荧光免疫层析法定量检测胃蛋白酶原及应用

目的 建立一种一次操作即可同时定量检测胃蛋白酶原Ⅰ及胃蛋白酶原Ⅱ荧光免疫层析的方法,检测人血清中胃蛋白酶原Ⅰ(PGⅠ)及胃蛋白酶原Ⅱ(PGⅡ)的含量,用于辅助诊断慢性萎缩性胃炎和早期胃癌.方法 将鼠抗胃蛋白酶原Ⅰ (PGⅠ)抗体用划线机喷到硝酸纤维素膜表面作为检测线1(T1),将鼠抗胃蛋白酶原Ⅱ(PGⅡ)抗体用划线机喷到硝酸纤维素膜表面作为检测线2(T2),将羊抗兔IgG多克隆抗体喷到硝酸纤维素膜表面作为质控线(C);用荧光素分别标记鼠抗胃蛋白酶原Ⅰ(PGⅠ)抗体、鼠抗胃蛋白酶原Ⅱ(PGⅡ)抗体和兔IgG抗体,将所制得的以上三种抗体荧光素标记物按一定比例混合,均匀喷到玻璃纤维素膜上制得荧光标记物垫;以双抗体夹心法反应模式制备同时定量检测胃蛋白酶原Ⅰ及胃蛋白酶原Ⅱ的荧光免疫层析法试纸条,并使用酶联免疫法试剂进行比对,对方法的线性、精密度、最低检出限、回收率、相关性等方面进行分析.结果 荧光免疫层析法检测胃蛋白酶原Ⅰ及胃蛋白酶原Ⅱ,进行Logistic曲线四参数拟合,R2均为0.99,拟合度较高;精密性CV分别为3.59％、3.40％;荧光免疫层析法与酶联免疫法的相关性较好(PG Ⅰ和PGⅡ分别为r=0.99,r =0.99);最低检出限分别为0.81 ng/mL和0.72ng/mL.结论 所建立的在一个检测条上同时测定胃蛋白酶原Ⅰ(PGⅠ)及胃蛋白酶原Ⅱ(PGⅡ)含量的荧光免疫层析法方法,具有较好的特异性和较高的灵敏度,PG Ⅰ和PGⅡ无相互干扰,结果准确、操作便捷,便于我国基层疾控中心及医疗结构对胃蛋白酶原的检测.     

胃蛋白酶原Ⅰ、Ⅱ测定在胃癌早期诊断中的研究

研究血清胃蛋白酶原Ⅰ、Ⅱ含量变化与胃癌发生的关系,探讨血清胃蛋白酶原Ⅰ、Ⅱ作为胃癌早期诊断标志物的可行性.应用化学发光法测定非萎缩性胃炎、慢性萎缩性胃炎、胃癌患者的血清胃蛋白酶原Ⅰ、Ⅱ的含量并计算其比值的变化.结果显示:与非萎缩性胃炎组相比,萎缩性胃炎和胃癌组血清胃蛋白酶原Ⅰ水平下降,差异均有统计学意义(P<0.05)...     

川西高原地区健康藏族人群胃蛋白酶原参考区间的建立

目的 建立川西高原地区健康藏族人群血清胃蛋白酶原I(PGI)、胃蛋白酶原II(PGII)和胃蛋白酶原I/胃蛋白酶原II比值(PGR)参考区间,同时与同地区健康汉族人群进行差异性分析。方法 选取2018年1月至2021年12月在三六三医院体检结果正常的515名健康藏族成人和504名健康汉族成人,采用荧光免疫层析法检测其血清中PGI、PGII的水平,计算比值PGR。统计分析健康藏族成人PGI、PGII、PGR各参数的参考区间,并与健康汉族成人进行差异性分析。结果 515名健康藏族成人血清PGI、PGII和PGR均呈偏态分布,采用百分位数法确定参考区间。川西高原地区健康藏族人群PGI参考区间为47.68～283.8μg/L、PGII参考区间为3.4～42.1μg/L、PGR参考区间为≥5.23。藏族与汉族间差异有统计学意义(P<0.05)。3项指标的参考范围与试剂说明书提供的参考范围相差较大。未发现存在明显的性别差异(P>0.05)和年龄差异(P>0.05)。结论 川西高原地区健康藏族人群胃蛋白酶原水平与同地区汉族人群存在差异,同时参考区间与试剂说明书提供的参考范围存在差异...     

胞溶性钙离子增强胃蛋白酶原分泌细胞的胞吐作用

０１９胞溶性钙离子增强胃蛋白酶原分泌细胞的胞吐作用［英」／ＴａｏＣ…／／Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ。－１９９４，１０６（４ｐｔ２）．－Ａ１９３作者曾报告过几种蛙胃蛋白酶原分泌细胞的激动剂，如氨甲酞胆碱和蛙皮素等，这些均可导致胞溶性钙离子呈双相性...     

从石蜡包埋组织中提取的间期核FISH分析

从石蜡包埋组织中提取的间期核ＦＩＳＨ分析从石蜡包埋的组织中提取细胞核的方法是１９８３年第一次由Ｈｅｄｌｅｙ等人提出的。这一方案在许多方面已得到修改。然而，其中３个重要步骤一直没有得到改进：①脱蜡和再水合过程中组织的沉降；②应用胃蛋白酶（和胃蛋白酶抑制...     

石榴健胃散药效学研究

目的：观察受试药物的止泻、促进消化作用。方法：通过番泻叶所臻小鼠腹泻模型、活性炭标记小鼠小肠蠕动、测定大鼠胃酸、胃蛋白酶分泌量变化进行观察。结果：受试物对番泻叶所致小鼠腹泻、小肠蠕动有显抑制作用,对大鼠胃酸、胃蛋酶分泌有显促进作用。结论：石榴健胃散具有止泻、增加胃酸、胃蛋白酶分泌,促进消化作用。     

大鼠肺外动脉可溶性胶原Ⅰ、Ⅲ型比例的测定

本文介绍了大鼠肺外动脉可溶性胶原Ⅰ、Ⅲ型比例的测定。首先经双醋酸——胃蛋白酶消化提取可溶性胶原I、Ⅲ型混和物:分离大鼠肺外动脉,称湿重剪碎后,浸入少量0.5M醋酸,4℃过夜。次日冰浴中匀浆,加胃蛋白酶(1mg/10mg肺动脉)后混匀,4℃摇荡过夜;第三日4℃15000rpm离心30分钟,留上清,沉淀     

幽门螺杆菌诱导大鼠胃粘膜细胞分泌胃蛋白酶原

为研究幽门螺杆菌 (Ｈｐ)超声提取物对大鼠胃粘膜细胞系合成与分泌胃蛋白酶原的影响 ,大鼠胃粘膜细胞ＯＵＭＳ 37(34代 )在ＤＭＥＭ培养基中培养 3ｄ后细胞生长到紧密状态时 ,换以新鲜的培养基 ,加入Ｈｐ超声提取物或试剂后 ,采用酸变性法 ,按指定时间取培养上清及细胞裂解液测定胃蛋白酶原活力。结果显示 ,不同浓度的Ｈｐ超声提取物(10 0ｍｇ/Ｌ ,2 0 0ｍｇ/Ｌ ,40 0ｍｇ/Ｌ)对细胞存活无影响。Ｈｐ超声提取物可在 30ｍｉｎ～ 180ｍｉｎ内呈剂量依赖性地诱导大鼠胃细胞分泌胃蛋白酶原。ＤｉｂｕｔｙｒｙｌｃＡＭＰ显著诱导胃粘膜细胞分泌胃…     

转铁蛋白、乳酸脱氢酶、胃蛋白酶原Ⅰ和胃泌素在恶性贫血诊断中的价值

目的探讨转铁蛋白(transferrin,TRF)、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)、胃蛋白酶原I(pepsinogen,PGI)和胃泌素(Gastrin)在恶性贫血诊断中的价值。方法选取恶性贫血患者、缺铁性贫血患者、非恶性贫血的巨幼红细胞性贫血患者和健康体检者各30例分别为恶性贫血组、缺铁贫血组、巨幼贫血组和对照组,检测4组研究对象转铁蛋白、乳酸脱氢酶、胃蛋白酶原Ⅰ和胃泌素的血清水平。用ROC曲线下面积分析转铁蛋白、乳酸脱氢酶、胃蛋白酶原Ⅰ和胃泌素在恶性贫血诊断中的价值。结果恶性贫血患者血清中的乳酸脱氢酶、胃泌素和转铁蛋白的表达量均明显高于非恶性贫血的巨幼细胞贫血患者、缺铁性贫血和健康体检者(P <0. 05),而胃蛋白酶原Ⅰ的表达量明显低于巨幼细胞贫血患者、缺铁性贫血和健康体检者(P <0.05)。LDH,PGI,Gastrin和TRF在恶性贫血组与缺铁贫血组的诊断灵敏度分别为83%、67%、80%、80%,特异性分别为73%、83%、77%、70%;PGI和transferrin在恶性贫血组与巨幼贫血组的诊断灵敏度分别为80%、56%;特异性分别为73%、93%。结论转铁蛋白,乳酸脱氢酶,胃蛋白酶原Ⅰ和胃泌素可作为诊断恶性贫血的潜在标志物。     

年龄对胃部常见良性疾病患者的胃蛋白酶原及胃泌素-17水平的影响

研究年龄对胃部常见良性疾病患者的胃蛋白酶原(PG)及胃泌素-17（G-17）水平的影响。方法 收集2016年1月~2017年12月在安徽医科大学附属安庆医院消化内科住院患者的病历作为研究材料,根据疾病将其分为慢性非萎缩性胃炎（CNAG）组、胃息肉组及胃溃疡组,共收集2638份符合条件的病历。将上述三组疾病按照年龄进一步分为高龄亚组（≥60岁）及低龄亚组（＜60岁）,每个亚组按男女性别再分为两个次级亚组。按照随机数字表法,将符合条件的患者资料随机分到每个次级亚组中,每组40例,一共收集480例资料作为样本进行分析。使用双抗体夹心法的酶学免疫分析技术检测各组患者的胃蛋白酶原Ⅰ（PGⅠ）、胃蛋白酶原Ⅱ（PGⅡ）及G-17水平,并计算出PGⅠ/PGⅡ的比值PGR。结果 在CNAG及胃息肉组中,高龄亚组的PGⅠ、PGⅡ和G-17水平均高于低龄亚组、PGR水平低于低龄亚组,差异有统计学意义（P＜0.05）。在胃溃疡组中,高龄亚组的PGⅠ、PGⅡ及G-17水平均高于低龄亚组、PGR水平低于低龄亚组,差异无统计学意义（P＞0.05）。结论 在CNAG及胃息肉组中,年龄对胃蛋白酶原及G-17水平有影响,但在胃溃疡组中,年龄对胃蛋白酶原及G-17水平的无明显影响。     

一种新的网状纤维染色方法

一种新的网状纤维染色方法黎家华，陈昌伟网状纤维嗜银染色（简称网染）方法甚多，传统的网染方法步骤繁多，操作复杂，不易掌握。在总结多种嗜银染色技术的基础上，我们创立了一种新的网染法。一、材料和方法１．染液配制（１）胃蛋白酶液：取胃蛋白酶４００ｍｇ、双蒸水...     

pH值和酶作用对鲩鱼过敏原免疫学活性的影响研究

目的研究pH值、胃蛋白酶和胰蛋白酶作用对鲩鱼过敏原免疫学活性的影响。方法采用不同Coca's液提取制备鲩鱼总蛋白,以鲩鱼过敏患者阳性血清为一抗用Western Blotting方法分析pH值、胃蛋白酶和胰蛋白酶以及多因素多重作用对鲩鱼过敏原免疫学特性的影响。结果HCl溶液、胃蛋白酶溶液、胰蛋白酶溶液以及多种因素的多重作用对鲩鱼蛋白均有不同程度的降解作用,且均可以显著降低鲩鱼过敏原的免疫学活性,但一些蛋白具有很高的稳定性,如M_r为35 000和23 000的蛋白。受制备过程的影响,鲩鱼蛋白中出现新的阳性过敏原条带,如M_r为27 000和20 000的阳性过敏原条带(pH 1.0 HCl溶液)。结论鲩鱼含有稳定性较高的潜在过敏原,该类潜在过敏原对热、酸、酶解等作用均有很强的耐受性。     

血清胃蛋白酶原与CA724联合检测在胃癌鉴别诊断中的应用价值

目的 探讨血清胃蛋白酶原(PG)和糖类抗原CA724联合检测作为肿瘤标志物用于胃癌鉴别诊断的可行性.方法 选取经纤维胃镜及病理组织学诊断为胃癌的患者195例,慢性萎缩性胃炎(CAG)患者175例,正常健康体检者210例.采用免疫分析法检测胃蛋白酶原Ⅰ(PG Ⅰ)、胃蛋白酶原Ⅱ(PGⅡ)并计胃蛋白酶原比值PGR(PG Ⅰ/PGⅡ),采用电化学发光免疫分析法检测糖化抗原CA724.结果 胃癌组PG Ⅰ与PGR水平明显低于正常对照组,两组比较差异具有统计学意义(P =0.000);PGⅡ的含量变化不大,两组比较差异无统计学意义(P =0.490).CAG组PG Ⅰ与PGR水平明显低于正常对照组,两组比较差异具有统计学意义(P =0.003);PGⅡ的含量变化不大,两组比较差异无统计学意义(P=0.407).胃癌组与CAG组PG Ⅰ与PGR比较差异无统计学意义(P =0.400).胃癌组的CA724水平明显高于CAG组与正常对照组,差异有统计学意义(P=0.003);而CAG组与正常对照组比较差异无统计学意义(P =0.388).对胃癌诊断的敏感性PC (71.79％)高于CA724(41.28％),特异性CA724 (92.2％)高于PG(66.23％),二者联合检测敏感性为82.67％,特异性为73.59％,同时阴性时82.78％排除胃癌诊断.结论 血清胃蛋白酶原和CA724联合检测二者同时阴性时可以82.78％排除胃癌诊断,可以作为胃癌鉴别诊断的标志物.     

健康体检血清PG水平与Hp感染研究

目的 研究健康体检血清胃蛋白酶原与Hp感染的临床应用价值.方法 分析本院856例健康体检人员分别采用时间分辨荧光免疫分析法检测血清胃蛋白酶原(PG)水平和13C尿素呼气试验检测幽门螺杆菌(Hp)感染率.结果 737例无胃病人群血清PG Ⅰ平均值为153.9 ±45.7ng/mL,PGⅡ平均值为11.4±4.5ng/mL,PG Ⅰ/PGⅡ平均值为13.5±4.7;119例疑似有胃病人群血清PG Ⅰ平均值为181.7±69.8ng/mL,PGⅡ平均值为20.7±7.6ng/mL,PG Ⅰ/PGⅡ平均值为8.7±4.4.Hp阳性人群PG Ⅰ和PGⅡ水平(195 ±57.3ng/mL,18.7±8.9 ng/mL)明显高于Hp阴性人群.结论 健康体检人群的Hp感染与血清PG水平存在着一定的正相关,血清胃蛋白酶原和13C尿素呼气试验可联合用于健康体检.     

血清胃蛋白酶原水平变化对肝硬化患者胃黏膜功能的评估价值

目的研究血清胃蛋白酶原水平变化对肝硬化患者胃黏膜功能的评估价值。方法选取2014年12月至2015年12月我院收治的肝硬化患者85例作为研究组,同期健康体检正常者85例作为对照组,比较两组患者血清胃蛋白酶原水平变化以及按照Child-Pugh肝功能改良分级法不同等级间患者血清胃蛋白酶原水平变化情况。结果研究组患者PGI及PGⅡ水平均高于对照组,且组间比较差异有统计学意义(P<0.05);研究组患者PGR低于对照组,但是组间比较差异无统计学意义(P>0.05);按照Child-Pugh肝功能分级,B级和C级患者血清PGI、PGⅡ水平及PGR均高于A级患者,且组间比较均有统计学意义(P<0.05)。结论肝硬化患者可出现血清PG水平异常情况,且与肝功能分级有关,血清PG水平在一定程度上可以反映肝硬化患者胃黏膜功能状态。     

血清PG检测在胃部疾病诊断中的价值

胃蛋白酶原（Pepsinogen,PG）是胃黏膜组织分泌的一种蛋白酶前体,据免疫原性不同分为PGI和PGⅡ两个亚群;PGI由胃主细胞及颈黏液细胞合成,     

抗轮状病毒IgY和Fab的研制

目的对抗轮状病毒(RV)IgY和胃蛋白酶水解片断Fab进行分离与纯化.方法免疫鸡得到抗HRVIgY,用两步盐析结合凝胶过滤将其从蛋黄中分离出来,纯的IgY经胃蛋白酶水解得抗体片断Fab.结果抗HRVIgY用SDS-PAGE检测纯度可达到95%以上.抗轮状病毒(RV)IgY和抗体片断Fab经SDS-PAGE和MALDIMS法测定,其纯度达到99%以上,经ELISA法检测,Fab'的活性保持在IgY原始活性的70%以上.结论我们所设计的分离和纯化抗HRVIgY和Fab'的方法简单、有效.     

非溃疡症消化不良患者MTL RIA的观察

胃动素(Motilin．简称MTL)．主要生理活性为刺激胃和肠的运动及促进胃蛋白酶的分泌，对消化道运动的调节有重要的作用。     

血清胃蛋白酶原与胃泌素检测对消化性溃疡病的诊断价值

目的:探讨胃、十二指肠溃疡患者血清胃蛋白酶原(PG)、胃泌素(GS)水平变化规律及临床意义。 方法:采用免疫放射分析测定了100例正常人,61例十二指肠球部溃疡,46例胃溃疡患者,66例胃癌和101例 慢性胃炎患者血清胃蛋白酶原Ⅰ(PGⅠ)、胃蛋白酶原Ⅱ(PGⅡ)、GS含量及PGⅠ/PGⅡ比值变化。结果:十二 指肠溃疡组和胃溃疡组PGⅠ、PGⅡ、PGⅠ/PGⅡ较对照组显著增高(P<0.001),GS水平较对照组、慢性胃炎 组明显增高(P<0.001),但明显低于胃癌组(P<0.001),十二指肠球部溃疡组PGⅠ、PGⅠ/PGⅡ水平较胃溃 疡组明显增高(P<0.001)。结论:过高的PGⅠ、PGⅡ、PGⅠ/PGⅡ、GS水平增高是溃疡病的高危因素之一,作 为一项血清学指标,对溃疡病的诊断及疗效观察有重要的临床意义。     

血清胃蛋白酶原检测在胃相关疾病中的诊断价值

目的 探讨血清胃蛋白酶原(PG)在胃相关疾病中的诊断价值.方法 收集胃镜检查阴性者87例,作为正常对照组,慢性浅表性胃炎组41例,胃溃疡组45例(其中未出血组15例,出血组30例)及胃癌组35例,利用时间分辨荧光免疫分析法检测血清中胃蛋白酶原Ⅰ(PGⅠ)和胃蛋白酶原Ⅱ(PGⅡ)的含量,并计算其比值PGⅠ/PGⅡ(PGR).结果 与正常对照组相比,胃炎组、胃溃疡组PGⅠ和PGⅡ水平明显升高(P＜0.05),胃癌组PGⅠ较对照组明显降低(83.49±26.31vs 168.18±17.13),差异有统计学意义;PGR在三组中与正常对照组相比,结果明显降低(P＜0.05).PGⅠ在胃炎组、胃溃疡组(未出血组、出血组)及胃癌组的阳性率分别为41.46％,(66.67％、80.00％)和52.00％,PGⅡ在各组的阳性率分别为26.83％,(40.00％、46.67％)及0.00％,与对照组PGⅠ和PGⅡ阳性率相比,有显著性差异(P＜0.05)(除胃癌组PGⅡ).PGR在胃炎组、胃溃疡组(未出血组、出血组)及胃癌组的阳性率分别为14.63％,(26.67％、20.00％)和48.00％,与正常对照组相比,差异有统计学意义.结论 血清胃蛋白酶原检测可以为胃相关疾病的诊断提供帮助,尤其PGR对胃癌的诊断具有重要意义.