它的主要功能是通过与配体粘膜地址素细胞粘附分子 1(ｍｕｃｏｓ ａｌａｄｄｒｅｓｓｉｎｃｅｌｌａｄｈｅｓｉｏｎｍｏｌｅｃｕｌｅ 1,ＭＡｄＣＡＭ 1)的相互作用而介导淋巴细胞在粘膜部位的归巢和定居 ,并参与该部位的免疫应答。抗 β7的单抗 (ｍＡｂ)可有效阻断α4 β7介导的多种功能 ,已成功用于多种研究。我们将编码 β7亚基主要抗原表位的 1.8ｋｂｃＤＮＡ片段[2 ] ,亚克隆入原核融合表达载体ｐＧ…     

先天性髋关节脱位和髋关节发育不良

先天性髋脱位 (ｃｏｎｇｅｎｉｔａｌｄｉｓｌｏｃａｔｉｏｎｏｆｈｉｐ ,ＣＤＨ)是婴儿出生时就患有的髋关节疾患。但是 ,并不是所有的病儿在刚出生时即可诊断本病[1～ 3 ] ,而是在出生后逐渐演变而成。因此 ,有作者[4] 认为完全有理由将本病称为发育性髋关节发育不良 (ｄｅｖｅｌ ｏｐｍｅｎｔａｌｄｉｓｐｌａｓｉａｏｆｈｉｐ ,ＤＤＨ )。有许多病例在新生儿早期表现正常 ,随着日龄、月龄或年龄的增长逐渐出现半脱位 (ｓｕｂｌｕｘａｔ ａｂｌｅｈｉｐ) ,此时若不及时治疗即发展为完全脱位 (ｄｉｓｌｏｃａｔｉｏｎ) [5] 。后者的命名更…     

放射性间质性肺炎早期透明质酸积聚的分子机理研究

透明质酸 (ＨＡ)是一种广泛分布于细胞间质的单链糖胺多糖 ,参与组织发生、损伤修复与肿瘤转移等多种生理、病理过程[1 ] 。近几年 ,3种基因结构类似的透明质酸合成酶(ＨＡＳ)已相继被克隆、鉴定[2 4 ] 。这 3种ＨＡＳ基因都有单独合成ＨＡ的能力 ,但它们的表达却具有细胞特异性 ,并对不同因子的刺激产生不同反应[5] 。至今 ,关于调控ＨＡ活性的分子机理尚属未知。正常情况下 ,组织内ＨＡ的合成和降解处于动态平衡。但在许多疾病发生过程中 ,ＨＡ代谢发生变化 ,并在血液和组织中积聚[6 ] 。其中 ,放射性间质性肺炎的病理特点是在病变早期 ,…     

辐射诱导细胞凋亡的基因调控

ｐ５３和Ｂｃｌ－２家庭在辐射诱导的细胞凋亡中起着中心作用，可调节许多凋７亡基因的转录与表达，从而调控细胞凋亡；ｃ－ｍｙｃ是一个双向的凋控基因，可因细胞生长条件的不同而不同；ＩＣＥ基因家庭蛋白则在调控细胞凋亡过程中使一些有关蛋白底物酶解。这些基因及其它凋亡相关基因并不孤立存在，而是互相联系、互相作用，共同调节细胞的增殖、分化与凋亡。     

大电导钙激活钾通道(BK)在调节血管平滑肌细胞张力中的作用

钙激活钾通道 (ｃａｌｃｉｕｍ -ａｃｔｉｖａｔｅｄｐｏｔａｓｓｉｕｍｃｈａｎｎｅｌ,ＫＣａ)是一类电压和钙敏感的通道 ,最早由Ｃａｒｄｏｓ描述 ,后来由Ｍｅｅｃｈ证明并报告[1 ] 。起初发现的ＫＣａ,其电导比任何其他的钾通道的电导都大得多 (单通道电导为 10 0～ 2 5 0ｐＳ) ,因而称为大电导的钙激活钾通道 (ＢＫ)。后来又发现了中电导 (ＭＫ ,2 0～ 6 0ｐＳ)和小电导 (ＳＫ ,10～ 14ｐＳ)的钙激活钾通道[2 ] 。在这些类型的ＫＣａ 中 ,ＢＫ在平滑肌上表达密度最高 ,在平滑肌细胞膜电位的维持和肌紧张的调节中起着重要的作用。一、Ｂ…     

放创复合伤的创伤局部bFGF和NGF含量的变化及意义

生长因子可以调节创伤修复中的多种细胞反应 ,对细胞增殖、迁移、细胞外基质合成、分泌都具有重要作用[1 ] 。碱性成纤维细胞生长因子 (ｂａｓｉｃｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ,ｂＦＧＦ)和神经生长因子 (ｎｅｒｖｅｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ,ＮＧＦ)在创伤愈合过程中具有重要作用[2 ,3 ] ,但合并全身放射损伤的创伤局部其含量变化及其意义仍未见报道 ,因此本实验拟对此进行研究 ,以期深入阐明放创复合伤创伤难愈的理论机理 ,并为进一步制订促愈措施提供实验依据。一、材料和方法1 实验动物 :Ｗｉｓｔａｒ大鼠 5 5只 ,由我…     

8-Br-cAMP和~(60)Co照射诱导宫颈癌Hela细胞凋亡及相关基因表达的研究

应用８ Ｂｒ ｃ Ａ Ｍ Ｐ 和６０ Ｃｏ 照射体外诱导 Ｈｅｌａ 细胞凋亡。探讨ｂｘ Ｌ ２ ,ｗ ｐ５３ ,ｍ ｐ５３ ,ｃ ｍ ｙｃｉ Ｎｏｓ 的基因表达和ｉ Ｎｏｓ , Ｆａｓ 蛋白表达之间的关系,为探讨无毒性８ Ｂｒ ｃ Ａ Ｍ Ｐ 对宫颈癌治疗的新途径提供依据。采用 Ｔ Ｕ Ｎ Ｅ Ｌ 法和 Ｆｅｕｌｇｅｎ 法进行细胞凋亡实验;采用本实验室创新的完整细胞原位 Ｒ Ｎ Ａ 斑点印迹技术检测 Ｆａｓ 和ｉ Ｎｏｓ蛋白,应用高速薄层色谱扫描仪对斑点印迹信号进行定量测定。结果８ Ｂｒ ｃ Ａ Ｍ Ｐ 和６０ Ｃｏ 照射均可上调 Ｈｅｌａ ｗｐ５３ ,ｉ Ｎｏｓ 的基因表达;下调ｍ ｐ５３ ,ｂｃｌ ２ ,ｃ ｍｙｃ 的基因表达。可增强ｉ Ｎｏｓ 蛋白质的酶活性,降低 Ｆａｓ 蛋白质的免疫反应性。显示出８ Ｂｒ ｃ Ａ Ｍ Ｐ 可能代替放疗作为一种治疗宫颈癌的新途径。     

幽门螺杆菌热休克蛋白A基因的克隆及高效分泌表达

目的：从幽门螺杆菌（Ｈｐ）分离热休克蛋白Ａ基因，并实现在大肠杆菌中的融合分泌表达，方法：提取Ｈｐ染色体ＤＮＡ，用ＰＣＲ方法扩增ｈｓｐＡ基因。经克隆、测序后，构建融合分泌表达载体ｐＭＡＬ－ＨｓｐＡ，转化大肠杆菌，ＩＰＴＧ诱导表达。结果：分离得到了高度保守的３５４ｂｐ的ｈｓｐＡ基因片段，并在大肠杆菌中实现了该基因的融合分泌表达。在３７℃诱导表达３ｈ后，基融合分泌表达蛋白可占细菌周质总蛋白的６６．６％。     

移植pSVPoMcat微基因修饰雪旺氏细胞对脊髓损伤后细胞凋亡的影响

目的探讨ｐＳＶＰｏＭｃａｔ微基因修饰雪旺氏细胞（ＳＣ）移植对脊髓损伤（ＳＣＩ）后细胞凋亡的作用。方法将实验动物分为ｐＳＶＰｏＭｃａｔ微基因修饰ＳＣ组（Ａ组），ＳＣ移植组（Ｂ组），损伤对照组（Ｃ组）。移植后１２周，对ＳＣＩ区的脊髓组织切片进行细胞凋亡的检测（甲基绿－派诺宁染色法和荧光原位标记法）以及Ｂｃ１～２和Ｆａｓ蛋白表达的测定（免疫组化法）。结果在Ａ、Ｂ、Ｃ组中，均发现凋亡细胞及Ｂｃ１～２和Ｆａｓ蛋白阳性表达。体视学计量发现，细胞凋亡率为Ｃ＞Ｂ＞Ａ；Ｂｃ１～２蛋白阳性表达顺序为Ａ＞Ｂ＞Ｃ；Ｆａｓ蛋白阳性表达顺序为Ｃ＞Ｂ＞Ａ。结论ｐＳＶＰｏＭｃａｔ微基因修饰ＳＣ移植能抑制ＳＣＩ后的细胞凋亡，而创伤则可诱发细胞凋亡     

Fas系统与充血性心力衰竭的研究进展

近年来 ,大量的研究证实 ,心力衰竭时有广泛的心肌细胞凋亡存在 ,其发生参与了心衰的心肌重塑 ,并在心力衰竭(ＣＨＦ)的发生、发展中起重要作用 ,因而 ,成为当今心衰发病学上的新观点[1] 。大量的动物模型及临床研究显示 ,心肌细胞的凋亡是心力衰竭过程中心肌细胞丧失的重要机制 ,心肌细胞数目的逐渐减少 ,纤维化进行性加重 ,从而心功能不全进行性加重[2 -3 ] 。细胞凋亡的有关机制非常复杂 ,尚未完全清楚。目前的研究发现 ,与心肌细胞凋亡有关的基因包括促凋亡基因有Ｆａｓ、Ｂａｘ、Ｃ -ｍｙｃ、Ｐ 5 3、Ｃ -ｆｏｓ和抑凋亡基因有Ｂｃｌ- …     

一种快速鉴定重组酵母克隆的方法

甲基营养型毕赤酵母巴斯德毕赤酵母(Ｐｉｃｈｉａｐａｓｔｏｒｉｓ)是目前较为有效的外源基因表达系统,可实现目的蛋白的高效分泌表达,且可对目的蛋白进行糖基化加工等[1]。毕赤酵母表达系统利用的是乙醇氧化酶基因(Ａｏｘ1)启动子作为强诱导型启动子,可被甲醇诱导。宿主菌ＧＳ115在Ｈｉｓ4基因位点被突变,因而只有当携有外源基因和Ｈｉｓ4基因的表达载体(如ｐＰＩＣ9或ｐＨＩＬＳ1)与酵母染色体在Ａｏｘ1基因处发生同源重组后,酵母克隆才能在组氨酸缺陷培养基(ＭＤ)平板上生长。而此时由于酵母基因组上Ａｏｘ1基因被取代,重组克隆仅能利用…