皮肤致敏性局部淋巴结试验方法的建立及应用研究

目的 使用BALB/c小鼠建立皮肤致敏性局部淋巴结试验(LLNA:DA)方法,为皮肤致敏性替代方法在国内的发展和应用积累数据。方法 使用8～9周龄雌性BALB/c小鼠,每组4只,测试9个受试物(己基肉桂醛、2,4-二硝基氯苯、间苯二甲酸二甲酯、丁子香酚、反式肉桂醛、甲醛、二氯化钴、重铬酸钾和异丙醇)的皮肤致敏性,每个受试物设3个浓度。染毒结束后分离每只小鼠双耳耳廓、双侧颌下淋巴结并称重,测定淋巴结ATP发光量,进行受试物致敏性判断及致敏性分级,并与替代方法验证机构间协调委员会(ICCVAM)致敏分级数据进行比较。结果 25%己基肉桂醛、0.3%2,4-二硝基氯苯、25%反式肉桂醛、13.5%甲醛、5%二氯化钴、0.3%和1%重铬酸钾耳廓重和淋巴结重增加差异有统计学意义(F_耳廓重=3.516等,F_淋巴结重=28.647等,P<0.05);4.05%甲醛、3%二氯化钴仅淋巴结重增加差异有统计学意义(F=47.453,F=31.108,P<0.05),耳廓重未见明显变化;提示这些浓度的受试物具有刺激性,且指标淋巴结重较耳廓重更灵敏。其他...     

应用小鼠局部淋巴结试验(LLNA:DA)对13种化学物刺激性和致敏性的评价

目的 利用BALB/c小鼠对13种不同浓度化学物进行局部淋巴结试验(LLNA:DA)检测,评价受试物皮肤刺激性和致敏性,为LLNA:DA法应用于致敏性检测提供数据支持。方法 采用BALB/c小鼠LLNA:DA法,对13种化学物进行评价,并将结果与国际权威机构ICCVAM结果对照分析。结果 2,4-二硝基氯苯、丁子香酚、3-氨基苯酚、异丁香酚、反式肉桂醛、甲醛、戊二醛、二氯化钴、六水硫酸镍和重铬酸钾等10种化学物部分浓度组或全部浓度组的刺激指数SI值>1.8,致敏阳性;异丙醇、间苯二甲酸二甲酯和水杨酸甲酯的刺激指数SI<1.8,致敏阴性。根据SI指数计算EC1.8(%),进一步进行致敏分级,致敏性预测准确率为100%(13/13),阳性致敏物预测率为100%(10/10),阴性致敏物预测率为100%(3/3),致敏分级准确率为85%(11/13)。结论 在本试验条件下,BALB/c小鼠LLNA:DA法可较好地评估化学物的致敏性,适用于未来化学物致敏性检测。     

局部淋巴结试验与局部封闭斑贴试验应用于化妆品皮肤变态反应评价的比较

目的 通过局部淋巴结试验法和局部封闭斑贴试验应用于化妆品皮肤变态反应的比较,探讨局部淋巴结试验应用于化妆品成品的可行性.方法 采用局部淋巴结试验与体内局部封闭斑贴试验对标准的阳性物以及市面上的2种染发剂进行评价.结果 局部淋巴结试验表明,2种染发剂的SI值＜1.8,均为阴性,判断结果与局部封闭斑贴试验结果一致.结论 局...     

优化噻唑蓝法检测抗肿瘤药物敏感性

［摘要］目的提高噻唑蓝（MTT）法检测抗肿瘤药物敏感性的成功率和可操作性,帮助临床合理选择抗肿瘤药。方法结合以往实践经验,在资料收集、实验前准备和实际操作等方面进行方法优化。结果优化的MTT法可操作性强,实验成本低、成功率高。结论经济有效的检测减少了不必要的医疗费用,提高了临床疗效。     

噻唑蓝比色法用于乳腺癌体外化疗药物敏感性的检测

建立肿瘤体外化疗药物敏感试验来选取有效的化疗药物,一直是临床化疗中倍受关注的问题。噻唑蓝(MTT)比色法快速、简捷,已被广泛应用于临床。本文应用MTT法检测10例乳腺癌体外化疗药物的敏感性,为临床化疗药物选择提供参考。1材料与方法1.1临床资料本组10例,年龄35~60岁。均经术中冰冻证实为乳腺恶性肿瘤,其中导管浸润癌5例,导管原位癌1例,未分类4例。1.2标本处理无菌取得手术标本,剪去脂肪、坏死组织,经含庆大霉素的生理盐水和含青霉素、链霉素的RPMI-1640培养液反复冲洗后,在200目网筛上反复剪碎组织,并用注射器针芯研磨,制成单细胞悬…     

一种天然化妆品对豚鼠的皮肤致敏性试验

阿卡夏No·1修护霜(ACACIA)是一种以从我国特有的金合欢属(Acacia Mill)珍贵植物中提取的小分子活性化合物AKJ为主要成分,并辅以多种名贵中药的化妆品,在日常护肤使用中具有非常良好的前景。本实验依据我国卫生部颁布的《化妆品卫生规范》[1-2]相关规范,并参考经济合作与发展组     

美蓝法在乳腺癌前哨淋巴结定位活检的临床意义

目的探讨美蓝为示踪剂行乳腺癌前哨淋巴结活检的准确性及临床价值。方法对62例乳腺癌患者使用美蓝在其乳晕及肿瘤周围皮肤注射,5～15min后进行术中定位及活检术。结果 58例患者（58/62）找到前哨淋巴结,灵敏度为94.4%,假阴性率为5.6%,准确率为92.0%。所有患者未出现过敏反应。结论美蓝法可以较准确地预测腋淋巴结转移,可用于乳腺癌前哨淋巴结定位及活检。     

噻唑蓝法检测中药复方对人白血病CD34~+CD38~-干细胞群的影响

目的运用噻唑蓝(MTT)法检测中药益气养阴方及其拆方后的扶正组方、祛邪组方对人白血病CD34+CD38-干细胞群的影响。方法免疫磁珠分离人白血病CD34+CD38-干细胞群,MTT法检测中药复方对细胞生长的影响。结果益气养阴制剂对白血病干细胞的体外抑制率为(24.390±0.046)%,扶正组抑制率为(9.270±0.052)%,祛邪组为(9.370±0.017)%,益气养阴组与扶正组、祛邪组比较差异均有统计学意义(P<0.05),扶正组与祛邪阻比较差异无统计学意义。结论益气养阴方对白血病干细胞有明显抑制作用。     

用甲基噻唑蓝筛选抗铜绿假单胞菌药物方法的建立

目的:建立适合铜绿假单胞菌的定量、快速、体外高通量药物筛选方法。方法:优化甲基噻唑蓝法检测活细菌数量的实验条件,用MIC方法与MTT法比较2种已知抗生素的抗菌作用。结果:微量培养对细菌生长无影响,最佳MTT浓度和反应时间分别为5 mg·mL-1和1 h。在同一培养时间,菌浓度在1×107～1×1010CFU·mL-1范围内,甲臜的吸收度与菌浓度呈线性相关。用2种抗生素比较MIC方法与MTT法药敏测定的结果一致。结论:MTT微量法进行抗铜绿假单胞菌新药筛选操作简便,省时省力,成本较低,结果稳定,具有可重复性,适宜体外高通量药物筛选。     

介绍一种简便局部用药法

呃逆是临床常见病症，主要表现为气逆上冲，喉间呃呃连声，严重时妨碍患者谈话、呼吸、饮食和睡眠。笔者自1996年至今采用针灸配合中药治疗呃逆56例，疗效较好，现报道如下。 1 一般资料 56例有门诊及住院病人，男30例，女26例，年龄34-70岁，其中住院病人有原发病为脑血管病10例，肝硬化5例，肝癌2例，胃及十二指肠溃疡5例，上消化道出血3例，胸腹部术后15例，病程最短1d，最长月余。 2 治疗方法 针灸取穴：① 鱼腰、内关、中脘、足三里；② 颈4、5夹脊穴、膈俞、胃俞 。操作方法：以上两组穴位交替使用，第一组穴位应用时，患者取仰卧位…     

小鼠局部淋巴结分析试验噻唑蓝比色法实验条件的研究

目的研究并初步制定小鼠局部淋巴结分析试验噻唑蓝比色法(LLNA-MTT法)评价化学品致敏性的判定标准。方法采用正交设计,对LLNA(MTT法)试验的3个关键因素各设3个水平进行试验,以确定最佳水平,并对小鼠淋巴结重量、淋巴细胞计数、吸光度值做相关性分析。结果采用正交试验结果的最佳水平进行试验,2,4-二硝基氯代苯(DNCB)与对照组比较,小鼠淋巴结重量,淋巴细胞计数及吸光度值均增加,且有统计学意义(P0.01),刺激指数大于3,提示具有致敏性。结论初步制定了小鼠局部淋巴结分析试验评价皮肤变态反应的标准。     

介绍一种简易局部用药法

急慢性上呼吸道感染，咽喉炎的病人，咽喉部红肿疼痛明显，全身用药效果欠佳，用药时间也较长。在治疗中，我们通常采用全身用药加超声雾化吸入，控制感染，减轻局部症状。在多年的工作中，我们采用局部用药，代替雾化吸入，便于家庭及条件设备较差的乡镇卫生院使用。 1 操作方法 用5ml无菌注射器，抽取生理盐水2ml，由加入庆大霉素4~8万u，a—糜蛋白酶4mg，固定好针头后，让病人张口，将药液推入咽后壁，口含1~2min，每4~6h一次，连用3d。 收到良好效果。①12h症状明显改善者162例。②13~24h症状明显改善者78例。③25~48h症状改善者57例。…     

腘窝淋巴结试验模型的构建及在清开灵注射液致敏性研究中的应用

目的构建直接和间接腘窝淋巴结试验(d-PLNA和s-PLNA)模型,并用其检测清开灵注射液(QKLI)的致敏性。方法雌性BALB/c小鼠右侧后肢足趾一次性分别sc给予50μl盐酸D-青霉胺(D-Pen)12.5,25.0,37.5,50.0和62.5 mg.kg-1,分别在给药后的第5,7和9天处死小鼠,摘取两侧腘窝淋巴结(PLN),计算PLN质量指数(MI)和细胞指数(CI),确定D-Pen的最低有效剂量和最佳解剖时间。小鼠右侧后肢足趾一次性sc给予D-Pen 37.5 mg.kg-1、QKLI原液、2倍和4倍QKLI原液,7 d后活杀,进行d-PLNA实验。小鼠右侧后肢足趾一次性sc给予D-Pen和QKLI,2个月后,给予亚剂量激发,7 d后活杀进行s-PLNA实验,检测MI和CI。结果根据MI≥2和CI≥5阳性标准判定D-Pen最低有效剂量为37.5 mg.kg-1,最佳解剖时间为给药后第7天。d-PLNA实验结果显示,QKLI原液组处理侧PLN的质量和细胞计数较未处理侧有轻度的升高,但未达到阳性反应判定标准;2倍原液浓度组MI为2.0±1.0,CI为5.4±0.9;4倍原液浓度组MI为3.4±0.4,CI为5.4±0.9,均达到阳性反应判定标准。s-PLNA实验结果显示,2倍原液浓度组MI为2.4±0.6,CI为6.2±0.8;4倍原液浓度组MI为3.2±0.9,CI为8.4±1.8均达到阳性反应判定标准。结论制备了能够用于致敏实验的腘窝淋巴结模型,利用此模型发现QKLI具有诱发过敏反应的可能。     

一种植物源性化妆品原料局部毒性试验研究

<正>随着人们对化妆品的健康性和安全性要求越来越高,绿色天然的消费理念日益深入人心。以植物提取物、从植物中提取的活性成分等植物资源为原料开发的化妆品越来越受到消费者追捧。但“天然”不等于安全,植物提取物中的成分众多且提取物成分复杂,可能存在安全性风险成分,因此在使用植物提取物用于化妆品时需进行毒理学评价^[1]。近年来,基于动物福利及科学技术的进步, 多种替代动物试验的体外方法得到开发和应用^[2]。     

噻唑蓝法测定雷公藤内酯醇对神经胶质瘤U251细胞增殖的抑制作用

神经胶质瘤又称胶质细胞瘤,是发生于神经外胚层的肿瘤,故又称为神经外胚层肿瘤或神经上皮肿瘤,约占颅内肿瘤的44．6％。该肿瘤具有侵袭性生长、手术中难以全部切除、术后复发率高、难以治愈等特性。目前临床上对神经胶质瘤采取手术、放疗、化疗、免疫等手段进行综合治疗,大多数脑胶质瘤患者中位生存期一般14个月左右。     

介绍一种初匀速法热稳定性试验的估算方法

目的：对初匀速稳定性试验的数据处理方法进行改进。方法：采用一级反应动力学公式与Arrhenius指数公式为依据替代零级反应动力学公式进行数据处理。结果：从理论上建立了数据处理程序，并进行实际应用。结果：初匀速法估算法以一级反应动力学公式为依据，更为符合药物降解的实际过程，在数据处理上优于匀速法。     

甲癣局部治疗Ⅱ期试验的成功结果

Celtic制药公司宣布TDT-067（特比萘芬Transfersomes）、（Ⅰ）治疗甲癣的Ⅱ期试验的成功结果。（Ⅰ）是一种新型经皮施用的特比萘芬制剂,用于治疗指和趾的甲癣。新型药物载体Transfersomes用于非侵人性将药物通过或进入皮肤。Transfersomes制剂含有复杂的脂质小囊,由于经皮水梯度,可穿过皮肤渗透性屏障角质层。     

正交试验法对清热通淋胶囊制备工艺的改进

目的:对清热通淋胶囊原有的生产工艺进行改进,以求降低崩解时间,减少外观不合格率.方法:根椐正交实验,将清热通淋胶囊处方中各药材的原提取工艺中水提法改变为水提醇沉法(含醇量为75%);将制粒时的稀释剂玉米淀粉改为玉米淀粉与滑石粉混合(5:2);将湿润剂乙醇的浓度由45%改为65%.将助流剂硬脂酸镁的加入法改为转动糖衣锅式加入法.结果:生产工艺改进后,解决了崩解度不稳定和外观易变化的问题.结论:改进后工艺是可行的.