TGF-β1活性抑制肽对糖尿病大鼠肾保护的作用研究

目的 采用人工合成多肽抑制TGF-β1活性,观察其对糖尿病大鼠肾组织的影响。 方法 采用链脲佐菌素腹腔注射建立糖尿病模型,将40只SD大鼠随机分为4组,正常对照组（NC组）、糖尿病肾病组（DM组）、L肽干预组(DL组,给予合成多肽LSKL 100μg/d)、G肽干预组(DG组,给予合成多肽GGWSHW 100μg/d),每组10只。16w测定肾脏肥大指数、MGV、FMA 、尿蛋白、血肌酐,取标本行病理组织检查,ELISA检测肾组织中活性及总体TGF-β1的水平。 结果 (1) 多肽干预组肾脏肥大指数、MGV、FMA 、尿蛋白、血肌酐明显低于DM组( P<0.05),肾组织病理改变也明显较轻,DL与DG组上述指标差别不明显。(2) 糖尿病大鼠肾组织总体、活性TGF-β1水平明显增高;与DM组相比,多肽干预组活性TGF-β1含量明显下降,差别显著(P<0.05),但总体TGF-β1无明显差异;DL与DG组相比,总体TGF-β1、活性TGF-β1均差别不明显。 结论 人工合成多肽（LSKL与GGWSHW）通过抑制TGF-β1活性起到保护糖尿病大鼠肾脏的作用。     

活性维生素D3对糖尿病大鼠肾脏TGF-β1和HGF表达的影响

目的:探讨活性维生素D3对糖尿病大鼠肾脏(Transforming growth factor-beta 1,TGF-β1)和肝细胞生长因子(Hepatocyte growth factor,HGF)表达的影响.方法:雄性SD大鼠30只,按随机数字表法分为正常对照组(NC),糖尿病模型组(DM),活性维生素D3治疗组(DC),每组10只.12周后,观测肾组织形态学和肾功能变化,尿白蛋白排泄率等指标的变化,用免疫组化法检测肾脏TGF-β1表达水平的变化,RT-PCR法检测肾皮质TGF-β1mRNA、HGFmRNA表达水平的变化.结果:与NC组比较,第12周末DM组大鼠肾脏肥大指数(KW/BW)、平均肾小球体积(MGV)、系膜面积比(FMA)、尿白蛋白排泄率(UAER)、血肌酐(Scr)均明显升高(P＜0.05),肾组织TGF-1mRNA及蛋白表达水平也显著升高(P＜0.05),同时肾皮质HGFmRNA表达也有所增加(P＜0.05).DC组HGFmRNA的表达水平较DM组显著升高(P＜0.05),而上述其他指标与DM组比较,则有明显的降低(P＜0.05).结论:活性维生素D3对于糖尿病肾脏病变至少具有部分保护作用,其机制可能为通过抑制糖尿病大鼠肾脏TGF-β1的过度表达,而上调HGF的表达,从而对糖尿病大鼠肾脏起保护作用.     

凝血酶敏感蛋白-1活化TGF-β_1在糖尿病肾病中作用的实验研究

目的测定糖尿病肾病中活性TGF-β1的水平,研究阻断TSP-1介导的TGF-β1活化能否延缓糖尿病肾病的纤维化进程。方法采用链脲佐菌素（STZ）腹腔注射建立糖尿病模型,将30只SD大鼠随机分为3组,正常对照组（NC组）、糖尿病肾病组（DM组）、多肽干预组（DT组,给予人工合成多肽LSKL 100μg/d）,每组10只。每隔4周,测定24小时尿蛋白、血肌酐;16周取肾标本,行病理组织检查,ELISA法检测肾组织中活性及总体TGF-β1的水平,免疫组化检测TSP-1及TGF-β1的表达。结果 DT组24小时尿蛋白、血肌酐明显低于DM组（P〈0.01）,肾组织病理改变也明显较轻;DM组、DT组与NC组相比,肾组织总体TGF-β1、活性TGF-β1水平明显增高;DT组与DM组相比,总体TGF-β1含量差别不明显（P〉0.05）,但活性TGF-β1含量明显下降,差别显著（P〈0.05）。NC组肾组织TSP-l无阳性表达、TGF-β1少量表达,而DT组与DM组两者的阳性表达面积显著增强;DT组与DM组TSP-l、TGF-β1阳性表达差别不明显（P〉0.05）。结论在糖尿病肾病发病进程中,TSP-1是活化TGF-β1的重要因子,阻断TSP-1介导的TGF-β1活化,能延缓肾纤维化进程。     

吡格列酮对糖尿病大鼠肾组织TSP1表达的影响

目的 探讨噻唑烷二酮类(thiazolidinediones,TZD)药物吡格列酮对1型糖尿病(diabetes mellitus,DM)大鼠肾组织中血小板反应蛋白-1(thrombospondin-1,TSP1)及转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)表达的影响.方法 40只Sprague-Dawley(SD)大鼠随机分为正常对照组(NC)、模型组(DM,链脲佐菌素单次腹腔注射)、吡格列酮治疗组(DP)、给药对照组(NP).干预后10周末,检测各组24 h尿蛋白定量、血肌酐(serum creatinine,Scr)及肾脏肥大指数;RT-PCR法观察肾组织TSP1和TGF-β1 mRNA表达水平;免疫组化法观察肾组织内TSP1和TGF-β1蛋白表达水平.结果 DP组与DM组比较,血糖水平差异无统计学意义(P>0.05),但24 h尿蛋白和肾脏肥大指数明显降低(P<0.05).与Nc和NP组相比,DM及DP组TSPl和TGF-β1表达显著增高(P<0.01);与DM组相比,DP组TSP1和TGF-β1表达明显降低(P<0.05).结论 吡格列酮对DM大鼠具有直接肾脏保护作用,其机制不依赖于胰岛增敏(降糖),可能与降低肾组织TSP1和TGF-β1表达有关.     

活性维生素D3对糖尿病大鼠肾脏BMP-7及TGF-β1表达的影响

目的:探讨活性维生素D3对糖尿病大鼠肾脏骨形成蛋白-7(BMP-7)和转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的影响。方法:30只雄性SD大鼠,按随机数字表法分3组:正常对照(NC)组,糖尿病模型(DM)组,活性维生素D3(DC)组(制备糖尿病模型后用骨化三醇灌胃),每组10只。12周后,检测大鼠24 h尿蛋白定量及血生化指标,采用PAS及Masson染色观察大鼠肾脏病理改变,免疫组化法检测肾组织中BMP-7及TGF-β1蛋白的表达,RT-PCR法检测肾组织中BMP-7、TGF-β1 mRNA的表达。结果:与NC组比较,DM组大鼠肾脏肥大指数、24 h尿蛋白定量、血肌酐、尿素氮、胱抑素C水平均明显升高(P<0.05);同时肾组织中TGF-β1 mRNA及蛋白表达水平也明显升高(P<0.05),而BMP-7 mRNA及蛋白表达水平明显下降(P<0.05)。与DM组比较,DC组肾组织中BMP-7 mRNA及蛋白表达水平明显升高(P<0.05),余上述指标明显下降(P<0.05),病理改变明显减轻。结论:活性维生素D3可能通过上调BMP-7、下调TGF-β1的表达,发挥其肾脏保护作用。     

霉酚酸酯对糖尿病大鼠肾组织中TGF-β1与OPN表达的影响

目的探讨霉酚酸酯(MMF)对糖尿病肾病大鼠肾组织转化生长因子-β1(TGF-β1)和骨调素(OPN)表达的影响和肾保护作用。方法应用链脲佐菌素(STZ)将SD大鼠制作为糖尿病肾病大鼠模型,将SD大鼠分为健康对照组(NC组)、糖尿病肾病组(DM组)和霉酚酸酯干预组(MMF组)。12周后观察24 h尿蛋白定量、血糖、肾功能、肾重/体重比,处死后采用免疫组化观察肾组织中TGF-β1、OPN的表达。结果 DM组和MMF组的尿蛋白定量、血糖、肾重/体重比较NC组明显升高,免疫组化检查TGF-β1、OPN的表达明显增加,而MMF组中TGF-β1、OPN的表达较DM组明显减少,而且TGF-β1、OPN的表达与尿蛋白、肾重/体重比成正比。结论糖尿病肾病大鼠肾组织中TGF-β1、OPN的表达明显增加;MMF对TGF-β1、OPN的表达有抑制作用;MMF可以减少蛋白尿,减轻肾小球、肾小管的硬化和纤维化,机制可能与MMF对TGF-β1、OPN表达有抑制作用相关,对糖尿病肾病有一定的治疗作用。     

活性维生素D3抗炎机制对糖尿病大鼠肾脏的保护作用

[摘要] 目的 探讨活性维生素D3对糖尿病大鼠肾脏的保护作用及其可能机制。方法 实验选用3月龄雄性SD大鼠(清洁级)24只。按随机数字表法分为3组,分别为正常对照组(NC),糖尿病模型组(DM),活性维生素D3治疗组(DC),每组8只。喂养12周后,观测肾组织形态学和肾功能变化,尿白蛋白排泄率等指标的变化,用免疫组化法检测肾脏转化生长因子- 1（TGF- 1）、核转录因子- B （NF- B）、单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）、CD68表达水平的变化,RT-PCR方法检测各组大鼠肾皮质TGF- 1 、NF- B、MCP-1 mRNA表达水平的变化。结果 与正常对照组比较,第12周末糖尿病肾病模型组大鼠的肾脏肥大指数（KW/BW）、平均肾小球体积（MGV）、系膜面积比(FMA)、尿白蛋白排泄率(UAER)、血肌酐(Scr)、均有明显升高(P<0．05),肾皮质TGF- 1 、NF- B、MCP-1 、CD68的蛋白表达水平也有显著增高(P<0．05),同时肾组织TGF- 1 、NF- B、MCP-1 mRNA表达水平均明显升高(P<0．05)。活性维生素D3治疗组的上述指标与糖尿病模型组比较,则有明显的降低(P<0．05)。结论 活性维生素D3对于糖尿病肾脏病变至少具有部分保护作用,其机制可能为通过抑制糖尿病大鼠肾脏的TGF- 1 、NF- B、MCP-1等细胞因子的表达,抑制巨噬细胞的聚集,从而经由抗炎机制发挥对糖尿病大鼠肾脏的保护作用。     

α一硫辛酸对糖尿病肾病大鼠肾纤维化的影响研究

目的 通过α-硫辛酸对糖尿病肾病模型大鼠肾组织转化生长因子( TGF-β1)、结缔组织生长因子(CTGF)表达的影响,研究其延缓肾脏纤维化的作用及机制,为临床防治糖尿病肾病提供实验依据.方法 将健康SD大鼠50只,体重250 ～ 300 g,随机分为6组:①正常对照组;②糖尿病对照组;③α-硫辛酸15、30、60mg/ (kg·d).50只采用STZ 45 mg/kg造成糖尿病模型,10只用等量柠檬酸缓冲液腹腔注射,造成模型组,用α-硫辛酸给糖尿病模型组给予剂量.检测各组的大鼠血糖,血清肌酐,肾重指数,制备肾脏石蜡切片,测定肾小球体积(MGA)和计算肾小球平均体积(MGV).比较MGA和MGV;用SureStep Plus型血糖仪于实验结束前检测空腹血糖;用Western-Blot法检测肾组织TGF-β1、CTGF的表达.结果 DM组大鼠血糖明显升高,血清肌酐无明显变化;与DM组相比,治疗组大鼠血糖,血清肌酐均无统计学意义;DM组大鼠肾重指数明显增加,光镜先显示:DM组的大鼠肾小球体积明显增大,肾小球HE染色区扩大,系膜区增宽,毛细血管管腔受压,肾小球基底膜增厚,α-硫辛酸治疗后上述异常均有不同程度的改善,但未恢复到正常状态图像显示;DM组肾小球平均面积(MGA)和肾小球平均体积(MGV)明显扩大,与其相比,治疗组有不同程度的缩小.结论 α-硫辛酸通过抑制肾组织TGF-β1、CTGF的表达而发挥其抗纤维化的作用,从而延缓STZ糖尿病大鼠肾脏纤维化的发展.     

霉酚酸酯对糖尿病大鼠肾小管上皮细胞转分化的影响

目的探讨霉酚酸酯(MMF)对糖尿病大鼠肾小管上皮细胞转分化的影响及其可能机制。方法雄性SD大鼠28只,随机选取8只作为正常对照组(N组),其余20只注射链脲佐菌素(STZ)制作糖尿病模型,并随机分为糖尿病组(DM组)、霉酚酸酯组(M组)。12周后测量大鼠血糖、体质量、肾质量/体质量、24 h尿蛋白定量、血肌酐(SCr),观察肾小管间质病理形态学变化,应用免疫组化技术和Western blot检测肾组织中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及转化生长因子β1(TGF-β1)的表达。结果 DM组血糖、肾质量/体质量、24 h尿蛋白定量、血SCr、肾小管-间质损伤指数(TII)均明显高于N组(P<0.01),M组除血糖、体质量外(P>0.05),其余指标均明显低于DM组(P<0.01);免疫组化结果显示,DM组肾小管上皮细胞胞浆中α-SMA、TGF-β1表达均明显高于N组(P<0.01),M组明显低于DM组(P<0.01);Western blot结果显示,DM组肾组织α-SMA、TGF-β1表达较N组分别增加3.4倍与1.1倍,M组肾组织α-SMA、TGF-β1表达较DM组分别下降55%与40%。结论 MMF能下调糖尿病大鼠肾小管上皮细胞α-SMA、TGF-β1的表达,抑制肾小管上皮细胞转分化,起到肾脏保护作用。     

还原型谷胱甘肽对糖尿病大鼠肾组织糖基化及转化生长因子β1表达的影响

目的观察还原型谷胱甘肽及盐酸氨基胍对链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠肾组织非酶糖化及转化生长因子β1(TGF-β1)表达的影响,以发现更为有效的防治糖尿病肾病及减少终末期肾病发病率的方法。方法应用链脲佐菌素建立大鼠糖尿病模型,随机分为正常对照组、糖尿病对照组(DM组)、氨基胍治疗组(DM AG组)、还原型谷胱甘肽治疗组(DM GLUT组)、氨基胍 还原型谷胱甘肽治疗组(DM AG GLUT组)。第8周留取双侧肾脏,应用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组织化学等方法研究5组大鼠肾脏TGF-β1mRNA及蛋白质表达、肾皮质糖基化终末产物(AGEs)含量、24 h尿白蛋白、肾组织学形态,测定肾重/体重比值、血糖、糖化血红蛋白、血肌酐水平,计算肌酐清除率。结果(1)与正常对照组相比,各组糖尿病大鼠TGF-β1mRNA表达明显上调(P<0.01);肾皮质匀浆及血清TGF-β1蛋白量均明显高于正常对照组(P<0.01);肾皮质匀浆脂相、蛋白质相荧光值即AGEs含量均明显增高(P<0.01);血糖、糖化血红蛋白、尿白蛋白排泄量、内生肌酐清除率及肾重/体重比值均明显增高(P<0.01);(2)与DM组相比,DM AG组、DM GLUT组及DM AG GLUT 3组TGF-β1mRNA表达增加被明显逆转(P<0.05或P<0.01);肾皮质匀浆及血清TGF-β1蛋白量均明显降低(P<0.01或P<0.05);AGEs含量均明显降低(P<0.01或P<0.05);尿白蛋白排泄量、内生肌酐清除率及肾重/体重均明显降低(P<0.01);(3)PAS、PAM、Masson染色显示:DM组肾小球可见轻度系膜增殖,未见系膜细胞增生、局灶节段性硬化及肾小球基底膜(GBM)增厚;正常对照组、DM AG组、DM GLUT组、DM AG GLUT组肾小球无明显异常。结论还原型谷胱甘肽及盐酸氨基胍可以减轻糖尿病大鼠肾组织的非酶糖化过程,并减轻肾小球肥大及肾肥大,延缓其肾病发展,对糖尿病肾脏具有保护作用,二者对肾脏的保护作用至少部分与抑制TGF-β1在肾脏的过度表达有关。     

肾炎四味片对糖尿病大鼠肾脏保护作用的实验研究

目的 观察并探讨肾炎四味片对实验性糖尿病(diabetes mellitus,DM)大鼠早期肾脏病变的作用及可能的作用机制.方法 健康雄性SD大鼠45只,随机抽取30只腹腔注射链脲佐菌素制备DM大鼠模型,成模后随机分为DM对照组(B组)15只、肾炎四味片干预组(C组)15只;正常对照组(A组)15只,分别于8周、12周末检测尿蛋白定量,肌酐清除率(Ccr),应用光镜和电镜对肾组织行病理形态学观察,免疫组织化学染色检测肾组织转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)、α平滑肌肌动蛋白(α-Smooth muscle actin,、αSMA)表达情况.结果 C组大鼠与同时期B组比较,24 h尿蛋白明显减少(P<0.01),肾组织TGF-β1、α-SMA表达明显下降(P<0.01),肾组织病理形态学改变明显减轻.结论 肾炎四味片能够抑制DM大鼠肾组织TGF -β1、αSMA的表达,减少DM大鼠的尿蛋白,减轻及延缓肾小球硬化,发挥保护肾脏的作用.     

金樱子对大鼠糖尿病肾脏的实验研究

目的 研究中药金樱子对糖尿病大鼠肾脏的保护作用并探讨其保护机制.方法 用链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)腹腔注射诱导法建立SD大鼠糖尿病模型,随机分为糖尿病模型组和金樱子干预组,同时另设正常对照组和金樱子对照组.观察大鼠一般状态,测定血糖、体重(BW)及肾重(KW)、肾脏指数(KW/BW),肾组织光镜检查了解组织形态,肾组织免疫组化检查观察金樱子对糖尿病大鼠肾脏组织转化生长因子β1(TGF-β1),Ⅳ型胶原表达影响.结果 糖尿病模型组血糖及肾脏指数明显升高,肾脏病理改变明显,TGF-β1、Ⅳ型胶原表达明显增加.治疗24周后,金樱子干预组血糖降低,肾脏肥大明显改善,TGF-β1,Ⅳ型胶原表达明显下降(P＜0.05),肾脏病理改变较糖尿病模型组有较大改善,但金樱子对照组肾组织无明显病理改变.结论 金樱子对糖尿病大鼠肾脏有保护作用,其机制与抑制糖尿病大鼠肾脏TGF-β1,Ⅳ型胶原蛋白过度表达有关.     

还原型谷胱甘肽对糖尿病大鼠肾脏的保护作用及机制

目的：探讨还原型谷胱甘肽(Glut)对糖尿病大鼠肾脏的保护作用及可能机制。方法：以链脲佐菌素诱导糖尿病大鼠模型,同时设对照组,给予还原型谷胱甘肽、盐酸氨基胍(AG)单独或联合治疗8周,分别以RT-PCR及免疫组化法检测肾皮质TGF-β1 mRNA及蛋白表达,行肾组织PAS染色测定平均肾小球截面积(MGA)及体积(MGV),同时检测尿白蛋白排泄率(UAER)、糖化血红蛋白(HbALC)、肾小球滤过率(Ccr)及肾重/体重比值。结果：8周时,各组糖尿病大鼠UAER、MGA、MGV、Ccr、肾重/体重比值、TGF-β1 mRNA及蛋白表达均较空白对照组明显增加(P<0.05或P<0.01)。还原型谷胱甘肽、盐酸氨基胍单独或联合治疗组UAER、MGA、MGV、Ccr、肾重/体重比值、TGF-β1 mRNA及蛋白表达均较糖尿病对照组明显降低(P<0.05或P<0.01)。结论：还原型谷胱甘肽对糖尿病大鼠肾脏具有保护作用。     

α-硫辛酸对糖尿病肾病大鼠肾纤维化的影响研究

目的通过α-硫辛酸对糖尿病肾病模型大鼠肾组织转化生长因子（TGF-β1）、结缔组织生长因子（CTGF）表达的影响,研究其延缓肾脏纤维化的作用及机制,为临床防治糖尿病肾病提供实验依据。方法将健康SD大鼠50只,体重250～300 g,随机分为6组：①正常对照组;②糖尿病对照组;③α-硫辛酸15、30、60mg/（kg.d）。50只采用STZ 45 mg/kg造成糖尿病模型,10只用等量柠檬酸缓冲液腹腔注射,造成模型组,用α-硫辛酸给糖尿病模型组给予剂量。检测各组的大鼠血糖,血清肌酐,肾重指数,制备肾脏石蜡切片,测定肾小球体积（MGA）和计算肾小球平均体积（MGV）。比较MGA和MGV;用SureStep Plus型血糖仪于实验结束前检测空腹血糖;用Western-Blot法检测肾组织TGF-β1、CTGF的表达。结果 DM组大鼠血糖明显升高,血清肌酐无明显变化;与DM组相比,治疗组大鼠血糖,血清肌酐均无统计学意义;DM组大鼠肾重指数明显增加,光镜先显示：DM组的大鼠肾小球体积明显增大,肾小球HE染色区扩大,系膜区增宽,毛细血管管腔受压,肾小球基底膜增厚,α-硫辛酸治疗后上述异常均有不同程度的改善,但未恢复到正常状态图像显示;DM组肾小球平均面积（MGA）和肾小球平均体积（MGV）明显扩大,与其相比,治疗组有不同程度的缩小。结论α-硫辛酸通过抑制肾组织TGF-β1、CTGF的表达而发挥其抗纤维化的作用,从而延缓STZ糖尿病大鼠肾脏纤维化的发展。     

肾康丸对糖尿病肾病大鼠肾脏TGF-β1/Smad 7通路的影响

目的探讨肾康丸对糖尿病肾病(DN)大鼠肾脏TGF-β1/Smad 7信号通路的影响。方法用链脲佐菌素(STZ)腹腔注射法诱导建立大鼠糖尿病(DM)模型,模型成功后随机分为3组:模型对照组、开搏通组、肾康丸组,另设正常对照组。治疗8周后,取大鼠肾脏,采用免疫组化法观察各组大鼠肾脏组织纤连蛋白(FN)、转化生长因子-β1(TGF-β1)和Smad 7蛋白表达的情况。结果8周后,DN模型组大鼠与正常大鼠比较,肾脏组织中FN和TGF-β1蛋白表达明显增加,Smad 7蛋白表达明显减少。肾康丸和开搏通都可以减少FN和TGF-β1蛋白的表达,增加Smad 7蛋白的表达。结论肾康丸可以抑制DN大鼠肾脏中TGF-β1/Smad信号传导通路的激活,减少ECM的沉积,从而延缓DN进程。     

α- 硫辛酸对糖尿病大鼠肾脏的保护作用及其可能的机制

目的 观察α- 硫辛酸（ALA）对糖尿病大鼠肾脏的保护作用,并探讨其可能的作用机制。 方法 复制糖尿病大鼠模型,分为糖尿病组（DM 组）、糖尿病硫辛酸组（ALA 组）,并设置正常对照组（NC 组）。实验6 周后处死全部大鼠,测定相应生化指标和相关氧化应激指标;HE、Masson 染色观察肾组织的形 态变化;免疫组织化学和Western blot 检测大鼠肾组织中核转录共抑制因子（SnoN）、转化生长因子（TGF-β1）、 Collagen I、Collagen IV 表达水平。结果 ① DM 组大鼠肾重/ 体重、血糖、血总胆固醇、三酰甘油、24 h 尿蛋白均高于NC 组,ALA 组除了血糖外以上其余指标均低于DM 组。② DM 组总抗氧化物酶活性（T-AOC）、 总超氧化物歧化酶活性（T-SOD）、过氧化氢酶活性（CAT）低于NC 组,丙二醛含量（MDA）增多;ALA 组T-AOC、T-SOD、CAT 活性高于DM 组,MDA 含量降低。③病理检查显示,DM 组大鼠出现肾纤维化 改变,ALA 组肾纤维化病变明显改善。④免疫组织化学和Western blot 结果显示：与NC 组相比,DM 组大 鼠SnoN 蛋白水平降低,TGF-β1、Collagen I 和Collagen IV 增高;与DM 组相比,ALA 组SnoN 蛋白水平升 高,TGF-β1、Collagen I 和Collagen IV 降低。结论 α- 硫辛酸可以增强DM 大鼠肾脏的抗氧化能力,上调 SnoN 蛋白的表达,从而抑制TGF-β1 信号通路而减少细胞外基质沉积,对糖尿病大鼠肾脏起到保护作用。     

芪术胶囊对糖尿病肾病大鼠肾组织TGF-β1和CTGF表达的影响

目的 观察芪术胶囊对糖尿病肾病（DN）大鼠肾脏保护作用.方法 采用单侧肾脏切除和腹腔注射链脲佐菌素的方法来建立大鼠糖尿病肾病模型,随机分为正常（NC）组、模型组（DM）、芪术胶囊（QZ）组、氯沙坦钾（LSTJ）组;成模1周后,QZ组按 1 g·kg-1给药,LSTJ组按 1.67 mg·kg-1给药.实验8周末观察各组大鼠血尿素氮BUN、血肌酐（Scr）、糖化血红蛋白（HbAlc）、胱抑素（CysC）以及24 h尿蛋白定量,并进行肾组织病理形态学观察以及免疫组化法检测肾组织中转化生长因子β1（TGF-β1）与结缔组织生长因子（CTGF）的蛋白表达.结果 与DM组相比：QZ组大鼠血清 BUN、Scr、HbAlc、Cys-c和24 h尿蛋白定量明显减低,肾组织病理形态学改变程度均明显改善,大鼠肾小球TGF-β1和CTGF表达均减弱.结论 芪术胶囊可以减少尿蛋白,降低血糖,改善肾功能,下调肾组织TGF-β1和CTGF表达,起到保护肾脏,延缓DN进展的作用.     

α-硫辛酸对糖尿病肾病模型大鼠肾组织转化生长因子-β1和结缔组织生长因子表达的影响

目的:通过α-硫辛酸对糖尿病肾病模型大鼠肾组织转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)、结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)表达的影响,研究其延缓肾脏纤维化的作用及机制,为临床防治糖尿病肾病提供实验依据。方法:将50只健康SD大鼠随机分为正常对照组,糖尿病模型组和α-硫辛酸低、中、高剂量组。采用链脲佐菌素(streptozocin,STZ)以60 mg/kg于左下腹腔一次性注射建立大鼠糖尿病模型。α-硫辛酸低、中、高剂量组分别按15、30、60 mg/(kg.d)灌胃12周。检测各组大鼠的血糖、肾重指数,制备肾脏石蜡切片,测定肾小球平均截面积(MGA)并计算肾小球平均体积(MGV)。用SureStep Plus型血糖仪于实验结束前检测空腹血糖;经HE染色,光镜下观察肾小球体积,肾小球基底膜变化,用免疫组化法检测肾组织TGF-β1、CTGF的表达。结果:与正常组相比,模型组大鼠血糖明显升高;与模型组相比,α-硫辛酸各剂量组大鼠血糖显著降低;糖尿病模型组大鼠肾重指数明显增加,光镜显示糖尿病模型组大鼠的肾小球体积明显增大,系膜区增宽,毛细血管管腔受压,肾小球基底膜增厚,肾组织TGF-β1、CTGF蛋白表达明显降低;糖尿病模型组MGA和MGV明显扩大,与其相比,α-硫辛酸各剂量组有不同程度的缩小。结论:α-硫辛酸通过抑制肾组织TGF-β1、CTGF的表达而发挥其抗纤维化的作用,从而延缓STZ糖尿病大鼠肾脏纤维化的发展。     

槲皮素脂质体对糖尿病肾病氧化应激和TGF-β1/Smad7通路的影响

目的 观察槲皮素脂质体(LQ)对糖尿病肾病氧化应激和转化生长因子-β1(TGF-β1)/Smad7通路的影响.方法 高糖高脂饮食联合腹腔注射链脲佐菌素(STZ)制备大鼠2型糖尿病肾病模型,随机分为糖尿病模型组(DM组)、槲皮素脂质体组(LQ组)和厄贝沙坦组(IRB组),另设正常组.8周后生化法测定各组大鼠血清中总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平,免疫组化检测大鼠肾脏TGF-β1和Smad7蛋白的表达,RT-PCR法检测大鼠肾皮质TGF-β1和Smad7 mRNA的表达情况.结果 与正常组比较,DM组大鼠血清中HDL、SOD、GSH-Px活性水平显著下降,TC、TG、LDL、MDA含量明显升高,肾组织TGF-β1蛋白及TGF-β1 mRNA表达均显著增高,Smad7蛋白及Smad7 mRNA表达减少.与DM组比较,LQ组和IRB组HDL、SOD、GSH-Px活性水平升高,TC、TG、LDL、MDA含量降低,肾组织TGF-β1蛋白及TGF-β1 mRNA减少,Smad7蛋白及Smad7 mRNA表达增加.结论 LQ通过减轻体内氧化应激反应,干预TGF-β1和Smad7通路从而对糖尿病肾病起保护作用.     

胞外调节蛋白激酶在糖尿病肾病中激活机制及健脾益肾活血中药的干预作用

目的:观察健脾益肾活血中药对糖尿病肾病(DN)大鼠肾皮质中磷酸化胞外调节蛋白激酶(P-ERK)、转化生长因子(TGF-β1)基因、血小板衍化生长因子(PDGF-B)基因的表达及肾脏病理变化的影响。探讨ERK被激活的分子机制及中药复方对DN肾脏的保护作用机制。方法:雄性Wistar大鼠33只,腹腔注射链脲佐菌素建立早期DN模型。将大鼠随机分为正常组、模型组、中药治疗组。观察6周。检测血糖、肾肥大指数,用Western Blot检测肾皮质P-ERK;用RT-PCR技术检测TGF-β1mRNA、PDGF-BmRNA的表达。结果:治疗后6周模型组和治疗组血糖值、肾肥大指数和肾小球系膜细胞基质(ECM)相对面积均明显高于正常组(P值均小于0.01)。治疗组血糖值、肾肥大指数、(ECM)相对面积低于模型组,(P值均小于0.01)。治疗组肾皮质P-ERK、TGF-β1mRNA、PDGF-BmRNA的表达均明显低于模型组,肾组织病变明显减轻。结论①ERK参与了DN的发生与发展。②中药复方抑制DN大鼠肾皮质中ERK的活性,并下调TGF-β1mRNA、PDGF-BmRNA的过度表达,减轻肾组织病理改变;③中药复方对DN肾脏的保护作用,可能与抑制ERK活性有关。④ERK活化与DN高血糖、TGF-β1RNA及PDGF-BmRNA的过度表达有关。