伏马菌素B1免疫学检测方法的建立

目的建立应用单克隆抗体的伏马菌素B1(fumonisin B1,FB1)间接竞争酶联免疫吸附检测方法.方法利用B淋巴细胞杂交瘤技术制备抗FB1单克隆抗体,建立FB1间接竞争酶联免疫吸附方法.结果建立稳定分泌抗FB1毒素单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分泌的抗体为IgG1亚类,分子量150KD,腹水稀释度为12.0×108,亲和常数为6.72×109L/mol.FB1间接竞争酶联免疫吸附方法的最低检出浓度为5μg/L,校正曲线的线性范围50～500μg/L,线性方程Y=-0.582X+1.793(r=0.99,P＜0.05);与脱氧雪腐镰刀菌烯醇、玉米赤霉烯酮、T-2毒素均无交叉反应.回收率71.89%～112.95%,平均回收率100.23%.结论所建立的检测方法具有快速、简便、灵敏的特点,可满足实际工作需要.     

葡萄球菌肠毒素A、B检测的免疫芯片技术研究

目的:建立用于葡萄球菌肠毒素A、B检测的免疫芯片技术方法。方法:采用双抗体夹心法原理进行免疫芯片的技术研究,对影响免疫芯片检测结果的实验条件进行了优化。结果:实现了在同一张芯片上同时检测葡萄球菌肠毒素A、B,按优化后的条件检测SEA、SEB,最低检测限均为1 ng/m l。结论:对葡萄球菌肠毒素A、B进行了免疫芯片的制作,可以实现待测物的测定。     

微囊藻毒素和黄曲霉毒素及伏马菌素联合毒性

目的研究微囊藻毒素、黄曲霉毒素、伏马菌素对Hep G2细胞的半数抑制浓度（IC50）,探讨3种毒素的联合毒性.方法选用3种毒素各自最具代表性的异构体微囊藻毒素LR、黄曲霉毒素B1和伏马菌素B1,用水溶性四氮唑（WST-1）比色法测定3种物质对Hep G2细胞存活率的影响,计算IC50,并根据等效曲面联合毒性分析模型判断联合作用类型.结果染毒24h,微囊藻毒素LR对Hep G2细胞的IC50〉100μmol/L;黄曲霉毒素B1、伏马菌素B1及3毒素混合物的IC50分别为1.0,399.2和172.0μmol/L.根据等效曲面法求得的相互作用指数α为0.95.结论微囊藻毒素LR、黄曲霉毒素B1和伏马菌素B1对Hep G2的联合毒作用类型为相加作用.     

伏马毒素B1酶联免疫分析方法研究

伏马毒素B1是由串珠镰刀菌属产生的毒性较大的一种真菌毒素，国内外对检测伏马毒素B1的酶联免疫吸附分析方法进行了许多研究。本文主要对酶联免疫分析中的完全抗原制备、抗体的制备以及酶联免疫检测形式进行概述。     

市售花生、玉米中黄曲霉毒素与伏马菌素污染水平调查

[目的]了解南京市市售花生、玉米及其制品的黄曲霉毒素(aflatoxin,AFT)和伏马菌素B(FumonisinB,FB)的污染水平,就两者的联合污染水平进行探讨。[方法]收集南京市超市和农贸市场的部分花生、玉米及其制品,采用ELISA法测定FB与黄曲霉毒素B(1AFB1)的含量。[结果]超市所采集的19份样品AFB1的检出率为68%,平均含量为0.53μg/kg,FB的检出率为21%,平均含量为0.56mg/kg。农贸市场所采集的49份样品AFB1的检出率为59%,平均含量为6.98μg/kg,FB的检出率为76%,平均含量为9.89mg/kg。所有玉米及其制品样品AFB1和FB的联合污染率为33%,其中超市样品的联合污染率为21%,农贸市场样品的联合污染率为38%。[结论]南京市市售花生、玉米及其制品中存在AFB1和FB的污染,且玉米及其制品存在联合污染问题。     

伏马毒素B_1酶联免疫分析方法研究

伏马毒素B1是由串珠镰刀菌属产生的毒性较大的一种真菌毒素,国内外对检测伏马毒素B1的酶联免疫吸附分析方法进行了许多研究。本文主要对酶联免疫分析中的完全抗原制备、抗体的制备以及酶联免疫检测形式进行概述。     

044 伏马毒素B1酶联免疫分析方法研究

伏马毒素B1是由串珠镰刀菌属产生的毒性较大的一种真菌毒素,国内外对检测伏马毒素B1的酶联免疫吸附分析方法进行了许多研究.本文主要对酶联免疫分析中的完全抗原制备、抗体的制备以及酶联免疫检测形式进行概述.     

伏马毒素B_1时间分辨荧光免疫分析超微量检测方法的建立

目的 利用稀土离子作为示踪剂,建立间接竞争时间分辨荧光免疫分析方法检测伏马毒素B_1(FB_1).方法 以伏马毒素B_1-牛血清白蛋白(FB_1-BSA)包被于同相微孔板,FB_1标准品或样品中的FB_1竞争结合限量的抗FB_1单抗,然后用稀土离子Eu~(3+)羊抗鼠lgG进行示踪检测,建立伏马毒素B_1-时间分辨荧光免疫分析(FB_1-TRFIA)并进行方法学的考核.结果 FB_1-TRFIA检测灵敏度为0.05 ng/ml,检测范围为FB_1 1.0～1 000 ng/ml,批内、批问变异率均小于10%.添加回收实验表明玉米样品中FB_1批内平均回收率为104.3%,批间平均回收率为100.7%.FB_1与FB_2有轻微交叉反应,FB_1不与赤霉毒素脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)、玉米赤霉烯酮(ZEN)、T2等真菌毒素发生交叉反应,方法特异性好.结论 FB_1-TRFIA灵敏度高,检测范围宽,重复性、稳定性好,是一种简便、快速、经济、稳定、可进行大批量样品伏马毒素筛查的检测方法.

Abstract：

Objective To develop an indirect competitive time-resolved fluoroimmunoassay (TRFIA) for the quantitative determination of fumonisin B_1 in cereal. Methods FB_1-BSA was coated in 96-well plates as the solid phase antigen to compete with free FB, for limited anti-FB, monoclonal antibody. The goat anti-mouse antibodies labeled with Eu3+ were used as the tracers to establish FB_1-TRFIA in dissociation enhanced fluorescence immunoassay system. Results For this method, the sensitivity was 0.05 ng/ml and the assay ranges were 1.0-1000 ng/ml with intra-and inter-assay CV less than 10%. The average recoveries for FB_1 were 104.3% for inter-assay and 100.7% for intra-assay respectively in corn samples. In FB_1-TRFIA, there was a slight interaction between FB_1 and FB_2, and there were no interactions between FB_1 and other mycotoxins, such as DON, ZEN and T2. The results indicated that the assay was of highly specificity. Conclusion The FB_1-TRFIA with high sensitivity, wide measuring range, good repeatability and stability is a simple, rapid, economic method and is applicable to the determination of fumonisin B_1 for large scale samples.     

玉米糁中伏马毒素B1和B2的免疫亲和柱净化-超高效液相串联质谱测定法

目的 建立用超高效液相串联质谱法测定玉米糁中伏马毒素含量的方法.方法 样品经前处理,用免疫亲和柱净化,甲醇洗脱待测物后,以0.1%甲酸水溶液、50%甲醇溶液和50%乙腈溶液(4:3:3)为流动相,用超高效液相串联质谱仪测定.结果 在本实验条件下,伏马毒素B<,1>和B<,2>(FB<,1>和FB<,2>)的线形范围均为...     

伏马菌素B1单抗ELISA检测试剂盒研制

目的研制快速检测粮食中伏马菌素BI（FB1）的试剂盒。方法在制备抗FB1单克隆抗体基础上，利用间接竞争酶联免疫吸附方法研制FB，快速检测试剂盒。结果该试剂盒最低检出浓度为5ng／ml，校正曲线线性范围50～500．g／ml，线性方程Y=-0．582X＋1．793（r=0．99，P〈0．05）。与脱氧雪腐镰刀菌烯醇、玉米赤霉烯酮、T-2毒素均无交叉反应。回收率在71．89％～112．95％之间，平均回收率为100．23％。试剂盒常温下可保存225d，实验室内的变异系数和实验室间变异系数均〈20％。结论该试剂盒快速、简单、灵敏，可满足实际工作需要。