肝脏卵圆细胞研究进展及存在问题

在人类肝脏受到严重损害或在肝脏肿瘤的发生过程中，在肝脏的赫氏小管区(Canal of hering)以及胆管树终末处，都可以观察到一种卵圆形的小细胞增生，该细胞被命名为卵圆细胞(Oval cell)。它与肝细胞的再生以及肝肿瘤的形成都存在密切关系。本文综合近几年的文献，从卵圆细胞的来源、标志、影响因素等方面作一综述。     

大鼠肝卵圆细胞体外分离培养和诱导分化为肝细胞的初步研究

目的 探索体外诱导成年Wistar大鼠肝卵圆细胞(HOCs)分化为肝细胞的可行性.方法 雄性Wistar大鼠36只,建立肝卵圆细胞增殖模型,采用两步法灌注和Percoll密度梯度离心法分离纯化HOCs,行体外培养并添加HGF、OSM和FGF4诱导其分化.结果 每只模型大鼠肝脏体外分离可获得约1.34×105/ml HOCs,细胞为圆形、椭圆形或多角形,大小为正常肝细胞1/6～1/3,核质比例大,2周后可呈克隆样增殖生长.所获HOCs胞浆和胞膜表达干细胞标志Thy-1及C-kit,其原始细胞标志AFP呈阳性表达;能稳定传代,在HGF、OSM和FGF4刺激下形态逐渐发生改变,细胞伸展且体积渐增大,贴壁能力减弱,诱导14天后分化细胞Alb表达明显阳性,且随着诱导时间延长阳性率逐渐升高;诱导分化的细胞胞浆G-6-P及PAS染色均呈阳性.结论 HOCs在体外一定条件刺激下可诱导分化为肝细胞.     

胃印戒细胞癌组化、免疫组化与超微结构观察

目的 探讨胃印戒细胞的组化、免疫组化特性与超微结构特征的相关性,为胃印戒细胞癌发生发展和诊断提供依据。方法 对５３例胃印戒细胞癌的病理标本进行ＡＢ－ＰＡＳ组化染色及ＣＥＡ免疫组化检测,同时进行电镜超微结构观察。结果 癌细胞呈现三种形态：单核细胞样、浆细胞样及印戒细胞样。分泌三种粘液：肠型酸性粘液、胃型中性粘液和混合型粘液,并可同时见于癌组织的不同区域中。本组胃印戒细胞癌组织中ＣＥＡ均呈强阳性。癌细     

卵圆窝X线投影位置观测及临床应用

卵圆窝Ｘ线投影位置观测及临床应用甘旭坤，张蓉，林村河，张第儒，李曹昆，张维耀３６３０００漳州解放军第１７５医院中图法分类号Ｒ８１４．４在行经皮穿刺球囊二尖瓣成形术（ＰＢＭＶ）时，房间隔穿刺点的选择是保证手术成功和避免严重并发症的关键［１、４］。房间隔...     

大鼠心窦房结超微结构水平的老龄变化观察

目的研究老年动物窦房结在超微结构水平的增龄变化规律，探讨老年人心律紊乱好发的原因。方法在电镜下对2月龄和22月龄两组各6只Wistar大鼠窦房结进行了详细对比观察。结果（1）起搏细胞（Pacemakingcells，PC）和移行细胞（Tmeitionalcells，TC）变稀疏，形态发生改变，各亚细胞结构呈现明显的老龄变化，线粒体排列紊乱，特殊分泌颗粒减少，次级溶酶体增多，并出现脂褐素（Lipofuscin）和髓磷体（Mylinefigures）；（2）首次观察到并提出原始起搏细胞（Primppacemakingcell，PPC）或于细胞（Stemcell）存在及其分化潜能；（3）对窦房结的其他成分（包括神经纤维、毛细血管、细胞间质）的增龄变化作了记述。结论窦房结超微结构水平增龄变化非常显著，其中有些改变可能与老年人好发的心传导系功能障碍、心律紊乱有关。     

大鼠坐骨神经损伤后显微及超微结构的三维重建

利用大鼠坐骨神经损伤后再生神经组织连续切片重建其显微及超微结构的三维图像。用硅胶管桥接90只大鼠左侧坐骨神经长6mm缺损，术后7、15、30、60、90天取坐骨神经行光、电镜检查，经显微摄像和扫描仪采集输入微机进行图像配准和分割，采用直接体素绘制模型实现三维重建和显示。结果显示，利用光镜和电镜图像完成了坐骨神经损伤后变性、再生过程中神经纤维及附属结构的形态变化的三维图像重建。重建结果能直观、形象地揭示大鼠再生坐骨神经纤维与正常神经纤维结构形态的差异，可作为周围神经损伤研究的一种新手段。     

大鼠直肠壁内淋巴管的微细分布及超微结构

目的观察大鼠直肠壁内淋巴管的分布和形态、结构特点,为探讨直肠癌淋巴道转移的机制提供形态学依据。方法用半薄、超薄切片、光镜和电镜下观察大鼠直肠淋巴管的微细分布和超微结构。结果直肠壁内的毛细淋巴管见于黏膜同有层深部和肛梳区真皮乳头层;在黏膜下层和肛梳区的网状层、皮下组织以及肌层和浆膜层内均有毛细淋巴管和淋巴管,直肠壁内毛细淋巴管的超微结构具有一般毛细淋巴管超微结构的特点,内皮细胞连接有重叠、嵌插和端端连接3种类型,处于开放状态约占21％;胞质内含有一般的细胞器,并含有大量的囊泡。结论齿状线以上直肠壁各层淋巴管的分布与其他部位消化管壁的相似;齿状线以下的淋巴管分布与皮肤的相似,提示在直肠内组织液和大分子物质的转运主要通过内皮细胞的连接开放和囊泡系统。     

高原环境对大鼠海马超微结构影响及可塑性的研究

本文采用形态计量方法对海拔(397m)移居到海拔(3400m)一周(急性)、四周(亚急性)及返回到海拔(397m)四周的Wistar大鼠海马的突触、锥体细胞超微结构进行定量观察研究。结果:急性组变化为线粒体数量增加,粗面内质网池轻度扩张和脱颗粒。亚急性组海马锥体细胞肿胀、粗面内质网明显分布紊乱、脱颗粒和断裂;核糖体减速少,线粒体不同程度肿胀、嵴断裂、数量减少、外膜臌出和变性;轴突和树突内线粒体也发生同样变化。轴棘、轴树突触间隙宽度变窄(P<0.01),突触小泡数量减少(P<0.01)。恢复组:海马锥体细胞内部分线粒体和粗面内质网仍未完全恢复正常。本文对形态改变的机制进行了探讨。     

运动对大鼠窦房结P细胞、T细胞超微结构及其Bcl-2、Bax表达的影响

目的:探讨有氧训练和大强度疲劳训练对大鼠窦房结(Sinoatrialnode,SAN)P细胞、T细胞超微结构及其Bcl-2、Bax表达的影响。方法:采用跑台训练方式,建立大鼠有氧运动和疲劳运动模型。分别采用免疫组织化学SABC法和电镜技术观察SANP细胞、T细胞的Bcl-2、Bax蛋白表达及其超微结构的变化。结果:有氧训练组SANP细胞、T细胞线粒体丰富,细胞连接结构正常;Bcl-2蛋白表达均显著高于对照组和疲劳训练组。疲劳训练组SANP细胞、T细胞胞浆线粒体明显肿胀,嵴断裂并有空泡化表现,细胞连接有扩张表现;Bax蛋白表达均显著高于有氧训练组和安静对照组。结论:不同强度运动训练影响大鼠SANP细胞、T细胞超微结构的变化,尤其是疲劳训练可造成SANP细胞、T细胞结构性微损伤和细胞凋亡的发生。     

白藜芦醇对大鼠创伤性脑水肿的影响及超微结构观察

目的：探讨白藜芦醇对自由落体伤大鼠脑水肿的影响及超微结构变化。方法：采用自由落体伤获得大鼠脑创伤模型，白藜芦醇腹腔注射治疗，取创伤区脑组织，烤箱内干燥，根据烘烤前后质量差，得出脑含水量，用统计方法分析数据；另取部分伤区脑组织行电子显微镜观察。结果：白藜芦醇治疗后大鼠脑含水量差异性明显，超微结构亦有不同改变。结论：白藜芦醇能减轻创伤后大鼠脑水肿，同时对伤区脑组织超微结构有保护作用。     

雌激素α、β受体在大鼠视网膜组织的免疫组织化学定位

目的探讨雌激素α、β受体(ERα、ERβ)在大鼠视网膜组织的定位和分布。方法22只SD雌性大鼠颈椎脱臼处死,取眼球做常规石蜡包埋,连续切片,采用免疫组织化学方法显示ERα、ERβ在视网膜组织的表达,并设正常大鼠子宫作阳性对照;PBS代替一抗作阴性对照。同时采用放射免疫分析方法检测大鼠血清雌二醇的浓度。结果ERα在少数标本的视网膜色素上皮、节细胞层和神经纤维层呈阳性表达,其他区域则呈阴性反应。ERβ在视网膜组织各区域分布有着明显差异,以视网膜色素上皮、节细胞层和神经纤维层阳性表达为主,内丛状层次之,其他区域阳性表达较少。ERα、ERβ免疫阳性反应物呈颗粒状,定位在视网膜色素上皮的细胞质以及神经节细胞的细胞质和细胞核或弥散分布在相关的视网膜区域内。ERβ在视网膜色素上皮、神经节细胞层和神经纤维层阳性表达率明显高于ERα,经统计学分析两者间有显著性差异(P<0.05)。正常大鼠血清雌二醇水平经检测含量为22.13±3.54pg/ml。结论大鼠视网膜组织以表达ERβ为主,ERβ主要分布在视网膜色素上皮层、节细胞层、神经纤维层,提示雌激素通过ERβ的介导直接对视网膜功能起调控作用;同时为进一步研究雌激素与视网膜疾病之间的关系提供了分子生物学基础。     

运动性疲劳状态下线粒体膜生物学特征的研究-Ⅲ:递增负荷力竭性运动后大鼠肝线粒体膜NADH-CoQ还原酶及肝组织NAD~(+)的变化

以５０大鼠三级递增负荷跑台跑为力竭性运动模型，分别测定了运动后即刻肝线粒体内膜ＭＭＤＨ－ＣｏＱ还原酶（复合体１）活性的变化；肝组织内ＮＡＤ含量及线粒体膜脂质过氧化水平（ＭＤＡ含量）的变化。发现：一次力竭性运动后，大鼠肝线粒体膜复合体１活性及肝组织当中ＭＤ”含量显著性下降，ＭＤＡ含量显著增加。研究提示，递增负荷力竭性运动中线粒体内膜复合体１损害，肝组织呼吸链底物堆积，线粒体氧利用能力下降，可能是运动性线粒体膜损害及疲劳的重要膜分子机制之一。     

一过性肝实质强化对肝脓肿和转移瘤的鉴别诊断价值

目的探讨一过性肝实质强化(THPE)对肝脓肿与肝转移瘤的鉴别诊断价值。方法对34例肝脓肿(47个病灶)和29例肝转移瘤(52个病灶)的动态增强CT进行回顾性分析。结果47个脓肿灶中,32个(68.1%)出现THPE;52个转移灶中,9个(21.5%)出现THPE。以1个病灶以上出现THPE作为诊断肝脓肿的标准,其敏感性为70.6%,特异性为79.3%。结论肝脓肿发生TPHE的概率显著高于肝转移瘤;THPE有助于肝脓肿与转移瘤的鉴别诊断。     

31P MR波谱分析在肝细胞癌、肝硬化及正常肝组织中的临床应用价值

目的利用肝脏31P MRS分析活体无创性鉴别肝细胞癌、肝硬化及正常肝组织.方法对随机选择的正常人、肝硬化和肝癌患者共33例66个有效体素分3组进行方差分析.结果 3组研究对象每组13个变量中的10个具有显著性统计学意义(P＜0.05),3组研究对象的该10种变量两两之间存在明显差异,且与谱图分析结果一致.结论肝脏31P MRS分析可以作为活体无创性鉴别肝细胞癌、肝硬化及正常肝组织的有效方法.     

肝星状细胞的激活在纤维化大鼠小肝移植供肝损伤中的作用

目的:在建立大鼠纤维化肝移植模型的基础上,检测肝星状细胞的激活, 探讨其在小肝移植后供肝损伤中所起的作用.方法:建立大鼠纤维化肝移植模型,纤维化肝脏切片Masson染色以观察纤维化程度.分全肝移植组和小肝移植组,观察两组7 d生存率.分别于术后6,48 h处死大鼠,取下肝脏标本,应用α-SMA抗体进行免疫组织化学染色以测定肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC)的激活程度.结果与结论:成功建立了大鼠纤维化肝移植模型.全肝移植组和小肝移植组7 d生存率分别为58.3%(7/12)和8.3%(1/12)(P=0.027);在同一组内不同时间点上,α-SMA的表达呈上升趋势;通过两组间比较,在各时间点上,小肝移植组α-SMA的表达均高于同一时间点全肝移植组α-SMA的表达,表明小肝移植组HSC激活的程度总体上高于全肝移植组.HSC的激活与肝硬变大鼠小肝移植中供肝损伤密切相关.     

高铁负荷对化学性肝损伤大鼠Bcl-2/Bax基因表达的影响

目的　研究高铁负荷对化学性肝损伤大鼠Bcl 2 /Bax基因表达的影响。方法　复制大鼠高铁负荷模型 ,以四氯化碳 (CCl4)攻击复制肝损伤模型。观察各实验组和对照组的血清铁 (SI)、肝组织铁 (HIC)及丙二醛 (MDA)含量变化 ,流式细胞仪检测肝细胞DNA含量、Bcl 2和Bax表达量 ,计算凋亡指数 (ApoptoticIndex ,AI)和增殖指数 (ProliferationIndex ,PI)。结果　高铁组大鼠SI,HIC及MDA含量增加 ,AI升高 ,PI无明显变化。CCl4+高铁组与高铁组相比 ,MDA ,AI及Bax均有显著增加。结论　铁可以诱导肝细胞凋亡 ,其机制可能为 :上调促凋亡基因Bax水平 ,催化脂质过氧化反应 ,促进氧自由基的产生 ,从而引起肝细胞凋亡 ,并且 ,铁与CCl4在促进肝细胞凋亡上有协同作用。     

暂时阻断肝静脉后肝脏的血流改变及其意义：CT影像学研究

目的 研究犬肝静脉阻断后肝脏血流改变,并评估该技术在肝癌介入治疗中的应用价值。材料与方法 对6只犬行肝静脉球囊导管阻断,应用螺旋CT行肝脏双期扫描和同层动态增强扫描。结果 肝静脉受阻肝叶密度明显低于未阻肝叶,二者形成明显的分界,门静脉逆行增强显影,受阻肝叶肝实质及门静脉增强的平均峰值时间显滞后于未受阻者。结论 暂时阻断肝静脉后受阻区域总的血流量减少,血流速度变缓,门静脉变为引流静脉。暂时阻断肝静脉行肝动脉化疗栓塞术和局部高温固化疗效是一项有临床应用前景的技术。     

肝内管道CT三维重建在囊性肝包虫病中的应用研究及意义

目的探讨肝内肝动脉、肝静脉和胆道等管道系统的螺旋CT三维重建在囊性肝包虫病的应用研究及意义。方法8例囊性肝包虫病患者术前进行肝内管道包括肝动脉、肝静脉、门静脉及胆管螺旋CT造影扫描,多轴向投照容积重建法三维重建,观察分析三维重建图像中肝动脉、肝静脉、门静脉及胆管的主要分支显影、形态、分布、受压和移位情况,分别将肝包虫囊肿的空间位置关系,与“外膜内完整摘除术”中实际情况进行对照。结果肝脏螺旋CT三维重建图像清晰地显示病变与肝内管道的三维空间关系,包括管道的受压移位并与包虫囊肿呈半抱球状。部分肝门静脉、肝管左右支夹角增大,部分胆管壁嵌于包虫外囊壁内。8例“外膜内完整摘除术”均成功,术中证实三维图像与实际情况相符。结论利用CT三维重建技术,对囊性肝包虫进行术前的准确定位、对指导囊性肝包虫“外膜内完整摘除术”的操作具有重大指导意义。