快中子及X射线诱导人直肠癌细胞凋亡及相关基因表达的研究

目的:研究及探讨快中子及X射线诱导人直肠癌细胞凋亡及其相关基因表达。方法：不同剂量X射线（0、2、4、6、8、10Gy）及具有同等放射生物学效应的相当于射线1／3剂量的不同剂量快中子（０、０.67、1.34、2.01、2.68、３.34Gy)照射细胞,于３７℃孵育６小时,２４小时,４８小时,７２小时后,进行Ｈoechest33342荧光染色,观察细胞凋亡形态并凋亡指数ＡＩ（凋亡细胞的百分数）;用电子显微镜观察凋亡细胞特有的形态学特征;此外,我们分别对不同剂量（0、2、4、6、8、10Gy)X射线及快中子（0、0.67、1.34、2.01、2.68、3.34Gy)照射后24小时的细胞用免疫组化方法进行基因表达p53及bcl-2)的检测。结果：不同剂量X射线和快中子照射的细胞凋亡指数,随着照射剂量和受照时间的延长而逐渐增加,在同一时间点,快中子诱导的细胞凋亡水平明显高于X射线;不同剂量快中子照射后的细胞,较阳性对照组,p53基因表达下调明显,bcl－2基因表达下调不明显;不同剂量快中子照射后的细胞,p53及bcl-2基因表达下调均不明显。结论：高能X射线和快中子诱导人直肠癌细胞的凋亡具有明确的时间－剂量相关性,随着受照后时间的延长和剂量的逐渐增大,凋亡指数渐趋升高,无明显变缓之势;快中子照射人直肠癌细胞,与X射线相比较,可引起较大的凋亡反应;此外,照射后p53及bcl-2基因表达下调,说明此两类基因都参与了细胞凋亡的基因调控。     

旋转磁场联合5-Fu对SP2/0细胞周期及凋亡的影响

目的 研究旋转磁场 (RMF) 联合氟尿嘧啶（5-Fu）对小鼠骨髓瘤细胞 (SP2/0) 细胞周期及凋亡的影响。方法 SP2/0细胞分为四组：对照组、单纯5-Fu化疗组（单化组）、单纯磁疗组（单磁组）、磁场联合5-Fu组（磁化组）。用RMF联合5-Fu作用于SP2/0细胞,流式细胞仪进行分析。结果 单磁组S期细胞比例和单化组G1期细胞比例均高于其余3组（P<0.05）。磁化组S期细胞比例降低,低于单磁组,但仍高于对照组和单化组（P<0.05）。磁化组G1期比例高于对照组及单磁组（P<0.05）。单磁组和对照组比较,细胞凋亡率差异无统计学意义（P>0.05）;单化组和磁化组的细胞凋亡率明显高于对照组和单磁组（P<0.05）,而磁化组的凋亡率明显高于单化组（P<0.05）。结论 磁场可引起细胞周期S期比例增高。单纯磁场处理不能诱发细胞的凋亡,但磁场可增强5 Fu的毒性从而促进5 Fu引起的细胞凋亡,其机制可能与RMF引起SP2/0细胞周期的改变有关。     

氯化铈单独及与射线联合作用对K562细胞凋亡的影响及其机制研究

背景与目的： 探讨氯化铈(CeCl3)单独及与60Co γ射线联合作用对K562细胞凋亡的影响及其可能机制。 材料与方法： 以K562细胞为研究对象,分为对照组、CeCl3组、60Co γ射线组及CeCl3与射线联合作用组,观察CeCl3单独及与射线联合作用对细胞凋亡的影响。采用流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期的变化,应用Western blot检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的表达情况。 结果： 与对照组相比较,CeCl3单独作用26 h、γ射线及CeCl3与γ射线联合作用均可以显著诱导K562细胞凋亡(P<0.05),γ射线、CeCl3单独作用组及CeCl3与γ射线联合可引起K562细胞S期细胞比例较对照组明显减少(P<0.05或P<0.01);同时γ射线组及CeCl3与γ射线联合组的G2/M期细胞较对照组明显阻滞(P均<0.01);CeCl3组、γ射线组及CeCl3与γ射线联合组的Bcl-2/Bax比值较正常对照组降低。 结论： CeCl3单独及与γ射线联合作用可以诱导K562肿瘤细胞凋亡,其诱导凋亡机制主要是通过线粒体途径。联合组的凋亡可能还与细胞周期阻滞有关。     

顺铂对肝癌细胞凋亡及其细胞周期的影响

目的：探讨顺铂对Hca-F细胞凋亡及细胞周期的影响。方法：采用荧光，透射电镜及流式细胞术分析法检测肝癌细胞凋亡，细胞周期和增殖指数（PI）的变化。结果：CDDP可引起肿瘤细胞凋亡，并随着给药时间的延长，药物浓度的增高，细胞凋亡率随之增高，细胞凋亡形态结构越发典型，表现为核固缩，染色质边集，核小体形成等，同时药物浓度的升高，细胞周期S期比例下降，G0/G1期比例上升，PI增殖指数下降。结论：CDDP可引起细胞凋亡，细胞周期G0/G1期阻滞，使细胞分裂增殖活动受到抑制。     

SEA诱导Hep—2细胞凋亡的机制研究

目的：观察葡萄球菌肠毒素A（SEA）对Hep-2细胞株诱导凋亡机制。方法：应用ＭＴＴ比色法和流式细胞术检测ＳＥＡ对Ｈep-2细胞增殖抑制率和对细胞增殖周期的影响。同时应用同位素法检测Ｈep-2细胞内ＣＡＭＰ水平。结果：ＳＥＡ对Ｈep-2细胞株有明显的抑制作用,且呈剂量依赖性。流式细胞术分析,ＳＥＡ能阻止Ｇ１期细胞向Ｓ期的过程,Ｇ１期细胞规程。同位素分析,Ｈep-2细胞内ＣＡＭＰ水平下降。结论：ＳＥＡ能诱导Ｈep-2细胞凋亡,抑制Ｈep-2细胞增殖,具有细胞毒性效应。     

人参皂甙Rh2诱导C6胶质瘤细胞凋亡的实验研究

目的:观察不同浓度人参皂甙Rh2(G-Rh2)对C6胶质瘤细胞的诱导凋亡作用,并在分子水平探讨其作用机理。方法:细胞计数法检测细胞增殖,流式细胞仪分析细胞的DNA组织含量变化,电镜下观察细胞的超微结构改变。结果:1)不同浓度G-Rh22、4、8μmol/L对C6胶质瘤细胞有增殖抑制作用,且呈明显量效关系;2)流式细胞术分析经G-Rh2作用72h的C6胶质瘤细胞的DNA组织直方图提示有凋亡发生;3)不同浓度G-Rh22、4、8μmol/L可使G0/G1期细胞比率下降(P<0.05,P<0.01),S期细胞比率明显升高(P<0.05,P<0.01),而G2/M期细胞相对稳定(P>0.05);4)电镜结果提示经4μmol/LG-Rh2作用72h的C6细胞呈典型的凋亡形态学改变。结论:G-Rh2对C6胶质瘤细胞有诱导凋亡作用,呈剂量依赖性抑制C6胶质瘤细胞增殖,对脑胶质瘤的治疗有重要意义。     

褪黑素对H22肝癌细胞凋亡作用的影响

目的　探讨褪黑素 (MLT)在体外对H2 2肝癌细胞凋亡作用的影响及其机制。方法　应用免疫细胞化学染色方法及原位末端脱氧核苷酸转移酶标记法 (TUNEL)对bcl 2、bax及凋亡细胞进行检测。结果　经MLT孵育相同的时间后 ,凋亡指数 (AI)随MLT浓度的增加而增加 ,中等剂量组与低剂量组及对照组间差异均有显著性 (P <0 .0 5) ,大剂量组、5 Fu组与低剂量组、对照组间差异均有显著性 (P <0 .0 1)。同一药物浓度下 ,中等剂量组、大剂量组及 5 Fu组在孵育 2 4,3 6h后 ,其AI差异有显著性 (P <0 .0 5)。随MLT浓度增加 ,bcl 2的表达呈降低趋势 ,低剂量组与对照组差异有显著性 (P <0 .0 1)。在孵育 2 4,3 6h后 ,bcl 2的下降差异有显著性 (P <0 .0 5)。随MLT浓度增加 ,bax表达在 2 4h内呈上升趋势 ,随时间延长变化不大。结论　MLT在体外有促进肿瘤细胞凋亡的作用 ,且随时间和浓度的增加 ,其促凋亡作用增强 ,bcl 2和bax参与了其中的调节作用     

X射线诱导人星形细胞瘤细胞系的凋亡

目的：为了观察辐射诱导胶质瘤细胞凋亡的特征，进一步探讨辐射诱导肿瘤细胞凋亡与辐射剂量、剂量率和照射方式之间的关系。方法：将ＳＷＯ细胞分为对照组、不同剂量组、不同剂量率组、单次照射组和分次照射组，以医用直线加速器Ｘ射线照射。采用光镜、电镜及ＤＮＡ琼脂糖凝胶电泳法观察Ｘ射线诱导星形细胞瘤细胞系凋亡的特征。结果：（１）低剂量、低剂理率和分次照射组（１０Ｇｙ）诱导出典型细胞凋亡的特殊（如凋亡小体，ＤＮＡ梯     

p53凋亡刺激蛋白2对饥饿诱导的大肠癌HCT116 p53+/+细胞凋亡、周期和自噬的影响

目的 探讨p53凋亡刺激蛋白2(ASPP2)对饥饿诱导的大肠癌HCT116 p53+/+(p53野生型)细胞凋亡、周期和自噬的影响.方法 实验分6组:①对照组;②绿色荧光蛋白腺病毒(rAd-GFP)感染组;③ASPP2腺病毒(rAd-ASPP2)感染组;④饥饿处理组;⑤rAd-GFP+饥饿组;⑥rAd-ASPP2+饥饿组.利用rAd-ASPP2感染使细胞过表达ASPP2基因.无血清培养基培养24h诱导凋亡、自噬和细胞周期改变.钙黄绿素(Calcein)/碘化丙啶(PI)吸收试验观察各组细胞调亡水平.细胞转染红色荧光蛋白标记的CFP-Lc3自噬质粒,荧光显微镜下观察各组细胞自噬水平.流式细胞术观察细胞周期改变.组间比较采用单因素方差分析进行统计学分析.结果 ASPP2过表达显著促进了饥饿诱导的细胞凋亡、自噬及G2-M期阻滞,各组细胞的凋亡率为:rAd-GFP+饥饿组10.00％±1.42％,rAd-ASPP2+饥饿组18.44％ ±2.06％(q=9.548,P=0.000);各组细胞的自噬发生率为:rAd-GFP+饥饿组35.00％±5.34％,rAd-ASPP2+饥饿组57.61％ ±6.06％(q=7.657,P=0.000).但无饥饿诱导时ASPP2过表达使G0-G1、G2-M期都发生阻滞.结论 ASPP2过表达促进饥饿诱导的大肠癌HCT116 p53+/+细胞凋亡和自噬,显著改变细胞周期进程.     

过钒酸钠对电离辐射后BET-2细胞周期阻滞及细胞凋亡的影响

  目的 观察酪氨酸磷酸酶（PTP）特异性抑制剂过钒酸钠（Per）对电离辐射诱导造血细胞周期阻滞及细胞凋亡的影响。方法 BET-2细胞经1，3，5，7，10 Gy 60COγ射线照射，用流式细胞仪观察Per对电离辐射后细胞周期改变以及细胞凋亡的影响。结果 电离辐射后，BET-2细胞出现G2／M期阻滞以及细胞凋亡，具有一定的时间效应和剂量效应；而加入Per可进一步增加G2／M期阻滞，显著减少细胞凋亡。结论 过钒酸钠可进一步增加辐射诱导的细胞周期阻滞，减少细胞凋亡，为寻找治疗辐射损伤药物提供新的途径。     

黄芩素诱导人肝癌细胞株SMMC-7721凋亡作用的研究

目的:研究12-脂氧合酶(12-lipoxygenase,12-LOX)在人肝癌细胞株SMMC-7721中的表达,以及选择性12-LOX抑制剂黄芩素对人肝癌细胞SMMC-7721生长、凋亡的影响.方法:采用免疫细胞化学染色及RT-PCR检测12-LOX的蛋白质和mRNA在SMMC-7721中的表达.应用MTT、流式细胞术及TUNEL检测细胞生长及凋亡.蛋白印迹法检测分析Caspase-3,Bcl-2,Bax,phospho-ERK1/2,ERK1/2和β-actin蛋白质的表达.结果:免疫细胞化学技术显示12-LOX蛋白表达于SMMC-7721细胞质.RT-PCR检测到黄芩素呈浓度-时间依赖性地抑制12-LOX mRNA表达.采用黄芩素小同浓度或不同时间段干预细胞SMMC-7721,MTT法检测细胞增殖呈剂量、时问依赖性的下降.原位末端转移酶标记技术及流式细胞仪分析证实12-LOX抑制剂诱导细胞凋亡.蛋白印迹法检测显示,黄芩素干预后,Bcl-2蛋白表达明显下降和Bax蛋白轻微上升,细胞凋亡蛋白酶-3活性水平与黄芩素浓度正相关,黄芩素对细胞凋亡相关蛋白的影响被12 (S)-HETE逆转,12(5)-HETE可能激活ERK1/2磷酸化.结论:人肝癌细胞株SMMC-7721存在12-LOX的表达,12-LOX抑制剂黄芩素可抑制细胞生长和诱导细胞凋亡.     

苦参碱对人类肝癌细胞HepG2增殖、细胞周期及凋亡的影响

 目的　探讨苦参碱（MT）对人类肝癌细胞株HepG2增殖、细胞周期及凋亡的影响。方法　用不同质量浓度的MT（0.0125、0.025、0.05、0.1、0.2、0.4、0.8、1.6 g／L）对培养的HepG2细胞作用不同时间（24、48、72 h）,用四氮噻唑蓝（MTT） 比色法检测MT对细胞增殖的影响;流式细胞术（FCM）检测MT对HepG2细胞周期及凋亡的影响。结果　质量浓度≥0.1 g／L的MT有抑制HepG2细胞增殖的作用,且作用随药物质量浓度的增加及时间的延长而加强（P＜0.01）。FCM检测分析显示,0.8 g／L MT作用48 h能将HepG2细胞阻滞在G1期[（75.3±6.5）%对（64.1±6.3）%]（P＜0.05）,1.6 g／L MT作用48 h能将HepG2细胞阻滞在G2期[（29.1±9.1）%对（11.6±2.1）%]（P＜0.01）。0.4、0.8、1.6 g／L MT作用12、24、48 h对HepG2细胞都有诱导凋亡作用,且作用随药物质量浓度的增加及作用时间的延长而加强（P＜0.01）。结论　MT能够抑制HepG2细胞的增殖、诱导其凋亡并影响其细胞周期,呈时间和剂量依赖性。MT抗肝癌的机制可能与影响肝癌细胞周期、抑制细胞增殖及诱导凋亡有关。     

芬太尼对人肝癌细胞bel-7404生长与凋亡的影响

目的探讨芬太尼对人肝癌细胞bel-7404生长及凋亡的影响。方法体外培养人肝癌bel-7404细胞,分F1、F2、F13、F4,4个实验组和1个对照组,实验组分别在RPMI-1640培养液中加入5ng／ml（F1）、50ng／ml（F2）、500ng／ml（F3）、5000ng／ml（F4）芬太尼,对照组不加芬太尼,所有样本孵育24h后,用倒置显微镜观察细胞形态学改变,应用MTT法和克隆形成实验检测细胞的增殖活性,应用流式细胞仪检测细胞凋亡率与细胞周期。结果各实验组人肝癌bel-7404细胞MTT和克隆形成率明显低于对照组（P〈0．01）,细胞凋亡百分比显著高于对照组（P〈0．05）。芬太尼浓度≥50ng／ml时,随着浓度的增加,凋亡率逐渐增高,细胞周期中G0／G1期比例逐渐增加,S期细胞比例逐渐减少,与对照组比较差异具有统计学意义（P〈0．05）。结论芬太尼可剂量依赖性抑制人肝癌细胞bel-7404的生长,干扰肝癌细胞增殖周期,诱导肝癌细胞凋亡。     

Effects of ARHI on cell cycle progression and apoptosis levels of breast cancer cells

The purposes of this study were to investigate the role of Aplysia Ras Homolog I (ARHI) on cell growth, proliferation, apoptosis, and other biological characteristics of HER2-positive breast cancer cells. Our goal was to provide experimental evidence for the development of future effective treatments of HER2-positive breast cancer. A pcDNA3.1-ARHI eukaryotic expression vector was constructed and transfected into the human HER2-positive breast cancer cell lines SK-BR-3 and JIMT-1. Then, various experimental methods were utilized to analyze the biological characteristics of ARHI-expressing breast cancer cells and to examine the impact of expression of the ARHI gene on cyclin D1, p27^Kip1, and calpain1 expression. We further analyzed the cells in each group after treatment with trastuzumab to examine the effects of this drug on various cellular characteristics. When we compared pcDNA3.1-ARHI-expressing SK-BR-3 and JIMT-1 cells to their respective empty vector and control groups, we found that cell viability was significantly lower (p?<?0.05) in the ARHI-expressing cells, and the proportions of G1 phase cells and apoptotic cells were significantly higher in the ARHI-expressing cells (p?<?0.05). In all groups of SK-BR-3 cells, trastuzumab treatment significantly decreased cell growth (p?<?0.05). The proportion of cells in G1 phase and the number of apoptotic cells in the pcDNA3.1-ARHI-expressing group were significantly higher than that in the empty vector group and the control group (p?<?0.05). The growth of pcDNA3.1-ARHI-transfected JIMT-1 cells was significantly decreased (p?<?0.05), while the proportion of apoptotic cells was significantly increased (p?<?0.05). Cell growth, viability, and the percentage of apoptotic cells were similar between the JIMT-1 empty vector and control groups. ARHI expression inhibited cyclin D1 expression in SK-BR-3 cells and JIMT-1 cells, while it promoted p27^Kip1 and calpain1 expression in these cells. ARHI expression inhibits the growth and proliferation of HER2-positive breast cancer cells, while it also promotes apoptosis in these cells. ARHI expression also improves the sensitivity of JIMT-1 cells to trastuzumab by inducing apoptosis.     

As2O3对人膀胱癌细胞凋亡和MDR1表达及细胞周期的影响

目的 :观察三氧化二砷 (As2 O3 )对人膀胱癌细胞株BIU 87的凋亡诱导作用及对多药耐药基因 (MDR1)蛋白表达、细胞周期的影响。方法 :采用四氮唑蓝 (MTT)法检测As2 O3 不同浓度、不同作用时间对BIU 87细胞的生长抑制率 ;流式细胞术(FCM )检测不同浓度As2 O3 作用 72h后细胞中与凋亡有关蛋白Fas、bcl 2及MDR1蛋白表达、细胞周期变化。结果 :As2 O3 可有效抑制BIU 87细胞的生长增殖 ,与浓度、时间相关 ,P <0 0 5 ;Fas、bcl 2的表达分别与浓度增高呈正、负相关 ,P <0 0 5 ,且二者随浓度增高呈负相关 ,P <0 0 5 ;MDR1蛋白表达与对照组相比As2 O3 1μmol/L作用后升高 ,P <0 0 5 ,2、5 μmol/L作用后降低 ,P <0 0 5 ;随As2 O3 浓度升高 ,细胞周期被阻滞在G0 /G1期。结论 :As2 O3 可有效抑制人膀胱癌细胞的生长增殖 ,诱导细胞凋亡及阻滞细胞周期可能起了重要作用     

2,3-吲哚醌诱导人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞凋亡及周期阻滞

背景与目的:2,3-吲哚醌(isatin,ISA)是存在于哺乳动物体液及组织中的一种天然物质,已发现其对肿瘤细胞的生长有抑制作用,但具体作用机制尚不明。本研究以人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y为靶细胞,观察ISA对SH-SY5Y细胞的作用及其机制。方法:采用荧光染色、流式细胞术(flow cytometry,FCM)及Western blot等方法检测不同浓度ISA(0、100、200、400μmol/L)诱导SH-SY5Y细胞凋亡及细胞周期阻滞的作用机制。结果:400μmol/L ISA作用48h后,在荧光显微镜下观察到SH-SY5Y细胞出现核固缩、DNA断裂等典型的凋亡形态学改变。Western blot结果显示,随ISA浓度的增加,Bcl-2蛋白表达下降、Bax蛋白表达无明显改变,Bcl-2/Bax下降。100、200、400μmol/L ISA处理SH-SY5Y细胞48h,活化Caspase-3的表达率分别为19.28%、25.88%、33.43%,明显高于对照组(P<0.05)。Western blot进一步检测到其下游底物Caspase激活的脱氧核糖核酸酶抑制剂(inhibitor of caspase-activated DNase,ICAD)被降解。细胞周期分析表明,经100、200、400μmol/L ISA处理48h后,G1期SH-SY5Y细胞数明显增加,呈明显的G1期阻滞;磷酸化的ERK蛋白及Cyclin D1(CDK1)蛋白表达显著减少(P<0.05)。结论:ISA能明显诱导SH-SY5Y细胞凋亡和细胞周期G1期阻滞,该作用可能与Bcl-2/Bax降低、Caspase-3激活,以及下调磷酸化ERK和细胞周期因子CDK1表达有关。     

Effects of chartreusin on cell survival and cell cycle progression

Chartreusin was lethal to both L1210 and P388 cells in culture with 90% of the cells being killed after a 24-hr exposure to 1.1 and 2.6 microgram/ml, respectively. The lethality of the drug increased in direct proportion to dose and exposure time. Both L1210 and Chinese hamster ovary cells in S phase were more sensitive to the lethality of the drug than were their corresponding non-S-phase cells. L1210 cells were partially synchronized by exposing an asynchronous culture to [methyl-3H]thymidine (20 Ci/mmol) and Colcemid for 3 hr. Synchronous culture of Chinese hamster ovary cells was established by planting mitotic cells. The progression of cells through the cell cycle was studied with flow microfluorometry both in the presence of the drug and after the drug had been washed off. In the presence of chartreusin the progression of mitotic cells into G1 was not affected. The movement of G1 cells into S was slower, and the movement of G2 cells into mitosis was blocked. When the drug was removed, the G2 to M block persisted for at least 4 hr but the progression of G1 cells to S was no longer inhibited.     

Redox-mediated effects of selenium on apoptosis and cell cycle in the LNCaP human prostate cancer cell line

The effects of selenium exposure were studied in LNCaP human prostate cancer cells, and this same cell line adapted to selenium over 6 months to compare acute versus chronic effects of sodium selenite, the latter most closely resembling human clinical trials on the effects of selenium in cancer prevention and therapy. Our results demonstrated that oxidative stress was induced by sodium selenite at high concentrations in both acute and chronic treatments, but outcomes were different. After acute exposure to selenite, cells exhibited mitochondrial injury and cell death, mainly apoptosis. After chronic exposure to selenite, cells showed growth inhibition caused by cell cycle arrest, increased numbers of mitochondria and levels of mitochondrial enzymes, and only minimal induction of apoptosis. Immunoblotting analysis revealed that multiple proteins were up-regulated by chronic exposure to selenite. Among them, only up-regulation of manganese superoxide dismutase and the cyclin-dependent kinase inhibitor p21(Waf1/Cip1), proteins known to be redox sensitive and to have cell cycle regulatory functions, correlated with cell growth inhibition. Our results in selenite-adapted cells suggest that selenium may exert its effects in human prostate cancer cells by altering intracellular redox state, which subsequently results in cell cycle block.     

Genistein对绒毛膜癌细胞增殖、分化、细胞周期和凋亡的影响

目的：研究genistein对绒毛膜癌细胞形态学、增殖、分化、细胞周期和凋亡的影响。方法：在绒毛膜癌细胞JAR的培养基中加入不同浓度的genistein,每隔24h吸培养上清,测人绒毛膜促性腺激素(HCG)的含量。采用MTT比色法检测不同浓度genistein对JAR细胞增殖的影响。采用HE染色、电镜和流式细胞术检测JAR细胞经genistein处理72h,细胞形态学和超微结构的变化以及genistein对细胞周期和凋亡的影响。结果：Genistein能抑制绒毛膜癌细胞JAR的增殖和诱导凋亡。100nmoI/mL genistein使JAR细胞HCG分泌量增加,并呈时间依赖性；与对照组G_2/M为(17.44±6.1 6)%比较,100 nmoL/m1L genistein使细胞周期阻滞在G_2/M期,G_2/M期比例为(67.14±1.02)%；Annexin-V和PI双染色提示100nmol/L genistein作用JAR细胞72h后,能导致大部分细胞发生晚期凋亡和坏死。结论：Genistein能抑制肿瘤细胞增殖,诱导分化和凋亡,导致细胞周期阻滞。     

稳定表达RFX6基因肝癌细胞株的建立

目的:建立稳定表达RFX6基因的肝癌细胞株。方法:构建人源RFX6基因的重组质粒(pLNCX2-RFX6),pVSV-G质粒分别与pLNCX2-RFX6和空载体pLNCX2共转染至GP2-293细胞中进行包装,并用包装的逆转录病毒感染人肝癌QGY-7703细胞株,G418筛选出阳性克隆。RT-PCR和蛋白质印迹法验证稳定细胞株RFX6基因表达情况。采用Image J软件进行灰度值分析比较两株细胞系的差异。结果:在QGY-7703-pLNCX2-RFX6和QGY-7703-pLNCX2细胞中,RFX6/18SmRNA电泳条带灰度比值分别为5.044 0±1.384 0和0.357 2±0.407 9,QGY-7703-pLNCX2-RFX6细胞RFX6/18S是QGY-7703-pLNCX2细胞的14.1倍,差异有统计学意义,t=4.143,P<0.05;而在两细胞株中,RFX6/GAPDH的蛋白质印迹条带灰度值分别为1.391 4±0.141 3和0.127 8±0.037 3,QGY-7703-pLNCX2-RFX6细胞RFX6/GAPDH是QGY-7703-pLNCX2细胞的10.9倍,差异有统计学意义,t=14.966,P<0.05。结论:成功构建稳定表达RFX6基因的肝癌细胞株,为研究RFX6基因在肝癌细胞中的功能奠定了基础。