G6PD缺乏红细胞膜磷脂含量及其不对称性改变的研究

目的：通过测定葡萄糖－６－磷酸脱氢酶（Ｇ６ＰＤ）缺乏红细胞膜磷脂的含量及其不对称性的变化，研究Ｇ６ＰＤ缺乏对红细胞膜结构的影响。方法：不对称性实验采用磷脂酶Ａ２处理完整红细胞，磷脂的测定采用高效液相色谱法。结果：正常红细胞膜磷脂酰乙醇胺（ＰＥ）、磷脂酰丝氨酸（ＰＳ）、磷脂酰胆碱（ＰＣ）含量分别为５．５９±１．１６，２．９２±０．５０，６．６４±０．９２ｍｇ／ｍｇ膜蛋白；Ｇ６ＰＤ缺乏红细胞膜ＰＥ、ＰＳ、ＰＣ分别为５．１８±１．８６，１．５１±０．５８，５．７０±１．９１ｍｇ／ｍｇ膜蛋白，两组中ＰＳ有显著性差异（Ｐ＜０．００１），说明Ｇ６ＰＤ缺乏红细胞膜ＰＳ含量降低。在正常人红细胞膜中有１７．６％±２．５％ＰＥ，５７．９％±４．７％ＰＣ在外层，外层未发现ＰＳ，在Ｇ６ＰＤ缺乏红细胞膜中有３０．２％±５．７％ＰＥ，５３．８％±７．４％ＰＣ，２７．２％±５．８％ＰＳ在外层，两组中ＰＥ和ＰＳ有显著性差异（Ｐ＜０．０１和Ｐ＜０．００１），外层的ＰＣ无明显变化，说明ＰＥ、ＰＳ均向外层移动。结论：由于Ｇ６ＰＤ缺乏，红细胞膜磷脂结构发生改变，是红细胞溶血的重要机制之一。     

G6PD缺乏患者红细胞膜蛋白质的改变

据估计 ,目前世界上罹患Ｇ6ＰＤ缺陷者达四亿多人。Ｇ6ＰＤ缺陷的基因频率在库尔斯克犹太人 (ＫｕｒｄｉｓｈＪｅｗｓ)为0 7,在非洲、美洲黑人、地中海国家和东南亚也高于 0 .1,而在中欧和北欧为 0 .0 0 0 5左右[1] 。我国主要分布于黄河流域以南各省 ,尤以广东、广西、海南、贵州、云南、四川发病率高(约 0 .0 4～ 0 .2 0 ) ,其中云南个别民族发病率高达 0 .3。据薛红漫等[2 ] 的调查结果 ,1897例儿童溶血患者中Ｇ6ＰＤ缺陷症占 40 .48% ,在Ｇ6ＰＤ缺陷溶血发病诱因中感染占 39.9% ,其次是药物。我们对Ｇ6ＰＤ缺乏时 ,受氧化的红细胞蛋白…     

G6PD缺乏红细胞膜功能改变的研究

Ｇ６ＰＤ缺乏红细胞膜功能改变的研究邹成钢田兴亚张春童淑芬张淑珍汪晓英我们研究了葡萄糖－６－磷酸脱氢酶（Ｇ６ＰＤ）缺乏时红细胞膜变形性、封闭度、阴离子通透性的变化，希望有助于进一步揭示Ｇ６ＰＤ缺乏导致红细胞破裂溶血的机制。材料和方法１材料１．１试剂：细...     

尿毒症患者红细胞膜表面磷脂分布的不对称性与其贫血的关系

有证据表明红细胞膜双层结构上磷脂的不对称分布是维持红细胞正常寿命的重要因素[1] 。磷脂酰丝氨酸 (ＰＳ)在红细胞膜表面上的过度表达可促进巨噬细胞和脾脏对红细胞的识别、吞噬和清除能力增强。我们在本实验中的目的是探讨尿毒症患者是否存在红细胞表面磷脂分布的不对称性改变及其与贫血的关系。对象和方法1　对象　血液透析患者 :随机选择我院 1984年 1月～ 2 0 0 0年 5月行血液透析治疗的患者 73例 ,其中女性 37例 ,男性 36例 ,平均年龄 (48± 12 )岁 ,透析时间 5个月～ 16年 ,平均每周透析 2～ 3次。腹膜透析患者 :随机选择我院 1996…     

G6PD基因突变与新生儿溶血症

G6PD缺乏是新生儿溶血症的主要病因之一,基因突变是造成G6PD缺乏的遗传基础。由于G6PD的基因引起氨基酸置换,影响了NADP＋和G6P的结合,或在立体构型上影响到二聚体的形成及其稳定性,导致G6PD活性降低,临床上产生新生儿溶血和黄疸症状。本文对与新生儿溶血症有关的G6PD基因突变及相关机制进行综述。     

高效液相色谱分析红细胞膜磷脂

高效液相色谱分析红细胞膜磷脂董伟，周建中，李新建，王汝刚研究细胞膜磷脂不仅可以阐明细胞的生理过程和病理现象，而且有助于疾病的诊断和治疗，我们采用高效液相色谱定量检测红细胞膜磷脂含量，旨为临床诊治提供可行的手段。材料和方法１红细胞膜的制备：健康或脓毒症...     

冻冻干燥G6PD反应试剂的制备及应用

根据葡萄糖－６－磷酸脱氢酶荧光斑点试验方法,制备冰冻干燥Ｇ６ＰＤ反应试剂,观察冰冻干燥试剂在保存中的稳定性,用该试剂定性测定正常人Ｇ６Ｄ缺乏者酶活性,并与Ｇ６ＰＤ活性定量测定结果比较。结果冻干Ｇ６ＰＤ反应试剂在４℃至少能稳定６ｍｏ。与Ｇ６ＰＤ活性直接测定结果比较,检测Ｇ６ＰＤ活性正常者标本,符合率为９２％－９６％,男性Ｇ６ＰＤ缺乏者,符合率为１００％。     

东莞地区 G6PD 缺乏症的分子流行病学研究

目的：了解东莞地区人群 G6PD 缺乏的流行特征,为本地区提供 G6PD 缺乏症基因突变、基因型及表型资料,完善本地区基因突变谱,并为制订本地区 G6PD 缺乏症的预防计划提供有价值的参考。方法收集2010年1月至2012年12月在我院进行体检的男性外周血样本,采用 G6PD/6PGD 比值法进行筛查,记录其 G6PD/6PGD 比值法检测结果,G6PD/6PGD＜l．5确诊为 G6PD 缺乏,阳性样本采用 PCR-RDB 进行基因诊断,同时随机抽取50例阴性样本作为对照组进行基因诊断。计算疾病检出率、基因突变、基因型频率和基因构成比。结果3885例样本中共检出302例表型阳性的 G6PD 缺乏症患者,检出10种基因突变和1种多态性位点,鉴定出12种基因型,另有3例样品未发现 PCR-RDB 检测的17种突变类型。50例阴性样本进行基因诊断均为阴性。东莞市男性人群 G6PD 缺乏表型阳性的群体检出率是7．77％,17种常见突变基因携带率是7．70％,各种突变类型的构成比依次为 G1376T（32．8％）、G1388A（34．1％）、A95G（12．4％）、G871A （3．7％）、G392T（3．7％）、C1024T（3．3％）。结论本研究阐述了东莞地区G6PD 缺乏的人群发生率和详细的基因突变谱和突变频率,研究资料为在该地区制订有效可行的 G6PD 缺乏预防计划提供有价值的参考。     

深圳盐田地区G6PD缺乏症发病率与基因突变调查

目的了解深圳盐田区G6PD缺乏症的流行现状、基因突变谱,探讨其诊断方法及流程。方法采用G6PD／6PGD定量比值法检测G6PD酶活性,反向点杂交及DNA测序检测G6PD基因突变。结果该区G6PD基因突变人群携带率为4．50％,基因突变以C．1388G〉A、c．1376G〉T和c．95A〉G为主。结论该区为包含其他罕见或少见突变类型的复杂G6PD基因突变谱,基于G6PD酶活性的表型筛查有明显的漏检率,基因检测结合表型筛查可大大提高诊断准确性与可靠性。     

云南傣族和瑶族G6PD缺乏的基因突变分析

目的 分析云南傣族和瑶族两种少数民族G6PD缺乏的基因突变型，了解云南少数民族G6PD缺乏症的分子遗传特征。方法 应用突变难扩增系统、PCR-单链构象多态性分析、DNA自动测序技术，检测分析云南21例傣族、15例瑶族G6PD缺乏病例。Exon12及部分Intron11的C6PD基因突变。结果 傣族中发现G1376T突变3例、G1388A突变13例，瑶族中发现G1376T突变8例、G1388A突变3例。其中在云南傣族13例G1388A突变中有5例复合IVS-11 C93T突变，瑶族8例G1376T突变中2例复合IVS-11 C93T突变。首次报道上述两种复合型突变在云南傣族和瑶族中的存在。结论 云南少数民族中G6PD缺乏症具有明显的遗传异质性，G1388A复合IVS～11 C93T突变、G1376T复合WS—11C93T突变在云南一些民族中有较高的发生率。     

葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏时红细胞膜带3蛋白酪氨酸磷酸化的改变

目的：从红细胞膜蛋白磷酸化改变的角度探讨葡萄糖－6－磷酸脱氢酶（G6PD）缺乏症溶血的机制。方法：Western blot法检测G6PD缺乏症的红细胞膜蛋白磷酸化的改变以及二硫苏糖醇（DTT）对蛋白磷酸化的影响；以对硝基苯磷酸（PNPP）为底物，测磷酸酪氨酸磷酸酶（PTPs)活性以探讨磷酸化改变的可能成因。结果：G6PD缺乏的红细胞膜带3（Band 3)蛋白酪氨酸的磷酸化水平较正常对照明显增多，而PTPs活性检测较正常对照组明显减弱；DTT处理的G6PD缺乏红细胞，其膜Band 3蛋白酪氨酸的磷酸化与未处理者无明显差异，PTPs活性检测结果与未处理者亦无显著差异。结论：氧化致使G6PD缺乏红细胞的PTPs活性减弱，膜Band 3蛋白酪氨酸磷酸化增强，成为红细胞溶血的一个重要原因。但PTPs巯基的改变并不是影响PTPs活性的唯一因素。     

Assay of erythrocyte glucose-6-phosphate dehydrogenase on the GEMSAEC analyser

A procedure for the assay of glucose-6-phosphate dehydrogenase (EC 1.1.1.49) in erythrocytes on the GEMSAEC centrifugal analyzer using a modification of Beutler's procedure is described. Glucose-6-phosphate dehydrogenase activity is corrected for the contributing activity of 6-phosphogluconate dehydrogenase (EC 1.1.1.44) by using a two-cuvet system in which the activity of the sample incubated with 6-phosphogluconic acid is subtracted from the activity produced in the presence of the combined substrates, glucose-6-phosphate and 6-phosphogluconic acid. An overlay program on the GEMSAEC computer for calculation of results, and the use of a yeast glucose-6-phosphate dehydrogenase control which is stable frozen in dilute solution are discussed.     

Acquired enzymopathy of erythrocyte glucose-6-phosphate dehydrogenase in acute viral hepatitis.

Erythrocyte glucose-6-phosphate dehydrogenase from patients with acute viral hepatitis has been purified and characterized. The enzyme showed decreased activity (relative to protein), reduced affinity for glucose 6-phosphate and was inactivated at 45 degrees C or at low pH values. The activity and properties of normal erythrocyte enzyme, incubated in vitro with blood plasma of patients, showed a similar pattern of modifications. Incubation with bilirubin affected the enzyme stability, but not its activity or affinity for substrate.