微板核酸杂交-酶联显色检测性病沙眼衣原体DNA

目的 建立微板核酸杂交—ELISA方法，检测性病沙眼衣原体。方法 采用PCR、核酸杂交和ELISA三大生物技术相结合，建立微板核酸杂交ELISA法，并用此法分别同McCoy细胞培养和免疫学方法检测307份性传播疾病标本进行比较。结果 微板核酸杂交—ELISA法检测的阳性率为40．39％(122／307)，高于细胞培养的9.77％(30／307)和免疫诊断的12．05％(37／307)。结论 微板核酸杂交—ELISA技术检测性病沙眼衣原体灵敏度高、特异性好、简便快速。因此，该方法具有很强的实用价值和发展前景。     

PCR-微板杂交-ELISA检测结核杆菌DNA

[目的]探讨PCR-微板杂交-ELISA方法检测结核杆菌DNA的临床价值。[方法]选择PCR扩增区域内的保守序列设计捕获探针和显色探针,分别用于DNA杂交和ELISA分析,建立PCR-微板杂交-ELISA方法并运用该方法对328份结核病人痰标本进行了检测。[结果]328份结核病人痰标本中有196例结核杆菌DNA阳性,阳性率为59．7％。检出率明显高于痰培养和痰涂片抗酸染色。[结论]PCR-DNA微板杂交-ELISA方法综合运用了PCR、DNA杂交和-ELISA技术,大大增加了DNA检测的特异性和灵敏度,在临床上具有良好的应用前景。     

3种方法检测286例生殖道沙眼衣原体的分析

目的分析比较酶联免疫吸附试验(ELISA)、核酸扩增聚合酶链反应(PCR)荧光法和免疫层析法在检测泌尿生殖系统沙眼衣原体(CT)感染中的应用效果。方法分别采用ELISA、核酸扩增PCR荧光法和免疫层析法检测泌尿生殖系统的CT抗原,同时用细胞培养法作为"金标准"。结果共检286例标本,ELISA、核酸扩增PCR荧光法和免疫层析法的特异性和灵敏度分别为99.1%和95.5%;98.2%和97.0%;99.5%和73.6%。结论 ELISA法与核酸扩增PCR荧光法具有较一致灵敏度和特异性,均可为临床治疗和监测性病提供可靠的依据;免疫层析法虽然操作简便,但灵敏度较差。     

多重PCR-核酸探针杂交法同时检测沙眼衣原体、解脲支原体和淋病奈瑟菌

目的：建立一种同时检测沙眼衣原体，解脲支原体，淋病奈瑟菌三种病原体DNA的方法并用于临床标本检测。方法：采用多重PCR－核酸探针杂交技术，结果与常规PCR法比较。结果：本法特异性良好，敏感度达到0.1fg。经过对166例性传播疾病门诊患者标本测定证实，沙眼衣原体，解脲支原体，淋病奈瑟菌检出率分别为22．9％，54．8％，34．3％，并有22．2％的双重复合感染和4．8％的三重复合感染。并与常规PCR法具有很好的一致性。结论：本法快速，简便，特异性好，能指示多重感染。     

宫颈沙眼衣原体感染四种实验室诊断方法的比较

目的：评价宫颈拭子标本中沙眼衣原体检测的四种方法及其实验诊断意义,方法：同时用细胞培养,C－C法,PCR法和自动酶联免疫荧光法（VIDAS）检测宫颈拭子标本沙眼衣原体,结果：用细胞培养阳性,或细胞培养阴性而其他三种方法均为阳性作为“扩大的金标准”,四种方法的敏感性和特异性分别是：细胞培养91．30％（42／46）和100％（206／206）,VIDAS法97．83％和98．54％（203／206）;C－C法的敏感性差异有显著意义。结论 ：VIDAS法和PCR法敏感性和特异性均较高,细胞培养和C－C法敏感性略低,VIDAS法较C－C法更敏感,。     

微孔板核酸杂交-酶联免疫吸附试验检测人类免疫缺陷病毒RNA

抗-人类免疫缺陷病毒(HIV)1+2初筛实验大多采用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)方法,但普遍存在假阴性和假阳性现象.我们采用微孔板核酸杂交-ELISA技术,以蛋白印迹法(WB)作对照,检测抗-HIV1+2初筛实验阳性标本.结果显示采用微孔板核酸杂交-ELISA方法,具有较好的准确性,与确认实验结果符合率为100%.对HIV感染者的早期发现,鉴别诊断具有重要的意义.     

ＰＣＲ 荧光探针法检测 ４ 种生殖道病原体的结果分析

目的 探讨PCR荧光探针法、培养法、胶体金法和酶联法检测淋病奈瑟菌、解脲脲原体、沙眼衣原体及单纯性疱疹病毒-2型的阳性检出率，评价不同检测方法检测4种生殖道病原体的结果差异和应用价值。方法 收集北京佑安医院性病门诊就诊者生殖道分泌物1 738例、血液标本227例，采用PCR荧光探针法进行解脲脲原体、淋球菌、沙眼衣原体、单纯性疱疹病毒-2型检测，并同时采用培养法检测解脲脲原体、淋球菌；胶体金法检测沙眼衣原体；ELISA法检测单纯性疱疹病毒-2抗体，对PCR荧光探针法及其他3种方法检测结果进行分析。结果 478例PCR荧光探针法和培养法同时检测解脲脲原体中，PCR荧光探针法检测阳性率[38.7%(185/478)]略低于培养法检测阳性率[39.96%(191/478)],差异无统计学意义(P>0.05);654例PCR荧光探针法和胶体金法同时检测沙眼衣原体中，PCR荧光探针法检测阳性率[7.34%(48/654)]高于胶体金法检测阳性率[3.21%(21/654)],差异有统计学意义(P<0.001);379例PCR荧光探针法和培养法同时检测淋球菌中，PCR荧光探针法检测阳性率...     

异常ALT标本速率法与微板法测定比较

[目的] 比较速率法(IFCC)和微板法测定献血者异常ALT样品。[方法] 对献血者异常ALT样品200份进行两种方法检测，比较检测结果的阳性、假阳性和假阴性情况。[结果] 速率法检测初检异常ALT样品67份，微板法检出阳性为46份，检出率为68．7％，假阴性21份(31．3％，21／67)和假阳性16份(23．9％，16／67)；速率法检测复检异常ALT样品133份，微板法检出阳性91份，检出率为68．4％，假阴性42份(31．6％，42／133)和假阳性3份(2．3％，3／133)。[结论] 速率法测定异常ALT标本要显著优于微板法，建议使用自动或半自动生化分析仪测定ALT。     

铜绿假单孢菌聚合酶链反应微孔膜杂交基因诊断在检测临床标本中的应用

[目的]研究痰液标本的铜绿假单孢菌(P．A)DNA提取，聚合酶链反应微孔膜杂交基因诊断方法，并与目前培养、氧化酶方法比较。[方法]使用4％NaOH液化，生理盐水稀释痰液，以及在痰液加tritoa-x100等核酸捏取方法作对比，获得最佳标本处理方法，再以此方法处理痰液及棉拭子标本，进行基因诊断方法与培养、氧化酶检验方法阳性检出率的对比。[结果]在检测的120例临床标本中，采用培养法检出阳性7例，阳性率6％；用PCR及PCR微孔膜杂交检测全部阳性。在检测敏感度上，培养法可检出150个细菌／ml，而PCR微孔膜杂交可检出3个细菌／ml。[结论]4％NaOH液化与生理盐水稀释，离心的标本核酸提取方法，不适应于P．A DNA聚合酶链反应微孔膜杂交，添加tritoa-x100处理标本可提高标本的阳性检出率，其阳性检出率明显高于目前培养和氧化酶方法，方法简便准确可靠，适用于临床。     

多对沙眼衣原体引物敏感度的比较

沙眼衣原体(CT)检测方法很多,有Moccy细胞培养方法、直接涂片荧光抗体法、酶免疫法、探针杂交和PCR技术等.临床实验证明PCR技术敏感、特异,但敏感度也受标本收集、引物选择等多种因素的影响,本研究主要比较设计不同引物序列对PCR检测敏感度的影响.     

聚合酶链反应检测女性性病高危人群的沙眼衣原体

聚合酶链反应检测女性性病高危人群的沙眼衣原体李珊山张树文叶顺章我们建立一种快速处理宫颈拭子标本的聚合酶链反应（ＰＣＲ），同时与细胞培养法比较，对一组女性性病高危人群进行了ＣＴ的检测。一、材料和方法１．标本来源：１７６份宫颈拭子标本采自某地性病高危人群...     

不孕妇女的解脲脲原体、沙眼衣原体、淋球菌感染分析

目的 研究解脲脲原体(UU)、沙眼衣原体(CT)、淋球菌(NG)感染与不孕的关系.方法 UU用液体培养 固体培养的方法检测,CT用酶免疫吸附(ELISA)方法检测,NG用TM培养皿的分离培养方法检测,抗精子抗体(ASAb)用ELISA方法检测.对196例可疑性病患者,152例不孕者和176例健康体检者分别进行解脲脲原体、沙眼衣原体、淋球菌、ASAb测定比较.结果 不孕组解脲脲原体、沙眼衣原体、淋球菌检出率与对照组比较差异均有显著性(P＜0.01).不孕组血清中ASAb浓度与对照组比较差异均有显著性(P＜0.01).不孕组解脲脲体、沙眼衣原体、淋球菌检出率和血清中ASAb的浓度与可疑性病组比较差异无显著性.结论 解脲脲原体、沙眼衣原体、淋球菌、ASAb的检测对深讨性病与不孕之间的关系有一定的价值,有必要对不孕患者进行解脲脲原体、沙眼衣原体、淋球菌、ASAb检测.     

湖北省特殊人群沙眼衣原体感染情况研究

[目的]对湖北省荆州地区与宜昌地区特殊人群中沙眼衣原体的感染情况进行比较。[方法]分别采集湖北荆州、宜昌特殊人群的宫颈拭子，用PCR方法对其进行检测分析。[结果]荆州、宜昌两地区特殊人群的感染率分别为11.0％、12.3％，两地区阳性率无显著性差异（P〉0.05）。[结论]在文化背景、地理位置相近的地区之间，特殊人群中沙眼衣原体的感染率相近，沙眼衣原体的感染率与人的行为方式之间有一定的关系。     

Gap-LCR-ELISA法与PCR-反向杂交法对沙眼衣原体的检测的对比研究

沙眼是由沙眼衣原体（Chlamydia trachomatis，CT）感染引起的一种感染性眼病，是全球因感染而致盲的主要病因，集中在非洲和亚洲。本研究对167份标本用质粒缺口-连接酶链反应-酶联免疫吸附测定（Gap—LCR—ELISA）法及PCR-反向杂交法进行检测，并与传统的培养法比较，结果报道如下。     

竞争PCR-微流芯片法检测血清HBV-DNA含量

目的 评价微流芯片法检测乙型肝炎病毒(HBV)基因的竞争PCR扩增产物含量的准确性.方法 通过竞争PCR-微流芯片法的重复性试验、稀释试验及与竞争PCR-微孔板杂交法、荧光PCR法的比较,判断HBV-DNA检测的准确性.结果 竞争PCR-微流芯片法重复性、稀释试验的线性相关性较好;检测线性范围高于竞争PCR-微孔板杂交法,竞争PCR内对照的含量对检测结果有一定影响;与荧光PCR法检测有较好的一致性.结论 竞争PCR-微流芯片法是临床检测HBV-DNA含量可行的一种方法.     

HBV DNA定量检测方法的评价

目的协助临床检验工作者及科研人员选择适合本单位实际条件的HBV DNA定量检测方法。方法采用核酸分子杂交、荧光定量PCR、微板核酸杂交三种方法对89例乙型肝炎大三阳患者进行HBV DNA测定。结果三种方法测定结果依次为荧光定量PCR法阳性89例，微板核酸杂交法阳性8l例，斑点杂交法阳性62例，三种方法均阳性61例。结论斑点杂交法准确性和特异性较高，适合于流行病学调查和药物观察等研究。荧光定量PCR技术灵敏度较高，若能提高其检测结果的准确性，它应为临床及科研之首选方法。微板核酸杂交技术有较高的灵敏度和特异性，操作简便，可常规普及。     

PCR-微孔板反向杂交法在结核分枝杆菌检测中的应用

目的评价PCR-微孔板反向杂交法检测临床标本中结核分枝杆菌(MTB)的应用价值.方法应用集菌涂片镜检法、培养法、PCR法、PCR-微孔板反向杂交法分别对55份肺结核病患者和30份非结核呼吸系统病患者痰标本平行检测.结果涂片法对结核病患者临床标本中MTB检出率为21.82%,培养法检出率为25.46%,PCR法检出率36.36%,PCR-微孔板反向杂交法检出率47.27%.对30例非结核呼吸系统疾病患者检测MTB,PCR法出现2例假阳性,其余3种方法均阴性,PCR-微孔板反向杂交法比单纯PCR法灵敏度高、特异性强.结论PCR-微孔板反向杂交法具有简便、快速、抗污染、灵敏度高、特异性强的优点,缺点是存在假阴性,应改进标本前处理方法,在对结核病的辅助诊断中应与细菌学方法相结合,以提高检出率.     

探讨荧光探针定量PCR检测淋球菌、沙眼衣原体和解脲支原体的临床评价

目的 探讨荧光探针定量(FQ-PCR)法检测三种性病即淋球菌(NG)、沙眼衣原体(CT)、解脲支原体(UU)的临床价值和了解本地区三种性病病原体感染现状。方法 用荧光探针定量(FQ-PCR)法对三种性病病原体DNA进行定量测定。结果 2607例标本其检出率分别为NG 4．6％，CT 7．8％，UU11．2％，总检出率为43．5％。结论 应州FQ-PCR法具有较高的灵敏度和特异性，且定量准确结果可靠。1例标本可同时检测多种病原体DNA的可靠、准确、敏感的方法。     

沙眼衣原体感染不同检测方法的比较

目的：研究不同方法检测沙眼衣原体感染的灵敏度和特异度。方法采取213例女性非淋菌性泌尿生殖道感染者宫颈分泌物，分别用直接免疫荧光法（DFA）、免疫层析法（ICA）和实时荧光定量PCR法（FQ-PCR）检测沙眼衣原体。结果采用DAF法和FQ-PCR法与采用ICA法检测沙眼衣原体阳性率比较差异有统计学意义（P＜0．05）；DFA法、ICA法和FQ-PCR法的灵敏度分别为95．1％、60．2％和97．3％，特异度分别为93．2％、99．2％和99．3％。DFA法和FQ-PCR法的灵敏度高于ICA法，差异有统计学意义（P＜0．05），ICA法和FQ-PCR法的特异度高于DFA法，差异有统计学意义（P＜0．05）。结论 FQ-PCR法有较高的灵敏度和特异度，可为临床诊断沙眼衣原体感染提供可靠依据。基层医疗卫生单位适合用IC A法检测沙眼衣原体。     

糖原试验、聚合酶链反应和细胞培养对沙眼衣原体感染的诊断价值

目的 探讨糖原试验、聚合酶链反应（PCR）和细胞培养法检测泌尿生殖道沙眼衣原体感染的诊断价值。方法 用三种方法分别对106例女性门诊患者宫颈分泌物标本进行平行检测。结果 以细胞培养作参比。糖原试验的敏感性为80.0%，特异性为95.8%；PCR敏感性为90.0%，特异性为97.7%。结论 糖原试验对泌尿生殖道沙眼衣原体感染有一定诊断价值。