用大豆磷脂激活Nitchmann沉淀B中凝血酶

凝血酶在人体凝血机制中起着重要作用,以纤维蛋白原及凝血酶作为主要成分的纤维蛋白止血胶在国外已被广泛用于局部和手术中的止血和做粘合剂[1].制备凝血酶的方法是采用先将凝血酶原复合物激活,从中分离纯化凝血酶.激活用的凝血活酶多数采用兔、牛等动物脑磷脂,一旦动物脑磷脂进入人体有可能引起种间病毒的传播,本实验室应用大豆磷脂代替动物脑磷脂激活Nitchmann沉淀B中凝血酶,获得较好的激活效果,这种方法既经济,又避免了种间病毒的传播.     

用离子交换分离组分B中的凝血酶

目的建立从Nitschmann组中分离人凝血酶的新方法.方法用磷脂激活,上CM sephrose fast flow离子交换柱进行分离纯化.结果对分离条件进行了优化,上样盐浓度为2%,洗脱盐浓度为16%～18%,上样速度8ml/min,分离后凝血酶比活195IU/mg,回收率77.9%.结论经此方法分离得到的凝血酶活性单位较高,并进行线形放大,可用于规模化生产,5L填料能处00L以上的样品.     

用离子交换分离组分B中的凝血酶

目的　建立从Nitschmann组中分离人凝血酶的新方法。方法　用磷脂激活 ,上CMsephrosefastflow离子交换柱进行分离纯化。结果　对分离条件进行了优化 ,上样盐浓度为 2 % ,洗脱盐浓度为 1 6 %～ 1 8% ,上样速度8ml/min ,分离后凝血酶比活 1 95IU/mg,回收率 77 9%。结论　经此方法分离得到的凝血酶活性单位较高 ,并进行线形放大 ,可用于规模化生产 ,5L填料能处理 1 0 0L以上的样品     

凝血酶激活纤溶抑制物的研究进展

凝血酶激活纤溶抑制物(thrombin activated fibrinolysis inhibitor，TAFI)是近年来发现存在于血浆中的一种蛋白酶原，属于数肽酶家族成员。血液凝固时，TAFI被凝血酶—血栓调节蛋白(T—TM)复合物激活后，可特异性裂解纤维蛋白C—末端赖氨醛残基，下调纤溶活性，对纤维蛋白溶解有抑制作用。它的发现给纤溶系统增添了新的认识，将给临床防治血栓性疾病提供新的思路。本文将围绕TAFI的发现、分子生物学特性和生理功能等作一综述。     

凝血酶激活纤溶抑制物的研究进展

凝血酶激活纤溶抑制物 (thrombinactivatedfibrinolysisinhibitor,TAFI)是近年来发现存在于血浆中的一种蛋白酶原 ,属于羧肽酶家族成员。血液凝固时 ,TAFI被凝血酶 血栓调节蛋白 (T TM)复合物激活后 ,可特异性裂解纤维蛋白C 末端赖氨酸残基 ,下调纤溶活性 ,对纤维蛋白溶解有抑制作用。它的发现给纤溶系统增添了新的认识 ,将给临床防治血栓性疾病提供新的思路。本文将围绕TAFI的发现、分子生物学特性和生理功能等作一综述。     

凝血酶激活的纤溶抑制物及其抑制物的研究进展

凝血酶激活的纤溶抑制物(TAFI)是一种含锌的金属羧肽酶原。TAFI通过消除部分降解的纤维蛋白上的赖氨酸残基，从而抑制纤维蛋白的进一步溶解。这一机理表明TAFI在纤维蛋白溶解及血栓溶解过程中具有重要的调节作用。对TAFI及其抑制物的深入研究可以为辅助溶栓药物的开发提供新的思路。     

凝血酶激活的纤溶抑制物及其抑制物的研究进展

凝血酶激活的纤溶抑制物(TAFI)是一种含锌的金属羧肽酶原。TAFI通过消除部分降解的纤维蛋白上的赖氨酸残基,从而抑制纤维蛋白的进一步溶解。这一机理表明TAFI在纤维蛋白溶解及血栓溶解过程中具有重要的调节作用。对TAFI及其抑制物的深入研究可以为辅助溶栓药物的开发提供新的思路。     

凝血酶激活的纤溶抑制物的研究进展

凝血酶激活的纤溶抑制物(TAFI)属于羧肽酶家族成员。血液凝固时,TAFI可以被凝血酶激活,特异性裂解纤维蛋白C末端赖氨酸残基,下调纤溶系统。在动物实验中,抑制TAFI可以缩短血凝块溶解时间,增强溶栓药物的作用,TAFI抑制物有可能成为血栓性疾病治疗的一类新的药物。     

冷沉淀中抗-A(B)及患者输用前后抗-A(B)效价检测报告

<正> 冷沉淀是血浆在0～4℃中不溶解的部分,含 FⅧ、Fn、von Willebrand 因子和纤维蛋白原。常用于甲型血友病、Von Wille-brand 氏病、纤维蛋白原缺乏的患者。除上述疾病外,我们还用于手术后出血、严重感染和重症创伤等患者。由于多单位的冷沉淀是由不同 ABO 血型个体的冷沉淀混合而成,故作者对     

凝血酶激活纤溶抑制物检测在妊娠晚期的意义

凝血酶激活纤溶抑制物（thrombin activated fibrinolysis inhibitor，TAFI）是近年来发现存在于血浆中的一种蛋白酶原，属于羧肽酶家族成员。血液凝固时，TAFI被凝血酶血栓调节蛋白（T-TM）复合物激活后，可特异性裂解纤维蛋白（fibrinogen，Fb）C-末端赖氨酸残基，下调纤溶活性，对纤维蛋白溶解有抑制作用。妊娠晚期TAFI含量与妊娠早期相比较有明显升高（P〈0.01），表明妊娠晚期TAFI含量增高，使机体对纤维蛋白溶解抑制作用增高，导致机体处于高凝状态．易诱发弥漫性血管内凝血（DIC）发生。     

冠心病患者血浆凝血酶激活的纤溶抑制物的检测及其临床意义

目的　检测正常人群血浆中 TAFI:Ag和 TAFI:A的水平 ,确立正常人血浆中 TAFI:Ag和TAFI:A的参考值范围及其在冠心病患者血浆中的变化。方法　应用 ELISA方法测定 34名正常人、1 9例冠心病患者及 1 5例 DIC患者血浆中 TAFI:Ag的含量 ,应用发色底物法检测血浆中 TAFI:A的水平。对正常人、冠心病患者血浆中 TAFI:Ag和 TAFI:A的含量进行对照分析。结果　正常人 TAFI:Ag平均值为 ( 77± 2 8) % ,参考值范围为 2 1 %～ 1 33% ,TAFI:A平均值为 ( 2 4± 5 ) μg/ml,参考值为 1 4～ 34μg/ml。冠心病患者血浆中 TAFI:Ag为 ( 1 5 6± 32 ) % ,TAFI:A为 ( 4 3± 7) μg/ml。结论　正常人血浆中的TAFI:Ag含量具有很大变异性 ,正常人 TAFI的活性与 TAFI抗原含量呈剂量相关性 ,冠心病患者血浆中 TAFI:Ag和 TAFI:A显著增高 ,表明 TAFI在冠心病发病中起一定作用。     

脑卒中患者血浆凝血酶激活的纤溶抑制物的临床研究

目的 研究总凝血酶激活的纤溶抑制物(TAFI)抗原(TAFI:Ag)和活化的TAFI:Ag(TAFIa:Ag)与脑卒中的相关性,探讨二者在缺血性脑卒中(IS)和出血性脑卒中(ICH)的临床意义.方法 采用酶联免疫吸附试验(ELISA)对228例脑卒中患者血浆TAFI水平变化进行研究分析,并将IS和ICH分别与对照组比较.结果 与对照组[TAH:AS(100.63±25.28)μg/mL;TAFIa:Ag(126.43±31.88)ns/mL]相比,卒中发作时,2指标在IS[(118.72±31.41)μg/mL,(168.79±55.36)ng/mL]和ICH[(127.51±37.59)μg/mL,(207.99±73.71)ng/mL]均明显升高(P＜0.01),并有较高发生率;TAH评估脑卒中发病风险时,TAFIa:Ag在Is是对照组的3倍,在ICH是对照组的7倍.结论 血浆TAH与脑卒中存在密切关系,TAFI升高大大地增加了脑卒中的发病风险.     

脑卒中患者血浆凝血酶激活的纤溶抑制物的临床研究

目的研究总凝血酶激活的纤溶抑制物(TAFI)抗原(TAFI∶Ag)和活化的TAFI∶Ag(TAFIa∶Ag)与脑卒中的相关性,探讨二者在缺血性脑卒中(IS)和出血性脑卒中(ICH)的临床意义。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)对228例脑卒中患者血浆TAFI水平变化进行研究分析,并将IS和ICH分别与对照组比较。结果与对照组[TAFI∶Ag(100.63±25.28)μg/mL;TAFIa∶Ag(126.43±31.88)ng/mL]相比,卒中发作时,2指标在IS[(118.72±31.41)μg/mL,(168.79±55.36)ng/mL]和ICH[(127.51±37.59)μg/mL,(207.99±73.71)ng/mL]均明显升高(P<0.01),并有较高发生率;TAFI评估脑卒中发病风险时,TAFIa∶Ag在IS是对照组的3倍,在ICH是对照组的7倍。结论血浆TAFI与脑卒中存在密切关系,TAFI升高大大地增加了脑卒中的发病风险。     

2型糖尿病患者血浆凝血酶激活的纤溶抑制物变化观察

目的评价血浆凝血酶激活的纤溶抑制物(TAFI)在2型糖尿病患者凝血及纤溶功能变化中的作用。方法检测90例2型糖尿病患者和30例与患者年龄相匹配的健康者血浆中TAFI、组织纤溶酶原激活物(t-PA)、纤溶酶原激活物抑制物(PAI-1)。结果TAFI的活性在2型糖尿病各组患者血浆中高于对照组(P<0.05),高蛋白尿组较尿蛋白正常组和低蛋白尿组升高(P<0.05)。t-PA在无并发症组低于对照组,但无统计学意义(P>0.05),高蛋白尿约较尿蛋白正常组和低蛋白尿组低(P<0.05)。PAI-1在2型糖尿病各组患者高于对照组(P<0.05),高蛋白尿组较尿蛋白正常组利低蛋白尿组升高(P<0.05)。TAFI的活性与t-PA和PAI-1含量有较好的相关性。结论检测2型糖尿病患者血浆中TAFI活性水平,对于预测2型糖尿病患者的微血管病变程度,防治2型糖尿病并发症有着重要意义。     

凝血酶激活的纤溶抑制物:开启防治血栓性疾病的新思路

凝血酶激活的纤溶抑制物（thrombin-activatable fibrinolysis inhibitor,TAFI）又称血浆羧基肽酶B、R、U,属于羧基肽酶家族,是近年来发现的存在于血浆中的一种蛋白酶原,生理情况下,经凝血酶-血栓调节蛋白复合物（thrombin-thrombomodulin compound,T-TM）激活,转变为活化的凝血酶激活的纤溶抑制物（activated thrombin-activatable fibrinolysis inhibitor,TAFIa）下调纤溶活性,防止血栓过早被纤溶酶溶解,从而使血栓更加稳固。     

离心法制备冷沉淀凝血因子的影响因素控制

目的 通过对离心法制备冷沉淀凝血因子过程中影响因素的控制,减少凝血因子含量的损失.方法 从2013年7月至2014年6月荆门市红十字中心血站采用严格控制影响因素离心法制备的冷沉淀凝血因子制剂中,采用简单随机抽样方法抽取60袋冷沉淀凝血因子制剂标本作为研究对象,纳入研究组（n=60）;从2012年7月至2013年6月采用一般离心法制备冷沉淀凝血因子制剂中,采用简单随机抽样方法抽取54袋纳入对照组（n=54）.对两组冷沉淀凝血因子制剂中因子Ⅷ（FⅧ）与纤维蛋白原（Fib）含量进行检测.回顾性对比研究组与对照组冷沉淀凝血因子制剂中FⅧ与Fib含量.结果 研究组与对照组的FⅧ含量与Fib含量检测结果均值均为合格.研究组FⅧ含量[（102.8±12.3）IU/袋]显著高于对照组FⅧ含量[（90.4±4.2） IU/袋],差异有统计学意义（t=8.04,P＜0.001）;研究组Fib含量[（179.9±6.7）mg/袋]显著高于对照组Fib含量[（170.2±8.3）mg/袋],差异亦有统计学意义（t=7.72,P＜0.01）.结论 对离心法制备冷沉淀凝血因子过程中影响因素加以严格控制,可减少FⅧ与Fib含量的损失.     

去冷沉淀血浆中部分凝血因子及总蛋白的质量分析

目的 调查分析去冷沉淀血浆(CRP)中部分凝血因子及总蛋白的实际含量,为临床输注提供实验依据.方法 抽取40份新鲜全血,按照标准操作规程制备新鲜冰冻血浆(FFP)和CRP,同一人份制备的血浆分为FFP组(n=40)和CRP(n =40)留样,检测2组标本的FⅤ∶C、FⅦ∶C、FⅤⅢ∶C、FⅨ∶C、Fg和总蛋白含量的变化.结果 CRP组和FFP组的FⅦ∶C、FⅧ∶C、FⅨ∶C、Fg、总蛋白含量比较:(88.8±27.1)％vs(93.2±29.7)％、(23.0±17.4)％vs(83.4±25.8)％、(57.3±12.6)％vs(66.9±12.2)％、(157.7±52.5) 1mg/dLvs(212.6±50.0) mg/dL、(58.5±6.3) g/L vs (67.0±3.5) g/L(均为P＜0.05);FⅤ∶C(％)比较,131.0±49.4 vs 134.7±41.7(P ＞0.05).结论 CRP中的大部分凝血因子活性和总蛋白含量均下降,故临床输注不能等同于FFP和普通血浆.     

冷沉淀中凝血因子检测结果与分析

目的了解冷沉淀中凝血因子的活性以及凝血酶原时间(PT)、部分活化凝血酶原时间(APTT),确保临床输注疗效。方法随机抽取20份冷沉淀,采用凝固光学检测法,经全自动血凝分析仪测定冷沉淀中部分凝血因子的活性及PT、APTT,并进行分析。结果检测F、F、F、F、F的活性(%)分别为5.40±0.11、7.35±0.35、5.27±0.40、165.42±32.55、108.50±2.96,PT、APTT(s)分别为15.20±0.25、14.01±5.54。结论进行冷沉淀中凝血因子活性和PT、APTT的检测,有利于确保临床合理使用冷沉淀。     

B亚型中Bx新等位基因的鉴定

目的对ABO血型中B亚型分子遗传背景的研究,发现并鉴定ABO新等位基因。方法对5份血型血清学鉴定为B亚型的样本,采用PCR-SSP、ABO基因第6及第7外显子直接测序方法进行基因定型;并对目的B亚型样本进行RT-PCR、巢式PCR扩增、测序,分析其cDNA结构的差异。结果5份血清学为B亚型的样本中,血清学鉴定为Bx的个体发现了一个新的B等位基因。该等位基因与B101等位基因相比,差异仅在于第7外显子的B基因序列中nt721位C>T突变。其余4份B亚型样本的ABO基因第6、7外显子都未发现新的点突变。结论首次在中国汉族人中发现一个721C>T新变异的B等位基因,该等位基因nt721位由C转变为T,241位氨基酸由精氨酸转变为色氨酸,可导致糖基转移酶活性的降低,表明ABO基因的第241位氨基酸对决定糖基转移酶活性是至关重要的。