正交试验设计比较金银花药材中绿原酸与木犀草苷的水提工艺

目的 通过正交试验比较金银花药材中绿原酸与木犀草苷的水提工艺.方法 建立了HPLC法同时测定金银花提取物样品中绿原酸和木犀草苷含量的方法.分别采用煎煮和超声2种水提工艺提取金银花药材中的绿原酸和木犀草苷,正交试验设计安排实验,分别以绿原酸转移率、木犀草苷转移率和总转移率评分3种指标对正交试验结果进行分析与比较.结果 以绿原酸转移率为指标,煎煮法优于超声法;以木犀草苷转移率为指标,则超声法优于煎煮法.同一提取方法,评价指标不同所得到的最佳工艺也不同,对2种成分的提取效果也有差异.结论 在金银花的提取工艺研究中,不能仅以单一成分的转移率为指标进行评价,否则不能反映2种甚至多种成分的综合提取效果.     

HPLC法同时测定中药金银花中咖啡酸和木犀草苷的含量

目的建立高效液相色谱（HPLC）方法同时测定中药金银花中咖啡酸及木犀草苷的含量。方法采用Agilent C18色谱柱（250mm×4.6mm,5.0μm）,流动相采用甲醇：0.1%的磷酸水溶液,按照梯度洗脱方式,流速为1.0ml/min,进样量为15μl,检测波长为338nm,柱温为25℃。结果咖啡酸与木犀草苷分别在8.1-82.0μg/ml、2.1-42.0μg/ml范围内线性关系良好,线性回归方程分别为Y=37.71X-265.77（R=0.9997）,Y=15.56X＋3.98（R=0.9995）。结论采用HPLC方法测定金银花中的有效成分咖啡酸、木犀草苷,方法简单、分离效果好,重复性好,是一种较好的检测金银花药材质量的方式。     

宁夏栽培金银花质量分析

目的对宁夏栽培金银花进行质量评价。方法采用高效液相色谱法测定绿原酸及木犀草苷的含量。结果宁夏栽培金银花绿原酸的含量为2.6%-3.8%,木犀草苷的含量（修订方法测定）为0.063%-0.110%。结论宁夏栽培金银花中绿原酸和木犀草苷的含量均达到《中国药典》2005年版一部及2010年版一部的规定。     

HPLC-ELSD同时测定山银花中绿原酸、木犀草苷和川续断皂苷乙的含量

目的:建立高效液相色谱-蒸发光散射检测法测定山银花中绿原酸、木犀草苷和川续断皂苷乙的方法。方法:采用Col-umn XB-C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm)为色谱柱,用乙腈(A)-0.5%冰醋酸水溶液(B)为流动相梯度洗脱,以蒸发光散射检测器检测绿原酸和川续断皂苷乙。梯度程序为:0 min(A:9%,B:91%)保持10→12 min(A:29%,B:71%)→20 min(A:33%,B:67%)→25 min(A:45%,B:55%),流速1.0 ml/min;检测器漂移管温度100℃,载气流速为3.0 ml/min。结果:绿原酸、木犀草苷及川续断皂苷乙的回归方程分别为:Y绿原酸=1.341 1X+4.360 1,r=0.999 5;Y木犀草苷=25 948.31X-22.863 41,r=0.999 92,Y川续断皂苷乙=5.688 8 X+5.350 6,r=0.999 6。线性范围分别为:绿原酸0.005-0.045 mg/ml;木犀草苷0.017 7-0.085 5 mg/ml,川续断皂苷乙0.048 6-0.243 mg/ml。结论:该方法操作简便、结果准确,专属性强,分离效果和重现性好,可有效缩短总分析时间,为较全面控制金银花药材的质量控制提供了简便可靠的方法。     

高效液相色谱法测定抗菌消炎片中绿原酸、黄芩苷、黄芩素和大黄酚的含量

目的:采用高效液相色谱法测定抗菌消炎片中绿原酸、黄芩苷、黄芩素和大黄酚的含量.方法:抗菌消炎片去包衣粉末用50%甲醇超声提取30 min;色谱柱为Agilen Eclipse Plus-C18柱(4.6 mm×250 mm,5 μm);流动相:A相为0.1%磷酸水溶液,B相为甲醇,C相为乙腈,梯度洗脱;流速:0.8 ml/min;温度:30℃;进样量:10 μl;检测波长:254 nm.结果:绿原酸、黄芩苷、黄芩素和大黄酚4种成分在45 min内基线分离.峰面积(Y)对浓度(X)的标准曲线分别为:绿原酸 Y=12.89X-12.66,r=0.999 9;黄芩苷 Y=13.96X-1.013,r=1.0;黄芩素 Y=35.82X-4.923,r=0.999 9;大黄酚 Y=44.16X-3.280,r=0.999 9.方法学考察表明,日内及日间精密度、最低检测限均符合相关标准,加样回收率分别为(n=3):绿原酸101.5%(RSD=1.6%);黄芩苷103.4%(RSD=1.4%);黄芩素99.3%(RSD=2.0%);大黄酚98.1%(RSD=1.7%).结论:采用高效液相色谱法同时测定抗菌消炎片中绿原酸、黄芩苷、黄芩素和大黄酚的含量,样品处理简便,测定结果准确,可用于该制剂的质量控制.     

金银花连翘配伍前后8种有效成分变化研究

目的:测定金银花连翘配伍前后8种有效成分的含量变化,为连翘金银花药对有效成分未来的相关研究提供参考。方法:利用高效液相色谱法测定金银花连翘药对提取液中有效成分含量,以芦丁和绿原酸、獐牙菜苦苷、獐牙菜苷、连翘脂苷A、木犀草苷、连翘苷和槲皮素作为评价指标。采用乙醇超声法和水回流法提取连翘金银花药对的有效成分,并用标准曲线法测定有效成分的含量在配伍前后的变化。结果:研究后发现金银花和连翘药对配伍前后有效成分的含量变化为:配伍后的有效成分含量明显高于配伍前。结论:该实验的结论为金银花和连翘药对配伍增效的研究提供了参考依据。     

金银花提取物的质量评价研究

【目的】采用特征图谱、绿原酸与木犀草苷含量测定、山银花检查等综合方法,评价市场金银花提取物的质量。【方法】高效液相色谱(HPLC)特征图谱及绿原酸含量测定以Kromasil 100-C18为色谱柱,流动相为乙腈—0.4%磷酸溶液(梯度洗脱),检测波长为327 nm,柱温为35℃,流速为1.0 m L·min~(-1)。木犀草苷HPLC含量测定以ZOBAX SB-Phenyl为色谱柱,流动相为乙腈—0.5%(体积分数)冰乙酸(梯度洗脱),检测波长为350 nm,柱温为25℃,流速为0.9 m L·min~(-1)。山银花HPLCELSD检查方法,以Kromasil 100-C18为色谱柱,流动相为乙腈—0.4%(体积分数)冰乙酸(梯度洗脱),流速为1.0 m L·min~(-1)。【结果】13批市售金银花提取物特征图谱均检出6个酚酸类特征峰,分别为新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、3,4-O-二咖啡酰基奎宁酸、3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸、4,5-O-二咖啡酰基奎宁酸。金银花与山银花药材均检出6个酚酸类特征峰,但药材与提取物相对峰面积差异较大,提示提取物制备过程中发生酚酸类成分异构体的转化。13批样品中有6批样品检出山银花的灰毡毛忍冬皂苷乙特征峰,提示这些样品为山银花提取物伪品或掺假山银花提取物。样品中绿原酸与木犀草苷含量分别为1.56~45.61 mg·g~(-1)、0.038~0.734 mg·g~(-1),山银花提取物伪品或掺伪品的绿原酸含量相对较高,而木犀草苷含量明显较低,不同厂家的正品金银花提取物绿原酸含量差异也较大,提示可能与金银花原料质量、制备工艺方法及辅料加入量的不统一有关。【结论】市场上金银花提取物质量差异很大,山银花假冒金银花或掺伪金银花现象严重,应加强原料质量控制、确定稳定的制备工艺,以保障提取物质量的稳定性。     

不同产地金银花中绿原酸和木犀草苷含量的HPLC法测定

目的通过HPLC法测定不同地区人工栽培金银花中绿原酸和木犀草苷的含量,考察甘肃金银花质量状况。方法绿原酸色谱柱：C18色谱柱（4．6mm×250mm,5μm）,流动相为乙腈-0．4％磷酸（13：87）,流速为1．0mL/min,检测波长为327nm。木犀草苷色谱柱：苯基色谱拄（4．6mm×250mm,5μm）,流动相为乙腈-0.5％冰醋酸（二元梯度洗脱）,流速为1．0mL/min,检测波长为350nm。结果甘肃不同地方栽培的金银花中,绿原酸、木犀草苷含量分别占2．16％～3．63％、0．0532％～0．1407％,均符合中国药典以及补充检验方法的规定。结论甘肃栽培品金银花的质量与山东、河南道地产区相当。     

金银花和山银花UPLC特征图谱-化学成分模式识别方法研究

目的 建立超高效液相色谱（UPLC）特征图谱-化学模式识别金银花和山银花的差异性,为金银花和山银花的鉴定提供新的鉴别手段。方法 以70%甲醇超声提取金银花和山银花,特征图谱及含量测定利用同一液相色谱条件：乙腈-0.1%磷酸水为流动相,梯度洗脱,同时对新绿原酸、隐绿原酸、绿原酸、木犀草苷、芦丁、金丝桃苷、异绿原酸B、异绿原酸A、异绿原酸C等9种化学成分的色谱峰进行指认和含量测定,并采用SMICA14.1软件进行数据处理、聚类分析和主成分分析。结果 建立的金银花UPLC特征图谱中指认了金银花16个共有峰,山银花15个共有峰,聚类分析和主成分分析均可将二者区分开来。二者差异性成分为金丝桃苷、木犀草苷和新绿原酸。结论 UPLC特征图谱-化学成分模式识别方法能够全面、有效、直观地反映出金银花和山银花的差异,为金银花及其伪品的鉴别提供新的途径。     

金银花中绿原酸和木犀草苷的薄层色谱鉴别方法研究

目的 建立金银花中绿原酸和木犀草苷的薄层色谱鉴别方法.方法 参照〈中国药典〉2010年版一部附录Ⅵ B试验TLC法,分别考察供试品样品的制备,展开剂的选择,以及显色方法.结果 以水为溶剂热回流提取制备试验样品,以乙酸乙酯-丙酮-甲酸-水（7∶3∶1∶1.2）为展开剂,分别喷以5%的三氯化铝乙醇溶液,至紫外光灯（365 nm）下观察鉴定木犀草苷.喷以1%三氯化铁试液与1%铁氰化钾试液（1∶1）混合溶液的上清液,显色鉴定绿原酸.结论 所建立的方法简便可行,重现性好,可用于金银花中绿原酸和木犀草苷的鉴定.     

正交试验优化金银花中绿原酸的提取工艺

目的:优化金银花中绿原酸的水提工艺.方法:设计正交试验,以绿原酸对原药材的收率为指标,以紫外分光光度法为检测手段,优化金银花中绿原酸的提取工艺.结果:最佳提取工艺为药材粒度60目,加入15倍量水(pH=4),于70℃浸提3次,每次1h.结论:本文建立的方法操作简便,重复性好,绿原酸收率高.     

产地加工方法对山银花药材品质的影响

目的 比较不同产地加工方法对山银花药材外观及其有效成分绿原酸含量的影响。方法采用HPLC法,测定6种产地加工方法的山银花含量。结果不同产地加工方法的药材中外观及其绿原酸含量相差悬殊,绿原酸的含量从高到低依次为烘烤法>蒸制干燥法>熏硫干燥法>炒制干燥法>生晒法>晾干法。结论烘烤法加工的药材外观质量最优,绿原酸含量最高,应广泛推广和应用。     

金银花体外抗流感病毒细胞代谢成分研究

目的考察金银花药物成分经正常细胞及感染流感病毒细胞代谢后,金银花主要成分的变化情况。方法应用中药指纹图谱技术,将得到的色谱图导入指纹图谱相似度评价系统进行分析,比较各组间的标准指纹图谱主要特征色谱峰,找出与金银花抗流感作用相关的差异色谱峰。结果以培养基空白组为对照,正常细胞给药组、病毒细胞给药组各主要特征峰的峰面积表现出整体下降趋势。8号峰面积明显下降,2号峰、7号峰与c号峰与培养基空白组及金银花对照药材比较,相对峰面积成倍增加。结论 2、7、8、c号峰对应的化合物可能与金银花抗流感病毒活性密切相关。     

正交试验法优选小儿清热解毒颗粒的水提工艺条件

目的 优选小儿清热解毒颗粒的水提工艺条件。方法 采用L9（3^4）正交试验设计,以加水量、煎煮时间和煎煮次数为主要因素,以高效液相色谱法测定君药金银花中绿原酸含量,参考干膏得率综合分析。结果 小儿清热解毒颗粒的水提工艺为提取两次,第一次加水7倍,提取1．5h;第二次加水5倍,提取1h。结论 按优选的条件放大试验,工艺稳定,结果满意。     

高效液相色谱法同时测定金银花中绿原酸和木犀草苷的含量*

[目的]采用梯度洗脱方法建立金银花中绿原酸和木犀草苷含量测定的高效液相色谱(HPLC)法。[方法]色谱柱:Xterra@RP185;检测器:Waters2998二级管阵列检测器(DAD);工作站:Waters Empower;流动相:0.5%冰乙酸-乙腈;线性梯度洗脱0:～15 min(90∶10-80∶20),15～30 min(80∶20-75∶25),30～40 min(75∶25-65∶35),40～45 min(65∶35-90∶10);流速:1 mL/min;检测波长:350 nm。[结果]在此色谱条件下两种成分分离完全。[结论]该方法简便,准确,快速易行,可同时检测金银花中两种成分的含量。     

山东平邑金银花三个品系RAPD分析及绿原酸含量分析

目的：分析山东平邑金银花3个品系的遗传信息和绿原酸含量,为金银花品系的研究开发提供科学数据。方法：运用RAPD分析技术和HPLC方法采集数据。结果 ：金银花3种品系的RAPD遗传距离结果是：新品种与鸡爪花的遗传距离较近,在聚类分支图上归为一类;毛花与鸡爪花的遗传距离稍远。绿原酸含量结果 ：毛花品系〉新品种〉鸡爪花品系。结论：山东平邑金银花的新品种从遗传距离上分析与鸡爪花品系的亲缘关系较近,与毛花品系的稍远;新品种的绿原酸含量介于毛花品系与鸡爪花品系之间。     

高效液相色谱变波长法同时测定杜仲平压片中绿原酸和芦丁的含量

目的建立杜仲平压片中绿原酸和芦丁的含量测定方法。方法采用高效液相色谱(HPLC)变波长法同时测定杜仲平压片中绿原酸和芦丁的含量,色谱柱为Waters sunfire-C18(4.6 mm×250.0 mm,5μm),流动相为乙腈(A)-0.5%磷酸水溶液(B),梯度洗脱(0～11 min,12%A;>11～12 min,12%→24%A;>12～20 min,24%A);检测波长327 nm(0～12 min)、354 nm(>12～20 min);流速1.0 m L/min,柱温35℃,进样量10μL。结果绿原酸回归方程为Y=27.739X-2.015(r=0.9998),芦丁回归方程为Y=15.508X-0.0584(r=0.9997),表明绿原酸和芦丁分别在18.66～261.24,1.04～14.57μg/m L范围内呈良好的线性关系;绿原酸和芦丁的平均回收率分别为103.76%,98.38%,RSD分别为0.70%,0.94%。结论该法简便可行、重现性好,可用于杜仲平压片中绿原酸和芦丁的含量测定。     

HpLC 法测定不同加工方法金银花中绿原酸和木犀草苷的含量

目的通过采用高效液相色谱法测定不同加工方法所得金银花药材中绿原酸和木犀草苷的含量,考察不同加工方法对金银花质量的影响。方法绿原酸含量测定采用AgilentZorbax SB—C18色谱柱（4．6mm×250mm,5um）,流动相：乙腈-0．4％磷酸（15：85）;流速：1．0mL·min-1;检测波长：327nm;柱温：室温。木犀草苷含量测定采用Hypersil Pheny1-2色谱柱（4．6mm×150mm,5Ixm）,流动相：乙腈一0．5％冰醋酸,二元梯度洗脱,0～15min,乙腈10％～20％,15～30min,乙腈20％,30—40min,乙腈20％-30％;流速：1．0mL·min～;检测波长：350nm;柱温：40℃。结果不同加工方法对金银花药材中绿原酸和木犀草苷的含量有一定影响。结论烘干法和微波法所得样品质量较好,且药材的外观色泽与药材内在质量之间存在较为密切的关系。