甲型H1N1流感流行的特点及分子基础

甲型H1N1流感病毒早期也曾被称为"猪流感"或"猪源流感"病毒,是此次暴发于墨西哥和美国的流感大流行的病原体.早在2009年3月18日,墨西哥的流行病监测网络在墨西哥联邦区就发现了流感流行.     

甲型H1N1流感病毒抗原表位区段的克隆和表达

据统计,全世界每年流感流行都会造成10％～20％的人感染流感病毒,给整个社会带来极大的经济负担。2009年4月在墨西哥、美国暴发的甲型H1N1流感,其病毒是一种与猪流感病毒高度同源的新型变异毒株,它包含禽流感、猪流感和人流感3种流感病毒的基因片段,同时拥有亚洲猪流感病毒和非洲猪流感病毒的特征,是一种“杂交型”流感病毒。与传统的猪流感病毒不同,该病毒能在人和人之间快速传播。到目前为止,全球40多个国家均发现有甲型H1N1流感病毒感染的存在,国内外高度关注该病毒诊断试剂和疫苗的研制。     

科学应对甲型H1N1流感

甲型H1N1病毒在世界范围内的广泛流行引起了WHO的高度重视,疫情警告级别一度从3级提高到4级,又提高到5级.本文从流感病毒的发现、历史上流感大流行的有关情况出发,介绍此次甲型H1N1流感疫情的科学应对方法 ,包括甲型H1N1病毒的传播及甲型H1N1流感的临床表现、治疗、主要防控措施等.     

新甲型H1N1流感病毒及疫情分析

新甲型H1N1流感疫情正在从北美洲向全球逐步蔓延,引起了全世界的关注。本文介绍了此次新甲型H1N1流感的流行概况及特点,分析了病毒的遗传学特征,并尝试性地对新甲型H1N1流感的国际流行态势及对我国的影响进行了初步评估。初步分析认为,新甲型H1N1流感病毒极有可能引发一次全球范围的流感大流行,但其对人类健康造成的危害程度会比1918、1957和1968年3次流感要低;在中国不可避免地会出现一些散发病例甚至小规模的局部暴发流行,但近期造成大规模暴发流行的可能性较小。     

高原地区重、危重症甲型H1N1流感胸部影像表现动态变化特点

<正> 甲型H1N1流感是甲型(A型)流感病毒引起的一种急性、人畜共患呼吸道传染性疾病。2009年3月中旬,发生在墨西哥、美国的甲型H1N1流感,原称人感染猪流感疫情,世界卫生组织指出,墨西哥和美国感染的病例属于H1N1亚型猪流感病毒的一个相同毒株。该毒株包含有猪流感、禽流感和人流感3种流感病毒的基因片断,是一种新型流感病毒,可以人传染人。新型的甲型H1N1流感和现     

新甲型H1N1流感病毒分子生物学研究进展

甲型流感是由甲型流感病毒引起,可致人或其他动物宿主发生不同程度呼吸道症状的疾病。2009年3月新甲型H1N1流感突然在墨西哥暴发,由于疫情迅速扩散,世界卫生组织（WHO）于2009～06—11将流感流行级别调整为最高级六级,即宣布新甲型H1N1流感发生全球流行。现病毒已传播至212个国家和地区,并处于继续扩散的状态,由于感染人数巨大,目前世卫组织已无法统计罹患人数,仅统计报告确诊死亡人数（至2010—02—19死亡15921人）。     

人禽流感临床防治

1防治禽流感是一项紧急而长久的任务 人类明确记载的流感史是1918年的欧洲流感大流行,死亡约4000万人,最近已从病原上确认是H1N1流感病毒引起。随之1957年的H2N2以及1968年的H3N2等多次较大范围的人流感大流行均多起源于亚洲。流感病毒属于正黏液病毒,以其表层结构血凝素（Haemagglutinims,H）及神经氨酸酶（Neuraminidases,N）命名。     

2009年新型甲型H1N1流感病毒全基因组序列重组分析及同源性比对

目的 分析2009年新型甲型H1N1流感爆发以来流感病毒的全基因组进化变异及重组情况.方法 从NCBI基因数据库下载2009年新型甲型H1N1流感病毒(A/H1N1)代表性全基因组序列,先用MEGA4.0软件对8个基因序列片段进行比对和拼接;然后将历史上流行的H1N1、H5N1、H3N2等不同宿主(人、禽、猪)的流感病毒全基因组序列用MEGA做比对拼接,并用NJ法构建进化树.采用Simplot 3.5.1软件分析2009年新型甲型H1N1流感病毒基因重组情况.结果 自2009年3月爆发新型甲型H1N1流感以来,截至9月,病毒基因没有出现变异,同源性为99.69%～99.93%.基因重组分析显示,新型甲型H1N1病毒株PIE、PBI、PA、HA、NP和NS基因来源于近年来北美地区猪源人H1N1,同源性分别为95.25%,95.08%,95.21%,93.52%,95.23%,94.78%;NA和MP与欧洲地区猪H1N1同源性较高,分别为90.21%,94.43%.全基因序列同源性分析发现2009年新型甲型H1N1流感病毒与北美地区猪H1N1病毒同源性最高,为92.22%.结论 2009年新型甲型H1N1流感病毒是由2005年北美地区猪H1N1病毒与欧洲猪H1N1的NA和MP片段重排进化而成,新病毒暂未发生变异,H1N1新流感疫苗具有保护作用.     

2009年新型甲型H1N1流感病毒的进化趋势及未来防控中应考虑的问题

2009年流行的新型甲型H1N1流感病毒的8个功能基因各自有一定的进化特点,其主要免疫原性基因--血凝素(HA)基因源于北美猪流感病毒.2005年在美国衣阿华(Iowa)州分离的感染人的猪H1N1的HA基因、病毒聚合酶(PB2、PBl和PA)基因、核蛋白基因(NP)和非结构基因(NS)与此次新型甲型HlNl病毒高度同源(同源性超过90%),可能是此次新型甲型H1N1病毒进化过程中的中间步骤.神经氨酸酶(NA)基因源于欧洲H1N1猪流感病毒,基质蛋白(M1和M2)基因来自欧洲H3N2亚型猪流感病毒,两段基因可能在猪体内与Iowa株发生重排而进化成此次新型甲型H1N1病毒.本文分析了新型甲型H1N1流感病毒可能的进化过程,并提出了未来防控工作中需要注意的几个科学问题.     

甲型H1N1流感的病原学及其治疗药物

目的介绍甲型H1N1流感[Influenza A（H1N1）]的病原学特征及其治疗药物,为甲型H1N1流感的临床治疗提供依据。方法收集专业书刊和网站资料,介绍卫生部制定的甲型H1N1流感诊疗方案,综合分析抗甲型H1N1流感病毒药物。结果此次疫情是由变异后的甲型H1N1流感病毒[Influenza virus A（H1N1）]引起,该毒株是猪流感、禽流感和人流感3种病毒的基因重组;只要及时服用抗流感病毒药物达菲（Tamiflu）,患者可以基本治愈。结论甲型H1N1流感远没有非典和禽流感那么可怕,我们即有防控非典的经验,又有疗效确切的抗病毒药,所以甲型H1N1流感是可防、可控、可治的。     

2009年新型甲型H1N1流感病毒血凝素基因进化及变异特征分析

目的 了解自2009年3月新型甲型H1N1流感流行以来,其主要免疫原件基因-HA基因的进化及氨基酸变异特性.方法 从NCBI下载2009年新型甲型H1N1流感病毒以及北美地区、欧洲地区、亚洲地区以往流行的甲型H1N1流感病毒HA基因序列,利用MEGA 4.0软件对所选序列进行基因进化系统发育树分析;对2009年新型甲型H1N1流感病毒HA基因的核苷酸同源性及氨基酸特异性进行分析,并与北美地区、欧洲地区、亚洲地区分离株进行比较.结果 2009年新型甲型HlNl流感病毒HA基因与2006-2007年美国A/swine/H1N1流感病毒同源性最高,核苷酸序列差异为0%～0.8%;与美国各州1930-2007年分离的A/swine/H1N1流感病毒具有明显的时间上的进化关系;与欧洲及亚洲地区A/swine/H1N1流感病毒进化无关.其重要的抗原性位点与A/human/H1N1流感病毒及流感疫苗株存在较大差异.全球流行半年多以来该病毒株没有发生明显变异.结论 2009年新型甲型H1N1流感病毒HA基因是北美A/swine/H1N1流感病毒长期进化的结果,目前尚未发现明显抗原位点的变异.     

甲型H1N1流感的研究进展

2009年3月墨西哥与美国先后出现甲型H1N1型流感,并在很短时间内席卷全球.世界卫生组织(WHO)将此次全球流感大流行的预警级别提高到5级.目前的研究表明甲型H1N1流感病毒的传染性极强,但是病死率有待确证.此外,病毒特点也尚未明了,本文对甲型流感病毒及其进化特点进行简述,借此为该病的认识提供借鉴.     

高原地区重、危重症甲型HIN1流感胸部影像表现动态变化特点

甲型H1N1流感是甲型（A型）流感病毒引起的一种急性、人畜共患呼吸道传染性疾病。2009年3月中旬,发生在墨西哥、美国的甲型H1N1流感,原称人感染猪流感疫情,世界卫生组织指出,墨西哥和美国感染的病例属于H1N1亚型猪流感病毒的一个相同毒株。该毒株包含有猪流感、禽流感和人流感3种流感病毒的基因片断,是一种新型流感病毒,可以人传染人[1]。     

人感染甲型H1N1流感可防可控可治

今年3月中旬以来,一场突如其来的人感染甲型H1N1流感疫情在墨西哥暴发并迅速在全球蔓延,包括美国、加拿大、西班牙、以色列、新西兰、韩国在内的20余个国家和地区先后报告发生确诊或疑似人感染甲型H1N1流感病例,墨西哥、美国均已宣布进入公共卫生应急状态。这场疫情震惊了整个世界,世界卫生组织（WHO）确定此次疫情为“具有国际影响的突发公共卫生事件”,并宣布将流感大流行的警告级别从3级提高至4级。此举表明,WHO认定这是一种新的病毒在人际间传播,疾病大范围流行的风险显著增加。世界各国纷纷在第一时间采取防范措施,严防人感染甲型H1N1流感疫情的扩散蔓延。     

北京地区37例流感患者的病毒遗传变异及耐药突变分析

目的 分析2013-2014年度北京地区A型H1N1、H3N2和B型流感病毒神经氨酸酶(NA)基因的遗传变异情况,以及流感病毒对金刚烷胺类和NA抑制剂类(NAIs)抗病毒药物的耐药变异情况.方法 从37例流感病毒感染患者的鼻/咽拭子样本中提取RNA,采用荧光定量PCR检测流感病毒的基因型/亚型;反转录PCR方法扩增A型流感病毒的NA和基质蛋白M2(M2)基因片段及B型流感病毒的NA和血凝素(HA)基因片段,直接DNA测序.采用Mega软件构建系统进化树分析病毒的演变情况,Vector NTI软件分析耐药变异情况.结果 37例患者中共检出A型流感病毒29例,其中H1N1 23例,H3N2 6例;B型流感病毒8例.所有A型流感病毒均发生M2基因S31N金刚烷胺类药物耐药位点变异.A型和B型流感病毒均未发现NAIs耐药位点变异.系统进化分析显示,B型流感病毒有5例样品NA基因和HA基因分型不一致,NA基因均为B-Victoria系,而HA基因为B-Yamagata系.结论 北京地区人群A型流感病毒均对金刚烷胺类药物耐药,但A型和B型病毒均未检测出NAIs耐药变异.B型流感病毒流行株中存在B-Yamagata系和B-Victoria系重组病毒株.     

2009年新型甲型H1N1流感病毒聚合酶编码基因的遗传特性及重要功能位点变异分析

目的 分析2009年新型甲型H1N1流感病毒聚合酶PA、PB1和PB2编码基因序列遗传的进化特征及重要功能位点变异.方法 从NCBI流感数据库中获取此次流行株的PA、PB1和PB2聚合酶编码基因序列以及不同年代、不同地区、不同宿主、不同亚型的参考序列,运用MEGA4.0软件比对和修剪此次流行株的代表序列和所有参考株序列.并用NJ法构建进化树,同时比对此次流行株的代表序列、各年代人的A/H1N1以及禽流感病毒参考序列等编码的PB2蛋白质序列.结果 不同地区、不同时间分离的2009年新型甲型H1N1流感病毒的聚合酶PA、PBl和PB2编码基因同源性均>99.8%,且聚集在一枝独特的进化枝上,与禽流感病毒接近.进化树显示三者来源皆为禽类,目前仍未发生突变;PB2的重要功能位点第627位氨基酸为谷氨酸,具有禽流感病毒的特点.结论 本次流感大流行为新型甲型H1N1病毒导致的同源爆发.但还不具备典型的高致病性,禽流感病毒可能参与了聚合酶基因的重排过程.     

2009年新型甲型H1N1流感病毒基质蛋白基因进化的新探讨

目的 探讨甲型H1N1流感病毒基质蛋白(M)基因的进化规律及M2蛋白的氨基酸替代情况.方法 从NCBI数据库下载甲型H1N1病毒M基因179条进行预分析,最终选取50条采用MEGA 4.0软件对其进行比对,采用NJ法构建进化树,同时采用MEGA 4.0软件对M2蛋白氨基酸序列进行比对.结果 不同地区新型甲型H1NI流感病毒M基因同源性高,达99.6%～100.0%,但与历史上流行的H1N1和H3N2流感病毒M基因差异较大,仅与1999-2002年间香港地区流行的H3N2亚型猪流感病毒同源性较近,为96.7%~97.7%.2009年流行的新型甲型H1N1流感病毒与历年来流行的H1N1人流感病毒相比,在第11、13、14、16、20、28、31、43、54、57、77、78、82、86、89、93位氨基酸位点发生了变异;与历年来流行的H1N1禽流感病毒相比,在第13、14、16、31、43、55、77、89位氨基酸位点发生了变异;与H1N1猪流感病毒相比,在第13、14、19、43、55位氨基酸位点发生了变异.2009年流行的甲型H1N1流感病毒与历年来流行的H3N2人流感病毒相比,在第11、13、16、20、28、31、43、54、57、77、78、82、86、89、93位氨基酸位点发生了变异;与历年来在欧亚大陆流行的猪流感病毒相比,所比较的19个位点均有部分毒株发生变异;而与1999-2002年间在香港流行的H3N2猪流感病毒相比,仅在第13、14、21、43位氨基酸位点发生变异.结论 此次新型甲型H1N1流感病毒M基因可能由香港地区流行的H3N2猪流感病毒重组而来.M2蛋白胞外编码区氨基酸位点发生变异,提示在疫苗研制方面应注意由此带来的影响.跨膜区的突变可能是导致此次新型甲型H1N1流感病毒对金刚烷胺类特异性抗病毒药物产生耐药性的原因,第43位氨基酸位点可能为引起此次耐药的主要位点.     

甲型H1N1流感的预防与治疗

甲型HIN1流感是由甲型H1N1流感病毒引起的急性呼吸道传染病。病毒主要通过气溶胶直接和间接接触在人际间传播,也可通过口腔、鼻腔、眼睛黏膜等接触感染者或其分泌物,以及被污染的环境等传播。人感染该病毒后会出现发热、咳嗽、疲劳及食欲缺乏等症状,但病死率较低。     

流感病毒快速检测法对甲型H1N1流感的临床诊断价值

目的 评价国产（A型）流感病毒快速检测试剂盒（广州万孚生物技术有限公司,中国）对甲型H1N1流感的临床诊断价值.方法 对2009年10月20日～11月23日本院发热门诊的符合流感样病例的患者35例,使用国产（A型）流感病毒快速检测试剂盒进行鼻拭子甲型H1N1流感病毒快速检测（简称快速试纸法）,同时取咽拭子行聚合酶链式反应（PCR）检测.结果 快速试纸法检测病毒阳性率为68.5%,PCR法流感病毒检出率为60%.与PCR法相比,前者的敏感性为90.4%,特异性为64.2%,阳性预测值79.1%,阴性预测值为81.8%.结论 快速试纸法检测有较高的敏感性,可以满足临床快速诊断甲型H1N1流感的需要.     

噬菌体展示技术筛选甲型H1N1流感病毒抗原模拟表位的研究

目的筛选特异性甲型H1N1流感病毒抗原模拟表位。方法应用噬菌体表面展示技术,以2009年甲型H1N1流感康复患者的血清作为固相筛选分子,对人工合成的噬菌体随机环七肽库进行3轮吸附-洗脱-扩增筛选。从顶部琼脂噬菌斑中随机挑取32个克隆至处于对数生长期的大肠埃希菌中培养,采用ELISA,交叉反应以及竞争抑制性实验筛选并鉴定阳性克隆,对阳性克隆进行DNA序列分析,对其编码的展示于噬菌体表面的氨基酸序列与流感病毒血凝素(HA)基因进行同源性比较,确定甲型H1N1流感病毒抗原的模拟表位。结果从随机挑选的32个克隆中得到12个阳性克隆,确定氨基酸序列PLHARLP为甲型H1N1流感病毒抗原的模拟表位,其表位由HA的第52,53,59,60,61,83,271位氨基酸共同构成。结论用噬菌体环七肽库筛选得到甲型H1N1流感病毒的模拟表位,为开展用流感病毒模拟表位探索新的流感防治方法奠定了基础。