MS-HRM检测游离甲基化SEPT9在结直肠癌早期诊断中的应用

目的 建立一种稳定的甲基化敏感高分辨率熔解曲线(MS-HRM)定量检测血浆游离甲基化SEPT9的方法,并初步探讨利用此方法进行结直肠癌早期诊断的可行性.方法 按照不同比例混合甲基化和未甲基化DNA建立标准品,复管反应作出标准熔解曲线,定量检测36例结直肠癌患者血浆样本和20例正常人血浆样本甲基化SEPT9,并与Methylight进行比较.梯度稀释其中1例结直肠癌血浆游离DNA,分析其甲基化程度与DNA量是否独立.随机取2例结直肠癌样本重复甲基化修饰至MS-HRM分析,以排除修饰不完全对实验结果的影响.结果 SEPT9 MS-HRM法可检出混合甲样本中1%的甲基化,其检测灵敏度达1%.36例结直肠癌患者血浆中检测到25例(69.44%)有不同程度SEPT9基因甲基化,20例正常人血浆样本有2例(10%)呈现1%～5%甲基化.不同DNA量甲基化程度恒定,初步确定检测范围可达皮克级DNA.2例独立重复检测样本检测结果基本符合初次实验结果.结论 MS-HRM法检测游离的甲基化SEPT9简单易行,快速,稳定,敏感性高,检测样本范围广,有望为结直肠癌筛查开拓一个新平台.     

上海市闵行区筛查人群结直肠癌发病风险及确诊患者生存率分析

目的 分析人群经过结直肠癌筛查后的发病趋势及生存率,评价结直肠癌筛查项目的中远期效果。方法基于上海市闵行区七宝镇结直肠癌试点筛查项目,通过上海市恶性肿瘤登记系统及上海市生命统计系统追踪筛查人群结直肠癌的发病情况及确诊患者的生存情况,分析不同随访周期内相对于当地一般人群的标准化发病比（standardized incidence ratio,SIR）及确诊患者的生存率。结果 在所有参与筛查人群中共发现结直肠癌确诊患者144例,发病率为71.78/10万人年,SIR为0.71(95%CI:0.59～0.82)。随访时间小于1年、1～3年、4～6年以及7年以上的SIR分别为1.83(95%CI:1.20～2.46)、0.75(95%CI:0.53～0.98)、0.77(95%CI:0.56～0.98)和0.45(95%CI:0.23～0.66)。在筛查阴性人群中共发现结直肠癌确诊患者89例,发病率为51.4/10万人年,SIR为0.51(95%CI:0.40～0.62)。144例确诊患者3年生存率为77.2%,5年生存率为69.9%。结论 参与筛查人群中结直肠癌发病风险相较于当地同期一般人群...     

粪便FCP与血清CEA、CA125、CA19-9检测在结直肠癌筛查中的价值研究

目的 探究粪便钙卫蛋白(FCP)与血清癌胚抗原(CEA)、糖链抗原125(CA125)、糖链抗原19-9(CA19-9)在体检人群结直肠癌筛查中的价值.方法 选取2016年1月至2020年6月于天津市西青医院体检人群6000例,根据检查结果,分为结直肠癌组60例、肠息肉组100例、溃疡组125例、对照组5715例.检测并比较各组粪便FCP水平与血清CEA、CA125、CA19-9水平;观察结直肠癌组不同临床分期患者粪便FCP水平与血清CEA、CA125、CA19-9水平;观察结直肠癌组不同病理分型患者粪便FCP水平与血清CEA、CA125、CA19-9水平;比较粪便FCP与血清CEA、CA125、CA19-9单独和联合检测在结直肠癌筛查中的诊断效能.结果 结直肠癌组粪便FCP水平与血清CEA、CA125、CA19-9水平显著高于肠息肉组、溃疡组、对照组,差异有统计学意义(P<0.05);结直肠癌组Dukes C～D期患者粪便FCP水平与血清CEA、CA125、CA19-9水平均显著高于Dukes A～B期,差异有统计学意义(P<0.05);结直肠癌组中高分化癌患者粪便FCP水平与血清CEA、CA125、CA19-9水平均显著高于低分化癌,差异有统计学意义(P<0.05);粪便FCP水平与血清CEA、CA125、CA19-9联合检测的灵敏度、特异度、准确度、阳性预测值、阴性预测值、ROC曲线下面积(AUC)均显著高于单一指标检测,差异有统计学意义(P<0.05).结论 粪便FCP水平与血清CEA、CA125、CA19-9水平在结直肠癌患者中显著升高,可作为体检人群结直肠癌筛查指标.     

结直肠癌PINCH基因单核苷酸多态性的小样本检测

目的 筛选结直肠癌患者PINCH基因单核苷酸多态性(SNP)位点,初步探讨PINCH基因SNP与结直肠癌相关性,为后续结直肠癌风险预测提供参考.方法 抽提36例结直肠癌患者和30例非结直肠癌人群外周血单个核细胞DNA;同时对术中采集的配对的36例正常黏膜组织匀浆后提取DNA.对PINCH基因外显子区进行PCR扩增并对产物进行测序分析.结果 PINCH基因外显子区域内共筛查出10个SNP,其中rs74632558的SNP基因型在结直肠癌和非结直肠癌人群之间有差异,但无统计学意义,同时发现了3个未登陆的SNP.结论 PINCH基因外显子区rs74632558 SNP可能与结直肠癌发生有一定关系.     

血浆25-羟维生素D水平与结直肠肿瘤关系的病例对照研究

目的 探讨血浆25-羟维生素D水平与结直肠肿瘤发生的关系.方法 采用病例对照研究,对结直肠癌、进展期腺瘤、腺瘤和增生性息肉患者及健康人群血浆25-羟维生素D水平进行比较,并将结直肠癌患者按照病变部位(近端结肠、远端结肠)进行分层分析.结果 将25-羟维生素D水平分为≤13.39、13.39～18.23和≥18.23 ng/mL 3个等级,结直肠癌(P＜0.001)、进展期腺瘤(P＜0.001)、腺瘤(Ptrend＜0.001)和增生性息肉(Ptred=0.013)患者血浆25-羟维生素D均低于健康对照人群,其维生素D最高值与最低值比较OR(95％CI)依次为0.33(0.21,0.53)、0.18(0.09,0.38)、0.09(0.01,0.41)、0.25(0.08,0.77).按发病部位进行分层后,近端结直肠癌(Ptrend=0.001)和远端结直肠癌(P＜0.001)患者血浆25-羟维生素D水平均低于健康对照人群,其维生素D最高值与最低值比较OR(95％CI)依次为0.26(0.12,0.56)和0.33(0.20,0.56).结论 血浆25-羟维生素D可降低结直肠肿瘤发病风险,且与病变部位无关.     

重庆地区人群亚甲基四氢叶酸还原酶基因多态性与结直肠癌易感性关系研究

目的 探讨重庆人群亚甲基四氢叶酸还原酶(Methyenetetrahdrofolate reducatase,MTHFR)基因多态性与结直肠癌的关系，研究叶酸、MTHFR基因多态性以及结直肠癌发生的交互作用。方法 ①用聚合酶链反应限制性片段多态性(PCR-RFIP)技术，检测82例结直肠癌患者和82例正常对照的MTHFR基因多态性。②使用放免方法检测病例及对照血浆中的叶酸含量。结果 ①病例组叶酸水平显著低于对照组。②结直肠癌患者与对照MTHFR突变基因型率分别为56．1％和51．3％，无统计学差异。结论 叶酸水平与结直肠癌的发生显著相关，是结直肠癌发病的保护因素。在重庆人群中MTHFR基因多态性可能不是结直肠癌发生的危险因素。     

HPV DNA检测在宫颈病变筛查中的价值

目的 探究人乳头状瘤病毒(HPV) DNA检测对宫颈癌及其癌变前期的筛查效果.方法 对2014年1月至2016年12月到四川省人民医院接受官颈病变筛查的2 852例患者进行HPV DNA检测,同时进行病理活检,并以病理检查结果为金标准.考察不同年龄、区域(农村和城市)和肥胖对HPV DNA阳性检出率的影响,同时比较不同病理分型HPV DNA检测结果,分析HPV DNA检测的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值及漏诊率.结果 18～＜35岁组患者的HPV阳性率明显高于35～＜50岁组和50～58岁组,差异有统计学意义(P＜0.05);35～＜50岁组患者的HPV阳性率与50～58岁组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).城市组患者的HPV阳性率明显低于农村组,差异有统计学意义(P＜0.05);正常体质量组和体质量超标组HPV阳性率比较,差异无统计学意义(P＞0.05).HPV DNA筛查阳性患者病理检查癌变前期检出率为28.60％,癌症检出率为1.60％;HPV DNA检测灵敏度为87.79％,特异度为86.98％,阳性预测值为30.20％,阴性预测值为99.11％,漏诊率为12.21％.结论 HPV DNA检测对于宫颈病变筛查具有较高的灵敏度和特异度.     

SDC2和TFPI2基因甲基化联合检测在结直肠癌早期筛查中的应用价值

目的 探讨粪便样本中硫酸类肝素蛋白多糖基因(SDC2)甲基化和组织因子途径抑制物2基因(TFPI2)甲基化联合检测在结直肠癌早期筛查中的应用价值。方法 选取106例结直肠癌患者(结直肠癌组)、75例进展期腺瘤患者(进展期腺瘤组)、35例非进展期腺瘤患者(非进展期腺瘤组)为研究对象，并以同期153例其他消化系统干扰性疾病患者、182例结肠镜检查结果为阴性者作为对照组，采用甲基化荧光定量PCR(qMSP)法对所有受试者的粪便标本进行SDC2和TFPI2基因甲基化检测。以结肠镜检查及病理检查结果为金标准，评估SDC2和TFPI2基因甲基化联合检测对结直肠癌和腺瘤检测的灵敏度和特异度。结果 106例结直肠癌患者中，甲基化联合检测灵敏度为93.4%;75例进展期腺瘤患者中，甲基化联合检测灵敏度为62.7%;35例非进展期腺瘤患者中，甲基化联合检测灵敏度为34.3%; SDC2和TFPI2基因甲基化联合检测对结直肠癌和腺瘤筛查的特异度为94.6%。结论 SDC2和TFPI2基因甲基化联合检测对结直肠癌及其早期病变具有较高的灵敏度，同时保持较高的特异度。     

结直肠癌患者血浆循环游离DNA的RAS突变与临床特征的关系

目的 探讨结直肠癌患者血浆循环游离DNA(cfDNA)与肿瘤组织DNA的RAS基因突变检测的一致性,以及与临床特征的关系.方法 收集71例结直肠癌患者的血浆及肿瘤组织标本.采用多重荧光PCR法检测血浆标本cfDNA的RAS的基因突变状态,并与肿瘤组织标本的相应基因突变状态对比分析.分析血浆RAS基因突变状态与患者临床特征的关系.结果 血浆cfDNA的RAS突变率为32.39%,组织DNA的RAS突变率为50.70%,两种标本的RAS突变检测的一致率为76.06%,血浆cfDNA与组织DNA的RAS突变检测结果一致(Kappa=0.523,P=0.000).血浆cfDNA检测的敏感性为58.33%、特异性为94.29%、阳性预测值为91.30%、阴性预测值为68.75%.血浆cfDNA的RAS突变状态与结直肠癌患者年龄、性别、分期(Ⅳa与Ⅳb)、原发肿瘤部位、肺转移、CEA水平、CA199水平等无明显相关性,而血浆cfDNA的RAS突变与结直肠癌患者肝脏转移有相关性(P=0.045),肝转移患者较未发生肝转移的患者突变率升高.结论 血浆cfDNA可以作为无法获得组织标本的结直肠癌患者的RAS基因检测的替代标本,具有临床应用价值,且结直肠癌患者肝脏转移cfDNA RAS突变率升高.     

南京地区结直肠癌筛查初步结果分析

目的:对南京地区结直肠癌筛查的初步结果进行分析。方法:采用粪便隐血试验联合结肠镜检查在南京地区进行结直肠癌的筛查。结果:1年内共开展筛查850例,其中初筛阳性并行结肠镜检查者722例。共诊断结直肠癌37例,结直肠息肉222例,结直肠其他病变170例。37例结直肠癌患者中15例于我院手术切除,病理分期均为Ⅰ期。对临床症状与肿瘤相关性进行Logistic回归分析显示,便血及便秘与结直肠癌存在高度相关性。结论:筛查能够提高结直肠良性肿瘤及早期肠癌的诊断率,应该对一般人群尤其是存在便血及便秘的人群积极开展结直肠癌的筛查。     

循环血Septin 9基因甲基化检测在结直肠癌筛查中的应用价值

目的 研究循环血Septin 9基因甲基化在结直肠癌筛查中的检出率及术后监控中的临床意义。方法 选取甘肃省人民医院2018年1月-2019年1月入院结直肠癌患者125例为实验组,74例非肿瘤患者为对照组,检测外周血Septin 9基因甲基化、癌胚抗原（CEA）、CA199、CA724,统计4项检查指标的诊断灵敏度、特异度、总符合率,观察结直肠癌患者术后4项检查指标阳性率。结果 Septin 9基因甲基化阳性检出率实验组较对照组显著升高（P<0.05）。实验组检测中Septin 9基因甲基化诊断灵敏度较其他3项检查指标显著增高（P <0.05）,4项检测指标总符合率对比Septin 9为最高（P<0.05）。结论 循环血Septin 9基因甲基化检测较CEA、CA199、CA724在结直肠癌诊断中具有更高诊断效能,可用于结直肠癌筛查以及疗效评估。     

linc00673在结直肠癌患者血浆中的表达及临床意义

目的 检测结肠息肉和结直肠癌患者血浆中linc00673的表达水平,为血浆linc00673在结直肠癌早期筛查中的应用提供理论依据。方法 收集某院2018年6月至2018年12月期间收治的结肠息肉、结直肠癌住院患者,共108例作为研究对象。采用real-time PCR检测linc00673在结直肠癌和结肠息肉患者血浆中的表达水平,分析linc00673表达水平与结直肠癌患者年龄、性别、TNM分期、肿瘤部位、大体类型、淋巴结转移及肿瘤大小的临床相关性。结果 结直肠癌患者血浆中linc00673表达水平明显高于结肠息肉患者(P<0.05);其表达水平与患者年龄、性别、TNM分期、肿瘤部位、大体形态和淋巴结转移无关,仅与肿瘤体积大小呈正相关(P<0.01)。结论 血浆linc00673水平与结直肠癌发生、发展密切相关,可作为结直肠癌早期筛查的潜在标志物。     

浆细胞瘤转化迁移基因1在结直肠癌患者血浆中的表达与临床意义

目的: 检测长链非编码RNA浆细胞瘤转化迁移基因1(plasmacytoma variant translocation gene 1,PVT1)在结直肠癌患者血浆中的表达并探讨其临床意义。方法: 收集90例结直肠癌患者术前血浆、30例结直肠腺瘤患者血浆、42例体检健康者(对照组)血浆及29例配对的结直肠癌患者术后2～3周的血浆标本。采用实时荧光定量PCR(qRT PCR)方法检测上述标本的 PVT1表达水平,并对29例结直肠癌患者术前、术后进行比较。分析血浆PVT1表达量与结直肠癌临床病理参数的相关性。采用受试者工作特征曲线(ROC)评估血浆PVT1对结直肠癌的诊断效能。结果： 与对照组相比,结直肠腺瘤组、结直肠癌组及TNM Ⅰ/Ⅱ期结直肠癌组血浆PVT1表达水平均显著升高(P均＜0.05),且结直肠癌患者术后表达水平较术前明显降低(P＜0.01);结直肠癌患者血浆中PVT1表达水平与年龄、性别及肿瘤的部位、大小、分化程度、TNM分期等无相关性(P＞0.05);血浆PVT1单独诊断结直肠癌的效能高于常规肿瘤标志物癌胚抗原;PVT1与癌胚抗原联合检测对结直肠癌及TNM Ⅰ/Ⅱ期结直肠癌诊断价值均高于PVT1、癌胚抗原单独检测。 结论： lncRNA PVT1在结直肠癌及癌前病变患者血浆中表达上调,其可作为结直肠癌临床诊断和术后监测潜在的循环分子标志物。     

结直肠癌患者围术期静脉血栓栓塞症风险筛查与管理路径的应用效果分析

目的 探讨围术期静脉血栓栓塞症风险筛查与管理路径的构建与应用对结直肠癌患者深静脉血栓的预防作用.方法 选取2019年1月至2020年4月在安徽省肿瘤医院行结直肠癌根治术的190例患者为研究对象.基于文献回顾与小组会议形成初稿,选取8名专家进行2轮德尔菲专家咨询,形成终版血栓风险筛查与管理路径.将实施风险筛查和管理路径前(2019年1月～6月)的95例患者设为对照组;实施后(2019年7月～2020年4月)的95例患者设为干预组.比较两组患者术前、术后3天、2周的凝血酶原时间(PT)、血浆纤维蛋白原(FIB)、D-二聚体、血小板计数、深静脉血栓发生率、住院天数及住院费用.结果 对照组术后发生血栓13例(13.69％),多于干预组的4例(4.21％),差异有统计学意义(P<0.05).两组患者的PT、FIB、血小板计数、D-二聚体水平不同时间点差异有统计学意义(P<0.05);组间PT、FIB、D-二聚体水平差异有统计学意义(P<0.05);其中D-二聚体存在干预和时间的交互效应(P<0.05).干预组住院时间及住院费用均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 静脉血栓栓塞症风险筛查与管理路径的应用可有效降低结直肠癌术后患者发生深静脉血栓的风险、缩短住院时间,降低治疗费用.     

外周血p73基因联合CEA检测在结直肠癌早期筛查中的意义

目的:探讨外周血p73基因甲基化联合CEA检测在结直肠癌早期筛查中的临床意义。方法:选取2013年6月-2017年3月本院住院患者142例,将其分为结直肠癌组64例和结直肠瘤组78例,另选取健康体检者142例为健康对照组。采用甲基化特异性PCR(MSP)对所有受检者行血浆p73基因甲基化检测,并测定血清CEA。比较单独与联合检测联合血浆p73基因甲基化及血清CEA对结直肠癌的诊断准确性、阴性预测值、敏感性及特异性。结果:结直肠癌组血浆p73基因甲基化、血清CEA和联合检测的阳性率均明显高于结直肠瘤组和健康对照组,差异均有统计学意义(P0.001);且结直肠瘤组均明显高于健康对照组,差异均有统计学意义(P0.001)。联合血浆p73基因甲基化测定和血清CEA对结直肠癌的诊断敏感性优于单独检测(x~2=9.581、16.762,P0.01);阴性预测值高于单独检测,特异性低于单独检测,但差异均无统计学意义(P0.05)。结论:联合血浆p73基因甲基化测定及血清CEA对结直肠癌的早期筛查有重要的临床意义。     

DNA氧化损伤和结直肠癌发病风险的相关研究

目的 探讨总抗氧化能力,DNA氧化损伤和单核苷酸多态性（SNP）与结直肠癌的相关风险.方法 收集175份人血液样本,其中80例健康对照,67例肠息肉,28例结直肠癌患者.分别采用碱性和经DNA糖基化酶修饰的彗星试验,测定外周血白细胞的直接与DNA氧化损伤,以及血浆中的总抗氧化能力,并采用Applied Biosystems公司的引物系统对单核苷酸多态性进行等位基因鉴别检测.结果 结直肠癌患者氧化应激诱导的DNA损伤水平显著高于健康对照组（P＜0.05）.肠癌组直接DNA损伤水平也表现出明显升高的趋势（P =0.071）.肠息肉人群总抗氧化能力显著高于对照组.分析肠癌与生活方式（如吸烟和饮酒）关系,肠癌组吸烟率显著高于健康对照组（P＜0.01）.分析DNA损伤和修复,代谢和解毒等基因的单核苷酸多态性,hOGG1和GSTM的单核苷酸多态性与结直肠癌之间有一定的相关性.结论 高水平的氧化应激诱导的DNA损伤与结直肠癌的发病风险增加相关,是值得进一步研究的潜在的肿瘤生物标志物.     

多肿瘤标志物液态芯片技术检测恶性肿瘤的临床应用价值

目的 探讨多肿瘤标志物液态芯片技术检测恶性肿瘤的临床应用价值。方法 利用多肿瘤标志物液态芯片技术分析121例恶性肿瘤患者、42例良性疾病患者、39例正常对照者血清中9种常见肿瘤标志物的水平,分析该方法的灵敏度、特异性和检出肿瘤的阳性率。结果 该方法对恶性肿瘤的检测有较好的灵敏度和特异性（分别为81．8%和76．5％）,对肺癌、肝癌、结直肠癌、胃癌、卵巢癌、胰腺癌和前列腺癌等常见肿瘤进行9项指标联合检测的阳性率均高于单一标志物的检测（P〈0．05）。结论 多肿瘤标志物液态芯片定量检测是一种较好的肿瘤标志物检测方法,可以明显提高恶性肿瘤诊断的敏感性,同时也可以作为高危人群的早期肿瘤筛查手段之一,对肿瘤防治具有一定的意义。     

粪便SPG20、FBN1及VIM基因启动子甲基化联合检测在结直肠癌诊断中的意义

目的:探讨粪便标本的痉挛性截瘫-20(SPG20)、微纤维蛋白-1(FBN1)及波形蛋白(VIM)基因启动子甲基化联合检测在结直肠癌诊断及筛查中的意义。方法:选取结直肠癌患者75例为观察组,30例健康、年龄匹配的经结肠镜检查阴性者为正常对照组。提取组织及粪便标本DNA,应用甲基化特异性聚合酶链式反应(MSP)方法检测组织及粪便标本中SPG20、FBN1及VIM基因启动子甲基化状态。结果:结直肠癌患者癌组织中SPG20、FBN1及VIM基因启动子甲基化显著高于远癌组织;结直肠癌患者粪便中SPG20、FBN1及VIM基因启动子甲基化显著高于健康对照人群。联合检测显示,96%的患者表现为至少有一个基因启动子区呈现异常的甲基化状态,而在健康人群中,仅有4个(13.3%)呈现基因的异常甲基化状态。因此应用SPG20、FBN1、VIM三个基因启动子区甲基化状态对结直肠癌患者进行筛查的敏感性为96.0%,特异性为86.7%。结论:粪便标本的SPG20、FBN1及VIM基因启动子甲基化联合检测在结直肠癌的诊断和筛查中具有重要的应用价值。     

血清血小板反应蛋白2在结直肠癌早期诊断中的应用价值研究

目的:探讨血清血小板反应蛋白2(THBS-2)检测在结直肠癌早期诊断中的临床应用价值.方法:应用ELI-SA法检测23例结直肠癌患者及34例健康对照者血清中THBS-2的水平,通过ROC曲线来确定血清THBS-2检测诊断结直肠癌的灵敏度和特异度,并通过计算约登指数(Youden index)来确定THBS-2的cutoff值;同时与临床常用标志物CEA进行对比分析.结果:健康对照组和结直肠癌患者组血清中THBS-2的平均水平分别为(37.66±12.91)ng/ml和(6.59±18.58)ng/ml(P<0.001);AUC为0.934,最佳cutoff值17.495 ng/ml,灵敏度87％,特异度100％;23例结直肠癌患者中血清THBS-2检测出阳性患者20例,CEA检测出阳性患者11例(P<0.001).结论:与健康对照组相比,结直肠癌患者血清中THBS-2水平明显降低;早期诊断结直肠癌患者的灵敏度和特异度都很高,阳性检出率比CEA高,对结直肠癌的早期诊断具有非常重要的临床应用价值.     

我国结直肠癌筛查方案的研究进展及筛查困境分析

近年来,我国结直肠癌的发病率及死亡率呈上升趋势且增长迅速。大多数结直肠癌从正常肠黏膜到异常增生,再到最终恶性变的发展过程长达数十年,该时机使结直肠癌平均风险个体发生癌变之前就检测和移除早期癌前病变成为可能,这一生物学特性使其成为理想的在人群中进行筛查的癌症之一。现阶段,越来越多的国家拟通过在人群中进行结直肠癌筛查来改变结直肠癌高发病率、高死亡率和早期低诊断率的现状。本文阐述了常用结直肠癌筛查方法及手段,总结了结直肠癌筛查的研究现状,以期为临床实践提供参考。