中药蛇六谷两种药用基原鉴别研究

目的针对中药蛇六谷药材基原混乱的现状,研究建立基原为魔芋和疏毛魔芋的专属性鉴别方法。方法收集不同产地蛇六谷药材,采用原植物形态性状鉴别、显微鉴别、薄层色谱法对中药蛇六谷药用基原魔芋和疏毛魔芋进行定性鉴别。结果建立了蛇六谷两种基原魔芋和疏毛魔芋的专属性显微鉴别和薄层鉴别。结论建立的鉴别方法可有效区分魔芋和疏毛魔芋。     

40种蛇类动物骨骼的鉴别

报道了40种蛇类动物(主要是药用蛇)的骨骼鉴别检索表,可供去皮蛇类药材鉴别时应用。     

广东梅州市野生红冬蛇菰的资源调查和鉴别研究

目的对广东梅州地区野生红冬蛇菰进行资源调查和生药学特征鉴别研究,为其资源的合理利用、保护以及品种鉴别提供参考依据。方法采用实地采样调查方法进行资源调查,采用原植物形态特征、性状鉴别、显微鉴别方法进行质量标准鉴别研究。结果详细描述了野生红冬蛇菰的原植物形态特征、药材性状特征、横切面组织构造及其粉末显微特征。明确了梅州市野生红冬蛇菰分布情况及蕴藏量。结论该研究可为梅州市野生红冬蛇菰的品种鉴别、资源保护及进一步开发利用提供一定的参考。     

脱氧核糖核酸分子遗传标记技术在中药鉴定中的应用

中药传统从基原、性状、显微及理化等方面进行药材品种的鉴别。这些方法简便易行 ,对于植物药、矿物药和大多数以整体入药而保持其分类学性状特征的动物药的鉴定确实是行之有效的 ,所以一直沿用至今。然而一些局部入药的动物药材或经过多道工序炮制加工后的药材或是道地药材 ,有的失去其原本性状而难辨真伪 ,有的难以分辨品质优劣。尤其是道地药材和贵重的动物药材 ,如熊胆、鹿鞭、牛黄等 ,由于传统的鉴别方法难以很好进行鉴别 ,造假问题尤其严重 ,阻碍着中药的发展 ,这一矛盾亟待解决。近 10年来 ,分子生物学技术在农业、生物工程、环境保…     

云南产主要药用石斛的鉴别研究进展

目的:云南境内石斛除了《中国药典》收载品种外,其他品种应用也较广泛,为规范石斛市场,区别药用石斛的良莠。方法:对主产药用石斛已有的性状鉴别、显微鉴别、理化鉴别、DNA分子鉴别等方法进行系统归纳整理,总结综合鉴别方法,为区别石斛属药材及其混淆品提供有效手段。结果:性状可鉴别伪品,但同科属的近似品种则需用显微鉴别、理化鉴别及DNA分子鉴别。结论:石斛类药材作为重要的药用植物,利用多学科理论知识和技术手段是解决石斛品种混淆的有效方法。     

生药本草学家谢宗万治学经验录

谢宗万先生一直致力于研究考证中药材品种基原,鉴别药物的真伪优劣,澄清中药混乱品种。他善于在复杂的异物同名药物中,结合药材传统经验鉴别考证出我国历代传统药用正品中药,区别出地区的习用品和其他错用、混用品。近年来,在多年中药品种调查研究实践     

蛇类中药饮片分子鉴别方法的研究进展

蛇类中药饮片具有较高的临床药用价值,具有抗炎、镇痛、通络等功效,药理作用明显。近年来,由于野生动植物资源匮乏、蛇类中药饮片价格昂贵,市场上出现了很多伪品和混淆品。传统的中药饮片鉴别方法包括基源、形态、显微、理化鉴别四大方法体系,但这些方法都存在一些弊端,包括对中药样本有较高的形态学要求、鉴别过程复杂、易受主观因素影响等。随着分子生物学研究的深入和分子遗传标记技术的发展,中药鉴别方法逐渐多元化,一些新兴的理论和技术被引入中药材鉴别领域,RAPD技术、PCR反应、DNA条形码分析等。该文将着重对当前蛇类中药饮片的分子鉴别方法作简要综述。     

乌梢蛇鉴别技术研究

乌梢蛇,出自《本草纲目》,又名乌蛇,始载于《开宝本草》,主要在中国分布,国外未见报道。乌梢蛇作为的临床功效确切的中药材,其质量鉴别技术至关重要。全文就20年来鉴别技术的研究发展,从传统技术和现代鉴别技术2个方面阐述,主要包括性状、显微、色谱法、PCR技术以及电泳等鉴别方法。对近年来乌梢蛇基于PCR技术,开发一系列高效、准确的分子水平的鉴别方法及基于化学成分分析,高效毛细管电泳技术的应用进行了总结概述,为以后蛇类鉴别技术的发展以及研究奠定了基础,也为动物药的质量保证的提供参考。     

蛇类药材的性状鉴别

鉴于目前流通领域中蛇类药材的品种混乱情况比较严重,缺少简便而有效的鉴别手段,本文对收集自全国10个省区的263件蛇类药材及其伪、混品标本共14种进行了生药性状描述,归纳了《中国药典》(1995年版)所载三种正品蛇类药材的鉴别要点,并编制了蛇类药材及其常见伪、混品的性状鉴定检索表。     

运用传统经验快速检定中药

常用中药品种繁多 ,形态各异 ,给我们对中药的真伪优劣鉴别带来一定困难。为确保饮片质量 ,应逐步采用现代化检测手段对药品进行检验 ,但在目前中药现代化刚刚起步时期 ,许多单位条件不具备。在这种情况下 ,传统的眼看、手摸、鼻闻、口尝、水试、火试等传统的性状鉴别方法 ,仍不失为一种简单易行、能迅速初步判定所查品种真伪优劣的快速检定方法 ,不失为现代检测手段的补充。每种中药材都有自己独特的特异性特征 ,运用性状快速鉴别方法 ,最主要的特点就是掌握正品药材的特异性特征 ,驾简驭繁 ,凡不具备该品种特异性特征的检验品 ,即可认定为…     

地龙的多重位点特异性PCR鉴别

目的:近年来,中药材地龙的商品价格不断上涨,市场的混伪品随之增加。其主要鉴别特征在药材中大部分丢失,难以区分。因此,急需建立一种准确、稳定的中药材地龙基原鉴别方法。方法:根据地龙及其混伪品的COI基因序列差异找到变异位点,从而设计参环毛蚓、通俗环毛蚓、威廉环毛蚓及栉盲环毛蚓的特异性鉴别引物,优化反应体系并进行耐受性和适用性的考察和验证。在此基础上将特异性引物组合,构建多重聚合酶链式反应(PCR)体系,从而建立了一种高效准确、操作简便、专属性强、重复性好的中药材地龙及其常见混伪品的多重位点PCR鉴别方法。结果:在该方法下广地龙基原参环毛蚓可得到366 bp片段,沪地龙基原通俗环毛蚓和威廉环毛蚓可得到487 bp片段,栉盲环毛蚓可得到475 bp片段,其他混伪品均无条带。将之组合形成的多重PCR可在一次鉴定操作中根据条带位置同时鉴别沪地龙和广地龙。结论:该文所建立的多重位点特异性PCR鉴别方法可准确鉴别中药材地龙真伪。     

败酱草及其混伪品的显微鉴别特征与HPLC指纹图谱研究

目的 对败酱草Herba Patriniae及其市场常见混伪品的显微鉴别特征和HPLC指纹图谱进行研究,明确不同品种的败酱草及其混伪品间的差异,为败酱草的准确鉴定提供技术保障。方法 收集败酱草正品药材黄花败酱和白花败酱,市场常见败酱草混用品异叶败酱、菥蓂和苣荬菜,采用显微鉴别方法对5种药材粉末的显微特征进行研究;优化败酱草总皂苷的提取工艺,比较不同品种的总皂苷含量;建立败酱草及其混伪品的HPLC指纹图谱,基于指纹图谱相似度评价、聚类分析和主成分分析,对败酱草及其混伪品进行鉴别和药材质量的综合评价。结果 败酱草及其混伪品药材粉末的显微特征存在显著差异;优化了败酱草总皂苷的提取工艺,结果表明,败酱草及其混伪品总皂苷含量存在差异;建立了败酱草及其混伪品共26批的HPLC指纹图谱,共标定了11个共有峰,明确了败酱草及其混伪品指纹图谱的差异,通过相似度分析、聚类分析和主成分分析,可将败酱草及其混伪品进行准确区分;综合评价分析结果表明,败酱草及其混伪品的得分差异较大,其中正品白花败酱和黄花败酱的得分最高。结论 获得了败酱草及其市场常见混伪品在粉末的显微特征和HPLC指纹图谱的差异,为败酱草的准确鉴...     

地龙及其混淆品原动物的形态及DNA双重条形码鉴定

目的基于线粒体cytochrome coxidase I(CO I)和16 S rRNA基因开发DNA双重条形码鉴定方法,由此验证并补充形态鉴定,以期建立一种准确、有效地鉴定地龙及混淆品原动物的方法。方法对收集到的66份样品依据形态特征进行初步鉴定,使用优化后的引物同时扩增CO I和16 S rRNA序列。优化一步法双重PCR实验条件。用MEGA 5.1计算地龙及其混淆品的种内、种间遗传距离,基于K2P模型构建NJ树。结果 CO I和16 S rRNA双重DNA条形码鉴定与形态鉴定结合,可准确鉴别地龙及混淆品原动物。结论形态鉴定是分子鉴定的基础,分子鉴定是形态鉴定的有力补充。二者结合可最大程度地实现地龙及其混淆品原动物的准确鉴定。DNA双重条形码鉴定方法也可为地龙药材鉴定以及其他动物药材的分子鉴定提供参考。     

意大利牛舌草与其易混淆品的鉴定

目的:研究建立意大利牛舌草及其易混淆品的鉴别方法,为意大利牛舌草的质量控制提供依据。方法:采集不同产地的意大利牛舌草及其混淆品,采用药材显微鉴别、薄层色谱鉴别和DNA分子鉴别方法,对意大利牛舌草及其混淆品进行鉴别研究。结果:意大利牛舌草与琉璃苣、倒提壶在显微、薄层色谱有较为明显的差异,DNA分子鉴定表明,意大利牛舌草及其混淆品的最小种间K-2-P距离大于种内最大K-2-P距离,邻接法(NJ)树中意大利牛舌草的样品聚为一支,琉璃苣、倒提壶混淆品分别表现出单系性,可明显区分开。结论:该文在对意大利牛舌草及混淆品的茎、粉末显微特征比较研究的基础上,采用药材显微鉴别、薄层色谱鉴别与DNA分子鉴定手段相结合的综合鉴别模式,确定了意大利牛舌草及其混淆品的鉴别要点,DNA分子鉴定技术对于意大利牛舌草及其混淆品的鉴别有较大的优势,该法专属性强、灵敏度高,是传统鉴别技术的重要补充,具有较大的潜力和应用前景。建议进一步提高和完善意大利牛舌草的质量标准,加强意大利牛舌草的质量控制。     

《中国药典》中蕲蛇饮片分子鉴定方法的研究和探讨

目的：运用多种分子鉴定方法,从技术要求和标准编写方面对蕲蛇饮片现行质量标准提出建议。方法：本研究选取蕲蛇所在蝰科Viperidae蝮亚科Crotalinae的7个近缘物种和9种常见的蕲蛇伪品物种作为研究对象,采用DNA 条形码技术扩增16S rRNA序列,运用电泳检视法,根据扩增条带的有无评价模板DNA的质量;16S rRNA序列扩增产物通过双向测序,运用BioEdit软件拼接,双端对齐后剪切比对,利用MEGA 5.1软件构建邻接（NJ）系统发育树;采用蕲蛇饮片现行标准方法进行同步鉴别。结果：16S rRNA序列的电泳检视结果可有效评价蕲蛇样品的模板DNA质量,避免由于模板DNA质量不佳导致的假阴性结果的可能性;基于16S rRNA条形码序列建立的NJ树可以鉴别蕲蛇饮片及其混淆品;蕲蛇饮片现行标准方法专属性良好。结论：DNA条形码方法、现行标准方法以及NJ树三者相互结合,从不同角度对蕲蛇饮片进行真伪鉴别,有效弥补蕲蛇饮片现行标准方法的不足,为其他中药品种的分子鉴定技术的质量标准制定提供了参考。     

宽体金线蛭的特异性PCR分子鉴定

[目的] 实验旨在通过寻找宽体金线蛭单核苷酸多态性（SNP）位点,设计宽体金线蛭的特异性鉴别引物,建立宽体金线蛭特异性聚合酶链式反应（PCR）检测方法,实现对宽体金线蛭及其常见混伪品的快速鉴别。[方法] 通过比对宽体金线蛭与其常见混伪品的细胞色素C氧化酶亚基I（COI）序列,寻找宽体金线蛭COI基因序列内SNP位点,设计特异性鉴别引物。[结果] 进行PCR后仅宽体金线蛭能够扩增得到149 bp的条带,混伪品不能扩增出明显目的条带。向扩增产物中加入SYBR Green I核酸染料染色,宽体金线蛭样品在紫外灯下显黄绿色荧光,混伪品不显荧光。[结论] 该方法能够准确快速鉴别宽体金线蛭与其常见混伪品,为中药材市场上宽体金线蛭的快速鉴别提供技术支持。     

前胡及其混伪品的中药鉴定学研究进展

白花前胡Peucedanum praeruptorum作为前胡药材的基原具有降气化痰、疏风散热等功效,多用于呼吸道和肺动脉高压治疗,特别是在防治心血管疾病方面具有很高药用价值。通过收集国内外相关研究资料,综述了近年来前胡及其混伪品鉴定方面的研究成果。DNA条形码技术在药用植物和药材鉴定方面表现出较强的应用能力,为此阐述了现代分子生物学技术和传统鉴定手段应用于前胡及混伪品鉴定的最新进展,同时对各方法优缺点及实用性进行了总结,以期为中药的快速、准确鉴定提供新的研究思路和解决方案。     

水蛭的本草考证及其鉴别要点研究

水蛭是一种常用的珍贵动物类中药,具有很高的药用价值。近年来,随着需求增加,价格攀升,市场上出现了水蛭的混淆品。通过收集活体水蛭样本,对照动物分类学专著、本草著作及鉴别研究报道,发现并确认市场上流通的2种水蛭混淆品为湖北牛蛭Poecilobdella hubeiensian Yang和棒纹牛蛭P. javanica （Wahlberg）,以期为鉴别研究和临床安全用药提供参考。     

快速PCR方法在蛇类药材真伪鉴别中的应用

为优化获得一种准确、快速、高效鉴别药典所载蛇类药材(乌梢蛇,金钱白花蛇,蕲蛇)真伪品的方法。该研究以蛇类药材经典PCR鉴定方法为基础,采用碱裂解法提取基因组总DNA,加入特异性PCR引物,采用两步法进行PCR扩增,从而对蛇类药材及其混淆品进行鉴别。通过对影响PCR反应时间的退火温度、变性温度、退火时间、变性时间、循环次数等因素进行优化,并对不同型号PCR仪和Taq酶进行考察,分别获得乌梢蛇、金钱白花蛇、蕲蛇快速PCR反应程序。在PCR产物中加入SYBR Green I染料,正品显示出明亮绿色荧光,而混淆品不显示荧光。所建立的蛇类药材快速PCR真伪检测方法可在30~45 min完成,为蛇类药材现场快速鉴定提供技术支持。     

基于ITS2序列的市售木通药材及其混伪品的分子鉴定

目的 建立基于核糖体内部转录间隔区2(internal transcribed spacer 2,ITS2)序列的木通药材DNA条形码鉴定方法,对市售木通药材进行物种分析。方法 收集河北、安徽、贵州等地的样品总计45份,其中木通药材及其混伪品的原植物样品18份,市售木通药材样品27份。通过提取DNA、聚合酶链式反应（polymerase chain reaction,PCR）扩增、双向测序获得ITS2序列,基于邻接（neighbor joining,NJ）系统发育树和单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphisms,SNP）位点进行物种鉴定分析。结果 基于木通药材及其混伪品原植物ITS2序列构建的NJ树分析结果表明,木通药材正品及其混伪品在NJ树上聚为独立的分支,木通药材正品及其混伪品在NJ树上可明确区分;基于NJ树对27份市售木通药材的物种分析表明,市售样品中仅有4份为正品木通,2份为小木通,21份为粗齿铁线莲,正品率为14.8%。结论 基于ITS2序列的DNA条形码技术可以准确区分中药材木通及其混伪品,市售木通药材物种较混乱。