原发性肾病综合征患者治疗前后血及尿IL-8、IL-13水平测定及其临床意义

目的探讨肾病综合征患者治疗前后血清及尿中IL-8、IL-13水平变化及其临床意义.方法采用ELISA法测定25例肾病综合征患者血清及尿中IL-8、IL-13水平并与正常对照进行比较.口服强地松(1mg/kg)8～12w后再次测定血清及尿中IL-8、IL-13水平并与治疗前相比较.结果治疗前血清、尿IL-8水平[(31.08±3.07)pg/ml、(46.22±1.83)pg/ml]较正常对照[(22.99±2.29)pg/ml、(24.61±1.04)pg/ml]显著升高(P＜0.05),血清、尿IL-13水平[(31.05±2.71)pg/ml、(65.80±12.50)pg/ml]较正常对照[(25.61=2.52)pg/ml、(53.5±6.41)pg/ml]显著升高(P＜0.05).治疗后血清、尿IL-8水平[(23.06±2.60)pg/ml、(25.85±4.01)pg/ml]较治疗前显著降低(P＜0.05),血清、尿IL-13水平[(27.40±7.09)pg/ml、(50.31±11.13)pg/ml]较治疗前显著降低(P＜0.05),与正常对照无显著差异.结论肾病综合征患者,血清及尿中IL-8、IL-13水平升高,两者均参与炎症过程,并在疾病的发展中起一定的作用,激素治疗在控制病情的同时,可降低IL-8、IL-13水平,故IL-8、IL-13水平变化一定程度上可提示病情变化,监测治疗效果.     

慢性充血性心力衰竭患者血清细胞因子TNF-α,IL-6,IL-1β及IL-1O的液相芯片检测

目的 应用液相芯片技术探讨慢性充血性心力衰竭(CHF)患者血清细胞因子的变化.方法 采用Luminex液相芯片分析平台测定CHF患者15例,正常对照组15例的血清细胞因子TNF-α,IL-6,IL-1β,IL-10的含量.结果 CHF患者血清TNF-α,IL-6的含量[(10.431±6.510)pg/ml,(3.476±2.180)pg/ml]分别比正常对照组[(5.817±2.354)pg/ml,(1.545±0.594)pg/ml)]增加(P＜0.05),而两组IL-10[(0.619±0.368)pg/ml,(0.628±0.339)pg/ml]、IL-1β[(0.665±0.732)pg/ml,(0.630±0.578)pg/ml)]的含量无明显变化(P＞0.05).结论 CHF患者血清TNF-α,IL-6增高,与心衰的病理机制有关.     

IL-17A抑制Th2细胞分化减轻哮喘小鼠气道嗜酸性粒细胞炎症

目的 研究IL-17A对哮喘小鼠Th2细胞分化及其相关炎症的作用.方法 24只C57BL/6J小鼠按随机数字表法分为对照组、哮喘组和IL-17A处理组(n=8).哮喘组和IL-17A处理组予以卵清蛋白(ovalbumin,OVA)致敏及激发.每次雾化激发前1h,IL-17A处理组给予重组小鼠IL-17A气道滴入.各步对照均予以生理盐水.末次激发后24h处死小鼠,收集支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)行细胞总数及分类计数.ELISA检测BALF中IL-4、IL-5、IFN-γ、IL-17A的浓度.HE和PAS染色及半定量评分评估小鼠肺部病理变化.流式细胞术检测脾脏和支气管淋巴结Th细胞分化.免疫磁珠分选健康小鼠幼稚CD4+T细胞,用Th2极化培养基体外培养,并给予IL-17A或等量PBS干预,检测Th2细胞的增殖、凋亡和分化.结果 哮喘组较对照组,BALF中细胞总数、嗜酸性粒细胞数及其比例(P＜0.05)、IL-4、IL-5、IL-17A浓度均显著增高(P＜0.05),IFN-γ浓度显著下降(P＜0.05);支气管、血管周围炎症细胞浸润和杯状细胞化生明显加重(P＜0.01);脾脏和淋巴结Th2细胞分化比例显著增高(P＜0.05).IL-17A处理组较哮喘组,BALF中的细胞总数[(26.00±5.43)×104/mLvs(58.40 ±26.93)×104/mL,P＜0.05]、嗜酸性粒细胞数[(8.04±1.98)×104/mL vs(31.95±12.28)×104/mL,P＜0.05]及其比例[(29.93 ±3.03)％ vs(53.47 ±6.62)％,P＜0.01]显著降低,而中性粒细胞数及其比例无明显变化;BALF中Th2相关因子IL-4浓度[(9.86 ±2.77) pg/mL vs(28.13 ±4.62) pg/mL,P＜0.01]、IL-5浓度[(7.30 ±0.50) pg/mL vs(10.50±1.10) pg/mL,P＜0.01]均显著降低;支气管、血管周围炎症细胞浸润减轻,HE染色半定量评分降低[(2.00 ±0.51)vs(3.12 ±0.64),P＜0.05],杯状细胞化生减少[(0.80 ±0.45)vs(2.40 ±0.55),P＜0.01];脾脏[(2.24±0.44)％vs(4.82±1.83)％,P＜0.01]和淋巴结[(7.05±0.58)％vs(10.57±1.35)％,P＜0.05]中Th2细胞分化比例显著减少.极化培养的幼稚CD4+T细胞,予IL-17A干预后,诱导分化的Th2细胞比例显著减少(P＜0.05),而增殖和凋亡无显著变化.结论 IL-17A有抑制Th2细胞分化,减轻哮喘小鼠气道嗜酸性粒细胞炎症的作用.     

子宫内膜异位症患者血清与腹腔液中白细胞介素-6和γ-干扰素的测定

目的 :了解子宫内膜异位症 (内异症 ,EM)患者血清、腹腔液中白细胞介素 - 6、(IL - 6 )、γ-干扰素 (IFN-γ)的水平 ,并探讨 T辅助细胞 (TH)失衡与 EM的关系。方法 :对 2 2例 EM患者及 10例健康妇女的血清、腹腔液 ,采用放射免疫分析法测定 IL- 6水平 ,采用 EL ISA法测定 IFN- γ水平。结果 :EM组血清 IL- 6水平 [(2 0 7.32± 72 .35 ) pg/ml]较对照组 [(12 1.5 0± 5 0 .96 ) pg/ml]明显升高 (P<0 .0 1) ,血清 IFN-γ水平 [(78.5 5± 30 .4 5 ) pg/ml]与对照组 [(5 8.2 0± 19.4 4 ) pg/ml]比较差别无显著性 (P>0 .0 5 )。EM组腹腔液 IL- 6水平 [(2 15 .77± 5 8.39) pg/m l]较对照组 [(16 7.90± 5 2 .12 ) pg/ml]升高 (P<0 .0 5 ) ,IFN- γ水平 [(92 .5 5± 2 8.5 6 ) pg/ml]较对照组 [(5 1.90± 2 1.2 2 ) pg/ml]升高 (P<0 .0 5 )。结论 :EM患者体内存在着 TH1/TH2失衡 ,使子宫内膜能够逃避免疫监视及杀伤而在异位种植 ,引起 EM的发生发展。     

载脂蛋白A-I半胱氨酸突变体结合脂质后抗炎性能的变化

目的 探讨载脂蛋白A-I半胱氨酸突变体重组高密度脂蛋白抗炎能力.方法 应用脂多糖诱导构建内毒素血症小鼠模型,选取3种半胱氨酸突变体[A-I(S52C)、A-I(K107C)、A-I(R173C)]及野生型载脂蛋白A-I结合二棕榈酰磷脂酰胆碱(DPPC)构建重组高密度脂蛋白(rHDL52、rHDL107、rHDL173、rHDLwt)注射小鼠作为干预组(每组10只小鼠),以脂多糖组(9只小鼠)、生理盐水组(5只小鼠)作为对照.酶联免疫吸附试验(ELISA)检测4种重组高密度脂蛋白干预后对肿瘤坏死因子(TNF)α,白细胞介素(IL)1β和IL-6的影响.病理检测各组小鼠肺组织.结果 小鼠注射后24 h,rHDL52组血清中TNF-α和IL-1β明显低于rHDLwt组[(39.66±2.44)pg/ml比(135.28±12.84)pg/ml;(66.83 ±6.24)pg/ml比(82.00±8.19)pg/ml,均P＜0.05].常规病理分析显示,rHDL52比rHDL107、rHDL173及rHDLwt更能够降低炎症细胞的浸润,保护肺器官免受损伤.结论 rHDL52拥有较野生型载脂蛋白更强的抗炎能力.     

载脂蛋白A-I半胱氨酸突变体结合脂质后抗炎性能的变化

目的 探讨载脂蛋白A-I半胱氨酸突变体重组高密度脂蛋白抗炎能力.方法 应用脂多糖诱导构建内毒素血症小鼠模型,选取3种半胱氨酸突变体[A-I(S52C)、A-I(K107C)、A-I(R173C)]及野生型载脂蛋白A-I结合二棕榈酰磷脂酰胆碱(DPPC)构建重组高密度脂蛋白(rHDL52、rHDL107、rHDL173、rHDLwt)注射小鼠作为干预组(每组10只小鼠),以脂多糖组(9只小鼠)、生理盐水组(5只小鼠)作为对照.酶联免疫吸附试验(ELISA)检测4种重组高密度脂蛋白干预后对肿瘤坏死因子(TNF)α,白细胞介素(IL)1β和IL-6的影响.病理检测各组小鼠肺组织.结果 小鼠注射后24 h,rHDL52组血清中TNF-α和IL-1β明显低于rHDLwt组[(39.66±2.44)pg/ml比(135.28±12.84)pg/ml;(66.83 ±6.24)pg/ml比(82.00±8.19)pg/ml,均P＜0.05].常规病理分析显示,rHDL52比rHDL107、rHDL173及rHDLwt更能够降低炎症细胞的浸润,保护肺器官免受损伤.结论 rHDL52拥有较野生型载脂蛋白更强的抗炎能力.     

慢性充血性心力衰竭患者血清细胞因子TNF-α，IL-6，IL-1β及IL-10的液相芯片检测

目的应用液相芯片技术探讨慢性充血性心力衰竭(CHF)患者血清细胞因子的变化。方法采用Luminex液相芯片分析平台测定CHF患者15例,正常对照组15例的血清细胞因子TNF-α,IL-6,IL-1β,IL-10的含量。结果CHF患者血清TNF-α,IL-6的含量[(10.431±6.510)pg/ml,(3.476±2.180)pg/ml]分别比正常对照组[(5.817±2.354)pg/ml,(1.545±0.594)pg/ml)]增加(P<0.05),而两组IL-10[(0.619±0.368)pg/ml,(0.628±0.339)pg/ml]、IL-1β[(0.665±0.732)pg/ml,(0.630±0.578)pg/ml)]的含量无明显变化(P>0.05)。结论CHF患者血清TNF-α,IL-6增高,与心衰的病理机制有关。     

TIM-1对哮喘小鼠气道MUC5AC及Th2细胞因子表达的影响

目的 研究T细胞免疫球蛋白-黏蛋白-1(TIM-1)表达对哮喘小鼠气道MUC5AC及Th2细胞因子的作用,探讨气道黏液高分泌的机制。方法 30只健康雌性C57BL/6小鼠,按随机数字表法分为正常组、哮喘组和TIM-1抗体组,每组10只。检测小鼠外周血单个核细胞（PBMCs）TIM-1+细胞比例、气道MUC5AC mRNA表达、肺泡灌洗液（BALF）中IL-13、IL-4、IL-5表达及黏液细胞和细胞内黏液量的改变。结果（1）哮喘组及TIM-1抗体组小鼠外周血PBMCs中TIM-1+ 细胞比例（11.20%,5.11%）均显著高于正常组（0.64%,P<0.05);而TIM-1抗体组明显低于哮喘组（P<0.05）。（2）哮喘及TIM-1抗体小鼠气道黏液细胞MUC5AC mRNA相对表达(17.3±1.4,5.6±0.3)及IL-13[(16.80±0.63) ng/ml,(5.70±0.64)ng/ml]、IL-4[（614.72±117.39）pg/ml,（325.78±86.54）pg/ml]、IL-5[（1681.13±613.55）pg/ml,（513.42±86.87）pg/ml]表达量均显著高于正常组[1, (1.09±0.25)ng/ml,（17.56±3.01）pg/ml,（30.78±9.67）pg/ml ],TIM-1抗体组小鼠上述指标显著低于哮喘组（P<0.05）。（3）气道MUC5AC及IL-13表达与TIM-1+细胞表达均呈正相关,r1=0.946,P1=0.004; r2=0.984,P2=0.000. 结论 哮喘小鼠外周血TIM-1+细胞升高,可致气道黏液过度分泌;抑制TIM-1表达可减少哮喘气道黏液高分泌。调节TIM-1表达有可能成为减少黏液高分泌及治疗哮喘的新途径。     

葛根芩连汤降低TNF-α水平改善小鼠溃疡性结肠炎的机制研究

目的 探究葛根芩连汤对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导小鼠溃疡性结肠炎(UC)的抗炎作用。方法 34只SPF级C57BL/6小鼠按随机数字表法分为空白组8只、模型组10只、柳氮磺吡啶组(260mg/kg)8只和葛根芩连汤组(390mg/kg)8只。除空白组外,其余各组小鼠自由饮用2.5% DSS建立UC小鼠模型,建模成功后,柳氮磺吡啶组、葛根芩连汤组小鼠每天给予相应药物灌胃,其余组给予等体积(10ml/kg)生理盐水。每天观察小鼠体质量、大便性状、神态等一般情况的变化,并参照疾病活动指数(DAI)表进行评分。实验结束时采集结肠组织标本,采用苏木素-伊红(HE)染色观察各组小鼠结肠组织病理改变进行结肠组织学评分,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测小鼠血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-1β(IL-1β)浓度。 结果 与空白组比较,模型组小鼠体质量明显下降,出现腹泻、血便,DAI评分[(1.43±0.47)分比(0.00±0.00)分,P<0.05]、组织学评分[(6.80±3.99)分比(0.00±0.00)分,P<0.05]、血清中IL-1β[(49.14±18.52)pg/mL比(28.7±5.68)pg/mL,P<0.05]和TNF-α[(405.77±82.06)pg/mL比(295.32±60.93)pg/mL,P<0.05]浓度显著上升,结肠明显缩短[(5.40±0.41)cm比(7.07±0.61)cm,P<0.05]。经葛根芩连汤干预后,葛根芩连汤组与模型组相比小鼠体质量、大便情况等明显改善,DAI评分[(1.24±0.92)分比(1.43±0.47)分,P>0.05]、组织学评分[(5.00±4.93)分比(6.80±3.99)分,P>0.05]、血清TNF-α[(362.36±71.37)pg/mL比(405.77±82.06)pg/mL,P<0.05]、IL-1β[(46.73±10.02)pg/mL比(49.14±18.52)pg/mL,P>0.05]浓度降低,结肠组织形态和长度改善[(5.60±0.54)cm比(5.40±0.41)cm,P>0.05],与柳氮磺吡啶组小鼠之间无统计学差异(P>0.05)。 结论 葛根芩连汤能一定程度改善DSS诱导的UC小鼠结肠组织病理情况,其机制可能与下调炎性因子TNF-α的表达有关。     

哮喘小鼠血清IL-4和IL-15相关性分析

[目的]通过对哮喘小鼠模型血清中白细胞介素15(IL-15)与IL-4水平进行分析,探讨其二者之间的相关性。[方法]BALB/c小鼠随机分为3组,分别为正常对照组、哮喘组、地塞米松干预组。用鸡卵白蛋白(OVA)抗原溶液腹腔注射致敏,雾化吸入激发制备哮喘小鼠模型。对照组用生理盐水代替OVA;干预组每次雾化前腹腔注射地塞米松进行干预。定雾化激发后24 h取各组肺泡灌洗液进行嗜酸性细胞计数,并用ELISA方法测测定血清IL-15、IL-4的水平,分析二者相关性。[结果]IL-4与IL-15水平和嗜酸性细胞数各组比较均有显著性差异(P<0.01),哮喘组分别为(18.73±3.07)pg/mL,(18.10±2.66)pg/mL和(9.57±1.63)×105/L;干预组分别为(14.04±1.58)pg/mL,(14.37±2.46)pg/mL和(7.47±2.11)×105/L;对照组分别为(9.26±1.87)pg/mL,(10.82±2.13)pg/mL和(3.22±1.78×105/L);血清IL-4与IL-15水平呈正相关,r=0.57,P<0.05。[结论]IL-4与IL-15在哮喘发病中有一定的联系,IL-4作为一种对哮喘发生发展起负向调节作用的细胞因子可以推断IL-15在哮喘中起到一定的调节作用。     

呼出气冷凝液中LTB4和CCL11水平与儿童哮喘分期的研究

摘要：目的  探索呼出气冷凝液（EBC）中白三烯B4（LTB4）和嗜酸性粒细胞趋化因子（CCL11）2种标记物对儿童哮喘病情的评估作用。方法  收集64例哮喘患儿。其中,急性发作期33例,慢性持续期18例,缓解期13例,选同时期8例健康儿童作对照组。采用R-Tube收集每个实验对象的EBC,酶联免疫吸附法检测每个标本中LTB4和CCL11。结果  ①EBC中LTB4水平从高到低依次为发作组（70.89±8.31）pg/ml、持续组（35.27±6.61）pg/ml、缓解组（24.58±4.90）pg/ml、对照组（15.53±3.24）pg/ml,各组间比较,差异有统计学意义（P <0.05）;②EBC中CCL11水平最高为哮喘发作组（3.38±0.65）pg/ml,其次为持续组（2.46±0.52）pg/ml、缓解组（0.90±0.36）pg/ml和对照组（0.71±0.26）pg/ml,缓解组与对照组比较,差异无统计学意义。结论  EBC中LTB4、CCL11水平能反映哮喘气道炎症及其控制情况,对哮喘患儿病情的评估有一定价值。

     

The alteration of inflammatory cytokine during acute pancreatitis]

OBJECTIVE: To observe the alteration of both inflammatory and anti-inflammatory cytokines during acute pancreatitis, and to investigate the effect of somatostatin on modulation of inflammatory and anti-inflammatory cytokines in experimental acute pancreatitis. METHODS: SD male rats were divided into 3 groups: group 1. the normal rats as control (n = 6); group 2, the rats with acute pancreatitis induced by transabdominal injection of 5% sodium cholate sulfur (at the volume of 1.0 ml/kg) into the parcreatic duct and not given drug treatment; group 3, the rats injected with stilamin 20 micrograms/kg, intravenously, 30 minutes after the successful induction of acute pancreatitis. The animals in groups 2 and 3 were killed at 2, 6 and 24 hours after operation. The blood samples were taken for measurement of IL-1, TNF alpha, IL-6 (by Bioassay) and IL-10, TNF-beta (by ELISA). The wet weight of pancreatic tissue and amylase were also determined. RESULTS: Serum IL-1, TNF alpha, IL-6, IL-10 and TGF-beta in control group were 0.56 +/- 0.06 ng/ml, 23.50 +/- 1.87 IU/ml, 69.0 +/- 6.40 IU/ml, 32.05 +/- 14.87 pg/ml and 66.4 +/- 13.20 pg/ml, respectively. After acute pancreatitis was induced, the serum level of these inflammation-concerned cytokines increased significantly in group 2 (P < 0.05). Serum IL-1, TNF alpha, IL-6, IL-10 and TGF-beta in group 2 at 24 hours after pancreatitis were 1.15 +/- 0.13 ng/ml, 55.33 +/- 12.79 IU/ml. 127.17 +/- 13.91 IU/ml, 68.13 +/- 19.90 pg/ml, and 103.77 +/- 28.95 pg/ml, respectively. After administration of somatostatin, the inflammation-concerned cytokines in group 3 were remarkably decreased (P < 0.05). Serum IL-1, TNF alpha, IL-6, IL-10 and TGF-beta in group 3 were 0.83 +/- 0.12 ng/ml, 33.00 +/- 7.40 IU/ml. 71.83 +/- 6.34 IU/ml, 42.2 +/- 14.55 pg/ml, and 45.98 +/- 18.10 pg/ml, respectively. The indeies of the severity of pancreatitis, such as amylase and the weight of pancreas alse improved in group 3. CONCLUSION: Both inflammatory and antiinflammatory cytokines increased remarkably in the rats with acute pancreatitis. This result indicates that there is a potential tendency of inflammatory response syndrome and compensatory anti-inflammatory response syndrome in the course of acute pancreatitis. Somatostatin can modulate the derangement of these cytokines in acute pancreatitis.     

外源途径一氧化碳抑制小鼠严重烧伤后早期肺损伤和炎症反应的分子机制

目的 探讨外源途径一氧化碳对严重烧伤后小鼠早期肺损伤和炎症反应的抑止作用及机制.方法 建立小鼠15% Ⅲ度烧伤模型.实验动物共随机分成3组:假伤(Sham)组(12只),烫伤组(12只)及烫伤加一氧化碳释放分子(CORM)-2组(12只).烫伤组小鼠异氟烷吸入麻醉下,背部去毛,以92℃水,9 s,造成15% Ⅲ度烫伤,伤后腹腔内注射生理盐水1.5 ml抗休克;烫伤加CORM-2组小鼠烫伤后尾静脉注射CORM-2(8 mg/kg);Sham组用37℃温水代替92℃水,其余操作相同.检测动物肺组织髓过氧化物酶(MPO)、核因子、κB(NF-κB)活性、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)的表达,肺泡灌洗液中TNF-α和IL-1β,肺组织损伤指标(湿干比、血管通透性)以及肺内皮细胞经烧伤血清刺激后对白细胞的黏附作用.结果 烧伤组肺组织中MPO(87±11)U/g组织,肺泡灌洗液中TNF-α(160±9)pg/ml和IL-1β(27.2±2.9)pg/ml,NF-κB的活性及ICAM-1蛋白表达水平均明显高于Sham组.与烫伤组比较,烫伤+CORM-2组上述情况明显得到改善(P＜0.05);而肺湿干比、血管通透性未见明显改善.肺内皮细胞经烧伤血清刺激后对白细胞的黏附作用增强(46.5±8.5)%,经CORM-2处理后的烧伤血清刺激后肺内皮细胞对白细胞的黏附作用明显减弱(25.4±5.6)%.结论 外源性一氧化碳释放分子能明显抑止肺组织NF-κB活性,减轻严重烧伤后肺组织黏附分子的表达,从而减轻组织中白细胞扣留,有效减轻肺脏炎症反应.     

Association of IL-7 with disease progression in Chinese HIV-1 seropositive individuals

Background Elevated levels of interleukin-7 (IL-7) have been correlated with CD4(+) T cell depletion and the emergence of syncytium-inducing (SI) variants in human immunodeficiency virus type-1 (HIV-1) infection, and suggested as an indicator of acquired immunodeficiency syndrome (AIDS) disease progression. Therefore, we investigated the effects of IL-7 on disease progression and virus phenotype in Chinese HIV/AIDS patients. Methods In a cross-sectional study of 71 untreated HIV-1 seropositive individuals and 12 healthy donors, plasma IL-7 levels were determined by an ultra sensitive enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), and its relations to CD4(+) T cells, CD8(+) T cells, plasma viral loads and HIV phenotypes were analyzed. Results Significant higher IL-7 levels were found in Chinese HIV/AIDS patients [(3.33 ± 3.60) pg/ml] than those of health controls [(1.2 ± 0.81) pg/ml] ( P &lt;0.05), and IL-7 levels were inversely associated with CD4(+) T cell counts ( r = － 0.497, P &lt;0.01). Furthermore, IL-7 levels were significant higher in patients with SI variants [(9.12 ± 4.55) pg/ml] than those with non-syncytium-inducing variants [(1.50 ± 2.69) pg/ml] ( P &lt;0.01). Conclusions Increased IL-7 levels were found in Chinese HIV/AIDS patients and significantly associated with disease progression, thus increased IL-7 plasma levels may indicate disease progression.     

高迁移率族蛋白1诱导内皮细胞释放细胞因子的作用及其与脂多糖对白细胞介素6释放的协同效应

目的观察高迁移率族蛋白1(HMGB1)对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)释放细胞因子的影响及其对脂多糖(LPS)诱导细胞因子白细胞介素6(IL-6)表达的作用。方法用LiquiChip液相蛋白芯片系统检测重组HMGB1蛋白(15ng/ml)诱导HUVEC11种细胞因子/趋化因子的水平变化;检测不同浓度HMGB1(0~75ng/ml)刺激后不同时间点(0、1、3、6、12和24h)HUVEC分泌IL-6的水平以及HMGB1(15ng/ml)与LPS(10ng/ml)共同刺激对HUVEC分泌IL-6的影响。结果HMGB1刺激后HUVEC分泌粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、干扰素γ(IFN-γ)、IL-6、IL-8和单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)的水平明显升高(均P<0.01),分别是对照(未加刺激)的5.7、4.2、27.8、12.8和5.4倍;HMGB1蛋白以时间和剂量依赖方式诱导IL-6的分泌,在刺激后3~6h,IL-6水平开始增加,在6h时IL-6由对照的32pg/ml±21pg/ml增加到75pg/ml±22pg/ml(P<0.01),12h(453pg/ml±78pg/ml)~24h(901pg/ml±184pg/ml)持续升高(P<0.01);随着HMGB1浓度的增加,IL-6的水平也明显增加,当HMGB1浓度为3、15、75ng/ml时,IL-6分别是155pg/ml±33pg/ml、901pg/ml±184pg/ml、1508pg/ml±378pg/ml,与基础值32pg/ml±21pg/ml相比,差异有统计学意义(P<0.01)。分别用LPS(10ng/ml)和HMGB1(15ng/ml)单独刺激HUVEC时,IL-6的含量从基础的32pg/ml±22pg/ml分别增加至289pg/ml±42pg/ml和901pg/ml±184pg/ml(均P<0.01);如果用二者共同刺激HUVEC,IL-6的生成量大大增加(2361pg/ml±299pg/ml),二者存在协同作用(F=69.405,P<0.01)。结论HMGB1蛋白可诱导HUVEC释放多种炎性细胞因子;HMGB1诱导IL-6的上调具有时效性和量效性关系,并可协同LPS刺激HUVEC释放IL-6,在脓毒症的发生和发展中起重要作用。     

泼尼松对IL-8在COPD大鼠肺组织表达的影响

目的 研究IL-8在慢性阻塞性肺病(COPD)大鼠肺组织中的表达及泼尼松对其表达的影响.方法 Wistar大鼠24只随机分为:正常对照组(A组)、单纯熏烟组(B组)和熏烟 泼尼松组(C组),每组各8只.单纯熏香烟法建立COPD模型,C组于熏香烟前予泼尼松5 mg/kg隔日灌胃.模型建立后,行支气管肺泡灌洗,测定支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞数,酶联免疫吸附法(ELISA)测定BALF上清液和血清中的IL-8和TNF-α浓度,并对肺组织切片行苏木精-伊红(HE)染色观察形态学改变,采用图像分析系统定量测定肺平均内衬间隔(MLI)、平均肺泡数(MAN)和肺泡腔面积与总面积比(PAA).结果 B组MLI、PAA比A组增高,而MAN低于A组,C组与B组相比MLI、PAA降低,MAN升高,差异均有统计学意义(P＜0.01).与A组比较,B组BALF中IL-8、TNF-α、白细胞总数、中性粒细胞绝对计数和中性粒细胞百分比均增高(P＜0.05),C组较B组上述指标均下降(P＜0.05).B组血清中IL-8和TNF-α浓度亦比A组增高(P＜0.05),C组较B组下降,但IL-8的浓度差异无统计学意义.B组BALF中IL-8与中性粒细胞绝对计数、TNF-α呈正相关(r=0.735、0.987,P＜0.05);与血清中IL-8和TNF-α、血气分析的所有指标及形态学定量分析的任一指标均无相关性.血清IL-8与上述任一指标亦均无相关性.结论 BALF中的IL-8与COPD的气道炎症密切相关,IL-8与TNF-α相互作用,通过趋化激活中性粒细胞等炎性细胞共同参与COPD发病.泼尼松可能通过抑制IL-8的表达,从而减轻炎症介质和炎性细胞对气道的损害,延缓COPD的进展.     

脑梗死患者血清IL-6和sICAM-1变化及临床意义

目的： 分析急性脑梗死患者血清IL-6,sICAM-1变化及临床意义,探讨其在脑缺血炎性病理损伤中的可能作用机制。方法：选择发病3 d以内的符合试验入选标准的脑梗死患者32例,同时收集相匹配的同期体检者30例,分别用放射免疫法和酶联免疫吸附法测定血清IL-6和sICAM-1浓度。其中11例发病24 h内入院的患者进行血清IL-6和sICAM-1水平动态观察(发病第1 d,第3 d和第6 d)。所有脑梗死患者依据发病后48~72 h的CT检查结果计算脑梗死体积。结果： 发病3 d内［测定时间距发病时间平均为 (47.4±5.6) h］ 脑梗死患者血清IL-6浓度和sICAM-1浓度均显著高于正常对照组［(352.1±31.7) pg/ml vs. (135.4±18.3) pg/ml 和 (363.6±48.4) ng/ml vs. (227.2±30.1) ng/ml, P<0.01］。IL-6和 sICAM-1浓度随发病后时间的推移而逐渐下降;IL-6浓度在发病第1 d ［(364.5±29.7) pg/ml］ 与第3 d［［(345.7±28.9) pg/ml］ 比较无统计学意义(P>0.05),发病第6 d［(308.3±26.8) pg/ml］较第3 d明显降低 ( P<0.01);sICAM-1浓度在发病第1 d［(383.9±56.1) ng/ml］, 第3 d［(354.6±40.8) ng/ml］和第6 d ［(316.7±32.3) ng/ml］ 三个时间点两两比较差异显著(P<0.05);IL-6和sICAM-1浓度至第6 d时仍高于对照组 (P<0.01)。发病3 d内血清IL-6及sICAM-1水平均和脑梗死体积呈正相关 (r=0.368, P<0.05和 r=0.594,P<0.01),血清 IL-6浓度和sICAM-1浓度呈正相关 (r=0.453,P<0.05)。结论：急性脑梗死患者血清IL-6和sICAM-1水平升高,二者可能参与了脑缺血炎性病理损伤,sICAM-1的升高可能与IL-6升高有关,二者血清水平值可能能够反映脑缺血后炎性病理损伤的程度和脑梗死体积大小。     

替普瑞酮对类固醇致胃黏膜损伤的保护作用

目的研究替普瑞酮对类固醇激素所致胃黏膜损伤的保护作用及其机制。方法50只雄性SD大鼠随机分为空白组、实验对照组、低剂量替普瑞酮组、中剂量替普瑞酮组和高剂量替普瑞酮组,每组10只。采用泼尼松龙皮下注射制备大鼠胃黏膜损伤模型,低、中、高剂量组替普瑞酮的剂量分别为50、100、200mg/kg,给药7d,每天1次。观察胃黏膜的病理变化,计算溃疡指数、胃黏膜组织学损伤指数,放射免疫法检测血浆内皮素1和胃黏膜前列腺素E2(PGE2)水平,Griess法检测血清NO含量。结果类固醇激素能引起胃黏膜显著出血性损伤,实验对照组大鼠溃疡指数中位数为44.5,组织学损伤指数中位数为5.5,明显高于空白组(均为0,均P<0.01);实验组大鼠血浆内皮素1水平为399pg/ml±74pg/ml,高于空白组(279pg/ml±56pg/ml,P<0.01);血浆NO水平(27μmol/L±5μmol/L)低于空白组(36μmol/L±5μmol/L,P<0.01);胃黏膜PGE2水平(154pg/mg±83pg/mg)低于空白组(337pg/mg±112pg/mg,P<0.01)。低、中、高剂量替普瑞酮组的溃疡指数中位数分别为32.5,23.0,23.0,均明显低于实验组(均P<0.01);组织学损伤指数中位数分别为3.0,3.0,1.5,均明显低于实验组(均P<0.01),内皮素1水平分别为299pg/ml±99pg/ml,284pg/ml±85pg/ml,189pg/ml±32pg/ml,均明显低于实验对照组(P<0.05,P<0.01,P<0.01);NO水平分别为56μmol/L±16μmol/L,62μmol/L±12μmol/L,83μmol/L±9μmol/L,均明显高于实验对照组(均P<0.01),高剂量替普瑞酮组胃黏膜PGE2水平为241pg/mg±65pg/mg,明显高于实验组154pg/mg±83pg/mg(P<0.05)。溃疡指数、组织学损伤指数和内皮素1水平随替普瑞酮剂量的增大而降低,血清NO、胃黏膜PGE2水平随替普瑞酮剂量的增大而升高。结论替普瑞酮对类固醇致胃黏膜损伤具有一定的保护作用,其机制可能与降低内皮素1水平和增加NO和PGE2生成有关。     

广谱半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶抑制剂抗小鼠变应性接触性皮炎的研究

目的 研究广谱半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase)抑制剂Z-VAD-FMK对小鼠变应性接触性皮炎(ACD)的抑制作用.方法 以Franz垂直扩散池进行Z-VAD-FMK的体外透皮实验,高效液相色谱方法 检测其透皮量.建立ACD小鼠模型;实验组分别以0.1、0.5、2.5及5 mmol/L 4种浓度的Z-VAD-FMK溶液外涂于ACD模型小鼠一侧耳背部;阴性对照组以磷酸盐缓冲液(PBS)或含二甲基亚砜(DMSO)的PBS外涂,每组6只小鼠.以耳肿度、双侧耳重量之差及组织切片中双侧耳双面距离之差为指标,观察Z-VAD-FMK对小鼠ACD的抑制作用;以酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测各组小鼠耳皮损中自细胞介素2(IL-2)及γ-干扰素(INF-γ)的含量.结果 在供给池为5 mmol/L Z-VAD-FMK 200μl、接收池容积为4 ml、有效扩散面积为1 cm2的条件下,Z-VAD-FMK6、12及24 h的透皮率分别为2.15%、9.62%及12.85%.2.5 mmol/L Z-VAD-FMK组小鼠耳肿度为(12.5±1.4)×10-2mm,重量差为(3.2±0.3)mg,镜下距离差为(11.8±1.3)×10-2mm,均低于阴性对照组[(19.1±2.0)×10-2mm,(4.3±0.4)mg,(16.8±1.7)×10-2mm,q=4.76,4.34,4.87,均P<0.05].2.5mmol/L Z-VAD-FMK组小鼠耳皮损中IL-2及INF-γ的表达均低于阴性对照组[IL-2:(148±10)pg/mlvs(205±18)pg/ml,t=2.205,P<0.05;INF-γ:(650±45)pg/ml vs(1030±58)pg/ml,t=2.375,P<0.05].结论 广谱caspase抑制剂Z-VAD-FMK能够透过皮肤,并抑制T细胞的活化与增殖,抑制ACD.     

利巴韦林对呼吸道合胞病毒感染哮喘加重小鼠胸腺基质淋巴细胞生成素分泌的影响

目的 明确利巴韦林(RIB)在呼吸道合胞病毒(RSV)感染哮喘加重治疗中的作用.方法 (1)细胞试验:人支气管上皮细胞16HBE随机分为RSV组、RSV/RIB组、RIB组和对照组,每组8瓶.感染细胞用RSV病毒液的感染复数(MOI)为2;RIB浓度为50 μg/ml.蛋白质印迹法检测各组细胞胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)蛋白表达.(2)动物实验:雌性BALB/c小鼠随机分为卵清蛋白(OVA)组、OVA/RSV组、OVA/RSV/RIB组和对照组,每组8只.应用OVA腹腔注射致敏、OVA雾化吸入结合RSV病毒液滴鼻激发哮喘,RIB 10 mg/kg肌内注射.动物肺功能分析系统检测各组小鼠气道反应性;酶联免疫吸附试验检测小鼠血清白细胞介素4(IL-4)、IL-5、IL-13、干扰素γ(IFN-γ)和支气管肺泡灌洗液(BALF)TSLP浓度;取肺组织观察炎症反应和气道上皮细胞TSLP表达水平.结果 细胞试验显示RSV、RSV/RIB、RIB和对照组TSLP蛋白表达量分别为1.97±0.22、1.16±0.19、0.99±0.17和0.89±0.08,RSV/RIB组明显低于RSV组(P＜0.01).动物实验显示OVA/RSV/RIB组小鼠气道反应性明显低于OVA/RSV组(P＜0.01);血清IL-4、IL-5、IFN-γ和BALF中TSLP浓度分别为(109.7±41.9)、(220.8±30.9)、(13.0±3.4)和(1945±82)pg/ml,均明显低于OVA/RSV组[分别为(274.2±103.7)、(293.3±46.1)、(30.1±5.7)、(2127±46)pg/ml,均P＜0.01];气道炎症细胞浸润和气道上皮细胞TSLP表达均明显少于OVA/RSV组.结论 RIB可以抑制RSV感染引起的TSLP分泌增加和哮喘加重.