383例阴道真菌感染菌群鉴定及药敏分析

目的了解念珠菌性阴道炎致病菌的菌种分布情况及耐药情况。方法对念珠菌性阴道炎患者的标本运用玛嘉显色培养基法对分离自阴道念珠菌感染患者的383株念珠菌进行菌种鉴定。结果383例阴道念珠菌感染的病例经鉴定白色念珠菌368株（96．09％）,其次为光滑念珠菌10株（2．61％）,较少的有热带念珠菌4株1．04％）和克柔念珠菌1株（0．26％）。临床用7种药物中制霉菌素对阴道内真菌的敏感率最高为98．4％,两性霉素B敏感率为98．1％,酮康唑50.4％,伊曲康唑47．5％,咪康唑47．5％,氟康唑25．3％,特比萘芬23．5％。结论白色念珠菌是导致临床阴道念珠菌感染的优势菌群,其次有光滑念珠菌,热带念珠菌和克柔念珠菌等念珠菌感染。制霉菌素对阴道内真菌的敏感率最高,是治疗真菌感染的有效药物。鉴于伊曲康唑、咪康唑、氟康唑、特比萘芬等均存在不同程度的耐药,建议对反复发作的念珠菌性阴道炎患者根据药敏试验来选择药物,从而减少耐药菌株的出现,提高念珠菌性阴道炎的治愈率。     

女性感染阴道毛滴虫、白色念珠菌及淋球菌的分析研究

目的：了解女性感染念珠菌性阴道炎、滴虫性阴道炎和淋病的情况，探讨3种疾病的发生率与年龄的关系。方法：阴道毛滴虫、白色念珠菌采用湿片直接镜检法．淋球菌采用革兰氏染色镜检法。结果：9170例普查女性．阴道毛滴虫感染244例，发生率为2．66％；白色念珠菌感染1556例，发生率为16．96％；9170例标本有2930例同时普查了淋球菌，淋球菌感染88例，发生率为3．0％；淋球菌与白色念珠菌合并感染者12例，发生率为0．41％；未见阴道毛滴虫与白色念珠菌同时感染。阴道毛滴虫、白色念珠菌及淋球菌在20～35岁女性的感染构成比分别为66．39％、80．77％、74．99％。结论：女性阴道毛滴虫及淋球菌感染的发生率无上升趋势，白色念珠菌感染的发生率明显上升，20-35岁的女性应提高对这些性传播疾病的防范意识，定期进行妇检，并及时治疗。     

LA MP结合示差脉冲伏安法快速检测肺炎克雷伯菌的方法建立及临床应用

目的：利用环介导恒温扩增（LAMP）技术结合示差脉冲伏安（DPV）法,建立快速检测肺炎克雷伯菌的方法,并将其应用于小儿腹泻病原菌分析。方法通过基因比对与引物设计,建立针对肺炎克雷伯菌的LAMP 检测方法。采用LAMP 技术对肺炎克雷伯菌和其他8种干扰菌以及对不同浓度肺炎克雷伯菌进行扩增,结合DPV法评价其特异性及灵敏度。将200份腹泻患儿的粪便标本同时采用LAMP方法与培养法进行检验,对比2种方法检测肺炎克雷伯菌的阳性率。统计近2年该院门诊及住院小儿腹泻病例,初步分析其常见腹泻致病菌种类及比例。结果设计出针对肺炎克雷伯菌的LAMP 检测方法,该法只针对肺炎克雷伯菌有扩增,对其他干扰菌不扩增,显示出良好的特异性,LAMP法最低检测限为10 CFU/mL,显示出较高的灵敏度。200份腹泻患儿粪便标本,采用LAMP法与培养鉴定法检测的肺炎克雷伯菌阳性率差异无统计学意义（P＞0．05）。近2年内该院小儿腹泻粪便标本中共检出致病菌709株,主要病原菌分别为志贺菌（34．23％）、大肠杆菌（15．40％）、铜绿假单胞菌（12．96％）、弗劳地枸橼酸杆菌（7．82％）、沙门菌（6．36％）、白色念珠菌（6．11％）、肺炎克雷伯菌（4．40％）、产气荚膜梭菌（3．67％）、变形杆菌（3．42％）、其他菌（5．63％）。结论设计出了针对肺炎克雷伯菌的LAMP检测方法,该法具有良好的特异性和较高的灵敏度,能够用于肺炎克雷伯菌的快速检验。     

PCR-反向点杂交法在外阴阴道念珠菌病诊断及白念珠菌耐药基因突变检测中的应用

目的评价PCR-反向点杂交法用于念珠菌菌种鉴定及白念珠菌耐药基因突变检测的应用价值。方法收集念珠菌性阴道炎患者及体检健康妇女分泌物各285份和50份。用生物梅里埃酵母菌鉴定卡进行菌种鉴定,用最低抑菌浓度(MIC)法(郑州安图真菌快速培养鉴定药敏试剂)进行药敏试验;采用PCR-反向点杂交法(深圳亚能念珠菌菌种鉴定及白念珠菌耐药基因突变检测试剂)进行菌种鉴定和耐药基因突变检测;采用PCR及测序方法进行耐药基因的检测。分别以培养鉴定法、MIC法、核酸序列测定法为对比方法,评价PCR-反向点杂交法念珠菌菌种鉴定及白念珠菌耐药基因突变检测的敏感性、特异性及准确性。结果与培养鉴定法相比,PCR-反向点杂交法检测6种念珠菌菌种的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值和总符合率分别为95%、96%、96%、98%、97%以上,2种方法检测6种念珠菌(白念珠菌、光滑念珠菌、热带念珠菌、近平滑念珠菌、克柔念珠菌和季也蒙念珠菌)结果的差异无统计学意义(χ~2值分别为0.44、0、0、0、0和0,P均0.05),一致性较好(Kappa均0.9)。与MIC法相比,PCR-反向点杂交法检测白念珠菌耐药的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值和总符合率分别为98%、88%、98%、88%和96%,2种方法检测结果的差异无统计学意义(χ~2=0.17,P0.05),一致性较好(Kappa0.8)。PCR-反向点杂交法与核酸序列测定法相比,对6种白念珠菌耐药基因突变位点的检测结果完全一致。结论PCR-反向点杂交法在念珠菌菌种鉴定及白念珠菌耐药基因突变检测上与培养鉴定法以及核酸序列测定法的一致性高,比传统检测方法更早期更快速,可应用于外阴阴道念珠菌病(VVC)的辅助诊断。     

不同方法对外阴阴道假丝酵母菌病的检出效果

目的探讨湿片镜检、革兰染色镜检、阴道炎干化学五联检、阴道炎抗原三联检、核酸杂交和真菌培养等方法对阴道分泌物标本中外阴阴道假丝酵母菌(即念珠菌)的检出效果。方法同时使用上述方法检测211例阴道分泌物标本,并以真菌培养法为金标准对数据进行统计分析。结果湿片镜检、革兰染色镜检、阴道炎干化学五联检、阴道炎抗原三联检及核酸杂交法检测外阴阴道假丝酵母菌(即念珠菌)的灵敏度分别为43.48%、58.70%、63.04%、34.78%和71.74%,特异度分别为98.79%、98.18%、79.39%、96.36%和98.79%,诊断符合率分别为86.73%、89.57%、75.83%、82.94%和92.89%;5种方法分别与真菌培养法比较,Kappa值(一致性检验)分别为0.521、0.650、0.374、0.384和0.772;相对于真菌培养法,曲线下面积(AUC)分别为0.711、0.784、0.712、0.656和0.853,核酸杂交法AUC值最大,阴道炎抗原三联检AUC值最小;5种方法总符合率为60.66%。结论 5种方法中,核酸杂交法对念珠菌的检出效果最佳,革兰染色镜检法和湿片镜检法次之,阴道炎干化学五联检、阴道炎抗原三联检效果很不理想,不建议单独使用;5种方法间总体符合率非常低,不建议不同实验室和不同方法间进行比较。     

斯皮仁诺与达克宁栓联合治疗复发性念珠菌性阴道炎40例

念珠菌性阴道炎为临床上常见阴道炎之一 ,是由念珠菌中的白色念珠菌感染所致。多见于孕妇、糖尿病患者及大量接受雌激素及长期应用抗生素治疗的患者 ,在气候潮湿、妇女经期不注意清洁卫生等情况下易致本病 ,易复发。我院于 1 999年 8月至 1 2月应用西安杨森制药有限公司生产的斯皮仁诺胶囊与达克宁栓联合治疗复发性念珠菌性阴道炎患者 4 0例 ,取得了满意的临床效果。现报告如下资料与方法1 .1 .一般资料4 0例复发性念珠菌性阴道炎患者的年龄为 1 6～50岁 ,在半年内经其他抗真菌治疗后再复发次数不少于 2次。阴道分泌物镜检 ,念珠菌均为阳性…     

特比萘芬治疗复发性念珠菌性外阴阴道炎临床疗效观察

念珠菌性外阴阴道炎主要由白色念珠菌所引起的原发性或继发性感染，近年来，随着白念珠菌感染的增加，和其耐药现象日趋严重，在临床菌株中，复发性念珠菌性外阴阴道炎（RWC）的致病菌对6种抗真菌药物（5-氟胞嘧啶、制霉菌素、咪糠唑、益康唑、酮康唑、两性霉素）均有明显耐药性。作者2004年1月～2005年12月收治复发性念珠菌性外阴阴道炎70例，口服特比萘芬治疗，68例获得满意疗效，现将观察结果报告如下。     

武汉地区妇科门诊4744例阴道分泌物常规检查结果分析

目的：探讨武汉地区妇科门诊患者阴道炎的发病情况。方法对4474例阴道分泌物标本进行生理盐水湿片镜检和细菌性阴道炎（BV）试剂盒（BV蓝）联合检测。结果有1215例标本检出了病原体,总阳性率为27．16％,其中念珠菌性阴道炎664例,占14．84％,BV 400例,占8．94％,滴虫性阴道炎41例,占0．92％,混合感染阴道炎110例,占2．46％。结论妇女阴道炎的发生率较高,病原体分布也呈多样性。     

阴道分泌物念珠菌检测方法评价

目的探讨阴道分泌物的念珠菌检测（即盐水湿片法、革兰染色镜检法、真菌培养法）的方法学差异。方法对369例阴道炎患者的分泌物同时做盐水湿片、革兰染色镜检和真菌培养。结果盐水湿片法对念珠菌的检出率为25．2％,革兰染色镜检法的检出率为39．0％,真菌培养法的检出率为40．1％。结论盐水湿片法操作简便、快速,阳性率低于革兰染色镜检法及真菌培养法;真菌培养法阳性率及准确度高,且能鉴定真菌及做药敏试验,能及时指导临床用药,缺点是操作繁琐,耗时长,不利于早期诊断及治疗。     

念珠菌性外阴阴道炎的诊断与治疗

真菌性外阴、阴道炎是妇科常见病.真菌性外阴阴道炎是一种类酵母菌引起的炎症,最常见的致病菌为白色念珠菌,称为念珠菌性外阴阴道炎(VVC).     

白色念珠菌的快速检测技术开发

目的利用白色念珠菌单克隆抗体建立一种快速检测临床标本中白色念珠菌的方法。方法利用免疫层析技术,采用双抗夹心法制作成检测白色念珠菌的检测卡。利用标准菌株及临床标本对检测卡的最低检测限、交叉反应进行评估。与荧光PCR核酸扩增法进行试验对比,评估其灵敏度、特异度。结果该方法的最低检测限为10^4 cfu/mL,对可能造成交叉反应的临床常见的菌株,如热带念珠菌、克柔氏念珠菌、曲霉、金黄色葡萄球菌等真菌和细菌进行检测,均无交叉反应。该检测卡的灵敏度及特异度分别为80.00%和97.00%,与荧光PCR核酸扩增法进行对比,差异有统计学意义(P<0.05),Kappa值为0.737,两种方法一致性一般。结论该研究建立了一种灵敏度、特异度、准确度较高的,能快速检测临床标本中白色念珠菌的方法,对于有临床症状而快速检测结果为阴性的标本,建议进行荧光PCR核酸扩增法检测。     

恶性肿瘤患者念珠菌临床分离株的药物敏感性分析

目的 以美国临床实验室标准化委员会（NCCLS） M27-A方案的微量肉汤稀释法为金标准,评价丹麦ROSCO公司的纸片扩散法在检测念珠菌耐药性方面的应用价值,为临床实验室寻找一种简便的念珠菌药敏试验方法.方法 分别采用丹麦ROSCO公司抗真菌药敏纸片和法国生物梅里埃公司ATBFUNGUR2念珠菌药敏板条来检测78株常见念珠菌对5-氟胞嘧啶、两性霉素B、氟康唑、伊曲康唑等4种抗真菌药物的敏感性,以NCCLS的微量稀释法作为金标准,评价纸片扩散法的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值.结果 纸片扩散法检测5-氟胞嘧啶、两性霉素B、氟康唑、伊曲康唑的药敏结果,其Kappa值达到了0.89,未出现一种方法敏感而另一种方法耐药的严重错误现象;对78株念珠菌的药敏结果进行分析,5-氟胞嘧啶、两性霉素B敏感性高,分别为88.20％和89.17％,氟康唑和伊曲康唑敏感性较低,分别为56.34％和52.12％.白色念珠菌和热带念珠菌对4种抗真菌药物的敏感性较高,分别为90.95％、85.71％,而光滑念珠菌和克柔念珠菌的敏感性低,分别为67.50％、41.67％.结论 纸片扩散法与微量稀释法一致性高,在临床实验室可以替代微量稀释法进行念珠菌的药敏分析.我院念珠菌对两性霉素B的敏感性最高,对伊曲康唑的敏感性最低;抗真菌药物对白色念珠菌的抑菌率最高,对克柔念珠菌的抑菌率最低.     

检测阴道分泌物中β-N-乙酰葡糖胺糖苷酶的临床应用评估

目的对化学法检测阴道分泌物中β-N-乙酰葡糖胺糖苷酶的临床应用进行评估。方法在自动化仪器上用化学法检测200例患者阴道分泌物中β-N-乙酰葡糖胺糖苷酶,同时对受检样本进行假丝酵母菌的培养鉴定。结果β-N-乙酰葡糖胺糖苷酶阳性110例,阴性90例,培养出白色假丝酵母菌阳性69例。以培养法为标准,化学法检测阴道分泌物中白色假丝酵母菌的灵敏度、特异性、阳性预示值、阴性预示值分别为:62.3%、48.9%、39.0%、71.1%。结论化学法还不能作为检测阴道分泌物中白色假丝酵母菌阳性的过筛试验。     

3580例阴道炎患者阴道分泌物病原学检测及耐药性研究

目的 了解广州地区成年女性阴道炎患者阴道分泌物病原体感染状况及耐药情况,为该病的临床诊治提供依据.方法 对2010年1～12月在该院妇科就诊的阴道炎患者阴道分泌物常规及病原体检测结果进行统计分析.结果 3 580例患者阴道分泌物常规检查,检出真菌1 376例(占38.4%)、细菌性阴道炎1 256例(35.1%)、滴虫55例(1.5%)、革兰阴性双球菌11例(0.3%),清洁度以Ⅲ、Ⅳ度为主,分别占48.9%、27.5%.2 126例患者病原学检测,共检出2 248株病原体,其中假丝酵母菌1 028株、支原体728株、细菌457株、沙眼衣原体35株、485例患者同时检出两种或两种以上病原体,混合感染率为22.8%(485/2 126).检出率前三位的病原体依次为:白色假丝酵母菌、解脲支原体、大肠埃希菌.白色假丝酵母菌对抗真菌药物普遍敏感,耐药率均在10%以下;解脲支原体对多数抗生素的耐药率均较低,对交沙霉素、强力霉素等敏感率在95%以上;大肠埃希菌对氨苄西林及第三代头孢菌素耐药率较高,但对亚胺培南及阿米卡星仍高度敏感.结论 白色假丝酵母菌和解脲支原体是广州地区成年女性阴道炎患者感染的主要病原体.临床应重视病原菌的分离培养及药敏试验,并根据培养及药敏结果合理选用敏感抗菌药物的治疗.     

鹿寨县女性人群阴道分泌物检测结果分析

目的 了解鹿寨县女性人群阴道分泌物分布情况、阴道炎发病情况以及采取的相应预防措施.方法 对1 298例妇科门诊患者阴道分泌物采用CTB法做滴虫、念珠菌、纤毛菌、淋球菌、加特纳球杆菌检测,对其相关资料进行统计分析.结果 1 298例女性检出病原体523例,阳性率占40.29%.其中念珠菌222例,占首位(17.10%);其次加特纳球杆菌202例,占15.56%;毛滴虫、纤毛菌、淋球菌阳性者分别为43例(3.31%)、56例(4.31%)、1例(0.07%);清洁度以Ⅲ、Ⅳ为主,病原菌阳性率分别为60.09%、77.42%;二重感染以念珠菌+加特纳球杆菌为主,占51.28%;不同年龄组阴道炎发生率分别为22.13%、71.23%、60.13%、35.29%,20～39岁组念珠菌性阴道炎和细菌性阴道炎发生率最高,与其他组比较差异有统计学意义(P<0.05).结论 该地区女性常见阴道炎为念珠菌性阴道炎、细菌性阴道炎和非特异性阴道炎,以青壮年、围绝经期及绝经期女性多见,应加强对其开展健康教育.     

成年妇女阴道酵母样真菌感染的调查分析

对真菌性阴道炎进行准确诊断，从而对症治疗避免滥用抗生素并节约开支，给临床治疗提供合理用药的依据。方法对自2002年11月1日至2003年11月1日到该院就诊的541例妇女阴道拭子进行霉茵培养和鉴定，阳性标本进行药物敏感性试验。结果共检测541例病人标本，如果把任何一个鉴定为真菌的结果均视为阳性结果，阳性例数为97例，总阳性率为17．9％。白色假丝酵母菌占第一位，检出率为14．0％，占阳性标本的78．4％。常规用药药敏结果分析：对于阴道的真菌感染，制霉茵素(NYS)和咪康唑(MIZ)的敏感率为100％，其次为两性霉素B(AMB)98．97％；5一-氟胞嘧啶(5-FC)92．78％；酮康唑(KET)89．69％；益康唑(ECO)86．6％。结论白色假丝酵母茵是阴道真菌感染的主要病源菌；对阴道真茵感染，制霉菌素(NYS)和咪康唑(MIZ)可作为经验用药的首选药。     

血液细菌16S rRNA基因检测的诊断价值

目的探索快速可靠的检测细菌感染的新方法。方法用PCR技术扩增实验室保留株10株的16SrRNA基因,以乙型肝炎病毒-DNA、白假丝酵母菌和人类基因组DNA为对照,检测该方法的特异性;采用10倍比稀释法进行该方法的灵敏度检测。结果对所测细菌株均获得475bp扩增产物,而与乙型肝炎病毒-DNA、白假丝酵母菌和人基因组DNA无交叉反应;PCR最低能检测1.5×104/L大肠埃希氏菌。结论16SrRN基因PCR检测细菌感染的方法具有特异性、快速性和敏感性高等特点。     

Vaginitis/vaginosis

Vaginitis/vaginosis is an extremely common medical problem. Most cases are caused by yeast (predominantly Candida albicans), the protozoan Trichomonas vaginalis, or a specific mixture of bacteria (bacterial vaginosis). The prevalence of each of these varies with the patient population. The clinical signs used in differentiating among these and the associated bacterial flora are shown in Table 3. Because vaginitis/vaginosis cannot be adequately diagnosed solely on the basis of symptoms or physical examination, some laboratory methods are required. Yeast vaginitis is diagnosed by microscopic detection of budding yeast or pseudohyphae in vaginal secretions. The most sensitive method for detection of Trichomonas vaginalis is culture, but microscopic methods are more commonly used. Wet-mount examination for motile trichomonads is the least sensitive microscopic method. The sensitivity is increased when fluorescent monoclonal antibodies are used. Bacterial vaginosis may be diagnosed in the clinic by detecting three or more of the following on examination: (1) homogeneous adherent discharge, (2) vaginal fluid pH greater than 4.5, (3) amine odor, and (4) clue cells. A diagnosis may also be made by detecting the replacement of lactobacilli by a mixed presumably anaerobic flora. This is accomplished by examining a Gram stain of vaginal fluid. It is not uncommon for a woman to have more than one microbial source for her vaginal signs and symptoms. A vaginal examination should include appropriate tests for detection of all three of these agents.     

含光滑念珠菌与白色念珠菌白带的比较分析

目的分析女性含白色念珠菌和光滑念珠菌白带的性状及镜下特征,以便认识并区分这两类念珠菌所引起的妇科感染。方法连续选取2000例做白带检查的妇科门诊患者,询问患者的典型症状并观察单纯含念珠菌妇科涂片的镜下特征,用显色培养基对白带内的真菌进行鉴定,比较分析白色念珠菌组与光滑念珠菌组的差异。结果共检出476例含念珠菌标本,其中白色念珠菌393例,光滑念珠菌60例,其他念珠菌23例。白色念珠菌与光滑念珠菌阴道感染患者均表现出较高的性交痛症状。与白色念珠菌比较,光滑念珠菌组白带无豆渣样改变,患者少见外阴瘙痒;高倍视野下白细胞数量较少,上皮细胞、乳酸杆菌及真菌孢子数量较多,清洁度较好。结论含光滑念珠菌白带与白色念珠菌白带比较具有较为明显的差异,光滑念珠菌感染后患者临床症状及白带镜下特征均无白色念珠菌典型。     

住院患者下呼吸道374株念珠菌鉴定及对抗真菌药物的耐药性

目的分析患者下呼吸道念珠菌属分布及药敏特点,为指导临床用药提供理论依据。方法采用科玛嘉显色培养基对分离的374株念珠菌进行菌种鉴定,并用ATBFUNGUS 2INT进行真菌药敏试验。结果念珠菌属中白色念珠菌仍是最常见的,光滑念珠菌居第2位占14．4％;白色念珠菌对氟康唑及伊曲康唑的耐药率均较前提高;光滑念珠菌对氟康唑及伊曲康唑的敏感率较低,仅为29．6％;克柔念珠菌天生对氟康唑耐药。两性霉素B及氟胞嘧啶对念珠菌的敏感率较高分别为99．6％,98．0％。结论念珠菌属对抗真菌药物的敏感性下降,应加强念珠菌的检测和敏感性分析。