Ca^2＋与心肌迟后除极

心律失常发生的重要细胞机制之一──迟后除极与心肌胞浆游离钙［Ｃａ２＋］ｉ密切相关。许多因素可造成心肌［Ｃａ２＋］ｉ增高，引发肌质网的ｃａ２＋摄取和释放加速，引起胞浆Ｃａ２＋同步振动，使膜电导改变，产生膜电流──瞬时内向电流和爬行电流，形成迟后除极，以至触发活动，出现触发性心律失常。     

心肌不同缺血阶段超微结构改变及Ca^2^＋分布特点

观察了３３只家兔心肌不同缺血时间，再灌注３０ｍｉｎ后，心肌超微结构改变及Ｃａ＾２＾＋分布特点。缺血１５ｍｉｎ再灌注后，心肌结构接近正常，但肌纤维膜上Ｃａ＾２＾＋分布数量却低于正常心肌。缺血３０－４５ｍｉｎ，亚细胞结构发生了严重变性，大多数细胞肌纤维膜上Ｃａ＾２＾＋消失。再灌注后大量Ｃａ＾２＾＋以丛状形式沉积于线粒体内，称为不可逆损伤的边缘。缺血６０和７５ｍｉｎ与再灌注后，可见肌纤维膜断裂并完全失去     

心肌细胞的Na^＋—Ca^2＋交换与Na^＋—Ca^2＋交换体

心肌细胞Ｎａ＋－Ｃａ２＋交换属逆向离子交换系统，Ｎａ＋－Ｃａ２＋交换比例为３Ｎａ＋１Ｃａ２＋，故有生电性。Ｎａ＋－Ｃａ２＋交换结构的基础是Ｎａ＋－Ｃａ２＋交换体。心肌细胞Ｎａ＋－Ｃａ２＋交换体为含９７０个氨基酸残基的酸性蛋白，分子量１２０ｋＤ，有１１个跨膜区段；胞内Ｎａ＋、Ｃａ２＋、ＡＴＰ、肌醇磷酸及其代谢产物可通过不同方式调节Ｎａ＋－Ｃａ２＋交换活动；心脏Ｎａ＋－Ｃａ２＋交换的主要生理作用是参与心肌兴奋－收缩偶偶，维持胞内Ｃａ２＋稳态及调制起搏活动等。     

654—2对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用

本实验采用用离体大鼠Ｌａｎｇｅｎｄｏｒｆｆ灌流模型，观察了６５４－２对灌流液中Ｃａ＾２＋浓度变化所致心肌缺血再灌注损伤的保护作用。结果表明：６５４－２对缺血前及再灌时Ｃａ＾２＋浓度变化所致的心肌损伤均有明显的保护作用。推测这种保护作用可能是通过其稳膜及Ｃａ＾２＋调节作用而实现的。     

猕猴精子获能和顶体反应过程中Ca~（2＋）和Ca~（2＋）－ATPase定位及咖啡因和dbcAMP对顶体反应的影响

用焦锑酸钾原位沉淀法和枸橼酸铅捕获法研究了猕猴精子获能和顶体反应过程中的Ｃａ~（２＋）分布和Ｃａ~（２＋）－ＡＴＰａｓｅ活性。获能前精子头部Ｃａ~（２＋）主要分布于顶体区质膜内外、顶体外膜和顶体内膜内侧，尾部Ｃａ~（２＋）主要分布于线粒体基质，在质膜、致密纤维和轴丝处也有一定分布，在获能过程中Ｃａ~（２＋）进入精子内部，并在头部结合于顶体区质膜内侧和顶体外膜外侧。顶体反应时Ｃａ~（２＋）结合于顶体内膜外侧和由顶体外膜囊泡化形成的囊泡内外，另外还有一些Ｃａ~（２＋）分散存在于顶体内容物中。在ｐＨ９．０条件下，头部Ｃａ~（２＋）－ＡＴＰａｓｅ活性存在于顶体外膜外侧和顶体区质膜外侧，顶体后区质膜无此酶活性。尾部Ｃａ~（２＋）－ＡＴＰａｓｅ存在于质膜、线粒体膜及致密纤维和轴丝处。各处的Ｃａ~（２＋）－ＡＴＰａｓｅ活性在获能和顶体反应过程中一直存在。咖啡因和ｄｂｃＡＭＰ可提高精子运动能力，前者还可显著增加顶体反应率。     

镁对大鼠缺氧再给氧心肌细胞内游离钙的影响

目的和方法：用ＡＣＡＳ５７０粘附式细胞仪，以荧光素染色法观察镁（Ｍｇ２＋）对体外培养乳鼠心肌细胞内游离钙（Ｃａ２＋）的影响及对缺氧再给氧时细胞内Ｃａ２＋作用。结果：细胞外Ｍｇ２＋降至０３ｍｍｏｌ·Ｌ－１，细胞内Ｃａ２＋荧光强度上升速度加快，达到稳定所需时间延长，出现Ｃａ２＋振荡曲线。增加Ｍｇ２＋浓度可使细胞内Ｃａ２＋降低。Ｍｇ２＋还可以显著减少缺氧再给氧时细胞内Ｃａ２＋，Ｐ＜００１。结论：细胞外低Ｍｇ２＋可导致细胞内Ｃａ２＋增加，Ｍｇ２＋有维持正常心肌细胞内Ｃａ２＋稳定性及拮抗缺氧再给氧时细胞内Ｃａ２＋超载作用     

膜脂质构成对淋巴细胞膜特性及膜蛋白结构与功能的影响

本实验通过人为改变淋巴细胞胞膜脂质构成，进而研究了膜脂质，尤其是膜胆固醇，对淋巴细胞膜生物物理特性及膜蛋白结构，以及Ｃａ２＋通道蛋白活性的影响。结果显示，随着胞膜磷脂（ＰＬ）／胆固醇（Ｃｈ）摩尔比的降低，膜脂质的微粘滞性升高，活化淋巴细胞超极化反应增强，胞浆游离钙浓度［Ｃａ２＋］ｉ及Ｃａ２＋跨膜流动增加，且上述膜电位及Ｃａ２＋内流的变化可因Ｃａ２＋通道受阻而减弱或消失。提示膜脂质可通过调节Ｃａ２＋通道蛋白活性，进而影响Ｃａ２＋跨膜内流及膜电位。另外，膜脂质组成改变后，膜蛋白内源性荧光强度及最大发射波长峰位的变化，也表明膜脂质及相关膜特性可影响膜蛋白的结构与功能。     

猕猴精子获能和顶体反应过程中Ca^2＋和Ca^2＋—ATPase定位及咖啡因…

用焦锑酸钾原位沉淀法和枸橼酸铅捕获研究了猕猴精子获能和顶体反应过程中的Ｃａ＾２＋分布和Ｃａ＾２＋－ＡＴＰａｓｅ活性。获能前精子头部Ｃａ＾２＋主要分布于顶体区质膜内外、顶体外膜和顶体内膜内侧，尾部Ｃａ＾２＋主要分布于线粒体基质，在质膜、致密纤维和轴丝处也有一定分布。在获能过程中Ｃａ＾２＋进入精子内部，并在头部结合于顶体区质膜内侧和顶体外膜外侧。顶体反应时Ｃａ＾２＋结合于顶体内膜外侧和由顶体外膜囊泡化     

心肌肌浆网Ca~(2 )-ATPase的结构、功能及表达调节

心肌肌浆网Ｃａ２＋泵（ＳＥＲＣＡ）在调节胞浆Ｃａ２＋浓度中起主要作用。心肌全长ＳＥＲＣＡ基因组包含４０ｋｂ以上的核苷酸碱基对。已克隆出心肌ＳＥＲＣＡ蛋白。在心肌肥大和心衰等病理过程中，心肌ＳＥＲＣＡ２ａｍＲＮＡ及蛋白表达均减少，提示在病理情况下心肌可出现ＳＥＲＣＡ２ａ基因表达模式或水平的改变。     

心肌肌浆内Ca^2＋—ATPase的结构,功能及表达调节

心肌肌浆网Ｃａ＾２＋泵（ＳＥＲＣＡ）在调节胞浆Ｃａ＾２＋浓度中起主要作用。心肌全长ＳＥＲＣＡ基因组包含４０ｋｂ以上的核苷酸碱基对，已克隆出心肌ＳＥＲＣＡ蛋白。在心肌肥大和心衰等病理过程中，心肌ＳＥＲＣＡ２ａｍＲＮＡ及蛋白表达均减少，提示在病理情况一心肌可出现ＳＥＲＣＡ２ａ基因表达模式或水平的改变。     

牛磺酸对缺血大鼠心肌线粒体Ca^2＋—Mg^2＋—ATP酶活性与MDA …

目的和方法：用Ｗｉｓｔａｒ大鼠皮下注射异丙肾上腺素（ＩＳＰ,５ｍｇ／ｋｇ）诱导心肌缺血模型。观测心肌线粒体（Ｍｉｔ）中丙二醛（ＭＤＡ）含量、Ｃａ＾２＋－Ｍｇ＾２＋－ＡＴＰ酶和Ｃａ＾２＋－Ｍｇ＾２＋－ＡＴＰ酶和Ｃａ＾２＋－ＡＴＰ酶活性及牛磺酸（Ｔａｕ）的影响。结果：缺血组大鼠心肌Ｍｉｔ中ＭＤＡ升高８７．８３％、Ｃａ＾２＋－Ｍｇ＾２＋－ＡＴＰ酶和Ｃａ＾２＋－ＡＴＰ酶活性分别降低３７．５６％和５０．２０     

钙离子与心肌预适应

心肌细胞内Ｃａ２＋超负荷在长时间缺血再灌注损伤中起很重要的作用，Ｃａ２＋在内源性保护物质所介导的缺血预适应保护机制中亦有重要作用，同时发现少量短暂的细胞内Ｃａ２＋增加可产生预适应保护作用，称Ｃａ２＋预适应。因而Ｃａ２＋与心肌缺血预适应保护的关系已受到重视。     

维拉帕米和Mn~（2＋）对缺氧及复氧单心肌细胞游离Ca~（2＋）的影响

本文采用荧光探针Ｆｕｒａ－２结合计算机图像处理技术观察不同时间的缺氧及复氧单心肌细胞内游离Ｃａ￣（２＋）含量的变化以及Ｃａ￣（２＋）通道阻滞剂及Ｎａ￣＋－Ｃａ￣（２＋）交换抑制剂对其的响。结果显示随着缺氧和缺氧复氧时间的延长，细胞内Ｃａ￣（２＋）浓度逐渐增加。缺氧复氧时细胞内Ｃａ￣（２＋）增加幅度较单纯缺氧大。Ｍｎ￣（２＋）及维拉帕米均能降低缺氧时心肌细胞内Ｃａ￣（２＋）超负荷（Ｐ＜０．０５）。Ｍｎ￣（２＋）同时也能降低缺氧复氧时细胞内Ｃａ￣（２＋）含量（Ｐ＜０．０５），而维拉帕米降钙作用不明显（Ｐ＞０．０５）。本文提示缺氧和缺氧复氧时细胞内Ｃａ￣（２＋）超负荷的机制并非完全一致。     

654－2对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用

本实验采用离体大鼠Ｌａｎｇｅｎｄｏｒｆｆ灌流模型，观察了６５４－２对灌流液中Ｃａ￣（２＋）浓度变化所致心肌缺血再灌注损伤的保护作用。结果表明：６５４－２对缺血前（６５４－２在预灌时给予）及再灌时（６５４－２在再灌时给予）Ｃａ￣（２＋）浓度变化所致的心肌损伤均有明显的保护作用。推测这种保护作用可能是通过其稳膜及Ｃａ￣（２＋）调节作用而实现的。     

钙离子通道的分子结构及其亚单位的功能

钙离子通道是镶嵌于膜脂质中的糖蛋白或外侧糖基化的蛋白复合体，广泛存在于细胞膜表面，形成一个功能单位或小孔，对Ｃａ２＋具有高度的选择通透性，控制着离子的转运与细胞的功能。细胞内多种酶系统都对细胞内Ｃａ２＋非常敏感，Ｃａ２＋作为“第二信使”，进行着细胞调节的功能。此外，在心肌细胞的兴奋－收缩偶联中，Ｃａ２＋有着重要的作用     

Ca^2＋与肝细胞损伤

Ｃａ２＋参与细胞多种功能的调节。病理情况下，Ｃａ２＋参与细胞的损伤过程。当肝细胞受损伤时，细胞内〔Ｃａ２＋〕ｉ将发生改变，Ｃａ２＋内稳态的改变主要通过对质膜、线粒体和内质网等的作用而促进细胞损伤。     

维拉帕米和Mm^2＋对缺氧及复氧单心肌细胞游离Ca^2＋的影响

本文采用荧光探针Ｆｕｒａ－２结合计算机图像处理技术观察不同时间的缺氧及复氧单心肌细胞内游离Ｃａ＾２＋含量的变化以及Ｃａ＾２＋通道阻滞剂及Ｎａ＾＋－Ｃａ＾２＋交换抑制剂对其的影响。结果显示随着缺氧和缺氧复氧时间的延长，细胞内Ｃａ＾２＋浓度逐渐增加。     

牛磺酸对缺血大鼠心肌线粒体Ca2+-Mg2+-ATP酶活性与MDA含量影响

目的和方法：用Ｗｉｓｔａｒ大鼠皮下注射异丙肾上腺素（ＩＳＰ,５ｍｇ／ｋｇ）诱导心肌缺血模型。观测心肌线粒体（Ｍｉｔ）中丙二醛（ＭＤＡ）含量、Ｃａ２＋－Ｍｇ２＋－ＡＴＰ酶和Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶活性及牛磺酸（Ｔａｕ）的影响。结果：缺血组大鼠心肌Ｍｉｔ中ＭＤＡ升高８７８３％、Ｃａ２＋－Ｍｇ２＋－ＡＴＰ酶和Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶活性分别降低３７５６％和５０２０％（Ｐ＜０．０１）。Ｃａ２＋－Ｍｇ２＋－ＡＴＰ酶活性与ＭＤＡ含量也呈显著负相关（ｒ＝－０．８７,Ｐ＜０．０１）。Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶活性与ＭＤＡ含量也呈显著负相关（ｒ＝－０７９,Ｐ＜０．０１）。在注射异丙肾上腺素（ＩＳＰ）前３０ｍｉｎ腹腔注射Ｔａｕ（２００ｍｇ／ｋｇ）则Ｍｉｔ中ＭＤＡ含量、Ｃａ２＋－Ｍｇ２＋－ＡＴＰ酶和Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶活性均未见显著异常改变。结论：Ｔａｕ可能通过抑制ＭＤＡ的生成实现其保护Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶和Ｃａ２＋－Ｍｇ２＋－ＡＴＰ酶活性的作用。     

溶血磷脂酸对大鼠心肌细胞膜Na+-Ca2+交换的影响

本研究采用蔗糖梯度离心法制各大鼠心肌细胞膜,观察溶血磷脂酸（ ＬＰＡ）对心肌细胞膜 Ｎａ~＋－Ｃａ~(２＋)交换的影 响。结果发现ＬＰＡ（１～２０ｎｍｏｌ／Ｌ）呈剂量依赖性和时间依赖性刺激Ｎａ~＋一Ｃａ~（２＋）交换活性增加。Ｇｐｐ（ＮＨ）ｐ呈剂量依赖 性替代ＬＰＡ刺激的Ｎａ~＋－Ｃａ~(２＋)交换活性;ＰＴＸ可抑制ＬＰＡ对Ｎａ~＋－Ｃａ~(２＋)交换的激活;Ｇｅｎｉｓｔｅｉｎ,Ｐｒｏｐｒａｎｏｌｏｌ,Ｐｒａｚｏｓｉｎ,Ａｔｒｏｐｉｎｅ,Ｌｏｓａｒｔａｎ,ＢＱ１２３和磷脂酰胆碱对ＬＰＡ诱导的Ｎａ~＋－Ｃａ~２＋交换活性无影响,而磷脂酰丝氨酸可增加对照和ＬＰＡ 两组的 Ｎａ~＋－Ｃａ~(２＋)交换活性。这些结果表明 ＬＰＡ可通过 ＰＴＸ敏感的 Ｇ蛋白刺激大鼠心肌细胞膜 Ｎａ~＋－Ｃａ~(２＋)交换活性。     

多聚Clq诱导免疫细胞的Ca~（2＋）动员

多聚Ｃｌｑ与人Ｔ细胞系Ｊｕｒｋａｔ、Ｂ细胞系Ｒａｎ和Ｍφ系Ｕ９３７细胞表面ＣｌｑＲ相互作用，诱导４５Ｃａ２＋跨膜快速内流，刺激［Ｃａ２＋］ｉ迅速增高，前者可为质膜Ｃａ２＋通道阻滞剂Ｖｅｒａｐａｍｉｌ所阻断，后者能被胞外Ｃａ２＋络合剂ＥＧＴＡ部分抑制，被蛋白酪氨酸激酶（ＰＴＫ）抑制剂Ｇｅｎｉｓｔｅｉｎ完全消除。资料表明，Ｃｌｑ／ＣｌｑＲ系统介导的信号转导机制涉及内Ｃａ２＋和外Ｃａ２＋两者的动员，且与ＰＴＫ有关。