磷酸化Stat3和磷酸化Akt及磷酸化ERK1/2在表皮良恶性肿瘤中的表达

目的 探讨磷酸化细胞信号传导与转录活化因子3(p-Stat3)和磷酸化Akt(p-Akt)及磷酸化细胞外信号调节激酶(p-ERK1/2)在表皮良恶性肿瘤中的表达.方法 采用免疫组化的方法检测脂溢性角化病,光线性角化病,鲍恩样丘疹病,基底细胞上皮瘤,鲍恩病,鳞状细胞癌中p-Stat3,p-Akt及p-ERK1/2的表达.结果 p-Stat3,p-Akt及p-ERK1/2阳性表达率在表皮恶性肿瘤中明显高于良性肿瘤(P均<0.05).p-Stat3和p-Akt的阳性表达率在表皮恶性肿瘤中从高到低依次为鳞状细胞癌>鲍恩病>基底细胞上皮瘤,而p-ERK1/2的阳性表达率无差异(P>0.05).在表皮恶性肿瘤中,p-Stat3和p-Akt的阳性表达呈显著正相关(P<0.05).而p-ERK1/2的阳性表达与p-Star3、p-Akt的阳性表达之间无相关性(P>0.05).结论 p-Stat3,p-AKT和p-ERK1/2参与表皮恶性肿瘤的发病.     

活化Stat 3和细胞周期蛋白D1蛋白在寻常性银屑病中的表达

目的 探讨寻常性银屑病中磷酸化信号传导和转录激活因子(p-Stat 3)和细胞周期蛋白(Cyclin D1)的表达及其相关性。方法 通过免疫组化方法研究p-Stat 3和Cyclin D1蛋白在寻常性银屑病中的表达,并探讨p-Stat 3和Cyclin D1蛋白表达的相关性。结果 在22例的寻常性银屑病标本中,19例p-Stat 3和20例Cyclin D1染色阳性,且染色均位于表皮棘细胞层的细胞核中,但一些血管内皮细胞p-Stat 3染色呈阳性。而且,p-Stat 3蛋白表达与Cyclin D1的表达有显著相关性(P<0.01)。结论 Stat 3信号途径在银屑病的发病机制中起作用。     

Paget病皮损中p-Stat3,p-Akt,cyclinD1蛋白表达及其相关分析

目的探讨磷酸化细胞信号转导与转录活化因子3(p-Stat3)、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)、细胞周期蛋白D1(cyclinD1)在Paget病中的表达及意义。方法采用免疫组化法检测p-Stat3,p-Akt和cyclinD1在21例Paget病(包括乳房及乳房外)、15例汗管瘤和10例正常人皮肤组织中的表达水平,利用图像分析技术测量阳性细胞的平均光密度值,并对这3种蛋白的表达进行相关性分析。结果 Paget病中p-Stat3,p-Akt和cyclinD1的平均光密度值均明显高于汗管瘤和正常人皮肤组织,差异均有统计学意义(P均<0.001),而汗管瘤和正常皮肤组织比较差异无统计学意义(P>0.05);乳房Paget病与乳房外Paget病比较,p-Stat3,p-Akt和cyclinD1蛋白的表达差异均无统计学意义(P均>0.05);p-Stat3与cy-clinD1的表达,p-Akt与cyclinD1的表达及p-Stat3与p-Akt的表达均呈正相关(r=0.809,0.776,0.516,P均<0.05)。结论 Paget病中存在p-Stat3,p-Akt和cyclinD1的高表达,p-Stat3,p-Akt可能通过JAK/Stat3信号转导通路及PI3K/Akt信号转导通路诱导cyclinD1的过度表达,促使肿瘤细胞的生长及增殖。     

DNA甲基转移酶与CD11a基因在SLE患者中的表达

目的 探讨DNA甲基转移酶(DNMT)的表达异常在SLE发病中的作用.方法 以半定量RT-PCR方法检测了SLE缓解期、活动期及正常人外周血单核细胞(PBMC)中DNMT及CD11a基因表达水平,并进行相关性分析.结果 SLE缓解期患者PBMC中DNMT1的表达水平显著低于正常人对照组(t=5.90,P<0.0001);活动期的表达水平也显著低于对照组(t=2.26,P=0.0001);缓解期与活动期比较差异无统计学意义(t=1.75,P=0.089).SLE缓解期、活动期及对照组PBMC中DNMT3A的表达水平差异无统计学意义,DNMT3B的表达水平极低.SLE缓解期PBMC中CD11a表达水平明显高于对照组(t=5.35,P<0.0001);活动期的表达水平显著高于缓解期(t=2.99,P=0.006)和正常人对照组(t=6.57,P<0.0001).DNMT1的降低与SLE疾病活动指数(SLEDAI)间无显著相关性(r=-0.34,P>0.05),CD11a的升高与SLEDAI间呈显著正相关(r=0.48,P<0.05),DNMT1与CD11a间无显著相关性(r=-0.18,P>0.05).结论 DNMT1表达水平降低在SLE的发病中可能起作用.但不是决定DNA甲基化状态的惟一因素.     

Stat1和含SH2区域的SHP-1在尖锐湿疣中的表达

目的 探讨JAK/STAT通路中信号转导和转录激活因子Stat 1和含SH2区域的酪氨酸磷酸酶SHP-1在尖锐湿疣中的异常表达。方法 原位杂交技术诊断HPV6/11相关尖锐湿疣,SP免疫组化染色技术检测40例HPV6/11阳性尖锐湿疣患者皮损、20例正常人皮肤(包皮)中Stat 1和SHP-1的表达及分布。结果 尖锐湿疣皮损中Stat 1和SHP-1的表达均强于正常人上皮中的表达,两者比较差异均有统计学意义(前者W=382.5,P<0.01;后者W=369,P<0.01)。尖锐湿疣患者皮损中Stat 1和SHP-1阳性细胞主要分布于棘细胞层,Stat 1阳性反应定位于胞浆或胞核,SHP-1阳性反应主要定位于胞浆。尖锐湿疣患者中Stat 1和SHP-1的表达呈显著相关性(tau-b=1.0,P<0.01)。结论 HPV6/11阳性尖锐湿疣中Stat 1和SHP-1表达增强,提示HPV6/11感染时可能通过JAK/STAT通路,在角质形成细胞过度增殖中起作用。     

二期梅毒患者外周血淋巴细胞凋亡及其Fas、Bcl-2表达的研究

目的 检测二期梅毒患者外周血淋巴细胞(PBLC)凋亡及其Fas、Bcl-2的表达,探讨二期梅毒患者免疫功能异常与淋巴细胞凋亡的关系。方法 采用流式细胞仪检测33例二期梅毒患者和30例正常人PBLC细胞凋亡及其Fas、Bcl-2的表达。结果 梅毒患者PBLC及CD4⁺细胞Fas表达明显高于对照组(P<0.01),而Bcl-2表达明显低于对照组(P<0.01)。CD8⁺、CD19⁺细胞Fas、Bcl-2表达两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。梅毒患者PBLC及CD4⁺细胞凋亡率显著高于对照组(P<0.01),CD8⁺及CD19⁺细胞凋亡率两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。梅毒患者PBLC及CD4⁺细胞凋亡率分别与其Fas表达呈显著正相关(r=0.68,P<0.01;r=0.71,P<0.01),但与Bcl-2表达呈显著负相关(r=-0.82,P<0.01;r=-0.74,P<0.01)。结论 二期梅毒患者细胞免疫功能异常可能与淋巴细胞凋亡过度有关,而淋巴细胞凋亡过度与Fas、Bcl-2表达异常有关。     

可诱导共刺激分子在系统性红斑狼疮患者外周血T淋巴细胞的表达

目的 探讨可诱导共刺激分子(ICOS)在系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血T淋巴细胞的表达。方法 应用双色荧光抗体染色技术经流式细胞仪检测了33例SLE患者和16例正常人对照者外周血中T淋巴细胞表面ICOS的自然表达水平,同时收集SLE患者的实验室检查指标,并用SLE疾病活动指数(SLEDAI)来判定SLE患者疾病活动程度,比较分析不同组别SLE患者ICOS表达水平与SLEDAI的相关性。结果 活动期SLE组T淋巴细胞ICOS表达水平明显高于正常人对照组(P<0.01)和非活动期SLE组(P<0.01),非活动期SLE组与正常人对照组T淋巴细胞ICOS表达水平则差异无统计学意义(P>0.05)。活动期组与非活动期组SLE患者T淋巴细胞ICOS表达水平均与SLEDAI呈显著正相关(r=0.71,P=0.001、r=0.56,P=0.03)。结论 活动期SLE患者T淋巴细胞ICOS表达增高,ICOS可能与SLE的发病机制有关。     

特应性皮炎患者血浆中P物质的测定及其临床意义

目的 探讨特应性皮炎患者血清中P物质水平及其临床意义.方法 用放射免疫法测定35例特应性皮炎患者血浆中P物质浓度,观察P物质与疾病严重程度积分及嗜酸粒细胞数的关系.结果 特应性皮炎患者血浆中P物质浓度明显高于正常人对照P<0.01),且疾病的EASI评分和Rajka严重度积分与P物质浓度呈显著正相关,r分别为0.95和0.86,P均<0.01.特应性皮炎患者外周血嗜酸粒细胞数明显高于正常人对照(P<0.01),并且与疾病的严重度呈正相关(与EASI评分r=0.42,P=0.011,与Rajka严重度积分r=0.42,P=0.013):特应性皮炎患者血浆中P物质浓度与外周血嗜酸粒细胞数呈正相关(r=0.43,P=0.009).结论 P物质对判断特应性皮炎活动性可能有一定价值;P物质可能与嗜酸粒细胞共同参与特应性皮炎发病.     

核因子κB和c-myc在尖锐湿疣皮损角质形成细胞中的表达

目的 探讨核因子-κB(NF-κB)和c-myc在尖锐湿疣皮损角质形成细胞中的表达。方法 采用原位杂交方法检测尖锐湿疣50例,确定为HPV6/11阳性;采用免疫组化En Vision二步法检测50例尖锐湿疣患者皮损和25例正常人皮肤(包皮)中NF-κB和c-myc的表达及分布。结果 ①与正常人皮肤对照组相比,尖锐湿疣皮损角质形成细胞中NF-κB和c-myc的表达均有不同程度增强(前者U=6.286,P<0.01;后者U=4.356,P<0.01)。NF-κB表达主要分布于棘细胞层,阳性信号定位于胞浆。c-myc表达主要分布于表皮全层或棘细胞层和基底层,阳性信号定位于胞核。②尖锐湿疣皮损中,NF-κB与c-myc的表达呈正相关(r=0.89,P<0.01)。结论 在HPV6/11感染时,角质形成细胞中转录因子NF-κB和c-myc的表达增高,可能均参与HPV感染细胞增殖的调控。     

尖锐湿疣患者角质形成细胞中活化型细胞外信号调控蛋白激酶和活化型p38的检测

目的 探讨尖锐湿疣皮损角质形成细胞中活化型细胞外信号调控蛋白激酶(p-ERK)和活化型p38(p-p38)的表达。方法 采用原位杂交方法诊断HPV6/11相关尖锐湿疣50例;采用免疫组化EnVision二步法检测50例尖锐湿疣皮损中p-ERK和p-p38的表达及分布,并以25例正常人皮肤(包皮)作为对照。结果 ①p-ERK和p-p38在尖锐湿疣角质形成细胞中的表达较正常人上皮中均有不同程度的增强,前者u=4.113,P<0.01;后者u=4.497,P<0.01,其表达主要分布于棘细胞层,阳性信号均定位于胞核。②尖锐湿疣皮损中,p-ERK与p-p38的表达呈显著正相关(r=0.42,P<0.01)。结论 HPV6/11阳性尖锐湿疣患者中,p-ERK和p-p38的表达较正常人皮肤明显增强,提示在HPV6/11感染时,角质形成细胞中激酶ERK和p38的激活增加,可能通过ERK和p38MAPK通路起作用。     

Further confirmation of the association of human herpesvirus 8 with Kaposi's sarcoma

Recently, a new herpesvirus-like DNA sequence named Kaposi's sarcoma-associated herpesvirus (KSHV) or human herpesvirus 8 (HHV8) has been isolated from almost all cases of Kaposi's sarcoma (KS). It has not been found in most benign and malignant cutaneous hemangioproliferative disorders other than KS. To further verify the specificity of the association of this new viral DNA with KS, we examined in total 42 cases of vascular neoplasms of endothelial derivation using nested polymerase chain reaction (PCR) for the presence of a 233-bp segment of this KSHV/HHV8 on paraffin-embedded specimens. In our investigation, we added an additional step to conventional PCR protocol that uses UV light to pretreat all the PCR regeants except Taq DNA polymerase and the target DNA to eliminate the false positives caused by trace contamination. All 15 cases of typical KS, both AIDS and non-AIDS related, as well as 4 cases of atypical vascular tumors suspicious of KS, were positive for this KSHV/HHV8 DNA sequence. The remaining 23 cases of hemangioproliferative disorders other than KS, including angiosarcoma, capillary hemangioma, angiolymphoid hyperplasia with eosinophilia, epithelioid hemangioma, histiocytoid hemangioma, hemangioendothelioma, and microvenous hemangioma, were negative for HHV8. These results confirm the previous observation that KSHV/HHV8 is specific for KS within hemangioproliferative cutaneous disorders, and PCR for detection of KSHV/HHV8 might be used as an additional diagnostic tool in distinguishing KS.     

P16、P21WAF1/CIP1、PCNA和cyclin E在脂溢性角化病中的表达及其意义

目的：研究脂溢性角化病皮损组织中P16、P21^WAF1/CIP1、PCNA、cyclinE四种细胞周期素相关因子的表达及意义。方法：应用免疫组化PV法（改进的SP法），对50例脂溢性角化病病人和10例正常人皮肤进行P16、P21^WAF1/CIP1、PCNA、cyclinE四种细胞周期素相关因子的测定。结果：脂溢性角化病患者中这四种因子的表达阳性率分别为：78％、68％、70％、46％；而正常对照组的阳性率仅为：40％、30％、50％、10％。结论：P16、P21^WAF1/CIP1、PCNA、cyclinE四种细胞周期素相关因子在脂溢性角化病的发病中可能起重要作用。     

p-Akt在恶性黑素瘤中的表达及意义探讨

目的 探讨p-Akt（Ser-473）表达水平与恶性黑素瘤的临床和病理学参数的关系。方法 应用免疫组化方法检测21例恶性黑素瘤患者手术切除的肿瘤标本中p-Akt的表达,以21例色素痣作对照,分析其与恶性黑素瘤的临床特征及预后的关系。结果 p-Akt在转移性黑素瘤的表达阳性率（67%）高于原发性黑素瘤（56%）,而在色素痣中表达阴性,三组间的表达阳性率差异有统计学意义（P < 0.05）。肿瘤浸润深度及年龄与p-Akt表达率呈显著正相关（r值分别为0.41和0.53,P均 < 0.05）。p-Akt的强表达与恶性黑素瘤患者的5年生存率显著相关（r = 0.41,P < 0.05）,而高危黑素瘤（浸润厚度 > 1.5 mm）患者中p-Akt的强表达与生存率的相关性更为显著（OR = 2.586,95%可信区间为0.906 ～ 7.382,P < 0.05）。结论 p-Akt的表达随着恶性黑素瘤的浸润程度和进展显著提高,并与患者的5年生存率密切相关。此外,p-Akt可能有利于判断高危黑素瘤患者的预后。     

Definition of the features of acquired elastotic hemangioma reporting the clinical and histopathological characteristics of 14 patients

Background: During the last few years, new cutaneous vascular proliferations have been described, including a distinctive clinicopathologic variant of hemangioma, denominated acquired elastotic hemangioma. To date, there is only one series of six cases reported in the literature, thus, the clinical and morphological data of this variant are not well established. Methods: Fourteen cases of acquired elastotic hemangioma were retrieved from the files of the Dermatopathology Unit at Wake Forest University School of Medicine. Results: Acquired elastotic hemangioma affects sun‐damaged skin of upper extremities and neck. Clinically, lesions present as slowly growing, painless, solitary, erythematous plaques. Histopathologically, they are characterized by a horizontal proliferation of capillary blood vessels in the upper reticular dermis in a background of solar elastosis. The vessels have plump endothelial cells that protrude into the vascular lumens in a ‘hobnail’ pattern. Of the 10 cases assessed by immunohistochemistry, 100% (10) expressed CD31 and CD34, 90% (9) expressed D2‐40 and 10% (1) expressed SMA. Conclusion: Acquired elastotic hemangioma is a distinctive variant of hemangioma which should be differentiated from other cutaneous vascular tumors with a hobnail endothelial pattern, including angiosarcoma. The expression of D2‐40 in most cases suggests a lymphatic origin of this acquired vascular proliferation. Martorell‐Calatayud A, Balmer N, Sanmartín O, Díaz‐Recuero JL, Sangueza OP. Definition of the features of acquired elastotic hemangioma reporting the clinical and histopathological characteristics of 14 patients.     

鲍恩样丘疹病皮损中细胞周期调控蛋白表达与人乳头瘤病毒感染的研究

目的 探讨鲍恩样丘疹病（BP）皮损中人乳头瘤病毒（HPV）感染与细胞周期相关因子细胞周期蛋白D1（Cyclin D1）、细胞周期蛋白E（Cyclin E）及其依赖性蛋白激酶抑制蛋白p27表达的相关性。方法 基因芯片法检测BP皮损组织中人乳头瘤病毒感染（HPV）类型,免疫组化方法检测44例BP皮损组织及10例正常包皮环切组织中细胞周期调控蛋白Cyclin D1、Cyclin E及p27的表达水平。结果 44例BP中HPV感染率为100%,高危型感染38例,占86.36%,其中含HPV16感染者30例,占68.18%,单一HPV16感染者16例,合并其他高低危混合感染者14例,其他高危型感染为8例,低危感染6例,主要为HPV6型感染。在BP组织中,HPV高危组（u = 53.00,P < 0.05）、高低危混合组（u = 12.00,P < 0.01）,低危组（u = 5.00,P < 0.01）中Cyclin D1表达较正常组显著增高,高低危混合组（u = 44.00,P < 0.01）、低危组（u = 22.50,P < 0.05）Cyclin D1表达较高危组显著增高;Cyclin E在HPV高危组（u = 0.00,P < 0.01）,高低危混合组（u = 4.00,P < 0.01）,低危组（u = 1.50,P < 0.01）的表达显著高于正常组织,高危组显著高于低危组（u = 11.00,P < 0.01）;p27的表达在HPV高低危感染中差异无统计学意义。p27在年龄 > 50岁组较20 ~ 30岁组（u = 47.00,P < 0.05）、31 ~ 50岁组（u = 55.50,P < 0.05）显著增高。Cyclin E的表达在年龄 > 50岁组较20 ~ 30岁组（u = 45.50,P < 0.05）显著增高。还发现,女性患者Cyclin E的表达明显高于男性患者（u = 137.50,P < 0.05）。结论 不同HPV感染类型中,细胞周期调控蛋白Cyclin D1、Cyclin E及p27的表达存在差异。     

Differential expression of D-type cyclins in HaCaT keratinocytes and in psoriasis

In this study, we show that the G0-G1/S phase of HaCaT keratinocyte cell cycle is characterized by D1-type cyclin expression, whereas during the repeated rapid turnover of highly proliferating cells, the expression of cyclins D2 and D3 dominates. Knocking down cyclin D1 mRNA resulted in no change of cell proliferation and morphology, indicating that D2 and D3 cyclins could substitute for D1 in driving the cell cycle. Increased numbers of cyclin D1-expressing keratinocytes were found in the basal layers of the lesional psoriatic epidermis compared to both normal and non-lesional epidermis without increased expression of cyclin D1 mRNA, suggesting a possible dysfunction in the degradation of cyclin D1 protein. We also detected a significant increase in cyclin D2 and D3 mRNA expressions in psoriatic epidermis compared to normal epidermis with no difference in protein expressions. Blocking alpha5-integrin function by a neutralizing antibody in HaCaT keratinocytes downregulated the expression of cyclin D1 mRNA without affecting the expressions of cyclin D2 and D3 indicating a regulatory role for alpha5-integrin in the expression of cyclin D1. Our data suggest a possible role for D-type cyclins in the excessive basal-cell proliferation and perturbed keratinocyte differentiation in the psoriatic epidermis.