体外培育牛黄镇痛作用的电生理机制

目的探讨体外培育牛黄(calculus bovis sativus,CBS)镇痛作用的电生理机制。方法在蟾蜍坐骨神经干和培养大鼠三叉神经节(TRG)细胞上,分别记录复合动作电位和电压依赖性钠通道电流。结果CBS(>0.4g.L-1)可以抑制复合神经动作电位,4g.L-1CBS对其抑制率为(42.5±17.6)%。CBS(0.2~20mg.L-1)可以剂量依赖性的抑制大鼠TRG细胞电压依赖性总钠通道电流(INa-T)和TTX不敏感型钠通道电流(INa-TTX-r),20mg.L-1CBS对INa-T和INa-TTX-r的抑制率分别为(55.8±7.8)%和(39.3±5.7)%。结论CBS对钠电流的阻滞作用可能是其镇痛作用机制之一。     

牛黄及体外培育牛黄的药理作用研究进展

牛黄作为传统名贵中药,用途广泛,是多种常见中西成药的主要原料.现代药理研究显示,牛黄具有抗炎、抗氧化、保肝、抗肿瘤等作用.体外培育牛黄药效与之相似.本文检索国内外公开发表的涉及牛黄及体外培育牛黄药理作用、临床应用的专著、论文,进行归纳总结,为今后深入开展牛黄及体外培育牛黄的基础研究以及扩大临床应用提供参考.     

体外培育牛黄的临床应用举隅

目的探讨国家中药一类新药体外培育牛黄的临床应用疗效。方法整理、分析体外培育牛黄的临床应用之经典病例。结果和结论体外培育牛黄具有良好的清心开窍、清热解毒、凉血熄风之功效,临床冲服疗效好。     

牛黄降压胶囊中体外培育牛黄的替代使用研究

目的建立牛黄降压胶囊中体外培育牛黄的替代使用的定性鉴别和定量测定方法。方法采用薄层色谱法对方中体外培育牛黄定性鉴别,采用高效液相色谱法对胆红素进行含量测定。结果在与胆酸对照品色谱相应的位置上,牛黄降压胶囊(替代方)和牛黄降压胶囊(原方)的供试品均显相同颜色的斑点;在与猪去氧胆酸对照品色谱相应的位置上,牛黄降压胶囊(原方)显相同颜色的斑点,而牛黄降压胶囊(替代方)未显相同颜色的斑点。胆红素在0.035 52～0.592 00μg与峰面积的线性良好。胆红素平均回收率为97.73%,RSD值为3.22%(n=6)。结论方法简便,灵敏度高,重现性好,可用于牛黄降压胶囊中体外培育牛黄的替代使用情况控制。     

体外培育牛黄研究概况

体外培育牛黄可作为天然牛黄的理想替代品，该文就其主要化学成分及其分析、药理活性、临床应用以及相关制剂及其分析等方面的最新研究进展加以综述。     

吉非罗齐拮抗Bay K 8644增加大鼠主动脉平滑肌细胞L-型电压依赖性钙电流

目的 观察吉非罗齐拮抗Bay K 8644对离体大鼠主动脉的收缩效果,并进一步研究其机制。方法 采用离体血管张力记录法记录大鼠主动脉血管环的张力变化,膜片钳电生理学记录大鼠主动脉平滑肌细胞L-型电压依赖性钙电流。结果 Bay K 8644可以引起大鼠主动脉血管环收缩,最大收缩幅度为(2.13±0.42)g,提前孵育吉非罗齐可以对Bay K 8644的收缩幅度起到一定程度的抑制作用,使其收缩幅度降至(1.02±0.36)g。提前孵育L-NAME和去内皮均没有对吉非罗齐的抑制效果产生明显影响。Bay K 8644可以使得大鼠主动脉平滑肌细胞L-型钙电流增大127.62%,而吉非罗齐的干预,可以使其增幅降低到79.48%。结论 吉非罗齐可以一定程度上抑制Bay K 8644引起的大鼠主动脉收缩,其效果不受一氧化氮合酶抑制剂L-NAME及去内皮的影响。吉非罗齐可以部分拮抗Bay K 8644引起的大鼠离体主动脉平滑肌细胞L-型电压依赖性钙电流的增大。     

体外培育牛黄在慢性溃疡性结肠炎小鼠中的抗凋亡机制

目的：研究体外培育牛黄（Calculus Bovis Sativus,CBS）在慢性溃疡性结肠炎（ulcerative colitis,UC）中的抗凋亡机制。方法：将28只雄性C57BL/6小鼠采用随机数表法分为4组,分别为：正常对照组,模型对照组,CBS低剂量组和CBS高剂量组。给予2%葡聚糖硫酸钠（dextran sulfate sodium,DSS）溶液分3个周期诱导慢性溃疡性结肠炎模型。CBS低剂量组和CBS高剂量组在造模期间的最后7 d分别给予50,150 mg·kg^-1·d^-1CBS灌胃处理。计算小鼠生存率,观察结肠组织形态学改变,苏木素-伊红染色、糖原染色评价小鼠结肠损伤情况,TUNEL检测结肠细胞凋亡情况,Western Blot检测细胞凋亡相关蛋白Caspase3、Bcl-2、Bax表达水平。结果：与正常对照组相比,模型对照组小鼠生存率明显下降,结肠组织损伤严重,结肠细胞凋亡率显著增加;Caspase3、Bax蛋白表达量增加而Bcl-2表达减少,Bax/Bcl-2比值升高。经CBS处理后,小鼠生存率提高,结肠组织损伤得到缓解,结肠细胞凋亡率明显下降;Caspase3、Bax蛋白表达水平下调而Bcl-2表达上调,Bax/Bcl-2比值也有所降低。结论：CBS能够通过抑制结肠细胞的凋亡对DSS诱导的慢性UC产生疗效,其抗凋亡机制可能是对细胞凋亡相关蛋白Caspase3、Bcl-2、Bax表达的调控作用。     

大黄素对大鼠近端结肠平滑肌细胞电压依赖性钾通道的影响

目的研究大黄素对大鼠近端结肠电压依赖性钾离子通道的影响，以探讨其增强结肠运动的机制。方法 采用全细胞膜片钳技术测定电压依赖性钾离子通道快速激活型钾电流及延迟整流型钾电流。结果大黄素(1～30 μmol·L^-1)浓度依赖性地阻断延迟整流性钾通道，加快电流失活，其阻断作用不需要钾通道的开放。30 μmol·L^-1大黄素可抑制快速激活型钾电流。5 μmol·L^-1大黄素对钾通道的激活动力学及失活动力学没有影响，但30 μmol·L^-1大黄素使其激活动力学曲线明显右移，斜率常数由(13.0±0.6)上升至(19.6±2.5) mV，同时也使失活动力学曲线明显右移。结论大黄素可阻断延迟整流型钾通道及快速激活型钾通道，其阻断作用不是开放阻断。     

体外培育牛黄联合氟哌啶醇治疗大鼠精神分裂症的研究

摘 要 目的：研究体外培育牛黄（CBS）联合氟哌啶醇对精神分裂症模型大鼠行为学的影响并探索其作用机制。方法: 以地卓西平马来酸盐（MK 801）制备大鼠精神分裂症模型。SD大鼠随机分为对照组,模型组,氟哌啶醇组（1.4 mg·kg-1）,氟哌啶醇联合CBS低剂量（50 mg·kg-1）、中剂量（100 mg·kg-1）、高剂量（150 mg·kg-1）组,CBS低剂量（50 mg·kg-1）、中剂量（100 mg·kg-1）、高剂量（150 mg·kg-1）组。用高架十字实验评价各组大鼠焦虑水平的影响,Western blot检测各组大鼠前额皮层c Fos蛋白水平。结果: 高架十字实验结果显示,氟哌啶醇组和联合用药组大鼠开臂次数百分比相比模型组明显增加（P<0.01）,而CBS各剂量组与模型组无显著差异。联合用药中、高剂量组开臂时间百分比显著大于氟哌啶醇组（P<0.05）。CBS和氟哌啶醇均可降低大脑前额皮层中c Fos蛋白含量（P<0.05或P<0.01）;而联合用药各剂量组较氟哌啶醇组c Fos蛋白含量均显著降低（P<0.05）。结论: 通过行为学评价发现,CBS与氟哌啶醇联合使用能协同降低大鼠精神分裂症模型中增高的焦虑水平,这可能与协同降低前额皮层c Fos蛋白含量有关。本研究为临床上两药的联合使用提供了药效学基础,具有一定的参考意义。     

体外培育牛黄促进肛瘘术后伤口愈合的疗效观察

以肛瘘术后80例患者伤口用体外培育牛黄碾末作为观察组,与对照组从创面炎症反应控制,创面渗液,创面愈合时间进行分析比较,结果显示观察组明显优于对照组。提示体外培育牛黄具有明显的促进伤口愈合的作用,值得在临床上推广应用。     

体外培育牛黄对小鼠慢性溃疡性结肠炎的疗效研究

摘 要 目的：研究体外培育牛黄（CBS）对葡聚糖硫酸钠（DSS）诱导的慢性溃疡性结肠炎（UC）的治疗作用。方法: 采用2% 的DSS溶液连续给药3周期,在雄性C57BL/6小鼠中诱导慢性UC动物模型。造模的最后7 d连续给予50 mg · kg^-1和150 mg · kg^-1的CBS灌胃给药处理,每日1次;通过小鼠一般情况、疾病活动（DAI）指数、结肠状态、HE染色和Tunel检测细胞凋亡等来评价CBS对DSS诱导慢性UC的疗效。结果: CBS减弱了DSS诱导的小鼠体质量降低、腹泻、便血等症状,并减少了其DAI指数,同时减轻了结肠的组织病理损伤。结论:CBS对于DSS诱导的慢性UC具有一定的治疗作用,值得进一步深入研究。     

Bile Acid Inhibition of N-type Calcium Channel Currents from Sympathetic Ganglion Neurons

Under some pathological conditions as bile flow obstruction or liver diseases with the enterohepatic circulation being disrupted, regurgitation of bile acids into the systemic circulation occurs and the plasma level of bile acids increases. Bile acids in circulation may affect the nervous system. We examined this possibility by studying the effects of bile acids on gating of neuronal (N)-type Ca(2+) channel that is essential for neurotransmitter release at synapses of the peripheral and central nervous system. N-type Ca(2+) channel currents were recorded from bullfrog sympathetic neuron under a cell-attached mode using 100 mM Ba(2+) as a charge carrier. Cholic acid (CA, 10(-6) M) that is relatively hydrophilic thus less cytotoxic was included in the pipette solution. CA suppressed the open probability of N-type Ca(2+) channel, which appeared to be due to an increase in null (no activity) sweeps. For example, the proportion of null sweep in the presence of CA was ~40% at +40 mV as compared with ~8% in the control recorded without CA. Other single channel properties including slope conductance, single channel current amplitude, open and shut times were not significantly affected by CA being present. The results suggest that CA could modulate N-type Ca(2+) channel gating at a concentration as low as 10(-6) M. Bile acids have been shown to activate nonselective cation conductance and depolarize the cell membrane. Under pathological conditions with increased circulating bile acids, CA suppression of N-type Ca(2+) channel function may be beneficial against overexcitation of the synapses.     

人工牛黄抗口腔纤维化效应及机制初探

目的研究人工牛黄抗槟榔诱导的口腔纤维化的效应及药理机制。方法培养小鼠口腔黏膜成纤维细胞、氯胺T法、明胶酶谱分析、qRT-PCR、ELISA和Western blotting等。结果人工牛黄可抑制槟榔提取物(Areca nut extract,ANE)诱导的口腔黏膜成纤维细胞的异常增殖及胶原累积。药理研究显示,人工牛黄可显著拮抗ANE诱导的MMP2活性下降和胶原基因的表达上调,抑制ANE诱导的TIMP-1和TIMP-2基因表达,及CTGF、TGFβ1、IL-6和TNFα的转录及释放,抑制ANE诱导的AKT、ERK/JNK MAPK和NF-κB信号通路的活化及氧化应激。结论人工牛黄具有良好的抗纤维化作用,是一种很有应用前景的抗口腔黏膜纤维化药物。     

Effects of Rhynchophyline on L-type Calcium Channels in Isolated Rat Cortical Neurons During Acute Hypoxia

目的：研究钩藤碱对急性分离的Ｗｉｓｔａｒ大鼠大脑皮层神经元低氧状态下Ｌ型钙通道的作用。方法：细胞贴附膜片钳技术，从－４０ｍＶ去极化至０ｍＶ激活Ｌ型钙通道。结果：低氧可激活皮层神经元Ｌ型钙通道开放，使平均开放时间延长，平均关闭时间缩短，开放概率增加。钩藤碱（１５和３０μｍｏｌ·Ｌ－１）可浓度依赖性抑制低氧状态下此钙通道的激活，缩短其平均开放时间（从８８７ｍｓ缩至３０３ｍｓ和２２３ｍｓ，Ｐ＜０００１），延长其平均关闭时间（从９２３ｍｓ延至３８８４和５４４３ｍｓ，Ｐ＜０００１）并降低其开放概率（从０１４２降至００３１和００２５，Ｐ＜０００１）此作用与维拉帕米（１５μｍｏｌ·Ｌ－１）相似，但稍弱。结论：钩藤碱对低氧大鼠大脑皮层神经元Ｌ型钙通道有阻滞作用，从而降低细胞内钙超载，此为钩藤碱改善低氧性脑代谢紊乱的机制之一     

氨咖黄敏胶囊治疗轻型新型冠状病毒肺炎的临床观察

摘要：目的 观察氨咖黄敏胶囊(含体外培育牛黄10 mg/粒)治疗轻型新型冠状病毒肺炎的临床疗效,为临床用药提供参考依据。方法 选择2022年4月-2022年5月上海方舱医院收治的193例发热的轻型新型冠状病毒肺炎患者以1:1比例随机分配至两组(治疗组92例,对照组101例)。治疗组给予氨咖黄敏胶囊(含体外培育牛黄10 mg/粒),对照组给予氨酚伪麻美芬片/氨麻美敏片,总疗程不超过7 d。观察患者核酸转阴时间(新冠病毒检测核酸CT值连续2次≥35)、发热持续时间、用药3日后主要临床症状包括咽痛、鼻塞、头痛及肌肉酸痛等改善情况。结果 治疗组和对照组核酸转阴时间为(5.84±2.88)d及(5.75±2.36)d,差异无统计学意义(P＞0.05);治疗组和对照组发热时间为(1.36±0.57)d及(1.47±0.63)d,差异无统计学意义(P＞0.05);治疗组和对照组患者治疗后临床症状改善率分别为咽痛81.97%和63.77%,鼻塞92.06%和79.22%,头痛91.07%和73.02%,肌肉酸痛92.68%和74.47%,差异均有统计学意义(P＜0.05)。结论 氨咖黄敏胶囊(含体外培育牛黄10 mg/粒)能显著改善轻型新冠肺炎患者的咽痛、鼻塞、头痛、肌肉酸痛等临床症状,为其治疗该疾病提供了初步的临床证据。     

The Effect of Benzyltetrahydropalmatine (BTHP) on Action Potentials and the Two Components of Delayed Rectifying Potassium Currents in Guinea Pig Ventricular Myocytes

苄基四氢巴马汀为四氢巴马汀的衍化物，本文采用标准膜片钳全细胞记录技术，研究了苄基四氢巴马汀对豚鼠心室肌单细胞动作电位及延迟整流钾通道（Ｉｋ）两种成分（Ｉｋｓ和Ｉｋｒ）的选择性作用。结果表明：（１）３０μｍｏｌ·Ｌ－１苄基四氢巴马汀可显著延长无钙细胞外液条件下动作电位的ＡＰＤ９０（从１４３±１６ｍｓ到１８４±２１ｍｓ，Ｐ＜００１，ｎ＝５），而对ＲＰ，ＡＰＡ无明显影响，其对ＡＰＤ９０的延长作用不依赖于胞外钙。（２）苄基四氢巴马汀对延迟整流钾通道两种成分均有不同程度的阻滞作用，其阻滞Ｉｋｒ的ＩＣ５０（半数抑制浓度）为７９μｍｏｌ·Ｌ－１，阻滞Ｉｋｓ的ＩＣ５０为２２４μｍｏｌ·Ｌ－１，可见苄基四氢巴马汀对Ｉｋ的阻滞作用无选择性     

心房颤动患者右心房L型钙通道变化同心肌细胞结构改变的关系

目的：探讨心房颤动（房颤）的发生、房颤转复后窦性心律的维持与相关细胞结构和超微结构变化的关系.方法：53例心外科手术患者,其中窦性心律者26例（窦律组）,房颤患者27例（房颤组）.术前行超声心动图检查.手术中取右心房组织,石蜡包埋制作病理切片,HE染色后测定细胞直径.电镜检查超微结构变化.提取组织mRNA,逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法测定L-钙通道α1亚基的基因转录水平.结果：同窦律组比较,房颤组L-钙通道α1亚基mRNA水平降低,细胞直径增加,心肌出现不同程度的肌溶解现象.细胞直径同心房大小呈正相关,L-钙通道α1亚基mRNA水平与细胞直径呈负相关.结论：L-型钙通道α1亚基表达变化同房颤后细胞结构改变有关.