铁皮石斛研究进展

综述了20余年来国内有关铁皮石斛的组织培养、化学成分、药理作用、菌根真菌等研究工作，并对其产业化开发的有关问题作了初步的探讨。     

离体培养时真菌对铁皮石斛和金钗石斛生长的影响

目的研究离体培养时瘤菌根菌属(Epulorhiza sp.)真菌AR-18对铁皮石斛和金钗石斛生长的影响.方法采用琼脂作支持物,考察真菌对铁皮石斛和金钗石斛的鲜重和干重的影响;采用蛭石作支持物,考察真菌和营养液对铁皮石斛和金钗石斛的鲜重和干重的影响.结果在琼脂培养基上,真菌AR-18对铁皮石斛和金钗石斛的鲜重和干重的增加均没有显著性影响(P＞0.05).在蛭石基质上,真菌AR-18对金钗石斛鲜重的增加具有显著促进作用(P＜0.05),接菌的金钗石斛的鲜重较不接菌提高16%;真菌AR-18对金钗石斛干重的增加具有极显著促进作用(P＜0.01),接菌的金钗石斛的干重较不接菌提高21%.在蛭石基质上,真菌AR-18配合使用蒸馏水极显著促进了金钗石斛鲜重的增加(P＜0.01),接菌的金钗石斛的鲜重较不接菌提高47%,真菌AR-18配合使用营养液对金钗石斛鲜重的增加没有显著性影响(P＞0.05);真菌配合使用营养液或配合使用蒸馏水对金钗石斛干物质的积累没有显著性影响(P＞0.05),所以最佳处理组合为真菌AR-18配合使用蒸馏水.在蛭石基质上,真菌AR-18和营养液对铁皮石斛的鲜重和干重的增加没有显著性影响(P＞0.05).结论在离体培养条件下选择合适的基质和控制真菌的适度生长是建立稳定的共生平衡系统和促进金钗石斛生长的重要条件.在人工栽培金钗石斛的过程中,使用真菌AR-18作为菌肥,有可能取得较好的效果.     

三种内生真菌对铁皮石斛、金线莲生长影响的研究

目的：研究开唇兰小菇，石斛小菇，兰小菇等3种小菇属内生真菌对兰科濒危药用植物铁皮石斛，金线莲生长的促进作用。方法：采用植物无菌原球茎及试管苗与真菌进行双重培养，观察原球茎增殖及苗的生长情况，结果：接种3种内生真菌后，铁皮石斛苗的生长量高于对照3－5倍，石斛小菇，兰小菇对铁皮石斛原球茎增殖也有明显促进作用（P＜0．05），接种3种真菌的金线莲苗，侧芽及侧根数均显著高于对照.。结论：3种小菇属内生真菌能够促进铁皮石斛幼苗生长，促进金线莲侧芽及侧根的萌发，对铁皮石斛，金线莲的成功栽培具有实际应用价值。     

铁皮石斛种子的超低温保存研究

研究影响铁皮石斛种子超低保存的一些主要因素：种子含水量、解冻方法、恢复生长方法、保存时间等。结果表明,含水量是超低温保存的主要因素,种子含量降到８％－１８％,直接投入液氮中,经保存后,４０℃水俗 上快速解冻,种子萌发率为９２％－９５％,与未经冷冻的种子的蓝发率一致,并生成成正常植株。     

铁皮石斛种子的超低温保存研究

本文研究了影响铁皮石斛种子超低温保存的一些主要因素：种子含水量、解冻方法、恢复生长方法、保存时间等。结果表明，含水量是超低温保存的主要因素。种子含水量降到８￣１８％，直接投入液氮中，经保存后，４０℃水浴上快速解冻，种子萌发率为９２￣９５％，与未经冷冻的种子的萌发率一致，并生长成正常植株。     

铁皮石斛种子度管苗适宜培养基研究

铁皮石斛种子在１／２ＭＳ培养基或１／２ＭＳ附加马铃薯提取液的培养基上，能正常萌发成原球茎，并生长成幼苗；不同培养基试验表明，Ｎ６培养基对幼苗的生长是适宜的，在Ｎ６培养基上的幼苗，其株高和根数比其它；香蕉提取物对幼苗的生长有良好的促进作用，尤其对根的形成和株高生长。     

内生真菌菌丝及代谢物对铁皮石斛及金线莲生长的影响

目的 研究开唇兰小菇、石斛小菇和兰小菇3种小菇属内生真菌菌丝体及代谢物对兰科药用植物铁皮石斛及金线莲生长的促进作用。方法 在植物试管苗培养基中分别加入20%（V/V）真菌菌丝及10mg/L发酵液的乙酸乙酯提取物,观察对细胞增殖及苗生长的影响。结果 3种菌的菌丝体及兰小菇的乙酸乙酯提取物能显著提高铁皮石斛原球茎的增殖率;石斛小菇的菌丝体对金线莲的生长和侧芽增殖有显著促进作用;开唇兰小菇和兰小菇的乙酸乙酯提取物分别对增加金线莲侧芽发生数及生长有显著促进作用。结论 3种内生真菌对铁皮石斛、金线莲的促生长作用与菌丝内及分泌到菌丝外的代谢产物有关。     

铁皮石斛培养的产业化研究

目的　筛选适宜的铁皮石斛不定芽增殖与生根培养基 ,选择适合继代扩繁的不定芽高度。方法　在相同培养条件下 ,不同高度的不定芽在不同的增殖与生根培养基中生长 ,对结果所产生的不同生长状况 ,进行显著性差异检验及综合分析。结果　不同高度的不定芽之间有显著差异 ,不同的增殖与生根培养基之间有显著差异。结论　铁皮石斛继代以 (1.2± 0 .1) cm高的不定芽为宜 ,增殖培养基以 MS添加 BA1.0 m g/ L、NAA0 .2 mg/ L 为佳 ,生根培养基以 1/ 2 MS添加 NAA 0 .2 mg/ L为佳。     

稀土微肥对铁皮石斛试管苗壮苗的影响

目的研究稀土微肥对铁皮石斛试管苗壮苗的影响。方法通过正交试验,以石斛小苗为外植体,培养在附加了3种不同稀土元素组合的1/2MS 20%的香蕉提取物的培养基上进行培养。结果3种稀土元素中的镧(La)对试管苗增质量、叶绿素b、总叶绿素和石斛多糖的量都有显著的影响;3种稀土元素都对试管苗的叶片数、根数、分蘖数以及叶绿素a的量影响不显著。结论为铁皮石斛试管苗的壮苗以及品质的提高提供了科学的依据。     

铁皮石斛与金钗石斛化学成分的比较

目的比较铁皮石斛和金钗石斛在化学成分上的差别。方法用高效液相色谱-质谱联用(HPLC/MS)法,比较铁皮石斛和金钗石斛氨性氯仿提取物中各成分的色谱峰相对积分面积和含量。结果铁皮石斛和金钗石斛中电喷雾电离质谱质量数为偶数的色谱峰的相对积分面积和分别为2·34%和41·87%。铁皮石斛和金钗石斛中共有的25个相同的化学成分,相对积分面积和分别为97·12%和50·09%,其中有23个成分在铁皮石斛中的含量高于金钗石斛。结论铁皮石斛和金钗石斛在生物碱类成分的数量和含量上有很大差别,但就所含的相同化学成分而言,铁皮石斛的质量好于金钗石斛。     

铁皮石斛原球茎液体悬浮培养的研究

目的研究铁皮石斛Dendrobiumcandidum原球茎液体悬浮培养的可行性以及接种量和培养液体积对原球茎生长的影响。方法利用完全随机实验设计和正交试验设计研究不同基本培养基、接种量和培养液体积对原球茎生长的影响。结果无论鲜重还是干重,铁皮石斛原球茎在液体培养基上均极显著好于固体培养基(P<0.001)。不同基本培养基对铁皮石斛原球茎生长影响的研究表明,培养天数为30d时,对于鲜重67-V极显著好于B5(P<0.01),B5极显著好于1/2MS(P<0.01),1/2MS显著好于MS(P<0.05);对于干重67-V与B5没有显著性差异(P>0.05),B5极显著好于1/2MS(P<0.01),1/2MS极显著好于MS(P<0.01)。接种量和培养液体积对原球茎生长影响的研究表明,接种量影响最大,体积其次,互作最小,若不考虑互作,对于鲜重和干重,最佳处理为接种量6.194g/瓶 培养液体积150mL/瓶或100mL/瓶;对于干重,若考虑互作,接种量为6.194g/瓶时,应选培养液体积150mL/瓶或100mL/瓶,接种量为3.102g/瓶时,应选培养液体积150mL/瓶或100mL/瓶,接种量为1.693g/瓶时,应选150mL/瓶或50mL/瓶。结论液体悬浮培养对铁皮石斛原球茎的生长有利,获得了最佳基本培养基、接种量和培养液体积的最佳搭配方案,表明通过液体悬浮培养生产铁皮石斛原球茎具有较好的开发应用前景。     

铁皮石斛与玉竹抗疲劳作用的比较研究

目的观察铁皮石斛与玉竹及其配方的抗疲劳作用。方法将ICR小鼠25只随机分为阴性对照组、单味铁皮石斛组、单味玉竹组、铁皮石斛复方组、玉竹复方组,每组5只,连续给药1周(7天)后进行游泳实验,小鼠休息2天后,灌胃相应药物30min后进行耐缺氧实验,记录数据,对比并分析各组的差异。结果小鼠体质量增长、游泳时间和耐缺氧时间,呈现复方铁皮石斛组[(8.60±0.69)g、(9.86±0.35)min、(28.66±1.28)min]复方玉竹组[(7.46±0.55)g、(9.02±0.45)min、(26.78±1.27)min]单味铁皮石斛组[(6.40±1.14)g、(8.78±1.00)min、(24.52±2.32)min]单味玉竹组[(5.60±1.20)g、(8.56±0.69)min、(23.38±2.21)min]对照组[(4.84±0.98)g、(7.44±0.91)min、(19.92±2.12)min],且复方组明显高于其它三组(P0.05)。结论铁皮石斛和玉竹均有显著的抗疲劳作用,单味玉竹的抗疲劳作用略亚于单味铁皮石斛,铁皮石斛复方的抗疲劳效果明显优于玉竹复方。     

珍稀濒危药材铁皮石斛组培快繁关键技术研究

目的研究珍稀濒危药材铁皮石斛组织培养快速繁殖技术。方法以铁皮石斛茎段为试材,比较植物激素浓度配比、人工光源、炼苗驯化方法等对铁皮石斛组培快繁的影响,摸索出一套可进行组培快繁工厂化生产的技术体系,优选出铁皮石斛组培快繁的最适条件。结果 (1)组培各阶段最佳培养基:原球茎诱导:MS+BA 2.5 mg/L+IBA0.2 mg/L;原球茎分化:MS+BA1.5 mg/L+NAA1.2 mg/L+5%香蕉汁;壮苗生根:MS+NAA 0.15 mg/L+5%香蕉汁、MS+NAA 0.20 mg/L+7.5%香蕉汁、MS+NAA 0.25 mg/L+10%香蕉汁(分阶段补加);(2)人工光源:组培特定光谱节能灯;(3)炼苗方法:水培驯化炼苗。结论通过上述技术的应用,缩短了种苗组培育苗周期,解决了从组培苗到大量栽培的技术,该方法简便易用,且降低了生产成本。     

百合科药用植物种子发芽的研究

报道了不同温度对百合科药用植物种子萌发和休眠的影响，提出了不同种子发芽的温度范围、发芽适温、发芽所需天数及发芽率，对于中药村生产中掌握不同种子的发芽适温，确定合适的播种期具有指导意义。     

铁皮石斛试管苗生长发育动态研究

目的对铁皮石斛试管苗进行生长发育规律研究,为试管苗各生长发育时期合理调控技术措施的确定提供科学依据。方法采用常规方法,测定不同生长时期试管苗的生长指标、多糖和蛋白质含量及光合特性指标。结果播种后5~8个月时铁皮石斛试管苗的苗高和茎粗增长最快,6、11个月时各有1次分蘖高峰,5、9、12个月时各有1次发根高峰;7~8个月、10~12个月时试管苗生物量积累速率最高。铁皮石斛试管苗根与茎叶之比(R/T)相对较小,平均单株茎叶干重占总干重的90.6%。11个月时试管苗的多糖含量最高(5.07%),以后开始下降;8个月时试管苗可溶性蛋白质含量最高(211.28 mg/g),以后逐渐减少,以12个月时的含量最低(119.55 mg/g)。6~11个月时的试管苗生长代谢旺盛。从干物质积累动态、多糖及蛋白质含量变化、试管苗活力和生产成本等方面综合考虑,10个月左右的铁皮石斛试管苗出瓶移栽较为合适。生长发育过程中,试管苗的叶绿素含量变化幅度较大,呈减小→增加→再减小的趋势,光合速率与叶绿素含量的变化趋势基本一致。10个月之后试管苗的叶绿素开始降解。试管苗光饱和点和最大电子传递速率的变化相对稳定,9、10个月时的电子传递速率最高,为26μmol/(m2.s),而12个月时的光饱和点和电子传递速率最低。结论铁皮石斛种子萌发率及试管苗质量受种子成熟度的影响较大;组培室光照强度为27μmol/(m2.s),光强不足可能是试管苗生长发育的主要限制因子之一;播种后生长10个月左右的铁皮石斛试管苗出瓶移栽较为合适;通过调节红蓝光的光质配比来调节叶绿素a/b的比值,将有利于促进试管苗的生长发育。