酸性肽对阿尔茨海默病大鼠脑内一氧化氮、一氧化氮合酶和乙酰胆碱酯酶水平的干预

背景有实验指出酸性肽可能是通过抑制一氧化氮等毒性化合物的生成而提高阿尔茨海默病模型大鼠的学习记忆能力.目的建立阿尔茨海默病动物模型,观察给予不同剂量浓度的酸性肽治疗后大鼠脑一氧化氮、一氧化氮合酶与乙酰胆碱酯酶含量的变化.设计随机对照单一实验.单位郑州大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室.材料实验于2003-02/07在郑州大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室的第二研究室和实验动物房完成.选取雄性SD大鼠100只,用跳台实验除去反应迟钝的动物,共84只大鼠纳入实验,随机分为7组正常对照组,模型组,生理盐水组,吡拉西坦治疗组,酸性肽15,30,60mg/kg治疗组,12只/组.酸性肽为本课题组从牛脑中分离出的一个新的小分子肽,由三个谷氨酸连成的三肽.方法除正常对照组外,其余各组大鼠常规饲养1周后,均采用大鼠脑组织立体定位微量注射技术,脑海马注射5 μg鹅膏蕈氨酸,以损毁大鼠双侧迈纳特基底核建立阿尔茨海默病模型.正常对照组和模型组不给药,生理盐水组用生理盐水灌胃,吡拉西坦治疗组用0.3 g/kg吡拉西坦灌胃,酸性肽15,30,60mg/kg治疗组分别用15,30,60mg/kg酸性肽灌胃,连续20 d,1次/d,2mL/次.灌胃期满将大鼠麻醉后断头处死,立即在冰盘中开颅取脑制备组织匀浆.4℃下1 000 r/min离心10 min,取上清液用一氧化氮、一氧化氮合酶和乙酰胆碱酯酶检测试剂盒测定一氧化氮、一氧化氮合酶和乙酰胆碱酯酶的含量.主要观测指标各组大鼠脑内一氧化氮、一氧化氮合酶和乙酰胆碱酯酶的含量.结果纳入实验的84只大鼠全部进入结果分析.各组大鼠脑内一氧化氮、一氧化氮合酶和乙酰胆碱酯酶含量的比较与模型组比较,酸性肽15,30,60mg/kg治疗组一氧化氮含量均明显降低[(1.95±0.20),(1.39±0.10),(1.25±0.07),(1.00±0.04)mmoL/kg,P＜0.05];一氧化氮合酶含量均明显降低[(4.53±0.18),(3.39±0.09),(3.10±0.06),(2.97±0.06)μmol/kg,P＜0.05];乙酰胆碱酯酶含量无明显变化[(0.67±0.12),(0.71±0.11),(0.72±0.08),(0.72±0.07)mmol/L,P＞0.05].结论酸性肽能够显著降低阿尔茨海默病模型大鼠脑内一氧化氮、一氧化氮合酶的生成,而对乙酰胆碱酯酶的活性并无明显影响.提示酸性肽可能是通过抑制一氧化氮等毒性化合物的生成或毒性作用来提高阿尔茨海默病模型大鼠的学习记忆能力.     

复方戒毒肽和激光对自愿戒毒者血清中一氧化氮、一氧化氮合酶和乙酰胆碱酯酶的影响

目的观察复方戒毒肽和激光对自愿戒毒者血清中一氧化氮、一氧化氮合酶(nitricoxidesynthetase,NOS)和乙酰胆碱酯酶(AChE)的影响,探讨复方戒毒肽和激光戒毒的机制。方法:30例自愿戒毒者随机分成3组,每组10例。Ⅰ组为单独服用复方戒毒肽组;Ⅱ组为激光治疗组;Ⅲ组为复方戒毒肽加激光治疗组。治疗前和治疗10d后测定血中一氧化氮、NOS和AChE的水平,用生化方法分析。结果:各组血中一氧化氮浓度治疗前后比较差异无显著性意义(P>0.05)。Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ组治疗后血中NOS活性分别是(13.34±5.50)(17.34±3.17),(18.34±1.83)nkat/L,比治疗前(35.84±5.00),(36.17±9.17),(28.67±10.17)nkat/L明显下降,差异有显著性意义。Ⅰ,Ⅲ组血中AchE浓度治疗后分别是(23.17±2.67),(28.59±3.63)mmol/L,与治疗前(15.00±5.62),(15.63±6.41)mmol/L比显著增高,而Ⅱ组治疗前后比较差异无显著性意义(P>0.05)。结论:复方戒毒肽能降低患者血中NOS的含量和升高AChE的水平,激光能升高血中NOS的水平。     

复方戒毒肽和激光对自愿戒毒者血清中一氧化氮、一氧化氮合酶和乙酰胆碱酯酶的影响

目的 观察复方戒毒肽和激光对自愿戒毒者血清中一氧化氮、一氧化氮合酶(nitric oxide synthetase，NOS)和乙酰胆碱酯酶(AChE)的影响，探讨复方戒毒肽和激光戒毒的机制。方法：30例自愿戒毒者随机分成3组，每组10例。Ⅰ组为单独服用复方戒毒肽组；Ⅱ组为激光治疗组；Ⅲ组为复方戒毒肽加激光治疗组。治疗前和治疗10d后测定血中一氧化氮、NOS和AChE的水平，用生化方法分析。结果：各组血中一氧化氮浓度治疗前后比较差异无显著性意义(P&;gt;0．05)。Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ组治疗后血中NOS活性分别是(13．34&;#177;5．50)（17．34&;#177;3．17)，（18．34&;#177;1．83)nkat／L，比治疗前（35．84&;#177;5．00)，(36．17&;#177;9．17)，(28．67&;#177;10．17)nkat／L明显下降，差异有显著性意义。Ⅰ，Ⅲ组血中AchE浓度治疗后分别是(23．17&;#177;2．67)，(28．59&;#177;3．63)mmol／L，与治疗前（15．00&;#177;5．62)，（15．63&;#177;6．41)mmol／L比显著增高，而Ⅱ组治疗前后比较差异无显著性意义(P&;gt;0．05)。结论：复方戒毒肽能降低患者血中NOS的含量和升高AChE的水平，激光能升高血中NOS的水平。     

阿尔茨海默病大鼠模型脑内神经元型一氧化氮合酶神经元的变化

目的 观察阿尔茨海默病(AD)大鼠模型脑内神经元型一氧化氮合酶(nNOS)神经元的变化，探讨nNOS神经元与AD病理过程的关系。方法 选用健康雄性Wistar大鼠32只，lO～12周龄，采用海人酸损伤基底前脑胆碱能神经元的方法，建立AD大鼠模型。用避暗法和穿梭箱法测试大鼠的学习记忆能力，免疫组化法检测脑内nNOS神经元的变化。结果 大鼠模型基底前脑部ChAT神经元数目减少。实验组较对照组显著减少达40％(26&;#177;3vs 43&;#177;3,t=2．483．P&;lt;0．01)，大脑皮质中nNOS神经元形态发生改变，细胞突起显著减少，扭曲变形，断裂，突起上的分支减少，消失，树突缩短，胞体皱缩，胞质浓缩，酶染色深，表现出一系列变性的改变，且神经元数目减少(2l&;#177;3vs 3l&;#177;4，t=1.906，P&;lt;0．05)，海马中nNOS神经元形态及数目变化无显著性(18&;#177;3vs 20&;#177;4，t=1．473,P&;gt;0．05)。结论 nNOS神经元对神经元变性有易感性，nNOS神经元变性参与了AD病理过程的发生发展。     

辣椒素对大鼠面部皮肤降钙素基因相关肽和一氧化氮合酶阳性神经纤维的影响

背景：辣椒素外敷治疗浅表性疼痛已为人们接受，但能否直接作用于皮下或深层组织中的神经末梢或神经治疗三叉神经痛？目的：观察皮下注射辣椒素对大鼠面部皮肤降钙素基因相关肽、一氧化氮合酶阳性神经纤维的影响。设计：随机对照实验。单位：咸宁学院医学院解剖学教研室，华中科技大学同济医学院神经生物学研究室。材料：实验于2003—10／12于华中科技大学同济医学院神经生物学研究室完成。健康Wistar大鼠20只，雌雄不拘，体质量120～170g。方法：辣椒素皮下注射处理大鼠三叉神经眶下支，大鼠左侧面区为对照侧，右侧面区为实验侧，按用量将动物分为辣椒素20μL组，辣椒素30μL组，辣椒素50μL组，辣椒素100μL组4组，每组5只。24h取材后切片镜检，降钙素基因相关肽和一氧化氮合酶免疫组化染色。主要观察指标：①镜检实验侧各组染色标本中降钙素基因相关肽和一氧化氮合酶阳性神经纤维的变化；图像分析降钙素基因相关肽和一氧化氮合酶的平均吸光度。②大鼠的特征性行为和体征改变。结果：20只大鼠均进入结果分析。①行为变化：皮下注射辣椒素溶液数分钟后，大鼠出现一系列特征性的行为和体征改变，但随着用药次数的增加，则逐渐减轻或消失。②镜检结果：实验侧各组标本中降钙素基因相关肽和一氧化氮合酶阳性神经纤维有明显差别。③图像分析各组大鼠面部皮肤降钙素基因相关肽平均吸光度：对照侧为0.984＋0.056，辣椒素20μL组为0．947&;#177;0．025，辣椒素30μL组为0.852&;#177;0．042，辣椒素50μL组为0．756&;#177;0．028，辣椒素100μL组为0．730&;#177;0.016；各组大鼠面部皮肤一氧化氮合酶平均吸光度：对照侧为0．151&;#177;0．009，辣椒素20μL组为0.148&;#177;0．007，辣椒素30μL组为0.132&;#177;0．012，辣椒素50μL组为0.111&;#177;0．067，辣椒素100μL组为0.107&;#177;0．006。方差分析组间差异有显著性意义（P〈0．01）。结论：降钙素基因相关肽、一氧化氮合酶参与了伤害性信息处理和调控痛与镇痛的过程，辣椒素通过耗竭大量的神经递质而发挥镇痛作用。     

酸性肽对阿尔茨海默病鼠学习记忆能力的影响

背景：酸性肽是由3个谷氨酸连接而成的三肽，不可能像单个谷氨酸一样直接作为兴奋性神经递质而由突触前释放并与突触后的NMDA受体结合而发挥兴奋性神经信号传递作用，但通过与多种代谢性谷氨酸受体结合而促进神经细胞增殖或释放神经生长因子而发挥作用具有很大的可能性。目的：探讨酸性肽是否能够引起阿尔茨海默病模型大鼠学习记忆能力的变化。设计：随机对照单一实验。单位：郑州大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室。材料：实验于2003-02／07在郑州大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室的第二研究室和实验动物房完成。选取雄性SD大鼠100只，用跳台实验除去反应迟钝的动物，共84只大鼠纳入实验，随机分为7组：正常对照组，模型组，生理盐水组，吡拉西坦治疗组，酸性肽60，30，15mg／kg治疗组，12只／组。酸性肽为本课题组从牛脑中分离出的一个新的小分子肽，由三个谷氨酸连成的三肽。方法：除正常对照组外，其余各组大鼠常规饲养1周后，均采用大鼠脑组织立体定位微量注射技术，脑海马注射5μg鹅膏蕈氨酸，以损毁大鼠双侧迈纳特基底核建立阿尔茨海默病模型。正常对照组和模型组不给药，生理盐水组用生理盐水灌胃，毗拉西坦治疗组用0．3g／kg吡拉西坦灌胃，酸性肽60，30，15mg/kg治疗组分别用60，30，15mg／kg酸性肽灌胃，连续20d，1次／d，2mL／次。灌胃期满后通过跳台实验测定各组大鼠的学习和记忆能力。将动物放在跳台装置的安全台上，适应环境3min，然后通以36v电流，受到电击后动物跳至铜栅为错误反应，跳回安全区为正确反应，记录3min内的上台潜伏期与正确反应次数。主要观测指标：各组大鼠学习与记忆能力的比较。结果：纳入实验的84只大鼠全部进入结果分析。①各组大鼠学习能力的比较：与模型组比较，酸性肽15，30，60me,／kg治疗组的上台潜伏期均明显缩短[（102．03&;#177;5．33），（71．77&;#177;4．38），（68．28&;#177;9．53），（69．13&;#177;8．79）s，P〈0．01]；正确反应次数均明显提高[（12．92&;#177;2．91），（16．17&;#177;2．79），（15．83&;#177;3．27），（16．33&;#177;2．53）次，P〈0．01]。②各组大鼠记忆能力的比较：与模型组比较，酸性肽15，30，60mg／kg治疗组的上台潜伏期均明显缩短[（43．17&;#177;4．66），（29．78&;#177;4．48），（26．20&;#177;3．28），（22．09&;#177;4．43）s，P〈0．01]；正确反应次数均明显提高[（15．67&;#177;2．15），（20．92&;#177;2．68），（20．83&;#177;2．29），（20．25&;#177;2．05）次．P〈0．01]。结论：酸性肽能够明显缩短阿尔茨海默病鼠在跳台实验中的上台潜伏期，提高正确反应次数，表明酸性肽对阿尔茨海默病模型大鼠的学习记忆能力具有良好的干预作用。     

阿尔茨海默病大鼠模型脑内神经元型一氧化氮合酶神经元的变化

目的观察阿尔茨海默病(AD)大鼠模型脑内神经元型一氧化氮合酶(nNOS)神经元的变化,探讨nNOS神经元与AD病理过程的关系。方法选用健康雄性Wistar大鼠32只,10～12周龄,采用海人酸损伤基底前脑胆碱能神经元的方法,建立AD大鼠模型,用避暗法和穿梭箱法测试大鼠的学习记忆能力,免疫组化法检测脑内nNOS神经元的变化。结果大鼠模型基底前脑部ChAT神经元数目减少,实验组较对照组显著减少达40%(26±3vs43±3,t=2.483,P<0.01),大脑皮质中nNOS神经元形态发生改变,细胞突起显著减少,扭曲变形,断裂,突起上的分支减少,消失,树突缩短,胞体皱缩,胞质浓缩,酶染色深,表现出一系列变性的改变,且神经元数目减少(21±3vs31±4,t=1.906,P<0.05),海马中nNOS神经元形态及数目变化无显著性(18±3vs20±4,t=1.473,P>0.05)。结论nNOS神经元对神经元变性有易感性,nNOS神经元变性参与了AD病理过程的发生发展。     

肝硬化大鼠脊髓内一氧化氮合酶阳性神经元的分布

背景：肝硬化时可对脊髓等身体其他组织器官产生严重的影响。目的：应用四氯化碳损伤大鼠肝脏制备肝硬化大鼠模型，探讨肝硬化大鼠脊髓内一氧化氮合酶分布情况。．设计：完全随机对照实验。单位：首都医科大学解剖教研室。材料：实验于2002—03／2003—12在首都医科大学解剖教研室完成。20只Wistar雄性大鼠随机分为肝硬化组和正常组，每组10只。方法：肝硬化组经四氯化碳损伤大鼠肝脏制备肝硬化大鼠模型，正常大鼠组不作任何处理。于模型制备后3个月，各组大鼠在麻醉状态下开胸，灌注，固定，取脊髓组织，制备切片，采用还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸黄递酶组化法及Leica Q500IW图像分析系统对肝硬化大鼠脊髓一氧化氮合酶阳性细胞进行数量及灰度的测定。主要观察指标：①两组大鼠一氧化氮合酶阳性神经元灰度值。②两组大鼠一氧化氮合酶阳性细胞分布情况。结果：20只大鼠均进入结果分析。①两组大鼠一氧化氮合酶阳性神经元灰度均为60（P〉0．05）。②在脊髓灰质区，一氧化氮合酶阳性细胞主要分布在中央管周围即脊髓板层第X层和中间外侧核。还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸黄递酶组化法呈色为强阳性，细胞形态多为三角形和梭形，胞核不着色，胞质色深。细胞中等大小，以25μm为主。在脊髓颈、胸、腰各段灰质中间带一氧化氮合酶阳性细胞分布的数量基本相等，没有特异性变化。结论：肝硬化大鼠与正常大鼠一氧化氮合酶在脊髓内的表达基本相同。一氧化氮在脊髓节段的分布特性可能说明肝硬化大鼠在低级交感神经的调控上与正常无差异。     

FK506对大鼠脑液压伤后血浆一氧化氮合酶、一氧化氮、内皮素和脑组织兴奋性氨基酸水平的影响

目的：分析创伤性脑损伤(TBI）后FK506对血浆一氧化氮合酶(NOS)、一氧化氮(NO)、内皮素(ET)和脑组织兴奋性氨基酸(EAA)水平的影响。方法：雄性SD大鼠采用液压损伤法制备脑损伤模型，随机分为损伤组、治疗组和对照组。治疗组于伤后5min开始每6h腹腔注射1次FK506，连续4次。伤后30min、6h、24h测量血浆NO、NOS、ET和伤灶脑组织的EAA水平。结果：与对照组相比，治疗组NOS活性与NO，EAA水平显著降低，ET水平几乎没有变化。结论：按照本实验设计，FK506能抑制伤后NO升高，减少EAA释放，对TBI后继发性脑损伤有较大应用价值。     

硝基精氨酸-赖氨酸三肽对大鼠一氧化氮合酶抑制作用的研究

目的:研究硝基精氨酸赖氨酸三肽对组成型一氧化氮合酶(cNOS)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS )的抑制程度.方法:①用大鼠腹腔巨噬细胞作培养,检测硝基精氨酸赖氨酸三肽对iNOS的抑制程度.②用大鼠离体主动脉条孵育,检测硝基精氨酸赖氨酸三肽对cNOS的抑制程度.结果:①硝基精氨酸赖氨酸三肽(1×10-4 mol/L )可显著抑制大鼠腹腔巨噬细胞产生一氧化氮(NO,P<0.01),较NG硝基 L精氨酸(LNNA)作用增强(P<0.0 1).②硝基精氨酸赖氨酸三肽(1×10-4 mol/L)可显著减少大鼠腹腔巨噬细胞内环磷酸鸟苷 (cGMP)水平(P<0.01),较LNNA 作用增强(P<0.05).③与LNNA相比,硝基精氨酸赖氨酸三肽(1.5×10-4 mol/L)对大鼠主动脉壁cNOS的抑制程度减小(P<0.05).结论:①硝基精氨酸赖氨酸三肽抑制大鼠腹腔巨噬细胞内iNO S活性显著强于LNNA,而抑制大鼠血管壁cNOS活性显著弱于LNNA .     

酸性肽对阿尔茨海默病模型大鼠脑内N-甲基-D-天冬氨酸受体、神经生长因子和β淀粉样蛋白水平的调节作用

背景:一些研究已经证实酸性肽对痴呆模型大鼠有良好的治疗作用,但其发挥作用的途径尚需探讨。目的:观察酸性肽能否抑制阿尔茨海默病大鼠脑内N-甲基-D-天冬氨酸受体和淀粉样β蛋白的产生以及促进神经生长因子的产生和分泌。设计:随机对照动物实验。单位:郑州大学医学院生物化学与分子生物学教研室。材料:实验于2005-03/2006-05在郑州大学生物活性肽研究所第一实验室和郑州大学基础医学院细胞培养中心完成。选取10周龄的健康且经Y-迷宫测定无痴呆症状的雄性SD大鼠70只,单纯随机分为7组,正常对照组、模型组、生理盐水组、谷氨酸0.3g/kg组、酸性肽15,30,60mg/kg组,每组10只。方法:正常对照组不干预,其他6组用鹅膏蕈氨酸损毁大鼠双侧迈内特基底核,建立阿尔茨海默病病的动物模型,造模后谷氨酸0.3g/kg组灌胃谷氨酸0.3g/kg,酸性肽15,30,60mg/kg组灌胃相应剂量酸性肽(自制),生理盐水组灌胃等量生理盐水,1次/d,2mL/次,连续20d。主要观察指标:①灌胃期满后各组大鼠即做Y-迷宫实验以检测大鼠的学习记忆能力,以正确反应次数为指标。②学习记忆测试结束后,各组大鼠断头取脑,免疫组化染色,再用BiosensDigitalImagingSystem灰度扫描仪扫描以检测大鼠脑内神经生长因子、N-甲基-D-天冬氨酸受体、淀粉样β蛋白的水平。结果:70只大鼠全部进入结果分析。①Y-迷宫实验中正确反应次数:其他6组均低于正常组(P<0.01);酸性肽30,60mg/kg组高于模型组、生理盐水组、谷氨酸0.3g/kg组及酸性肽15mg/kg组(P<0.01)。②基底前脑神经生长因子灰度值:模型组、生理盐水组、谷氨酸0.3g/kg组及酸性肽15mg/kg组低于正常对照组(69.60±2.41,69.62±1.46,69.62±1.46,69.73±1.87,80.77±2.72,P<0.01),酸性肽30,60mg/kg组与正常对照组比较差异不显著(79.39±2.23,80.20±1.7,P>0.05),但高于其他几组。③大脑皮质N-甲基-D-天冬氨酸受体和淀粉样β蛋白表达的灰度值:模型组、生理盐水组、谷氨酸0.3g/kg组及酸性肽15mg/kg组高于正常对照组(N-甲基-D-天冬氨酸受体:81.01±1.38,81.31±2.06,81.37±1.39,79.38±1.23,69.50±1.04;淀粉样β蛋白:74.26±1.39,74.89±8.66,74.88±1.46,74.16±2.48,67.40±3.06,P<0.01),酸性肽30,60mg/kg组与正常对照组比较差异不显著(N-甲基-D-天冬氨酸受体:70.55±2.89,69.78±1.24;淀粉样β蛋白:67.66±2.25,67.58±2.21,P>0.05),但低于其他几组。结论:30,60mg/kg的酸性肽能明显改善阿尔茨海默病模型大鼠的学习记忆能力,其治疗作用途径可能是通过上调基底前脑中的神经生长因子水平,下调大脑皮质中N-甲基-D-天冬氨酸受体和β淀粉样蛋白的水平实现的。     

酸性肽对阿尔茨海默病模型大鼠脑内N-甲基-D-天冬氨酸受体、神经生长因子和β淀粉样蛋白水平的调节作用

背景：一些研究已经证实酸性肽对痴呆模型大鼠有良好的治疗作用，但其发挥作用的途径尚需探讨。 目的：观察酸性肽能否抑制阿尔茨海默病大鼠脑内N-甲基-D-天冬氨酸受体和淀粉样B蛋白的产生以及促进神经生长因子的产生和分泌。 设计：随机对照动物实验。 单位：郑州大学医学院生物化学与分子生物学教研室。 材料：实验于2005—03／2006—05在郑州大学生物活性肽研究所第一实验室和郑州大学基础医学院细胞培养中心完成。选取10周龄的健康且经Y-迷宫测定无痴呆症状的雄性SD大鼠70只，单纯随机分为7组．正常对照组、模型组、生理盐水组、谷氨酸0．3g／ks组、酸性肽15，30，60mg／kg组，每组10只。 方法：正常对照组不干预，其他6组用鹅膏蕈氨酸损毁大鼠双侧迈内特基底核，建立阿尔茨海默病病的动物模型，造模后谷氨酸0．3s／kg组灌胃谷氨酸0．3S／kg，酸性肽15，30，60mg／kg组灌胃相应剂量酸性肽（自制），生理盐水组灌胃等量生理盐水，1次／d，2mE／次，连续20d。 主要观察指标：①灌胃期满后各组大鼠即做Y-迷宫实验以检测大鼠的学习记忆能力，以正确反应次数为指标。②学习记忆测试结束后，各组大鼠断头取脑，免疫组化染色，再用Biosens Digital Imaging System灰度扫描仪扫描以检测大鼠脑内神经生长因子、N-甲基-D-天冬氨酸受体、淀粉样B蛋白的水平。 结果：70只大鼠全部进入结果分析。①Y-迷宫实验中正确反应次数：其他6组均低于正常组（P〈0．01）；酸性肽30，60mg／kg组高于模型组、生理盐水组、谷氨酸0．3g／kg组及酸性肽15mg／kg组（P〈0．01）。②基底前脑神经生长因子灰度值：模型组、生理盐水组、谷氨酸0．3g／kg组及酸性肽15mg／kg组低于正常对照组（69．60&;#177;2.41，69．62&;#177;1．46，69．62&;#177;1．46，69．73&;#177;1．87，80．77&;#177;2．72，P〈0．01），酸性肽30，60mg／kg组与正常对照组比较差异不显著（79．39＋2．23，80．20＋1．7，P〉0．05），但高于其他几组。③大脑皮质N-甲基-D-天冬氨酸受体和淀粉样B蛋白表达的灰度值：模型组、生理盐水组、谷氨酸0．3s／ks组及酸性肽15mg／kg组高于正常对照组（N-甲基-D-天冬氨酸受体：81．01&;#177;1.38，81.31&;#177;2．06，81．37&;#177;1．39，79.38&;#177;1.23，69．50&;#177;1．04；淀粉样B蛋白：74．26&;#177;1．39，74．89&;#177;8．66，74．88&;#177;1．46，74．16&;#177;2．48，67．40&;#177;3．06，P〈0．01），酸性肽30，60mg／kg组与正常对照组比较差异不显著（N-甲基-D-天冬氨酸受体：70．55&;#177;2．89，69．78&;#177;1．24；淀粉样B蛋白：67．66&;#177;2．25，67．58&;#177;2．21，P〉0．05），但低于其他几组。 结论：30，60ms／kg的酸性肽能明显改善阿尔茨海默病模型大鼠的学习记忆能力，其治疗作用途径可能是通过上调基底前脑中的神经生长因子水平，下调大脑皮质中N-甲基-D-天冬氨酸受体和B淀粉样蛋白的水平实现的。     

急性CO中毒大鼠脑组织NO NOS活性变化及纳洛酮的干预效应

目的　探讨急性一氧化碳 (CO)中毒大鼠脑组织中一氧化氮 (NO)和一氧化氮合成酶 (NOS)活性的变化及纳洛酮的治疗作用。方法　健康Wister大鼠 4 5只 ,随机分为 3组 :正常、CO染毒组 (中毒组 )、CO染毒后纳洛酮治疗组 (观察组 )。采用改良的Griess法和分光度法 ,分别测定大鼠大、小脑组织NO和NOS活性。结果　急性CO中毒后大鼠大、小脑组织中NO和NOS活性明显升高 ,与正常组比较P <0 0 1;应用纳洛酮治疗后 ,脑组织中NO和NOS活性明显降低 ,与中毒组比较P <0 0 1。结论　急性CO中毒后大鼠脑组织中NO和NOS活性增高 ,NO、NOS活性改变可能参与了急性CO中毒脑损伤的病理生理过程 ,纳洛酮治疗可降低急性CO中毒大鼠脑组织中NO和NOS活性。     

Serum neopterin, nitric oxide, inducible nitric oxide synthase and tumor necrosis factor-alpha levels in patients with ischemic heart disease

BACKGROUND: Atherosclerosis, a chronic inflammatory disease, underlies the pathogenesis of coronary artery disease. The present study assessed the diagnostic possibilities of inflammatory biomarkers, serum neopterin, nitrite/nitrate (NO2(-)/NO3(-)), inducible nitric oxide synthase (iNOS) and tumor necrosis factor-alpha (TNF-alpha), and their correlation with risk factors in patients with acute coronary syndromes and stable angina pectoris. METHODS: We studied 44 patients with chronic stable angina pectoris, 46 with unstable angina, 55 with acute ST-elevation myocardial infarction and 39 age-matched healthy volunteers (control group). Serum neopterin, iNOS and TNF-alpha were determined with commercially available enzyme linked immunosorbent assay methods and NO2(-)/NO3(-) by the modified cadmium-reduction method. RESULTS: Mean serum neopterin levels were significantly higher in patients with unstable and stable angina pectoris in comparison to control subjects (p<0.01 and p<0.05, respectively). Serum NO2(-)/NO3(-) values were significantly elevated (p<0.01) only in patients with unstable angina. ST-elevation myocardial infarction patients with cardiac death during follow-up showed significantly lower baseline neopterin values (p<0.001), and higher NO2(-)/NO3(-) levels (p<0.05) in comparison to those without adverse events. Significantly higher NO2(-)/NO3(-) values (p<0.05) were also found in patients who had myocardial reinfarction. Serum iNOS and TNF-alpha in all patient groups were within control ranges. A strong correlation was found between neopterin and both smoking (p<0.01) and triglycerides (p<0.05) in unstable angina patients. In stable angina patients, neopterin, iNOS and TNF-alpha significantly correlated with hypertension (p<0.01) and triglycerides (p<0.05). A significant difference in neopterin concentration was found between smokers and non-smokers (p<0.05). CONCLUSIONS: The results of this study suggest that in stable angina patients, if studied over time, serum neopterin or NO2(-)/NO3(-) levels may indicate future plaque instability. In ST-elevation myocardial infarction patients, neopterin and/or NO2(-)/NO3(-) levels may identify patients at long-term risk of death or recurrent acute coronary events after myocardial infarction.     

急性一氧化碳中毒大鼠小脑组织一氧化氮及一氧化氮合酶活性的变化

目的 :研究急性一氧化碳 (CO)中毒大鼠小脑组织中一氧化氮 (NO)、一氧化氮合酶 (NOS)活性的变化 ,以探讨NO、NOS与急性CO中毒脑损伤的关系。方法 :实验用Wistar大鼠 2 6只 ,随机分为两组 :正常对照组 (C组 ) ,CO染毒组 (CO组 )。采用改良的Griess法、分光光度法分别测定小脑组织中NO、NOS活性。结果 :CO中毒后小脑组织中NO明显增高 (P <0 0 5 ) ,NOS活性明显降低 (P <0 0 1)。结论 :急性CO中毒脑组织损伤与小脑组织中NOS活性受抑制、NO含量增高有关。     

复方戒毒肽对吗啡成瘾小鼠脑内N-甲基-D-天门冬氨酸受体1和一氧化氮合酶表达水平的影响

目的:观察复方戒毒肽对吗啡成瘾小鼠脑内N-甲基-D-天门冬氨酸受体1和一氧化氮合酶水平的影响。方法:实验于2003-03/2004-05在郑州大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室动物室和郑州大学志愿戒毒研究中心第一实验室完成。复方戒毒肽由脑肽配制而成熏主要含有酸性肽,牛神经肽FF等小分子神经肽。80只健康的昆明种小鼠,雌雄各半,8～10周龄,体质量(20±2)g。抽签随机分为8组,每组10只。正常对照组:不做任何处理。成瘾模型建立:腹腔注射吗啡,1次/d熏100mg/kg,共11d。成瘾模型组:成瘾模型建立后,不做任何处理。生理盐水组:成瘾模型建立后,用生理盐水1mL/次灌胃治疗15d。自然戒断组:成瘾模型建立后,正常喂养15d,期间不做任何处理;高、中、低剂量的复方戒毒肽治疗组:成瘾模型建立后,给成瘾小鼠按80mg/kg,40mg/kg,20mg/kg的复方戒毒肽进行灌胃治疗,神经肽溶液的实际用量为1mL熏0.5mL熏0.25mL,时间为15d。单独使用复方戒毒肽组:仅给正常小鼠按80mg/kg剂量的复方戒毒肽灌胃15d。实验结束后取材,通过免疫组化和Biosens数字成像系统分析仪测定海马内N-甲基-D-天门冬氨酸受体1和一氧化氮合酶水平。结果:80只小鼠均进入结果分析。各组N-甲基-D-天门冬氨酸受体1和一氧化氮合酶的水平的比较:与正常对照组相比,成瘾模型组两者水平均增高(134.93±6.83,117.24±3.91;116.26±8.64,96.81±6.16,P<0.05);与成瘾模型组、自然戒断组、生理盐水组、40mg/kg和20mg/kg复方戒毒肽组相比,80mg/kg复方戒毒肽组两者水平均明显降低(134.93±6.83,117.24±3.91;133.10±8.97,115.82±5.61;134.92±8.51,116.55±5.10;120.02±7.49,106.03±8.99;120.02±7.49,106.03±8.99;128.59±9.26,112.59±2.93;130.50±2.50,113.22±5.14,P<0.05)。结论:80mg/kg的复方戒毒肽能够降低吗啡成瘾小鼠脑内N-甲基-D-天门冬氨酸受体1和一氧化氮合酶的水平。     

复方戒毒肽对吗啡成瘾小鼠脑内N-甲基-D-天门冬氨酸受体1和一氧化氮合酶表达水平的影响

目的：观察复方戒毒肽对吗啡成瘾小鼠脑内N-甲基-D-天门冬氨酸受体1和一氧化氮合酶水平的影响。 方法：实验于2003-03／2004-05在郑州大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室动物室和郑州大学志愿戒毒研究中心第一实验室完成。复方戒毒肽由脑肽配制而成，主要含有酸性肽，牛神经肽FF等小分子神经肽。80只健康的昆明种小鼠，雌雄各半，8～10周龄，体质量（20&;#177;2）g。抽签随机分为8组，每组10只。正常对照组：不做任何处理。成瘾模型建立：腹腔注射吗啡，1次／d，100mg／kg，共11d。成瘾模型组：成瘾模型建立后，不做任何处理。生理盐水组：成瘾模型建立后，用生理盐水1mL／次灌胃治疗15d。自然戒断组：成瘾模型建立后，正常喂养15d，期间不做任何处理；高、中、低剂量的复方戒毒肽治疗组：成瘾模型建立后，给成瘾小鼠按80mg／kg，40mg／kg，20mg／kg的复方戒毒肽进行灌胃治疗，神经肽溶液的实际用量为1mL，0．5mL，0．25mL，时间为15d。单独使用复方戒毒肽组：仅给正常小鼠按80mg／kg剂量的复方戒毒肽灌胃15d。实验结束后取材，通过免疫组化和Biosens数字成像系统分析仪测定海马内N-甲基-D-天门冬氨酸受体1和一氧化氮合酶水平。 结果：80只小鼠均进入结果分析。各组N-甲基-D-天门冬氨酸受体1和一氧化氮合酶的水平的比较：与正常对照组相比，成瘾模型组两者水平均增高（134．93&;#177;6．83，117．24&;#177;3．91；116．26&;#177;8．64，96．81&;#177;6．16，P〈0．05）；与成瘾模型组、自然戒断组、生理盐水组、40mg／kg和20mg／kg复方戒毒肽组相比，80mg／kg复方戒毒肽组两者水平均明显降低（134．93&;#177;6．83，117．24&;#177;3．91；133．10&;#177;8．97．115．82&;#177;5．61；134．92&;#177;8．51，116．55&;#177;5．10；120．02&;#177;7．49，106．03&;#177;8．99；120．02&;#177;7．49．106．03&;#177;8．99；128．59&;#177;9．26，112．59&;#177;2．93；130．50&;#177;2．50，113．22&;#177;5．14，P〈0．05）。 结论：80mg／kg的复方戒毒肽能够降低吗啡成瘾小鼠脑内N-甲基-D-天门冬氨酸受体1和一氧化氮合酶的水平。