高效液相色谱-电化学检测法测定金荞麦饮片中表儿茶素的含量

目的:建立可测定金荞麦饮片中表儿茶素含量的高效液相色谱-电化学检测法。方法:采用DiamonsilC₁₈(4.6 mm×250 mm,5μm)柱,流动相甲醇-0.1 mol.L^-1磷酸盐缓冲液(1∶3,pH 2.5),流速1.0 mL.min^-1,柱温35℃,参比电极ISAAC(in-situ silver/silver chloride),工作电极玻碳电极,检测电位+600 mV。结果:表儿茶素的线性范围为0.004 875～1.56μg,r=0.999 9;平均回收率为100.7%,RSD 1.9%(n=5)。9批不同市售来源的金荞麦饮片中表儿茶素的含量存在差异。结论:该方法重复性好,可以用来测定金荞麦饮片中表儿茶素的含量。     

反相高效液相色谱-紫外检测法测定血浆中沙丁胺醇浓度

 目的 建立反相高效液相色谱-紫外法测定血浆中沙丁胺醇浓度的方法。方法采用Ullraspher Cyano分析柱(250 mmx 4.6mm,5 μm),乙腈-甲醇-0.025 mol.I/1磷酸铵缓冲液(pH2.8)(2:0.5:97.5)为流动相,吗啡作内标.样品经离子对萃取纯化后进样,在224 nm波长下检测,按内标法定量.结果标准曲线在0.5~32μg.L1内有良好线性,最低检测浓度为0.3 μg-L,萃取回收率在93% -99%之间,方法回收率在98%～109%之间,日内RSD小于5%,日间RSD小于8%。结论本法具有快速简便,灵敏准确等特点,已用于测定沙丁胺醇缓释制剂生物利用度样品700余个,结果良好.     

高效液相色谱 - 质谱法测定人血浆中左卡尼汀的浓度

 目的 建立人血浆中左卡尼汀浓度的高效液相色谱 - 质谱（ HPLC-MS ）测定法。 方法 以米屈肼作为内标,血浆样品经蛋白沉淀法处理,用氰基色谱柱 (Ultimate XB-CN , 4.6 mm × 250 mm , 5 μm) 进行分离,以乙腈 -30 mmol·L^-1 醋酸铵水溶液 ( 含 0.8% 甲酸 ) (80 ∶ 20) 为流动相,柱温 40 ℃ ,流速 1.0 mL·min^-1 ,柱后分流比为 4 ∶ 1 , HPLC-MS/ESI⁺ 法选择性监测准分子离子峰 [M+H]⁺ ( 左卡尼汀： <> m/z =162.1 , IS ： <> m/z =147.1) 。 结果 左卡尼汀及内标米屈肼在氰基柱上保留较好,分离完全,左卡尼汀在 0.4~12.8 mg·L^-1 内线性关系良好, <> r =0.999 4 ,平均萃取回收率大于 80% ,方法回收率大于 92% ,小于 114% ,日内日间 RSD 均小于 12% 。 结论 本方法简便快速、灵敏准确,适用于人血浆中左卡尼汀临床治疗监测和药物研究的需要。     

高效液相-电化学法测定大鼠血浆中单胺类神经递质及其代谢产物

目的: 建立高效液相色谱-库仑阵列电化学法测定大鼠血浆中的单胺类神经递质及其代谢产物含量的分析方法。 方法: 采用Agilent公司的1200型高效液相色谱仪和ESA公司库仑2通道电化学检测器,以3,4二羟基苄胺(DHBA)为内标,测定大鼠血浆中的肾上腺素(E)、去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)、高香草酸(HVA)和5-羟色胺(5-HT)的含量。色谱柱:Zorbax Eclipse XDB-C₁₈(4.6 mm×150 mm, 5 μm),加EasyGuard 预柱;流动相:含一水合柠檬酸80 mmol·L^-1,柠檬酸三钠73.4 mmol·L^-1,1-辛烷磺酸钠0.12 mmol·L^-1,乙二胺四乙酸二钠0.1 mmol·L^-1,18％甲醇的混合溶液,pH4.3;流速:1.0 mL·min^-1;柱温:25 ℃;进样量:10 μL;测定电极电势:-150 mv和400 mv。 结果 :NE、E、DA、HVA和5-HT的最低检测浓度分别为2.0,3.0,5.4,5.2,11.1 ng·mL^-1;平均回收率分别为99.72％、85.33％、83.15％、120.43％、103.56％;日内(n=6)和日间(n=3)精密度RSD小于9.12％。 结论: 本方法操作简便、准确、快速、灵敏度高。可用于大鼠血浆中相关单胺类神经递质的检测和研究。     

高效液相色谱 荧光检测法测定人血浆中酒石酸唑吡坦的浓度

 目的建立酒石酸唑吡坦血药浓度测定方法。方法采用HPLC-荧光检测法测定血药浓度,激发波长254 nm,发射波长390 nm。血样加0.25 mol·L^-1KOH碱化后用乙醚萃取;色谱柱：HypersilODS2(200 mm×4.6 mm,5μm);流动相：乙腈-0.02mol·L^-1KH₂PO₄(pH6.0)(40∶60);流速：1.0 mL·min^-1。结果血药浓度线性范围5.0～250.0 ng·mL^-1(r=0.9995,n=6),血浆最低检测浓度为2.5 ng·mL^-1,高、中、低3种浓度平均回收率分别为：(103.60±2.44)%,(104.40±0.84)%,(106.64±9.93)%。结论该法为酒石酸唑吡坦药动学研究提供了一种检测方法。     

血浆中葫芦素B的高效液相色谱测定方法研究

 目的 建立高效液相色谱法测定血浆中葫芦素B浓度的方法,研究葫芦素注射剂在小鼠体内的药动学。方法 采用高效液相色谱法,色谱柱：Hypersil ODS C₁₈, 流动相：甲醇-水（72：28）,筛选雌酚酮作内标。样品经萃取纯化后进样,检测波长228 nm,按内标法定量测定。结果 标准曲线在0.5～15μg·mL^-1内有良好线性关系（r=0.9962）,方法回收率在94.11%～99.77%,检测限4 ng,小鼠血浆中最低检测浓度为50 ng·mL^-1。日内RSD小于12.12%,日间RSD小于15.63%。葫芦素水针剂小鼠静脉给药后体内的药-时过程符合二室模型。结论 首次建立的高效液相色谱法测定葫芦素B血药浓度的方法简便,快速准确,灵敏度高,适用于测定血浆中葫芦素B浓度及体内的药动学研究。     

高效液相色谱-紫外检测法测定大鼠血浆Copen浓度

 目的 建立测定大鼠血浆Copen浓度的HPLC-UV检测方法,用于Copen大鼠药动学研究。方法 血浆样品用蛋白沉淀法进行预处理。以Symmetry（4.6 mm×150 mm,5 μm）色谱柱为分析柱,流动相采用乙腈-0.1%磷酸水溶液(50∶50),流速为1.0 mL·min^-1,柱温为25 ℃,检测波长为318 nm。结果 内源性杂质不干扰测定,Copen在0.101~20.2 μg·mL^-1内线性良好,方法的最低定量限为0.101 μg·mL^-1 。萃取回收率在69.19%~77.19%之间,日内、日间精密度(RSD)均小于5.20%。结论 此方法快速、准确、灵敏,所需血浆量少,适用于药动学研究。     

超高效液相色谱-电化学检测法测定女贞子中的3种成分

目的 建立超高效液相色谱-电化学检测法同时测定女贞子中羟基酪醇、红景天苷和酪醇3种成分的方法。方法 取女贞子药材粉末0.1 g经20 mL甲醇超声提取30 min,提取液再经0.22 μm滤膜过滤后上样进行色谱分离。以 ACQUITY UPLC HSS T3 柱(2.1 mm×100 mm,1.8 μm)为固定相,25 mmol·L^-1乙酸铵溶液(pH 3.6)-甲醇=88∶12(V/V)为流动相。电化学检测器检测,库伦检测池第一通道电压为350 mV,第二通道为550 mV。结果 羟基酪醇、红景天苷和酪醇的质量浓度在0.1~10、1~50和0.1~8 mg·L^-1内与其峰面积呈线性关系(r²>0.999 0),平均加标回收率分别为101.52%、102.15%和101.92%,相对标准偏差分别为3.64%、3.87%和4.54%。结论 使用超高效液相色谱-电化学检测法测定3种成分不仅灵敏度高,而且分析时间大大缩短,适合于女贞子中3种苯乙醇类化合物的测定。     

高效液相色谱法测定人血浆中氟尿嘧啶浓度

 目的测定人血浆中氟尿嘧啶的浓度。方法高效液相色谱法，测量氟尿嘧啶的波长λ_max=254nm，流动相为水-甲醇 冰醋酸(96.95∶3.0∶0.05),pH=3.5。结果回归方程为Y=11.82X+0.078(r=0.999 2)，其线性范围为0.66～42.00μg·mL^-1，最低检测浓度为0.154 9 μg·mL^-1(S/N=3)。结论该法简单、快速、结果准确，适用于临床氟尿嘧啶的药物浓度监测     

高效液相色谱荧光检测法测定人体内血浆中双嘧达莫的浓度

目的:建立一种简便、快速的高效液相色谱(HPLC)荧光检测法测定人体内血浆中双嘧达莫的浓度。方法:采用Kro-masil C18柱(4.6 mm×150 mm,5μm),柱温30℃,流动相为0.02 mol.L-1磷酸二氢钾(含0.04%的三乙胺)-乙腈(39:61),流速为1.0 ml.min-1,荧光检测激发波长290 nm,发射波长485 nm。氟伐他汀为内标。结果:双嘧达莫在10～4000μg.L-1范围内线性关系良好(r=0.9997)。日内和日间RSD%均低于10%。结论:该方法灵敏度高、快速、简便、无杂质干扰,适合于双嘧达莫的血药浓度监测及药物动力学研究。     

HPLC-ECD法测定大鼠血浆中同型半胱氨酸的含量

目的:建立检测大鼠血浆中同型半胱氨酸(Hcy)含量的HPLC-ECD测定方法。方法:大鼠血浆中的Hcy经二硫苏糖醇还原,色谱系统采用ODS2反相柱,10%甲醇流动相分离,用电化学检测器测定其浓度。结果:Hcy浓度在0.1~100μmol.L-1范围内线性关系良好,相关系数为0.999 3(n=7);样品加样回收率为100.73%,RSD=2.628%;精密度RSD=2.3%,日内稳定性RSD=2.61%,日间稳定性RSD=5.62%。结论:HPLC-ECD法测定血浆中Hcy的含量,操作简便,灵敏度高,稳定性及重复性好,可用于大鼠血浆中Hcy含量的研究。     

GC-MSn同时测定小鼠血浆中冰片和尼莫地平质量浓度

 目的建立测定小鼠血浆中冰片和尼莫地平的气相色谱-质谱(GC-MSn)定量分析方法。分析两药合用后尼莫地平在小鼠体内的药动学变化。方法血浆样品经乙酸乙酯提取,采用选择性离子抽提和二级MS/MS质谱分别监测冰片和尼莫地平的血药浓度。结果本法可同时测定血浆中2种相对分子质量差异较大的药物质量浓度,冰片在0.01～10 mg·L^-1,尼莫地平在0.01～0.5 mg·L^-1内,峰面积与其质量浓度呈良好的线性关系。最低检测限分别为5.0,2.5 mg·L^-1,日内RSD分别为4.6%～6.7%,2.5%～5.2%;日间RSD分别为2.3%～9.9%,5.1%～6.6%(n=5)。结论该方法灵敏,简便,准确,适用于冰片和尼莫地平配伍应用的药动学研究。尼莫地平加冰片合用的动力学研究表明,冰片可以改变尼莫地平在体内的分布过程。     

小鼠血浆中姜黄素的含量测定及药动学研究

 目的建立血浆中姜黄素含量测定的HPLC,并研究姜黄素静注后在小鼠体内的药动学行为。方法血浆样品用乙腈沉淀蛋白后,采用Lichrospher-C₁₈分析柱(4.6 mm×250 mm,5μm),柱温:30℃;流动相:甲醇-5%醋酸溶液(85∶15);流速:0.5 mL·min^-1;检测波长:420 nm。结果本法可将姜黄素与其他内源性干扰成分成功分离。在0.25～10.0 mg·L^-1内,测定方法具有良好的线性关系;萃取回收率为64.91%,加样回收率为93.10%;日内、日间精密度RSD均小于10%。小鼠静注姜黄素后药动学行为符合三室模型,主要药动学参数为:t_1/2pi 0.42 min,t_1/2α 16.2 min,t_1/2β 73.82 h,CL1.22 L·h^-1。结论所建立的姜黄素体内血药浓度测定方法可行,姜黄素静注后在小鼠体内分布消除迅速。     

HPLC-ECD法同时测定青天葵中鼠李柠檬素、鼠李秦素的含量

目的 采用高效液相-库仑阵列电化学法（HPLC-ECD）同时测定青天葵中鼠李柠檬素和鼠李秦素含量,并对不同培养方法及不同生长阶段的青天葵进行测定分析。方法 采用Agilent HC-C18色谱柱（150 mm×4.6 mm,5 μm）,以甲醇∶乙腈（体积比2∶1）混合后加5 % 20 mmol·L-1 NaH2PO4（A）－20 mmol·L-1 NaH2PO4水溶液,用H3PO4调pH至2.50（B）为流动相,A∶B=48∶52等度洗脱,流速：1 mL·min-1,进样量15 μL,柱温：35 ℃,检测电压：50,150 mV。结果 鼠李柠檬素和鼠李秦素的线性范围分别为0.2～50.1 μg·mL-1（r=0.9999）和0.15～36.4 μg·mL-1（r=0.9999）,平均回收率（n=9）分别为97.98 %（RSD=1.50 %）和97.64 %（RSD=2.49 %）。结论 HPLC-ECD法测定青天葵中鼠李柠檬素、鼠李秦素操作简便、准确,灵敏度高,不同培养阶段药材含有的鼠李柠檬素、鼠李秦的含量有一定差异,可为青天葵质量标准制定及提高提供依据。     

去甲乌药碱在犬体内的药动学研究

 目的 建立固相萃取-高效液相色谱电化学检测法,测定犬血浆中去甲乌药碱的血药浓度,并以此法研究去甲乌药碱在Beagle犬体内的药动学。方法 血浆样品中去甲乌药碱经Alltech酸性氧化铝柱萃取后,以多巴酚丁胺为内标进行色谱分析。色谱柱为Alltech公司Apollo Phenyl(5μm,150 mm×4.6mm)柱,柱前加预柱(2.5cm×4.6 mm),日本岛津L-ECD-6A型电化学检测器检测。流动相为0.05mol·L^-1磷酸二氢钠(pH 3.0)-乙腈(89:11),流速1.0 mL·min^-1。结果 去甲乌药碱与内标峰面积比和血浆去甲乌药碱浓度直线相关,r=0.9998,线性范围为25.0～10000.0 ng·mL^-1。去甲乌药碱的最低检测浓度为2.55ng·mL^-1,日内及日间RSD均小于7％。研究表明,去甲乌药碱的药-时曲线符合二室模型,t_1/2为8.60min。结论 此方法灵敏、准确、稳定,可用于去甲乌药碱药动学研究。     

HPLC-ECD法测定青蒿素溶解度及油水分配系数

目的 建立一种便捷灵敏的青蒿素含量测定方法,并测定其在不同溶剂中的溶解度及油水分配系数。方法 均匀试验设计优化青蒿素的柱前衍生条件,采用HPLC-ECD法进行测定。结果 优化的青蒿素柱前衍生条件为：1 mL青蒿素无水乙醇溶液与4 mL氢氧化钠0.01 mol·L-1于70 ℃水浴中反应50 min后,冷却至室温,再加入5 mL醋酸0.06 mol·L-1。青蒿素在0.0015~0.7500 μg范围内线性关系良好。结论 建立的柱前衍生HPLC-ECD法专属性强、灵敏度高,适用于青蒿素的测定。     

高效液相色谱-电化学检测法测定黄芩中3种有效成分的含量

目的:建立同时测定黄芩中有效成分黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素含量的HPLC-ECD检测法。方法:采用kromasil-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm)进行分离,Waters2465电化学检测器进行检测,检测电位为+800 mVvs.ISAAC(in-situ silver/silver chloride),流动相为H₂O-THF-H₃PO₄(80∶10∶0.2)与CH₃OH等体积混合洗脱,流速1.0 mL.min^-1,柱温30℃,进样体积10μL。结果与结论:黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素分别在下列范围内,有良好的线性:0.045 6～1.14μg(r=0.999 6),0.013～0.325μg(r=1.000 0),和0.009 5～0.047 5μg(r=0.999 9)。平均回收率(n=5)分别为97.9%(RSD 2.3%),97.2%(RSD 3.3%)和103.5%(RSD 3.5%)。测定了14个不同种源、9个不同产地黄芩中有效成分的含量,对黄芩品质进行了评价。     

血浆中东莨菪碱的高效液相色谱测定

目的 建立血浆中东莨菪碱的高效液相色谱(HPLC)测定方法,为含东莨菪碱的中药复方动物体内药动学研究提供基础.方法 采用ZORBAX SB-C18 (5 μm,250mm×4.60 mm)色谱柱;以甲醇-0.001 mol·L-1磷酸(70:30)(流动相含0.02 mol·L-1十二烷基硫酸钠)为流动相,流速为1.00 ml·min-1,检测波长为203 nm.结果 东莨菪碱在4.5～249.5 μg·ml-1范围内与峰面积比值呈良好的线性关系(r=0.998 8,r=0.999 4).回收率分别为113.51%,97.16%和97.59%.两者日内、日间精密度的RSD<5%.结论 建立的高效液相色谱测定方法为动物体内东莨菪碱的测定提供了一个可靠的方法.     

RP-HPLC测定人血浆中洛匹那韦浓度

 目的 建立人血浆中洛匹那韦的高效液相色谱测定方法,用于临床进行药物浓度监测。方法 血浆样品经醋酸乙酯液液萃取后,采用高效液相色谱法（HPLC进行分析。Eclipse C₁₈柱分离,流动相采用甲醇-0.1 mol·L-1醋酸铵溶液,流速为1 mL·min-1 ;梯度洗脱在0~6 min甲醇-0.1 mol·L-1醋酸铵溶液为70∶30,6.1~15 min甲醇-0.1 mol·L-1醋酸铵溶液为80∶20;利用光电二极管阵列检测器对流份进行双波长同时检测（洛匹那韦210 nm,内标298 nm,柱温30 ℃。结果 内源性物质不干扰测定,洛匹那韦的线性范围为1～12 mg·L-1（r=0.997 0,最低定量限为1 mg·L-1,基质效应为92.11%～105.31%（n=5,萃取回收率为73.32%～89.50%（n=5,批内和批间精密度（RSD%分别为1.75～5.99（n=5和4.97～9.79（n=3。结论 建立的HPLC方法简便、灵敏、准确、所需样本量小,可以用于临床血药浓度测定。