白色念珠菌腹腔感染对脾虚小鼠致病性的研究

目的:研究在脾虚状态下,小鼠对白色念珠菌免疫力的变化情况.方法:采用番泻叶泻下法造脾虚小鼠模型,经腹腔接种白色念珠菌菌液.观察小鼠的生存天数,用微量溶血分光光度法测定小鼠体液免疫功能.用双抗体夹心EusA法测定血清中υ-干扰素的含量,并进行小鼠肾脏内活茵茵数的测定.结果:与对照组比,抗体生成减少,血清中U-干扰素的含量减少,肾脏内活茵菌数增多,但脾虚小鼠生存天数没有明显变化.结论:脾虚小鼠对白色念珠菌的免疫力低于对照组.     

四君子汤对脾虚小鼠感染念珠菌后小肠组织中IFN-γ表达影响

目的:研究小鼠在脾虚时经口感染白念珠菌后经四君子汤灌胃治疗,检测小肠组织中IFN-γ mRNA及蛋白表达含量的变化,探讨脾虚小鼠在感染白色念珠菌经中药治疗后的免疫机制。方法:选取SPF级昆明种小白鼠,随机分组,经口感染白念珠菌,中药四君子汤灌胃治疗,采用RT-PCR和western-blot法检测各组小鼠小肠组织中IFN-γ mRNA及蛋白表达水平。结果:与空白对照组比,脾虚模型组、脾虚+白念珠菌、脾虚+白念珠菌+氟康唑组、脾虚+白念珠菌+四君子汤组小鼠小肠组织当中IFN-γmRNA及蛋白的表达含量在治疗后均显著上升(P0.05或者P0.01),有统计学意义。与脾虚模型组比较,脾虚+白念珠菌组、脾虚+白念珠菌+氟康唑组、脾虚+白念珠菌+四君子汤组小鼠小肠组织当中IFN-γ mRNA及蛋白的表达含量在治疗后均升高(P0.05或P0.01),有统计学意义。与脾虚+白念珠菌组比较,脾虚+白念珠菌+氟康唑组、脾虚+白念珠菌+四君子汤组小鼠小肠组织当中IFN-γ mRNA及蛋白的表达含量在治疗后均无统计学意义。与脾虚+白念珠菌+氟康唑组比较,脾虚+白念珠菌+四君子汤组小鼠小肠组织当中IFN-γ mRNA及蛋白的表达含量在治疗后无统计学意义。结论:当机体在脾虚状态下,经消化道感染白念珠菌后会导致免疫力下降,而四君子汤通过益气健脾,增强机体免疫力,起到治疗作用。     

黄芩苷对白色念珠菌超微结构的影响

目的 探讨黄芩苷对白色念珠菌超微结构的影响,进一步评价黄芩苷的抗真菌作用.方法 将黄芩苷作用12、24、48 h后的白色念珠菌制成超薄切片,置透射电镜下观察.结果 作用12 h透射电镜下可见细胞壁和细胞膜开始出现皱缩;24 h可见细胞壁有缺损,胞质内有空泡状结构及斑片状低电子密度区形成;48 h细胞壁界限模糊,部分溶解,细胞器及细胞核消失,整个细胞坏死,溶解.结论 黄芩苷通过破坏白色念珠菌的细胞壁使其超微结构发生明显的变化.     

多酚类化合物对白色念珠菌超微结构的影响

目的 :电镜观察白色念珠菌与多酚类化合物作用后形态和超微结构的改变 ,进一步评价该类化合物的抗真菌作用 ,探讨其抗真菌作用机制。方法 :将临床新分离的白色念珠菌与多酚类化合物共同培养 2 4h后 ,分离菌体 ,按常规方法进行样品处理 ,在扫描电镜与透射电镜下观察其细胞表面形态结构变化与细胞内超微结构变化。结果 :扫描电镜下观察可见酚类化合物作用后的白色念珠菌 ,细胞表面皱缩不平 ,细胞壁膜有严重皱折、变薄、剥脱等现象 ,并且质地变脆 ,有裂纹形成。透射电镜下可见 ,细胞壁不完整 ,局部有缺损 ,质地疏松 ,厚薄不均 ;细胞膜轮廓不清 ,不连续 ,有凸起 ;胞质不均匀 ,细胞内成分聚集固缩成电子密度较高的团块 ,且形成大量电子密度高的光亮区 ,间成有电子光点和空胞状物。结论 :酚类化合物与白色念珠菌作用后 ,可使其超微结构发生明显的改变 ,此改变表明了其抗真菌作用 ,并为其抗真菌作用机制的研究提供了线索。     

免疫抑制小鼠肺白色念珠菌病病理研究

目的:通过建立免疫抑制小鼠肺白色念珠菌病动物模型,研究肺念珠菌病病理改变,探讨念珠菌致肺部病理改变的机制。方法:从临床重症病人体内分离、鉴定、纯化白色念珠菌,并制备成2.0×109CFU/mL菌液;免疫抑制小鼠后经气道接种法、口饲给菌法、腹腔注射法、尾静脉注射法建立小鼠肺部感染白色念珠菌病模型,观察小鼠临床症状,并用颈椎脱臼法处死小鼠,解剖观察并取材,经病理切片观察肺部病变。结果:白色念球菌感染后小鼠出现异常行为,肉眼观肺脏体积增大、肺切缘呈钝角、颜色苍白、表面多个粟粒状灰白色斑点,镜下可见肺泡壁毛细血管高度扩张充血、肺泡间隔增宽、间质水肿、肺泡腔扩张、肺泡上皮增生和空泡变性、肺泡腔内充满淡红色水肿液。结论:可通过免疫抑制小鼠气道接种白色念珠菌法获取肺白色念珠菌病动物模型,用于研究肺部白色念珠菌致病理改变的机制。     

过氧化氢对白色念珠菌超微结构及通透屏障影响的研究

本文用电镜观察和对同位素标记物漏出检测的方法,研究了一定浓度的H_2O_2对C。albicans超微结构及其通透屏障的影响。电镜观察到经H_2O_2处理的C.albicans超微结构及表面形态发生改变,并伴有内容物漏出的征象。漏出物dpm值检测进一步证明,H_2O_2可引起C.albicansDNA漏出,且DNA漏出的量与细胞存活数间呈负相关,提示H_2O_2对C.albicans通透屏障的破坏,造成其内DNA漏出是细胞致死的重要原因之一。     

苦楝果浸出液对荷瘤小鼠及其感染白色念珠菌的影响

目的：探讨苦楝果对肿瘤生长及真菌感染的影响。方法：以Ｓ１８０ 荷瘤鼠感染白色念珠菌为实验模型，苦楝果浸出液治疗并检测肿瘤大小和念珠菌数量。结果：实验组荷瘤鼠的白色念珠菌检出量下降，肿瘤生长受到明显抑制。结论：苦楝果浸出液能提高机体细胞免疫功能，增强机体的吞噬作用。     

苦楝果浸出液对荷瘤小鼠及其感染白色念珠菌的影响

苦楝为一味有明显抑菌，杀菌和用的中药，以Ｓ１８０荷瘤鼠感染白色念珠菌为实验模型，进行苦楝果浸出液药理作用的体内研究。结果提示，苦楝果浸出注能使荷瘤鼠的白念珠菌感染量下降，肿瘤生长受到明显抑制，同时能提高机体红细胞免疫功能，增强机体对肿瘤和白色念珠菌的吞噬作用。     

脾虚小鼠肠道感染白色念珠菌的局部黏膜免疫机制研究

目的探讨脾虚小鼠肠道感染白色念珠菌的局部黏膜免疫机制。方法将60只小鼠随机分为空白组与脾虚模型组,每组30只。空白组小鼠正常饲养,脾虚模型组采用饮食不节加劳倦过度的方法进行造模。经过模型评价,模型复制成功后,对空白组与脾虚模型组进行亚组划分,空白组分为空白对照组和空白+白念组,脾虚模型组分为脾虚模型对照组和脾虚+白念组。对空白+白念组及脾虚+白念组小鼠经口感染白色念珠菌,空白对照组和脾虚模型对照组小鼠经口灌服等量蒸馏水。染菌后的第14天,处死小鼠,采用western-blot法检测各组小鼠小肠黏膜组织中分泌型免疫球蛋白A(s Ig A)和白细胞介素10(IL-10)的表达水平。结果与空白对照组比较,其余三组小鼠小肠黏膜组织中s Ig A蛋白表达水平显著降低,而IL-10表达水平明显上调(P0.01);与空白+白念组比较,脾虚模型对照组s Ig A表达明显上调,脾虚+白念组表达水平明显下调,而IL-10表达水平明显下调(P0.01);与脾虚模型对照组比较,脾虚+白念组小鼠小肠黏膜组织中s Ig A蛋白表达水平显著降低(P0.01),IL-10蛋白表达水平显著升高(P0.05)。结论脾虚状态的机体肠道黏膜免疫功能降低;小鼠发生感染后,机体的抗感染能力减弱。脾虚小鼠感染白色念珠菌后,感染程度加深,其小肠黏膜局部免疫功能受损较为严重,从而造成感染进行性加重。     

白念珠菌消化道感染对脾虚小鼠肠组织IgA变化的影响

目的:探讨机体在脾虚状态下对消化道感染白念珠菌的易感性。方法:本实验采用饮食失节加劳倦过度的复合因素制备小鼠脾虚证模型,经消化道感染白念珠菌,观察小鼠的体重变化及一般状况的改变,并检测粪便中的活白念珠菌数,应用酶联免疫吸附法(ELISA)测定脾虚模型小鼠肠组织表达的免疫球蛋白A(IgA)的含量。结果:脾虚感染组小鼠的体重下降明显(P<0.01),且一般状况欠佳,便活菌数持续增高,小肠组织IgA含量明显低于其它各组(P<0.01)。结论:机体在脾虚状态下对消化道感染白念珠菌的易感性增强。     

醋酸氢化考的松对小鼠白色念珠菌感染及吞噬细胞的影响

给小鼠静脉接种白色念珠菌(Candida albicans,C.α),再予皮下注射醋酸氢化考的松(HCA)。结果其死亡率及脏器带菌数均增加,肾脏病理变化严重。HCA可降低小鼠外周血单核细胞(MN)的百分率,升高中性粒细胞(PMN)的百分率,有抑制其吞噬及杀死C.α的能力及腹腔巨噬细胞(M_φ)的吞噬C.α的能力。     

基因疫苗干预对感染小鼠心肌组织病理及超微结构的影响

目的 探讨基因疫苗干预对柯萨奇病毒B组3型(coxsackie virus group B type 3,CVB3)感染后,小鼠心肌组织病理及细胞超微结构的变化及意义.方法 将BALB/C小鼠随机分为3组,每组11只,用空质粒pcDNA3、基因疫苗pcDNA3/VP1和融合基因疫苗pcDNA3/MDC-L19-VP1分别免疫,共3次,每次间隔4周.末次免疫后第3周,每组随机取3只小鼠,腹腔注射含3倍半数致死量(3 half lethal dose,3LD50) 的CVB3病毒液,感染后第7天将小鼠处死,用于检测血中病毒滴度,并取心脏组织进行病理观察和细胞超微结构观察.每组剩余8只小鼠,腹腔注射致死量病毒液,观察并记录动物存活情况.结果 预防性接种重组基因疫苗后,CVB3感染的小鼠生存率pcDNA3/MDC-L19-VP1组为37.5%,pcDNA3/VP1组12.5%,pcDNA3组11 d内全部死亡,3组生存率比较差异有统计学意义(P<0.01);3组小鼠血中的病毒滴度依次降低,且差异有统计学意义(P<0.01);光镜观察显示pcDNA3/MDC-L19-VP1 组小鼠心肌组织细胞未出现严重的水肿和炎细胞浸润,电镜显示心肌细胞未出现核周水肿,肌原纤维未见断裂溶解,线粒体、肌浆网等细胞器未见明显异常,仅有少量炎性细胞浸润.结论 融合基因重组疫苗可以有效的预防CVB3感染对心肌的损伤.     

胸腺肽对小鼠抗白色念珠菌感染作用的初步研究

白色念珠菌(简称白念菌)常感染免疫缺陷的宿主,甚或致死。据报道,胸腺激素制剂对某些免疫缺陷病、自身免疫病及病原微生物的重度感染有一定疗效。我们观察了胸腺肽对白念菌感染小鼠的影响及其所致细胞免疫功能的变化。     

两性霉素B脂质体对小鼠白色念珠菌感染的治疗观察

两性霉素B脂质体(L-AmpB)与未包封脂质体的两性霉素B((F-AmpB)的小鼠急毒试验LD_(50)分别为5．07mg·kg_(-1)和2．61mg·kg_(-1)。对全身性白色念珠菌感染的实验治疗,两者等剂量(1．0mg·kg_(-1)),小鼠存活率分别为55%和35%,差别不明显(p>0．05)。当F-AmpB剂量增加1．2mg·kg_(-1),大部分动物死亡,而L-AmpB加大至2．0mg·kg_(-1)和3．0mg·kg_(-1),存活率分别达到75%与85%,与F-AmpBl．0mg·kg_(-1)相比差别明显(p<0．01)。将各组存活动物饲养60天,取肾脏制成匀浆,进行真菌培养,除L-AmpB3．0mg·kg_(-1)组未见真菌生长外,其余各组均为阳性,提示:3．0mg·kg_(-1)可达根治效果。     

卡介苗免疫预防小鼠白色念珠菌感染的实验研究

目的探讨卡介苗（BCG）预先免疫对小鼠白色念珠菌感染的影响。方法采用BCG或灭菌生理盐水皮内注射预先免疫2周,然后由尾静脉注射白色念珠菌进行攻击,观察小鼠死亡率及计算存活小鼠肾组织带菌量。结果BCG免疫组存活时间长于生理盐水免疫组（P〈0.01）;存活小鼠肾组织菌落计数：BCG免疫组远少于省里盐水免疫组（P〈0.01）。结论BCG对小鼠白色念珠菌感染具有很好的保护作用。     

白色念珠菌经口感染ICR小鼠建立系统性感染模型

目的 探究白色念珠菌（C.albicans）经口感染ICR小鼠建立系统性感染模型,观察C.albicans经黏膜感染后在小鼠体内组织增殖及分布规律。方法 46只ICR雄性小鼠随机分为模型组A（n=20）、模型组B（n=20）、对照组（n=6）。模型组采用棉签法口腔接种C.albicans（7×10⁶cfu/mL）,对照组同方法接种等容积生理盐水。模型组A小鼠用于临床、生存、剖检观察试验;模型组B接种后第3、5、7天随机解剖5只小鼠用于组织载菌量和病理检验（对照组每个时间点解剖2只）,活菌平板计数法检测小鼠组织载菌量,光镜观察小鼠舌、胃、肝、肾病理组织学变化。结果 模型组小鼠接种后第3天舌面出现明显白斑并随时间加重引起死亡,第5天小鼠死亡率超过50%,第7天死亡率达100%,并能从舌（87.5%）、胃（87.5%）及内脏组织肝（54.5%）、肾（50.5%）、肺（20%）和心脏（4%）中分离到C.albicans,显微镜观察在舌、食道、胃、肝、肾存在菌丝的增殖,对照组未见C.albicans生长,提示模型组小鼠因C.albicans黏膜感染引起小鼠播散性的系统性感染。结论 C.albicans可在一定条件下突破黏膜免疫屏障引起小鼠机会性系统性感染,从而加重感染死亡。     

实验性白色念珠菌感染对小鼠脾细胞NK活性的抑制作用

以脾细胞为效应细胞，ＹＡＣ－１细胞为靶细胞，用ＬＤＨ释放法观察了白色念珠菌腹腔感染小鼠ＮＫ细胞活性的变化。结果表明，白色念珠严重感染可抑制ＫＮ细胞活性，以感染后４～８天抑制最明显，１６天左右恢复至正常，免疫功能低下小鼠更为受到白念菌的侵袭。     

乳酸杆菌对系统性白色念珠菌感染小鼠保护作用的实验研究

目的:探讨乳酸杆菌对系统性白色念珠菌感染的免疫抑制小鼠保护作用的机理。方法:建立系统性白色念珠菌感染小鼠模型,随机分为生理盐水对照组,低剂量、中剂量、高剂量组。造模后24h分别给予4组小鼠腹腔注射生理盐水,1×108、1×109、1×1010/ml乳酸杆菌悬液0.2ml/d×10。ELISA法检测小鼠血清IFN-γ、IL-12水平,MTT法测小鼠脾脏T淋巴细胞增殖活性,计算小鼠肾负荷真菌数。结果:中、高剂量组小鼠血清IFN-γ、IL-12水平与生理盐水对照组、低剂量组差异明显(P<0.05),中、高剂量组小鼠脾脏T淋巴细胞增殖活性与生理盐水对照组、低剂量组差异明显(P<0.05),中、高剂量组小鼠肾负荷真菌数与生理盐水对照组、低剂量组差异明显(P<0.05)。结论:乳酸杆菌可通过增强系统性白色念珠菌感染小鼠细胞免疫功能对其发挥保护作用,且保护作用与乳酸杆菌的剂量有关。