实时荧光PCR检测EGFR基因在新疆卡波氏肉瘤中的表达

目的检测EGFR基因在新疆卡波氏肉瘤（Kaposi’s Sarcoma,KS）中的表达并分析其-9KS发生发展的关系。方法应用SYBRGreenI作为荧光染料,以GAPDH作内参照,建立检测EGFRmRNA表达的实时荧光PCR反应体系,对经病理活检证实的7例KS肿瘤组织和瘤旁正常组织中EGFRmRNA的表达水平进行检测。结果KS肿瘤组织中EGFR表达水平低于瘤旁正常组织（t=-3．865,P〈0．05）,并且结果有统计学意义。KS肿瘤组织中EGFR的相对表达量为0．34±0．31,瘤旁组织中为1．24±0．78（P=0．008）。结论所建立的SYBRGreenI实时定量PCR方法可以成功地检测EGFR基因的表达量。KS肿瘤组织中EGFR表达水平低于瘤旁正常组织,差异有统计学意义。     

230例健康献血者卡波氏肉瘤相关疱疹病毒感染的血清学检测

卡波氏肉瘤相关疱疹病毒(Kaposi’s sarcomaassociated herpesvirus，KSHV)又称人疱疹病毒8型(HHV-8)，是1994年美国学者Chang等首先从AIDS患者卡波氏肉瘤(KS)组织中发现的一种新的肿瘤病毒，目前被认为是KS的致病因子。KS是AIDS患者最易患的一种血管瘤，在AIDS患者中的发病率可高达50％。后来的研究表明，KSHV与多中心性卡斯特莱曼病、原发渗出性淋巴病等多种疾病有关。另外，流行病学研究表明，     

安徽蚌埠地区卡波氏肉瘤相关疱疹病毒的血清阳性率研究

目的研究安徽蚌埠地区卡波氏肉瘤相关疱疹病毒(KSHV)在普通人群中的感染情况,并初步分析KSHV感染的危险因子。方法选择KSHV ORF65、ORF73和K8.1编码的病毒蛋白为抗原,采用酶联免疫法对1 008份普通人群血清进行了KSHV抗体检测。结果在检测的1 008份血样中,KSHV抗体的总阳性率为4.3%,其中男为3.9%,女为4.6%。统计学分析结果显示,KSHV感染率没有性别差异,在年龄上也基本无差异。结论在中国安徽北部地区的普通人群KSHV的感染率较低,且KSHV的感染与年龄及性别之间无明显相关性。     

卡波氏肉瘤相关疱疹病毒ORF65抗体的制备及其特异性检测

目的：制备高效价卡波氏肉瘤相关疱疹病毒（KSHV）病毒ORF65衣壳蛋白抗体并检测其特异性。方法将人工合成的ORF65蛋白抗原肽经弗氏佐剂乳化,在家兔背部、颌下等皮下多点免疫注射,间隔2周免疫,共4次。末次免疫后1周取兔血清,ELISA法检测兔免疫血清抗体IgG抗体水平。进一步采用免疫荧光、Western blot检测制备的抗血清中与ORF65结合的特异性。结果家兔在全程免疫后产生了高效价的特异性抗体,最高滴度达1∶12800。免疫荧光检测显示,与未经佛波酯（TPA）刺激的BCBL‐1细胞相比,兔抗血清主要结合于BCBL‐1细胞胞质,与ORF65蛋白在细胞内表达位置一致。Western blot结果显示在21 kD处有特异性蛋白条带,其大小与预期的ORF65蛋白大小相符,同时经T PA刺激的BCBL‐1细胞中ORF65蛋白表达量高于对照组,与ORF65蛋白裂解期蛋白的特性相符。结论用ORF65衣壳蛋白抗原肽段免疫家兔,可成功制备高效价的特异性抗血清,该抗体可与KSHV病毒ORF65蛋白特异性结合。     

卡波氏肉瘤相关疱疹病毒亚型分析研究

卡波氏肉瘤相关疱疹病毒为双链DNA病毒,基因组全长为160～170 kb。该病毒基因最早于1994年由美国哥伦比亚大学病理学家Chang等用代表性差异分析法首先在艾滋病患者并发的卡波氏肉瘤组织中发现。常用于KSHV亚型分析的基因片段有:ORF26、ORF75、K1、K15等。基于ORF26分型,最初采用的是330 bp和233 bp的ORF26基因片段,可将KSHV分为A、B、C三个亚型。目前,根据K1基因的多态性,主要将KSHV分为A、B、C、D、E、F亚型,各亚型在氨基酸水平上具有15%～30%的区别。目前,已知的K15有3个等位基因,分别是:P亚型、M亚型和N亚型。其中,N亚型与M型的核苷酸水平差异则高达90%。基于ORF75可以将KSHV分为A、B、C及N亚型。其中,A亚型主要流行于经典的KS患者,而B、C亚型主要见于非洲地区,同时所有亚型都在美国AIDS相关的KS患者中有发现。     

百色市献血人群中卡波氏肉瘤相关疱疹病毒DNA的套式PCR检测

目的了解百色市献血人群中卡波氏肉瘤相关疱疹病毒(KSHV)的流行状况。方法收集百色市部分无偿献血者肘静脉抗凝血474份,其中男259份,女215份,采用套式聚合酶链反应(n-PCR)方法对474例样本所提取的DNA进行KSHV特异性序列扩增,1.5%琼脂糖凝胶电泳,出现168bp条带为阳性结果。结果 474名献血者中9例阳性,阳性率1.90%;其中男性献血者中检出阳性者5例,阳性率为1.93%;女性献血者中检出4例,阳性率为1.86%。男女两组间阳性率采用χ2检验,差异无统计学意义(P>0.05)。结论百色市献血人群中存在KSHV的感染,不同性别献血者感染率差异无显著性。     

人类疱疹病毒-8型和卡波肉瘤

卡波肉瘤（KS）是一种起源于血管的恶性肿瘤,其病因不清。流行病学提示,KS可能是技感染因子引起的,许多因子曾被提出．但没有一个被证实。直到1994年,Chang等证实一个从未报道过的病毒DNA片段存在于卡波肉瘤组织基因组中。这种新发现的病毒被命名为人类疱疹病毒-8型（HHV-8）。令人信服的血清流行病学硬聚合酶链反应（PCR）资料提示HHV-8是感染源。为了探讨HHV-8与KS的关系．从6例KS石蜡切片中提取DNA．进行PCR和液相杂交。     

Kaposi肉瘤病因学研究进展

自1981年发现艾滋病(ALDS)相关型Kaposi肉瘤(KS)以来,KS的病因学研究取得了长足的进展,这些研究极大地丰富了KS的病因学内容,对于阐明KS的病因,具有十分重要的意义。一、遗传因素 KS的病因有地理和种族发生的背景,其发病率在不同人群和不同地域差异甚大,临床表现也不完全一样。经典型KS以欧洲东部、中部及地中海区域国家最常见,并有明显的种族好发倾向,尤其是意大利和犹太人种。在非洲呈地方性流行的非洲型KS也具有明显的种族好发倾向,主要见于赤道非洲的班     

艾滋病合并肝脏卡波氏肉瘤1例报告

患者男,33岁,汉族。因咳嗽、少量白色泡沫痰,伴恶心、腹泻10d于2003年12月10日入院。5个月前于外院检查人类免疫缺陷病毒（HIV）抗体阳性,明确诊断为获得性免疫缺陷综合征（AIDS）,行抗感染治疗欠佳,转我院住院治疗。我院X线胸片及胸部高分辨率（HRCT）检查提示卡氏肺囊虫肺炎（PCP）。     

有望治疗卡波济氏肉瘤的两种新药

接受蛋白酶抑制剂治疗(作为抗病毒疗法的一部分)的艾滋病(AIDS)患者不但能降低病毒荷载水平和增高T-细胞计数,而且还能降低卡波济氏肉瘤的发病率。卡波济氏肉瘤是一种与疱疹病毒-8感染有关的癌症。虽然最初的研究将这些抗癌作用归因于此类药物的抗病毒活性,但研究人员现已证实,蛋白酶抑制剂茚地那韦(indinavir)和沙奎那韦(saquinavir)也具有强有力的抗血管发生的作用。     

卡波式肉瘤相关疱疹病毒感染相关的模式识别受体

卡波式肉瘤相关疱疹病毒(KSHV)与人类卡波式肉瘤、原发性渗出性淋巴瘤及多中心Castleman's病有关。KSHV的主要靶细胞(B细胞和上皮细胞)表达大量的模式识别受体,可识别病原相关分子模式,并激活宿主的固有免疫反应,诱导干扰素、促炎症细胞因子等一系列抗病毒因子的产生,对抗病毒固有免疫的建立发挥着至关重要的作用。     

新疆卡波氏肉瘤患者与对照组血清细胞因子水平比较

目的：探讨血清细胞因子水平与卡波氏肉瘤(Kaposi‘s sarooma,KS)发病的关系。方法：采用酶联免疫法(Enzyme-linked immunoadaordent assay，ELISA)检测了13例KS患者和52例对照的血清血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor-α，TNF-α)、干扰素γ(Interferon-γ，IFN-γ)和白细胞介素(Interleukin-6，IL-6)浓度。结果：KS患者TNF-α，IFN-γ，IL-6和VEGF均高于对照组。血清TNF-α,IFN-γ，IL-6浓度在KS患者组和对照组间差异有显著性。VEGF在两组间无显著差异。结论：血清细胞因子TNF-α，IFN-γ，IL-6水平增加可能在KS发病中发挥一定的作用。VEGF与KS的关系有待扩大样本量后进一步检测,才能得出结论。     

卡波济肉瘤相关疱疹病毒体外感染人牙龈成纤维细胞初探

目的:探索卡波济肉瘤相关疱疹病毒(Kaposi's sarcoma-associated herpesvirus,KSHV)体外感染人牙龈成纤维细胞(human gingival fibroblast,HGF)的途径和方法,为研究KSHV导致口腔卡波济肉瘤病变的机制提供依据。方法:用12-O-十四烷酰佛波醇-13-乙酯(12-O-tetradecanoylphorbol-13-acetate,TPA)刺激人原发性渗出性淋巴瘤(primary effusion lymphoma,PEL)细胞系的BC-3细胞,收集细胞上清(含KSHV病毒颗粒),感染HGF细胞。观察细胞病变效应(cytopatric effect,CPE),采用RT-PCR和Western blot分别检测HGF细胞内KSHV编码基因的转录情况和蛋白表达水平。结果:KSHV感染HGF细胞后可出现CPE;感染后采用RT-PCR可检测到不同时间点ORF26和ORF73基因的转录;感染后12 h可检测到vIL-6蛋白的表达。结论:KSHV可感染HGF细胞并建立潜伏感染,为进一步研究KSHV导致的口腔KS发病机制提供了较好的体外模型。     

季德胜蛇药治疗艾滋病口腔及咽部卡波氏肉瘤

作者自1999年6月至2001年6月在莱索托王国中央医院工作二年以来，采用季德胜蛇药冶疗艾滋病口腔及咽部卡波氏肉瘤8例，取得一定疗效，报告如下：     

IL-10?IL-4及其受体启动子在人类单纯疱疹病毒1型激活卡波济肉瘤相关疱疹病毒复制过程中的启动活性分析

目的:分离和鉴定人类IL-10、IL-10受体(IL-10Rα)、IL-4及其受体IL-4Rα启动子序列,并分析IL-10、IL-4以及其受体的启动子在人类单纯疱疹病毒1型(HSV-1)激活卡波济肉瘤相关疱疹病毒(KSHV)过程中的启动活性.方法:以人类基因组DNA为模板,PCR扩增IL-10、IL-10Rα、IL-4Rα启动子区序列,并分别克隆载入pGL-3基本载体中虫荧光素酶(Luciferase)报告基因的上游.进一步将上述构建的重组质粒与本室保存的含IL-4启动子重组质粒分别转染HSV-1感染的BCBL-1细胞,并作Luciferase活性检测.结果:分离了IL-10、IL-10Rα和IL-4Rα的启动子区域序列,并成功克隆了含启动子序列重组报告质粒;HSV-1感染的BCBL-1细胞在进一步转染了IL-10、IL-10Rα、IL-4和IL-4Rα启动子重组报告质粒后,其Luciferase值与相应的对照比较显著升高(P＜0.05).结论:在BCBL-1细胞中,HSV-1可通过直接激活IL-10、IL-4以及相应受体的启动子来上调它们的表达;在HSV-1感染的BCBL-1细胞中,IL-10和IL-4可能对KSHV的裂解复制起到促进作用.