p53基因第72密码子多态性与部分中国人瘢痕疙瘩关系的研究

目的 探讨p53基因第72密码子多态性分布与部分中国人瘢痕疙瘩易发性的关系。方法 采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态方法，检测60例瘢痕疙瘩组织和102例非瘢痕体质健康对照血液标本的p53基因第72密码子的基因型分布。结果 瘢痕疙瘩与非瘢痕体质患者血液标本p53基因第72密码子多态性分布无统计学意义（χ^2=2．910，P=0．233）；两组Arg和Pro等位基因分布频率也无统计学意义（χ^2=0．882，P=0．348）；中、日两国健康人群和瘢痕疙瘩人群的p53基因第72密码子多态性分布无统计学意义（χ^2=3．942，P=0．139；χ^2=3．260，P=0．196）；对于肩背部瘢痕疙瘩，与Pro／Pro基因型相比，Arg／Arg基因型具有统计学意义（P〈0．01）。结论 与非瘢痕体质患者相比，p53基因codon72部位多态性分布与中国部分人群瘢痕疙瘩发生无明显关系；但与其它基因型比较，Arg／Arg基因型可能对肩背部瘢痕疙瘩的形成具有影响，尚需进一步的研究调查p53基因codon72的多态性与不同部位瘢痕疙瘩发生的关系。     

瘢痕疙瘩发病风险与p53基因第72位密码子多态性的关系

目的 研究p53基因第72位密码子多态性与瘢痕疙瘩发病风险的关系。方法 采用聚合酶链反应-反向点杂交、DNA直接测序方法检测了45例瘢痕疙瘩患者与60名正常对照的p53基因第72位密码子多态性位点的基因型。结果 瘢痕疙瘩患者的Pro等位基因频率明显高于正常对照组(x^2=4．485，P=0．034)。瘢痕疙瘩患者的Pro／Arg、Arg／Arg基因型频率与正常对照组相比差异无统计学意义(x^2值分别为0．949和1．346；P值分别为0．330和0．246)，而瘢痕疙瘩患者的Pro／Pro基因型频率明显高于对照组(x^2=4．375，P=0．036)。提示Pro／Pro基因型者患瘢痕疙瘩的风险性明显高于Pro／Arg、Arg／Arg基因型者(OR=2．400，95％CI：1．048～5．498)。结论 p53基因第72位密码子多态性位点的基因型检测可能对判断瘢痕疙瘩高危个体具有指导意义。     

瘢痕疙瘩p53基因突变高发区基因结构的研究

目的 探讨p53抑癌基因在病理性瘢痕组织中的结构异常与临床病理的关系。方法 采用PCR-SSCP及基因测序技术，以增生性瘢痕及正常皮肤为对照，检测瘢痕疙瘩组织标本p53基因突变高发区外显子4～6的基因结构。结果 瘢痕疙瘩p53基因外显子4、5、6均存在突变，对照组未发现突变。结论 提示瘢痕疙瘩p53基因抑制细胞进程及介导细胞凋亡等功能丧失。     

瘢痕疙瘩p53基因检测试剂盒的研制

p53蛋白的聚集现象。并与p53基因突变或缺失有关。p53基因第4外显子的第72密码子具有CCC／GGC的单核苷酸多态性，其编码的氨基酸分别为脯氨酸(Pro)和精氨酸(Arg)。在前阶段研究中发现p53基因第72密码子多态性与瘢痕疙瘩的发生有关基础上，本实验旨在设计并装配成一套p53基因检测试剂盒，用于预测瘢痕疙瘩高危个体。     

瘢痕疙瘩成纤维细胞p53基因突变的研究

目的　探讨瘢痕疙瘩成纤维细胞中 p5 3基因第 4～ 8外显子的突变规律及其意义。　方法　取瘢痕患者手术切除的瘢痕疙瘩和增生性瘢痕标本各 12例 ,并设患者自身正常皮肤标本及血标本为对照。体外分离、培养上述组织标本的成纤维细胞。采用聚合酶链式反应 单链构象多态性(PCR SSCP)分析方法和基因测序法 ,检测各种组织成纤维细胞中p5 3基因的突变情况。　 结果　 12例瘢痕疙瘩标本中有 9例p5 3基因外显子 4、5、6、7出现点突变和移码突变 ,增生性瘢痕标本、正常皮肤标本及血标本中均未检出突变。　结论　p5 3基因突变是瘢痕疙瘩形成和发展的重要因素之一。     

增生性瘢痕和瘢痕疙瘩P53基因多态性的分析

目的 探讨p53基因codon-72部位的多态性分布是否与增生性瘢痕及瘢痕疙瘩的易发性有关。方法 以日本医科大学整形外科行手术治疗患者的切除瘢痕标本为材料，利用限制性片段长度多态性分析法(RFLP)及DNA序列分析法(DNA-sequence)，对54例瘢痕疙瘩标本和30例增生性瘢痕标本的p53基因codon-72部位编码精氨酸(Arg)和脯氨酸(Pro)的等位基因CGC(Arg)和CCC(Pro)进行了分析。结果 与正常日本人群外周血p53基因codon-72部位的多态性频度分布相比，瘢痕疙瘩差异无显著性，而增生性瘢痕则差异有显著性。此外，由穿耳孔所致的耳部瘢痕疙瘩CGC(Arg)基因型显著增高。结论 推测p53codon 72部位具有CGC／CGC(Arg／Arg)纯合型者耳部瘢痕疙瘩的发生率明显增高，具有CCC／CCC(pro／pro)纯合型者增生性瘢痕发生率增高。     

瘢痕疙瘩临床表型与p53基因72位编码子基因多态性的相关性分析

目的观察并探讨p53基因表达及其72位编码子基因多态性对瘢痕疙瘩临床表型的影响。方法取35例自愿捐献瘢痕疙瘩组织,男19例,女16例;病程4个月～8年。同时收集自身外周血作基因型分析。根据观察范围不同,实验共分为两组(n=35)。中央组:各瘢痕疙瘩中央部(中央2/3半径范围内);周边组:各瘢痕疙瘩周边部(周边1/3半径范围内)。两组再根据瘢痕疙瘩最大横径大小分3个亚组:<1cm为小体积组(n=5),1～3cm为中体积组(n=21),>3cm为大体积组(n=9)。采用PCR法扩增p53基因外显子4,并进行基因测序;免疫组织化学方法检测P53蛋白表达变化;TUNEL法检测瘢痕疙瘩组织中成纤维细胞凋亡,并进行统计学分析。结果瘢痕疙瘩p53遗传基因型为Arg/Arg者7例,Pro/Arg者21例,Pro/Pro者7例,与临床表型分布有相关性(P<0.05);中、小体积周边组及中央组P53蛋白染色阳性,大体积周边组偶见细胞染色阳性。基因型为Arg/Arg、Arg/Pro及Pro/Pro的标本吸光度值分别为3439.3598±538.5275、3273.1862±375.2139及1691.3729±98.9893,各基因型间比较,差异有统计学意义(P<0.05);TUNEL法检测成纤维细胞凋亡,镜下可见凋亡细胞呈均匀分布,大、中、小体积周边组凋亡细胞指数分别为31.0000±3.2660、42.3000±4.3548、44.6000±5.2536,各组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论瘢痕疙瘩临床表型与P53蛋白表达密切相关,组织中p53基因72位编码子基因多态性的变异有利于瘢痕疙瘩成纤维细胞凋亡。     

瘢痕疙瘩组织p53基因突变的实验研究

目的：分析瘢痕疙瘩中p53基因第4—8外显子的突变及其意义。方法：取手术切除的瘢痕疙瘩和正常瘢痕各12例，并分别取同一患者正常皮肤对照，采用聚合酶链反应-单链构象多态性分析方法(PCR-SSCP)和基因测序，检测各组织p53基因的突变情况。结果：12例瘢痕疙瘩标本中有9例p53基因外显子4、5、6、7出现点突变和移码突变，正常瘢痕标本、正常皮肤标本均未检出突变。结论：p53基因突变是瘢痕疙瘩形成和发展的重要因素之一。     

p53基因第72位密码子多态性与剖宫产术后病理性瘢痕的相关性

目的 研究p53基因第72位密码子(codon 72)多态性与剖官产术后病理性瘢痕发生的关系.方法 对广州医学院第三附属医院产科行剖宫产术的303例女性,于术后3～5d抽取外周静脉血2 ml,用荧光分子信标PCR法检测其血液标本的p53基因codon 72多态性.分别于术后第3、6、12个月对所有病例进行电话随访,其中有19例随访至18个月,观察其病理性瘢痕发生情况,以及其与p53基因codon 72多态性位点基因型的关系.用SPSS 13.0软件进行统计学分析.结果 303例产妇中发生病理性瘢痕增生30例,273例为正常愈合.2组产妇p53基因codon 72 3种基因型(C/C、C/G和G/G)频率总体上有显著差异;病理性瘢痕增生组产妇C/C基因型频率为46.7％(14/30),高于正常组的17.6％ (48/273),差异有统计学意义(P＜0.01);在病理性瘢痕增生产妇中,C/C基因型频率显著高于C/G型(33.3％,10/30)和G/G型(20.0％,6/30),差异均有统计学意义(P＜0.01);在病理性瘢痕增生产妇中,C等位基因频率为63.3％,也显著高于G等位基因频率(36.7％,P＜0.01),OR值为2.30.结论 p53基因codon 72 C等位基因与剖宫产术后病理性瘢痕的发生有一定的关联性.     

瘢痕疙瘩遗传易感性基因研究进展

瘢痕疙瘩（keloid, KD）是一种创伤后局部皮肤成纤维细胞过度增生以及胶原基质异常聚集所致的病理性瘢痕。其病因复杂,发病机制至今尚未明确。目前全基因组测序技术已逐渐取代传统的连锁分析技术,现已发现与瘢痕疙瘩关联的多条染色体上的多个易感位点,且可能有特异基因变异参与其中。现主要从遗传相关因素、易感基因以及基因多肽性等方面对瘢痕疙瘩发病机制的研究进展作一综述。     

ras和p53在甲状腺癌中的表达

目的 探讨ｒａｓ和ｐ５３基因过度表达在甲状腺癌发生中的相互作用,以及甲状腺癌的临床病理标准与ｒａｓ和ｐ５３基因过度表达的关系。方法 采用ＬＳＡＢ免疫组化法检测了ｒａｓ和ｐ５３在８０例甲状腺病变中的表达,其中５４例为甲状腺癌,２６例为良性甲状腺结节性病变。结果 ｒａｓ和ｐ５３在甲状腺癌和良性甲状腺结节性病变中的表达阳性率分别为９０．７％及２３．０％和５５．５％及３０．７％,两者相比较,差异有显著性意     

脑胶质瘤易感性与p53基因第72号密码子多态性的关系

目的 探讨p53基因第72密码子多态性和胶质瘤易感性的关系.方法 提取p53基因72密码子多态性与脑胶质瘤易感性关系的数据,筛选出符合条件的数据,应用Meta分析技术软件对各项数据进行异质性检验,计算合并相对危险度(OR)值及95％可信区间(CI),并行敏感性分析和发表便宜的评估.结果 本研究中共有9组符合条件的数据,病例组2319例、对照组3682例.Meta分析合并结果显示,12139C等位基因能够增加高加索人脑胶质瘤的发病风险(P=0.04,OR=1.25;95％ CI 1.01 ～1.55,Pheterogeneity=0.002).敏感性分析表明合并结果不受单个研究的影响.结论 p53基因第72号密码子的多态性能够增加高加索人脑胶质瘤的发病风险.     

P53 TUMOUR SUPPRESSOR GENE EXPRESSION IN HYPERPARATHYROIDISM

Background: Mutations of the p53 tumour suppressor gene lead to the loss of control of normal cellular proliferation and differentiation and have been shown to be associated with the development of malignancy. Method: Archival paraffin resection specimens from 86 cases of hyperparathyroidism treated surgically using the rabbit poly-clonal CM1 antibody were investigated to detect p53 immunoreactivity in these sections. Results: Eighteen of the 86 sections examined (21%) showed nuclear immunoreactivity. No correlation was detected between tumour histology and p53 immunoreactivity (P = 0.45). nor was there any correlation between tumour clonality and immunoreactivity (P = 0.54). Multiple endocrine neoplasia type I (MEN 1) status did not correlate with p53 immunoreactivity. A significant correlation between p53 immunoreactivity and preparathyroidectomy calcium levels of > 1.5 mmol/L was detected (P < 0.005) although no correlation was noted between p53 immunoreactivity and higher levels of preparathyroidectomy intact parathyroid hormone (PTH) levels. Conclusion: A relationship is postulated between abnormal serum calcium regulation and p53 mutation in hypercalcaemic states associated with hyperparathyroidism.     

原发性肝癌拓扑异构酶Ⅱα的表达及其与P53基因突变之间的关系

目的研究原发性肝癌拓扑异构酶Ⅱα(Topoisom eraseⅡ,αToPoⅡα)的表达及临床意义,并探讨其与p53基因突变之间的关系。方法免疫组织化学法和W estern B lotting方法检测57例未经化疗过的原发性肝癌肿瘤组织和32例肝硬化组织ToPoⅡα蛋白的表达,并用聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)分析p53基因7、8外显子的突变。结果To-PoⅡα蛋白在肝癌组织中阳性率为87.7%(50/57),在肝硬化组织中阳性率为50%(16/32),两者有显著差异(P<0.05)。蛋白印迹结果显示肝癌组织中ToPoⅡα蛋白表达显著高于肝硬化组织(P<0.05),高分化肿瘤与中、低分化的肿瘤组织之间有显著差异(P<0.05),有转移的病人高于无转移者(P<0.05).等级相关分析显示ToPoⅡα蛋白的表达与p53基因突变呈正相关(r=0.914,P=0.001)。p53基因突变组ToPoⅡ蛋白的表达显著高于野生型组(P<0.01)。结论ToPoⅡα的检测可作为肝癌分化程度的特异指标,同时p53基因突变可能诱导ToPoⅡα蛋白的表达。     

IMMUNOHISTOCHEMICAL DETECTION OF p53 PROTEIN OVEREXPRESSION VERSUS GENE SEQUENCING IN URINARY BLADDER CARCINOMAS

PURPOSE: Mutations of p53 tumor suppressor gene and nuclear accumulation of p53 protein are common in bladder tumors. The prognostic significance of p53 alterations in bladder tumors has not been established. The aim of the present study was to evaluate an immunohistochemical (IHC) method for the routine determination of p53 protein overexpression in human bladder tumors and to determine the relation between nuclear accumulation of p53 with the traditional prognostic indicators and patient survival. MATERIALS AND METHODS: 104 transitional cell carcinomas of the bladder were analyzed simultaneously by immunohistochemistry for p53 protein overexpression and direct DNA sequencing for p53 gene mutations. RESULTS: The overexpression of p53 protein was reported in 30.8% of the cases and mutations of p53 gene in 23.0%. A significant association was observed between p53 alterations established either by IHC or direct DNA sequencing and stage (p<0.0001), grade (p<0.001), vascular invasion (p = 0.0005), DNA ploidy (p = 0.0002) and carcinoma in situ (p<0.0001). The correlation between the p53 gene mutations and p53 nuclear reactivity as detected by IHC was highly significant (p<0.0001). Univariate statistical analysis showed that the expression of p53 was significantly correlated to poor prognosis (p<0.0001). However, in multivariate analysis, only stage was significantly correlated to prognosis (p<0.0001). CONCLUSIONS: The IHC method was highly sensitive and specific and simple to apply for the routine examination of p53 overexpression in bladder tumors. However, overexpression of p53 as determined immunohistochemically, does not appear to have a better predictive prognostic value than stage in bladder tumors.