宣木瓜中重金属、农药残留及黄曲霉毒素的测定

目的考察宣木瓜药食安全性,为其质量控制提供依据。方法采用石墨炉原子光谱法、火焰原子光谱法以及原子荧光法,检测8批宣木瓜样品中铅、镉、铜、砷和汞的含量;采用气相色谱法检测相同样品中有机氯、菊酯类和有机磷农药残留;利用免疫亲和层析柱净化-超高效液相色谱法检测自然条件下贮藏1~2年的宣木瓜样品中黄曲霉毒素含量。结果采集的8批宣木瓜样品铅、镉、铜、砷和汞含量均未超出规定限量;有机氯、有机磷和除虫菊酯类农药残留量均在检测限以下,未能被检出;贮藏的6批宣木瓜样品黄曲霉毒素B1、B2、G1和G2总量均在检测限以下,未能被检出。结论来源于主产区的宣木瓜在重金属、农药残留及黄曲霉毒素的检查项目上均合格,呈现良好的药食安全性品质。     

检测中草药提取物中黄曲霉毒素的高灵敏方法

目的建立中草药提取物中黄曲霉毒素B1,B2,G1,G2的高灵敏测定方法。方法样品经提取和过滤后用免疫亲和柱净化和衍生,然后采用不同比例(15%~30%)乙腈/水梯度洗脱,用具荧光检测器的高效液相色谱仪检测。结果检出限:黄曲霉素G1为0.09 ppb;B2为0.02 ppb;B1为0.03 ppb;G2为0.04 ppb,均低于文献报道的检出限,样品加标回收率为90%~103.2%。结论该方法简单、快速、准确、灵敏度高,可用于中药中黄曲霉毒素含量的测定。     

酶联免疫吸附法和薄层色谱法联合分析黄曲霉毒素B1的研究

目的 研究酶联免疫吸附法和薄层色谱法的特点，评价联合两种方法检测黄曲霉素B1的可行性。方法 应用酶联免疫吸附法进行初步筛选试验和最终定量分析，以薄层色谱法进行确证试验。结果 黄曲霉毒素B1含量为1．0～20．00μg／kg范围内，标准曲线r值为-0．993～-0．999，CV为0．4～2．6％，回收率92．0～105．0％，当酶联免疫吸附法测定结果为10.0～45．0μg／kg范围内，应用薄层色谱法进行确证试验，符合率达100％。常见的其它霉菌毒素干扰试验表明，该方法特异性反应好，无干扰现象。结论 酶联免疫吸附法是目前国际测定黄曲霉毒素B1的先进方法，灵敏度高，干扰少，测定步骤简便、快速、操作安全。薄层色谱法中的确证试验是利用三氟醋酸和黄曲霉毒素B1的特异性反应所生产的衍生物，确证黄曲霉毒素B1。结合国际先进酶联免疫吸附法和传统方法的优点，科学地实现了快速、可靠、准确测定黄曲霉毒素B1的目的。     

免疫亲和柱-HPLC柱后光化学衍生法测定中药饮片中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2的含量

目的：建立中药饮片中黄曲霉毒素（ AF）B1、B2、G1、G2含量测定的方法。方法：收集中药饮片87批,用免疫亲和柱进行AF的分离处理,采用高液相色谱（ HPLC）柱后光化学衍生化法测定中药饮片中AFB1、AFB2、AFG1、AFG2含量并进行方法学分析。结果：被测定的AFB1、AFB2、AFG1、AFG2的检出限分别为0.7、0.3、0.6和0.3μg/kg,在选定的范围内线性关系良好（ r≥0.999）,精密度试验、重复性试验、准确度试验及标准样品验证试验结果均良好,87批中药饮片均未检出黄曲霉毒素。结论：免疫亲和柱-HPLC柱后光化学衍生化法操作简便,专属性强、灵敏度高,检测中药饮片中AFB1、AFB2、AFG1及AFG2的含量准确可靠。     

高效液相色谱法测定食品中黄曲霉毒素

目的建立HPLC测定食品中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2含量的方法。方法采用ALLSPHERE ODSLENGTH250×4·6mm色谱柱,分析时间18min左右,流动相为乙腈/水(梯度洗脱),流速:1·2ml/min,荧光检测器:激发波长360nm,发射波长440nm。结果线性关系良好,4种黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2的回收率在87·8%~102·1%之间,变异系数2·33%~3·48%,最低检出浓度B1、B2、G1、G2分别为0·20μg/kg,0·05μg/kg,0·20μg/kg,0·05μg/kg。结论应用高效液相色谱仪检测食品中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2,操作安全、快速、准确度高、精密度好。     

UHPLC法测定食品中黄曲霉毒素的含量

目的建立一种同时测定食品中多种黄曲霉毒素含量的方法.方法采用UHPLC法同时测定食品中黄曲霉毒素B1、B2、G1与G2,并建立回归方程,考察方法的准确度与精密度.结果在各自的线性范围中,黄曲霉毒素B1、B2、G1与G2的浓度c(μg/L)与峰面积A呈现良好的线性关系(r>0.999).食品样品的平均回收率为83.4%~107.5%.黄曲霉毒素B1、B2、G1与G2的相对标准偏差RSD为2.21%、2.79%、3.62%、2.57%(n=5).结论 UHPLC法操作简便、线性范围较广、灵敏度高、准确度和精密度良好,是实用的黄曲霉毒素检测方法.     

超高效液相色谱法检测食品黄曲霉毒素

目的 建立一种快速、灵敏、简便的超高效液相色谱法(UPLC)同时测定食品中黄曲霉毒素B1(AFB1)、B2(AFB2)、G1(AFG1)、G2(AFG2)水平的方法.方法 样品用乙腈水(84:16)提取液提取后过滤,滤液经黄曲霉毒素多功能净化柱(MFC)净化,纯化液经浓缩挥干后,加三氟乙酸(TFA)衍生后,用带有荧光检测器的超高效液相色谱仪测定.结果 4种黄曲霉毒素5min完全分离,线性范围质量浓度分别为0.10～100.00μg/L(AFB1、AFG1)、0.05～50.00μg/L(AFB2、AFG2),最低检出质量分数分别为0.04μg/kg(AFB1、AFG1)、0.02μg/kg(AFB2、AFG2),大米、玉米、花生、油炸面点回收率为80.0%～101.2%,相对标准偏差＜5%,r≥0.999.结论 该方法简单、快速、灵敏度高,适用于食品中4种黄曲霉毒素水平的同时测定.     

LC-MS/MS法检查中药制剂及保健食品中非法添加的16种镇静催眠药物

目的:建立准确、灵敏的LC-MS/MS方法甄别中药制剂及保健食品中可能添加的16种化学镇静催眠药物,以打击中药制剂及保健食品中非法添加化学药物现象。方法和结果:采用Waters Sunfire C18色谱柱,梯度洗脱:流动相A为20mmol/L醋酸铵溶液,流动相B为甲醇,检测波长为230 nm,流速为1 mL/min(分流比为4∶1)。选择正负离子全扫描方式检测临床常用的16种镇静催眠药物。利用质谱解析软件研究上述药物的质谱裂解规律,通过比较样品峰与对照品峰的一级质谱、二级质谱质荷比,确定样品中是否掺杂了化学药物。LC-MS/MS方法测定上述化学物质的最小检出量为1~40 ng。结论:该方法简便、快捷,灵敏度、准确性均可满足定性检查的要求。     

解读致癌物黄曲霉素

<正>1.黄曲霉素是什么黄曲霉素是黄曲霉菌属黄曲霉菌和寄生曲霉菌产生的代谢物。黄曲霉毒素不是一种化合物,而是一组化学结构类似的化合物总称。至今已分离出的黄曲霉毒素及其衍生物有二十多种,包括B1、B2、G1、G2、M1等毒素和毒醇。在天然食物中以黄曲霉毒素B1最为多见,危害性也最强,而牛奶检测超标的黄曲霉M1 B1     

中药黄曲霉毒素检测方法学的改良研究

目的 对黄曲霉毒素检测方法中的参数进行优化,完善2010 版药典的黄曲霉毒素检测方法.方法 本实验改用70% 的甲醇作为溶剂,调整流动相的比例及样品提取中离心机转速.结果 被测各组分之间有很好的分离度,有很好的峰型.B2 和G2 的最低检出限为0.07g/kg,B1 和G1 的最低检出限为0.10g/kg,回收率83.1%-94.6%,RSD3%-5%.结论 采用此方法检测常用中药材中的黄曲霉毒素无干扰性杂峰,结果准确可靠.     

广州市市售粮油食品中黄曲霉毒素B1的污染调查分析

目的对2016-2017年广州市市售粮油食品中黄曲霉毒素B1进行监测,为广州市市售粮油食品黄曲霉毒素B1风险评估工作提供基础数据。方法在广州市11个区随机采集粮油样品五大类共550份,按照GB/T 18979-2003《食品中黄曲霉毒素B1的测定免疫亲和层析净化高效液相色谱法和荧光光度法》进行检测。检测结果依据GB 2761-2017进行评价。结果 550份样品中共有74份检出黄曲霉毒素B1,检出率为13.4%,总体超标率为0.9%。结论广州市市售五大类粮油食品黄曲霉毒素B1污染水平不高,但花生油黄曲霉毒素B1检出率较高,非正规厂家生产的花生油黄曲霉毒素B1含量超标率比正规厂家生产的花生油高。     

ELISA法测定混合饲料多种霉菌毒素污染的研究

目的研究ELISA法检测饲料中伏马菌素、黄曲霉毒素、赭曲霉毒素、脱氧雪腐镰刀菌烯醇、T-2毒素的可行性,并对深圳市售玉米混合饲料污染状况调查。方法采用竞争ELISA法,检测玉米混合饲料中伏马菌素、黄曲霉毒素、赭曲霉毒素、脱氧雪腐镰刀菌烯醇、T-2毒素污染状况。结果伏马菌素浓度为0．25～5．0mg/kg之间的变异系数（CV,％）为1．0-7．0;黄由霉毒素浓度为1．0～20．0μg／kg之间的变异系数（CV,％）为1．0-7．5;赭曲霉毒素浓度为2．0～40．0μg／kg之间的变异系数（CV,％）为2．0-7．5;脱氧雪腐镰刀菌烯醇浓度为0．25～5．0mg／kg之间的变异系数（CV,％）为1．0～8．0;T-2毒素含量浓度为75．0～500．0μg／kg之间的变异系数（CV,％）为2．0-7。结论ELISA法检测玉米混合饲料中几种毒菌素的污染,显示方法灵敏度高、干扰少、测定步骤简便、快速、操作安全、测定结果准确可靠。建议日常工作中先用ELISA法快速筛选检测,阳性样品再用液相色谱-质谱联用仪分析法、薄层法进行确证实验。     

抗抗总黄曲霉毒素单抗F(ab’)2多克隆抗体的制备及特性

目的:以抗总黄曲霉毒素单抗2G2株F(ab’)2片段作为免疫原制备抗抗总黄曲霉毒素单抗独特型多克隆抗体。方法:制备抗总黄曲霉毒素单抗2G2株F(ab’)2片段,分别用F(ab’)2片段和F(ab’)2-KLH免疫日本大耳白兔,制备抗抗总黄曲霉毒素单抗独特型多克隆抗体。采用ELISA检测该抗体替代黄曲霉毒素B1(AFB1)的情况,并分析与其他单克隆抗体的交叉反应情况。用该多克隆抗体免疫BALB/C小鼠,采用间接非竞争ELISA检测小鼠血清,鉴定该抗体的亚型。结果:由2G2株F(ab’)2片段所得的抗抗总黄曲霉毒素单抗独特型多克隆抗体纯化后,替代游离AFB1达到20%、50%和80%竞争抑制时的质量浓度分别为1、4和25mg/L,分别相当于0.47、2.74和16.00μg/L游离AFB1;该抗体替代AFB1包被抗原达到20%、50%和80%竞争抑制时的质量浓度分别为1、4和19mg/L,分别相当于0.33、1.35和5.45μg/L游离AFB1。小鼠生物鉴定显示该多克隆抗体为Ab2β型。结论:成功制备了抗抗总黄曲霉毒素单抗独特型多克隆抗体,为研制AFB1无毒检测试剂盒提供了依据。     

中药黄曲霉毒素检测方法学的改良研究

目的探究改良黄曲霉毒素检测方法的应用价值。方法本研究应用的溶剂为70.0%的甲醇,对流动相的比例进行调整,并对样品提取中离心机转速进行相应的调整。结果所得出的分离度很好,所形成峰型理想。不管是B2,还是G2,它们的最低检出限为0.074g/kg。不管是B1,还是G1,它们的最低检出限为0.107 g/kg。回收率均值最大为94.6%,最小为83.1%。结论对黄曲霉毒素检测方法进行如此改良,可以将经常使用的中药中的黄曲霉毒素无干扰性杂峰识别出来,获得的结果既具有很好的准确性,又具有很好的可靠性,具有应用和推广的价值。     

酶联免疫吸附法测定黄曲霉毒素B1

目的　检测食品、饲料中黄曲霉毒素B1 。方法　采用先进的AgraQuantTM黄曲霉毒素检测试剂盒和StatFax 3 0 3Plus酶标读数仪 ,联合分析黄曲霉毒素B1 。结果　该方法与薄层层析法等各种方法相比具有灵敏度高、干扰少、测定步骤简便、快速、操作安全、设备投资少、测定结果准确可靠的优点。结论　该方法的测定结果令人满意 ,是目前测定黄曲霉毒素B1 较为理想的方法     

液-质联用技术鉴定安立生坦有关物质

采用液相色谱-飞行时间质谱(LC-TOF/MS)和液相色谱-二级质谱联用(LC-MS/MS)两种液-质联用技术对安立生坦有关物质进行结构鉴定。采用XBridge C₁₈(4.6 mm×150 mm,3.5 μm)色谱柱,以乙腈-水溶液(含0.15%甲酸)为流动相线性梯度洗脱,对安立生坦及其有关物质进行分离;通过电喷雾正离子化TOF/MS检测,并结合MS/MS碎片和对照品对照鉴定各有关物质的结构。在建立的色谱条件下安立生坦及其有关物质均分离良好,共检测到10个有关物质,并通过联用技术和有机反应机制解析确证了它们的结构。液-质联用技术能够有效地鉴定安立生坦有关物质,为其质量控制和工艺优化提供参考依据。     

PCS药材中大黄素的提取分离和结构确证

目的 从PCS药材中提取分离大黄素(Emodin),并进行结构确证.方法 乙醚提取PCS药材的脂溶性成分,用碱性水溶液自乙醚中萃取游离的大黄素,并经过柱层析、重结晶获得纯化的大黄素样品.运用熔点测定、紫外光谱、红外光谱、质谱和核磁共振技术,通过与对照品相应数据的比较来确证样品结构. 结果大黄素样品的mp、UV、IR、1H-NMR、MS数据与对照品相应数据基本一致.结论确证样品为大黄素.     

色谱-质谱联用技术研究盐酸西那卡塞的有关物质

采用LC-MS法分离和鉴定盐酸西那卡塞有关物质。采用Hypersil C₁₈(100 mm×4.6 mm,2.4 μm)色谱柱,以0.1%乙酸铵溶液-乙腈(93∶7)为流动相A相,乙腈为流动相B相进行线性梯度洗脱,对盐酸西那卡塞有关物质及强制降解产物进行分离。经过电喷雾正离子化-高分辨TOF/MS检测,同时结合MS/MS光谱和对照品对照,对各有关物质进行分析鉴定。在所建立的液-质联用分析条件下,盐酸西那卡塞及其有关物质得到有效的分离,共检测到10个有关物质,分别为盐酸西那卡塞合成起始原料(1个)、合成中间体(1个)、合成副产物(4个)和降解产物(5个)。建立的LC-MS法能有效鉴定盐酸西那卡塞有关物质,并为其质量控制和工艺优化研究提供参考依据。     

广西肝癌高发区花生中二甲基亚硝胺及黄曲霉毒素B_1的初步探讨

对30份肝癌高发区的花生样品进行化学方法提取和纯化后,用高压液相色谱仪同时进行二甲基亚硝胺和黄曲霉毒素B_1的检测,结果显示:30份样品中检测出二甲基亚硝胺和黄曲霉毒素B_1的各占50.0％(15/30),在同一份样品中同时检测出二甲基亚硝胺和黄曲霉毒素B_1的占30.0％(9/30)。结果表明肝癌高发区的花生除被黄曲霉毒素B_1严重污染外,同时也被二甲基亚硝胺严重污染,提示对花生防霉去毒的必要。     

抗总黄曲霉毒素单克隆抗体2G2 F(ab'')2片段的特性

目的:研究经无花果蛋白酶酶切后所得的抗总黄曲霉毒素单抗2G2 F(ab′)2片段的特性,为研制开发特异性、灵敏度较高的黄曲霉毒素B1抗独特型单克隆、多克隆抗体提供科学依据.方法:在制备出抗总黄曲霉毒素单克隆抗体2G2株及其2G2 F(ab′)2片段的基础上,采用非还原SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳(非还原SDS-PAGE)和酶联免疫吸附法(ELISA)对单抗2G2及其F(ab′)2片段的特性进行研究并加以比较.结果:单抗2G2 F(ab′)2片段和单抗2G2的相对分子质量分别为105 000和180 000.单抗2G2 F(ab′)2片段和单抗2G2的比效价分别为3.33和1.25.单抗2G2 F(ab′)2片段的最低检出限和达到50%竞争抑制率时的检出限分别为0.17 μg/L和0.67μg/L,单抗2 G2的分别为0.47 μg/L和1 92 μg/L.单抗2G2 F(ab′)2片段的亲和力常数为2.95×10-9 mol/L,单抗2G2的亲和力常数为1.52×10-10 mol/L.结论:单抗2G2 F(ab′)2片段灵敏度优于完整抗体,可利用其生产特异性和灵敏度较高的黄曲霉毒素B1抗独特型多克隆和单克隆抗体.